Определение патогенных микроорганизмов

1. Методы выявления и определения количества staphylococcus aureus.

Метод выявления S. areus посевом в жидкую селективную среду предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твёрдого продукта более 150 или в 1 см 3 жидкого продукта менее 15 колонеобразующих едениц (КОЕ) S.areus.

Метод выявления S. areus посевом на агаризованные селективно-диагностические среды предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твёрдого продукта более 150 или в 1 см 3 жидкого продукта более 15 КОЕ S.areus.

Метод определения наиболее вероятного числа (НВЧ) посевом в жидкую селективную среду предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твёрдого продукта менее 1500 или в 1 см 3 жидкого продукта менее 150 КОЕ S.areus.

Метод определения количества S. areus посевом на агаризованные селективно-диагностические среды предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твёрдого продукта более 1500 или в 1 см 3 жидкого продукта более 150 КОЕ S.areus.

Сущность методов: Методы выявления и определения количества НВЧ S. areus посевом с предварительным обогащением основаны на высеве навески продукта и (или) разведений навески продукта в жидкую селективную среду, инкубировании посевов, пересеве культуральной жидкости на поверхность агаризованной селективно-диагностической среды, подтверждении по биохимическим признакам принадлежности выделенных характерных колоний к S.areus.

Методы выявления и определения количества S. areus посевом на агаризованные селективно-диагностические среды основаны на высеве навески продукта на агаризованную селективно-диагностическую среду, инкубировании посевов, подсчёте количества характерных колоний (при определении количества S. areus), подтверждении по биохимическим признакам принадлежности выделенных характерных колоний к S.areus.

Отбор и подготовка проб.

Подготовка к анализу.

• 1) Приготовление растворов и реактивов.
• 2) Приготовление питательных сред.

Проведение анализа.

• 1) Посевы для определения количества S.areus.
• 2) Посевы для выявления S. areus в определённой навеске продукта.
• 3) Подтверждение принадлежности характерных колоний к S.areus.
• 4) Интерпретация результатов подтверждения принадлежности характерных колоний к S.areus.
• 5) Определение термостабильной нуклеазы.

Обработка результатов.[15].

2. Методы выявления ботулинического токсина

Методы выявления в пищевых продуктах ботулинических токсинов всех типов, вегетативных клеток и спор токсигенных штаммов Clostridium. botulinum, определение титров ботулинических токсинов, серологического титрования токсина и выделение культур токсигенных штаммов типа А, В, С, D, Е, F и G.

Метод выявления ботулинического токсина и определение его титра основан на выявлении симптомов клинической картины болезни и гибели животных, характерных для ботулинической интоксикации.

Серологическое титрование токсина C. botulinum осуществляется на белых мышах путём постановки защитного теста in vivo или реакции нейтрализации in vivo с диагностическими ботулинистическими типоспецифическими антитоксическими сыворотками.

Метод выявления C. botulinum основан на его способности развиваться и образовывать ботулинические токсины в питательных средах для анаэробных микроорганизмов.

Выделение культур токсигенных штаммов C. botulinum из продукта или культуральной жидкости проводят путём высева на твёрдые питательные среды с последующим исследованием культуральных и морфологических признаков, характерных для C. botulinum и определением способности выделенной культуры образовывать ботулинический токсин.

Методы предназначены: Для исследования продуктов по санитарно-эпидемиологическим показаниям; для анализа посевов продуктов, в случае обнаружения в них мезофильных анаэробных микроорганизмов.

Исследование проводят в лабораториях, указанных органами здравоохранения Методы отбора и подготовка проб.

Подготовка к испытанию.

• 1) Подготовка продукта к испытанию на наличие ботулинических токсинов.
• 2) Подготовка продукта к испытанию для выявления и выделения C.botulinum.

Проведение испытания.

• 1) Выявления ботулинических токсинов.
• 2) Определение титра ботулинического токсина.
• 3) Серологическое титрование токсина C.botulinum.
• 4) Выявление C.botulinum.
• 5) Выделение культур токсигенных штаммов C.botulinum.

Обработка результатов. [16].

3. Методы определения clostridium perfringens

Метод основан на выделении C. perfringens из колоний, полученных при глубинном посеве продукта, его разведении или культуральной жидкости в селективные среды. Принадлежность выделенных колоний к C. perfringens определяют по морфологическим и биохимическим свойствам. В зависимости от требований нормативно-технической документации подсчитывают количество или учитывают присутствие (отсутствие) C. perfringens в исследуемом продукте.

Метод предназначен для: установления соответствия микробиологических показателей качества пищевого продукта требованиям нормативно-технической документации; исследования продукта по санитарно-эпидемиологическим показаниям; анализа микрофлоры посевов (культуральной жидкости), в которых обнаружены мезофильные анаэробные клостридии, при необходимости подтверждения присутствия в посевах C.perfringens.

Отбор и подготовка проб.

Подготовка к испытанию.

• 1) Приготовление растворов.
• 2) Приготовление питательных сред.

Проведение испытаний. Выявление характерных колоний.

Обработка результатов. 18].