Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Роль генетического обмена в формировании энтеротоксигенных вариантов вакцинных штаммов Escherichia coli

Диссертация: Роль генетического обмена в формировании энтеротоксигенных вариантов вакцинных штаммов Escherichia coli
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Путём введения контролируемой делеции в ген eltA в положении 23−120 субъединицы получен генно-инженерный токсоид, сохранивший иммуногенные детерминанты термолабильного токсина, но утративший его токсические свойства. В опытах in vivo изучена возможность восстановления токсического фенотипа сконструированного штамма и доказана биологическая безопасность полученной конструкции и штамма в целом… Читать ещё >

Содержание

  • 1. Введение
  • 2. Обзор литературы
    • 2. 1. Бактериальные токсины
      • 2. 1. 1. Классификация
      • 2. 1. 2. Строение
      • 2. 1. 3. Распространение среди микроорганизмов
    • 2. 2. Генетика токсинообразования у Escherichia col
      • 2. 2. 1. Строение генов
      • 2. 2. 2. Роль горизонтального обмена генетическим материалом в формировании токсического фенотипа
    • 2. 3. Борьба с токсикоинфекциями и роль вакцинопрофи-лактики
      • 2. 3. 1. Современные вакцины
      • 2. 3. 2. Особенности противотоксических вакцин
      • 3. 3. 3. Биологическая безопасность вакцин
  • 3. Материалы и методы 39 3.1. Получение препаративных количеств плазмидной
    • 3. 1. 1. Культивирование штаммов Е. col
      • 3. 1. 1. 1. Использовавшиеся штаммы Е. col
      • 3. 1. 1. 2. Использовавшиеся плазмиды
      • 3. 1. 1. 3. Среды для культивирования микроорганизмов
      • 3. 1. 2. Трансформация штаммов Е. coli плазмидной ДНК
      • 3. 1. 3. Выделение и очистка плазмидной ДНК
      • 3. 1. 4. Электрофорез в агарозном геле и визуализация плазмидной ДНК
    • 3. 2. Клонирование генов
      • 3. 2. 1. Расщепление плазмидной ДНК рестриктирующими эндонуклеазами
      • 3. 2. 2. Выделения нужных1 фрагментов плазмидной ДНК из агарозных гелей
      • 3. 2. 3. Обработка фрагментов ДНК нуклеазой S
      • 3. 2. 4. Лигирование вектора со вставкой
    • 3. 4. Получение делении в гене
    • 3. 5. Отбор штаммов, содержащих конъюгативные плазми
    • 3. 6. Введения вектора в бактерии-реципиенты с помощью мобилизации
      • 3. 6. 1. Постановка триродителского скрещивания на плотной среде
    • 3. 7. Реакция двойной иммунодиффузии в агаровом геле по методу Ухтерлони
    • 3. 8. Оценка токсичности штаммов Е. col
    • 3. 9. Оценка протективной активности потенциально вакцинного штамма
  • 4. Результаты
    • 4. 1. Клонирование оперона полноразмерного LT в плазмиду pBR
    • 4. 2. Клонирование детерминант А-субъединицы LT и В-субъединицы LT в плазмиду pBR
    • 4. 3. Введение делеции в А-субъединицу полноразмерного
    • 4. 4. Конструирование штамма Е. coli, содержащего детерминанту токсоида LT и систему рестрикции-модификации
      • 4. 4. 1. Оценка эффективности мобилизации потенциального вектора в триродительском скрещивании
      • 4. 4. 2. Введение детерминанты токсоида в плазмиду pSClOl
      • 4. 4. 3. Получение штамма Е. coli, продуцирующего токсоид
      • 4. 4. 4. Введение детерминанты, обеспечивающей биологическую безопасность потенциально вакцинного штамма
      • 4. 4. 5. Контроль апатогенности полученной конструкции
    • 4. 5. Конструирование штамма Е. coli, содержащего детерминанту А-субъединицы LT
      • 4. 5. 1. Клонирование генов eltA и eltB в отдельные векторные плазмиды
      • 4. 5. 2. Клонирование eltA в плазмиду pCRl
    • 4. 6. Оценка возможности восстановления токсической активности термолабильного токсоида при скрещивании штаммов
    • 4. 7. Оценка протективной активности рекомбинантного препарата
  • 5. Обсуждение результатов
  • 6. Выводы

Роль генетического обмена в формировании энтеротоксигенных вариантов вакцинных штаммов Escherichia coli (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Проблема токсикоинфекций до сих пор остается одной из нерешённых в ветеринарии и медицине. Попытка создания вакцинных препаратов традиционным путём либо вообще не приводила к успеху, либо эффективность их применения была крайне мала, что объясняется физиологическими особенностями желудочно-кишечного тракта, играющего барьерную роль. Болезнь развивается при условии колонизации энте-ротоксигенными Escherichia coh (ЕТЕС) тонкого кишечника и выработки ими энтеротоксинов. Основную защиту против ЕТЕС обеспечивают антитела класса IgA к фимбриальным факторам колонизации, LT-токсину и О-антигенам (Учайкин В.Ф. и др., 2001). В процессе заболевания вырабатывается как антибактериальный, так и антитоксический иммунитет. До недавнего времени считалось, что антитоксический иммунитет в первую очередь направлен против субъединицы В термолабильного токсина, однако, согласно имеющимся литературным данным, А-субъединица холерогена, близкого по структуре к LT-токсину, обладает выраженными суперантигенными свойствами (Васильев Г. И. и др., 2002). Логично было бы предположить, что и А-субъединица LT-токсина является суперантигеном.

Иммунный ответ на текущий инфекционный процесс является многосторонним и связан с выработкой специфических антител на различные новые антигенные раздражители, последовательно вступающие в действие в динамике заболевания, что существенно отличается от вакцинального, формируемого традиционными парентеральными вакцинами, направленного, как правило, на один антигенный раздражитель. В настоящее время наиболее перспективным путём создания современных эффективных препаратов является разработка генно-инженерных живых пероральных субъединичных вакцин на резидентном носителе.

Основной проблемой при создании таких препаратов является обеспечение их биологической безопасности. В данном случае имеется ввиду невозможность восстановления токсического фенотипа вакцинными штаммами и предотвращение появления высокотоксичных полирезистентных штаммов. В этом плане большой теоретический и практический интерес представляет изучение особенностей обмена генетической информацией между вакцинными и природными штаммами, а также создание генетических конструкций, делающих такой обмен невозможным.

2. Обзор литературы.

Выводы.

1. Осуществлено клонирование полноразмерного elt-оперона и генов кодирующих отдельные субъединицы eltA и eltB термолабильного энтеротоксина Е. coli.

2. Путём введения контролируемой делеции в ген eltA в положении 23−120 субъединицы получен генно-инженерный токсоид, сохранивший иммуногенные детерминанты термолабильного токсина, но утративший его токсические свойства.

3 Получена генетическая конструкция на основе векторной плазмиды pSClOl и делетированного е/?-оперона, кодирующая авиру-лентный иммуногенный токсоид.

4 На основе полученной конструкции и апатогенного штамма эшерихий сконструирован потенциальный вакцинный штамм для профилактики токсикоинфекций пушных зверей.

5. В опытах in vivo изучена возможность восстановления токсического фенотипа сконструированного штамма и доказана биологическая безопасность полученной конструкции и штамма в целом.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Ю.П., Северцев М. К., Введенская О. И., Станиславский Е. С. Отек лап белых мышей тест для оценки активности эн-теротоксинов Escherichia. Бюл. эксперим. биол. и мед. 1978, 85, № 2, С. 150−152.
  2. Г. И., Козловский И. Н., Мишанькин Б. Н., Мишанькин М. Б. Холерный токсин суперантиген Vibrio cholerae. Журн. Микробиол. 2002, № 2, С. 50−55.
  3. В.В. Оценка риска при интродукции генетически модифицированных микроорганизмов в окружающую среду. Агрохимия, 2000, N8, с. 76−86.
  4. Л.И. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук, Москва, 1998.
  5. М.В., Фили Н. Г. «Белковые токсины микробов», «Медицина», 1980г.
  6. Ю.В. «Биомолекулярные основы патогенности бактерий» М., «Наука», 1977 г.
  7. Т.В., Р.А.Янг, Р.В.Дэвис 1988 в кн. Молекулярное клонирование. Методы. Пер. с англ., Москва «Мир»
  8. К., Дрейпер Дж. Генетическая инженерия растений. В кн. Клонирование ДНК. Методы., под ред. Д. Гловера, М.: «Мир», 1988, С. 330−332.
  9. . 1987 Гены Изд. «Мир»
  10. Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. 1984 Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. Пер. с англ. М.
  11. Н.В. Вакцинология. //М.: «Триада-Х». 1999.
  12. JI.A. Исследование биологических хмакромолекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами. М.: Наука, 1983, С. 304.
  13. В.Ф., Шамшева О. В. Вакцинопрофилактика. Настоящее и будущее. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001.
  14. С.С., Ефимов Б. А., Тарабрина Н. П., Шкопоров А. Н., Кафарская Л. И., Сепиашвили Я. Р. Иммунорегуляция в системе микрофлора интестинальный тракт., Аллергология и иммунология, 2004, № 2, С. 265−271.
  15. Altwegg, М., and Н. К. Geiss. 1989. Aeromonas as a human pathogen. Crit. Rev. Microbiol 16:253−286.
  16. , W. 1993. Evolution of prokaryotic genomes. Gene 135:49— 56.
  17. Asao, Т., Y. Kinoshita, S. Kozaki, T. Uemura, and G. Sakaguchi. 1984. Purification and some properties of Aeromonas hydrophila hemolysin. Infect. Immun. 46:122−127.
  18. Baldwin, T. J., S. Knutton, L. Sellers, H. A. Manjarrez-Hemandez, A. Aitken, and P. H. Williams. 1992. Enteroaggregative Escherichia coli strains secrete a heat-labile toxin antigenically related to E. coli hemolysin. Infect. Immun. 60:2092−2095.
  19. Betley, M. J., V. L. Miller, and J. J. Mekalanos. 1986. Genetics of bacterial enterotoxins. Annu. Rev. Microbiol. 40:577−605.
  20. H.C., Doly J. 1979 A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucl. Acids Res., 1979, v. 7, № 6, p. 1513
  21. Bishai, W. R., and J. R. Murphy. 1988. Bacteriophage gene products that cause human disease, p. 683−724. In R. Calendar (ed.), The bacteriophages. Plenum, New York, N.Y.
  22. , R. E. 1990. Epidemiology of travelers' diarrhea and relative importance of various pathogens. Rev. Infect. Dis. 12:73−79.
  23. , R. E. 1993. Epidemiology of diarrhoeal disease: implications for control by vaccines. Vaccine 11:100−106.
  24. , R. E. 1993. Persistent diarrhea in children of developing countries. Pediatr. Infect. Dis. J. 12:751−761.
  25. Bonventre P.F., Lincoln R.E., Lamanna C. Bacteriol. Revs, 1967, 31, № 2, 95
  26. P., Hooykaas P.J., 1996, Integration of Agrobfcterium tu-mefaciens T-DNA in the Saccharomyces cerevisiae genome by illegitimate recombination, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, 15 272−15 275.
  27. Busoni-Gatel D., De Ryeke I., Bosseray N. 1984 A footpad lesion test to demonstrate the pathogenicity of E. coli strains. Ann. Microbiol, v. 135 В № 3 p.311−321.
  28. , M. J. 1976. Transposition and fusion of the lac genes to select promoters in Escherichia coli using bacteriophage lambda and Mu. J. Mol. Biol. 104:541−555.
  29. Celemin, C., Anguita, J., Naharro, G. & Suarez, S. (1994). Evidence that Escherichia coli isolated from the intestine of healthy pigs hybridize with LT-П, ST-Ib and SLT-П DNA probes. Microb. Pathog. 16, 77
  30. , А. С. Y., and S. N. Cohen. 1978. Construction and characterization of amplifiable multicopy DNA cloning vehicles derived from the PI5A cryptic miniplasmid. J. Bacteriol. 134:1141−1156.
  31. Curtiss R., Clark J.E., Goldschmidt R., Hsu J.C., Hull S.C., Inoue M., Maturin L.J., Moody R., Pereira D.A. Biohazard assessment of recombinant SNA molecule research. //Proceedings of the Third International Symposium of Fntibiotic Resistance. 1976.
  32. W.S., Falkow S., 1980, Amino acid sequence homology between cholera toxin and Escherichia coli heat-labile toxin. Nature1. ndon) 288:499−501.
  33. W.S., Gill D.M., Falkow S., 1979, Cistrons encoding Escherichia coli heat-labile toxin. J Bacteriol, 139(3):850−858.
  34. Dallas, W. S., and S. Falkow. 1980. Amino acid sequence homology between cholera toxin and Escherichia coli heat-labile toxin. Nature 288:499−501.
  35. David E. Bradley, Diane E. Taylor, Doris R. Cohen. 1980. Specification of Surface Mating System Among Conjugative Drug Resistance Plasmids in Escherichia coli K-12. J.Bacteriol. 143:1466−1407 (No. 3).
  36. Dickinson, B. L., and J. D. Clements. 1995. Dissociation of Escherichia coli heat-labile enterotoxin adjuvanticity from ADP-ribosyltransferase activity. Infect. Immun. 63:1617−1623.
  37. Domenighini, M., C. Montecucco, W. C. Ripka, and R. Rappuoli. 1991. «Computer modelling of the NAD binding site of ADPribosylating toxins: active-site structure and mechanism of NAD binding.» Mol. Microbiol. 5:23−31.
  38. Donnenberg, M. S., and J. B. Kaper. 1991. Construction of an eae deletion mutant of enteropathogenic Escherichia coli by using a positive-selection suicide vector. Infect. Immun. 59:4310−4317.
  39. Donnenberg, M. S., C. 0. Tacket, S. P. James, G. Losonsky, J. P. Nataro, S. S. Wasserman, J. B. Kaper, and M. M. Levine. 1993. Role of the eaeA gene in experimental enteropathogenic Escherichia coli infection. J. Clin. Invest. 92:1412−1417.
  40. Dreyfus, L. A., J. C. Frantz, and D. C. Robertson. 1983. Chemical properties of heat-stable enterotoxins produced by enterotoxigenic Escherichia coli of different host origins. Infect. Immun. 42:539−548
  41. Dziejman, M., and J. J. Mekalanos. 1994. Analysis of membrane protein interaction: ToxR can dimerize the amino terminus of phage lambda repressor. Mol. Microbiol. 13:485−494.
  42. Echeverria, P., L. Verneart, С. V. Ulyangco, S. Komalarini, and M. T. Ho. 1978. Antimicrobial resistance and enterotoxin production among isolates of Escherichia coli in the Far East. Lancet 8090:589 592.
  43. Fasano, A., B. A. Kay, R. G. Russell, D. R. Maneval, and M. M. Levine. 1990. Enterotoxin and cytotoxin production by enteroinvasive Escherichia coli. Infect. Immun. 58:3717−3723.
  44. Finlay В. B.,. Falkow S «Common Themes in Microbial Pathogenicity Revisited», Microbiology and Molecular Biology Reviews, June 1997, p. 136−169
  45. , P. H. 1990. Mechanism of action of cholera toxin, p. 127−137. In J. Moss and M. Vaughan (ed.), ADP-ribosylating toxins and G proteins. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
  46. Focco van den Akker, Steve Sarfaty, Edda M Twiddy, Terry D Con-nell, Randall К Holmes and Wim GJ Hoi., 1996, Crystal structure of anew heat-labile enterotoxin, LT-IIb, Structure 15 June 1996, 4:665*678.
  47. Fukuta, S., Magnani, J.L., Twiddy, E.M., Holmes, R.K. & Ginsburg, V. (1988). Comparison of the carbohydrate-binding specificities of cholera toxin and Escherichia coli heat-labile enterotoxins LTh-I, LT-Ila, and LT-IIb. Infect. Immun. 56, 1748−1753.
  48. Gaastra, W., and A. M. Svennerholm. 1996. Colonization factors of human enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC). Trends Microbiol. 4:444−452.
  49. Gaastra, W., and A. M. Svennerholm. 1996. Colonization factors of human enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC). Trends Microbiol. 4:444−452.
  50. Gorbach, S. L., J. G. Banwell, B. D. Chatterjee, B. Jacobs, and R. B. Sack. 1971. Acute undifferentiated human diarrhea in the tropics. J. Clin. Invest. 50:881−889.
  51. Guerrant, R. L., C. A. Wanke, R. A. Pennie, L. J. Barrett, A. A. M. Lima and A. D. O’Brien. 1987. Production of a unique cytotoxin by Campylobacter jejuni. Infect. Immun. 55:2526−2530
  52. Guth, B.E.C., et al., & Trabulsi, L.R. (1986). Production of type II heatlabile enterotoxin by Escherichia coli isolated from food and human faeces. Infect. Immun. 59, 587−589.
  53. Gyles, C. L. and Barnum, D. A. (1969). A heat-labile enterotoxin from strains of Escherichia coli enteropathogenic for pigs. J. Infect. Dis. 120, 419−426.
  54. Hacker J., Blum-Oehler G., Muhldorfer I., Tschape H., 1997, Pathogenicity islands of virulent bacteria: Structure, function and impact on microbial evolution, Mol. Microbiol., 23, 1089−1097.
  55. Hacker, J., G. Blum-Oehler, I. Mu’hldorfer, and H. Tscha"pe. 1997. Pathogenicity islands of virulent bacteria: structure, function and impact on microbial evolution. Mol. Microbiol. 23:1089−1097.
  56. Halpern JL, Neale EA. 1995 Neurospecific binding, internalization and retrograde axonal transport. Curr Top Microbiol Immunol- 195:22 141.
  57. Holmgren J, Lycke N, Czerkinsky C. Cholera toxin and cholera В subunit as oral-mucosal adjuvant and antigen vector systems. // Vaccine. 1993 11, 1179−84.
  58. Houston, C. W., A. K. Chopra, J. M. Rose, and A. Kurosky. 1991. Review of Aeromonas enterotoxins. Experientia 47:424−426.
  59. , Т. Т., D. Baker, P. Klaasen, and F. K. de Graf. 1994. Leu-cineresponsive regulatory protein, IS 1 insertions, and the negative regulator FeaA control the expression of the fae (K88) operon in Escherichia coli. Mol. Microbiol. 11:525−536.
  60. S., Park S.H., Sasaki Т., Kumagai S., 1996, Transfer of conju-gative plasmid pAMpi from Lactococcus lactis to mouse intestinal bacteria, Lett. Appl. Microbiol., 23, 31−35.
  61. , J. M. 1991. Recent advances in the sUidy of the taxonomy, pathogenicity and infectious syndromes associated with the genus Aeromonas Clin. Microbiol. Rev. 4:397−410.
  62. Jertborn, M., C. Ahren, J. Holmgren, and A. M. Svennerholm. 1998. Safety and immunogenicity of an oral inactivated enterotoxigenic Escherichia coli vaccine. Vaccine 16:255−260.
  63. Jobling M.G., Holmes R.K. Biological and biochemical characreti-zation of variant A subunits of cholera toxin constructed by site directed mutagenesis. И J. Bacteriol. 2001. 183, 4024−4032.
  64. Jobling M.G., Holmes R: K. Mutational Analysis of Ganglioside GM1-Binding Ability, Pentamer Formation, and Epitopes of Cholera Toxin В (CTB) Subunits and CTB/Heat-Labile Enterotoxin В Subunit Chimeras. I I Infection and Immunity. 2002. 70, 1260−1271.
  65. Johnson, W. M., and H. Lior. 1988. A new heat-labile cytolethal distending toxin (CLDT) produced by Campylobacter spp. Microb. Pathog. 4:115−126
  66. , J. В., A. Fasano, and M. Trucksis. 1994. Toxins of Vibrio cholerae, p. 145−176. In I. K. Wachsmuth, P. A. Blake, and 0. Olsvik (ed.), Vibrio cholerac and cholera. American Society for Microbiology, Washington,
  67. Kato M., Imamura S., Kawase H., Miyama A., Tsuji T. Histidine-44 of the A subunit of Escherichia coli enterotoxin is involved in its enzymatic and biological activities. J/Microbiol. Letters. 1997. 152, 219 225.
  68. Kessler KR, Benecke R. 1997 Botulinum toxin: from poison to remedy. Neurotoxicology-18:761−770.
  69. Keusch G.T. and S.T. Donta «Classification of enterotoxins on the basis of activity in cell culture.», J.Infect.Dis. 1975r. 131: 58−63
  70. Klipstein, F. A., and R. F. Engert. 1984. Properties of crude Campylobacter jejuni heat-labile enterotoxin. Infect. Immun. 45:314−319.
  71. J.G., 1997, Selfish operons and speciation by gene transfer, Trends Microbiol, 5, 355−259.
  72. Lee, C. A. 1996. Pathogenicity islands and the evolution of bacterial pathogens.Infect. Agents Dis. 5:1−7.
  73. Leong, J., A. C. Vinal, and W. S. Dallas. 1985. Nucleotide sequence comparison between heat-labile toxin B-subunits from Escherichia coli of human and porcine origin. Infect. Immun. 48:73−77.
  74. Mahillon, J., and M. Chandler. 1998. Insertions sequences. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 62:725−774. Maniatis, Т., E. F. Fritsch, and J. Sambrook. 1982. Molecular cloning: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y.
  75. Matsutani, S., H. Ohtsubo, Y. Meada, and E. Ohtsubo. 1987. Isolation and characterization of IS elements repeated in the bacterial chromosome. J. Mol. Biol. 196:445−455.
  76. McClane, B. A. 1994. Clostridium perfringens enterotoxin acts by producing small molecule permeability alterations in plasma membranes. Toxicology 87:43−67.
  77. McClane, B. A., and A. P. Wnek. 1990. Studies of Clostridium perfringens enterotoxin action at different temperatures demonstrate a correlation between complex formation and cytotoxicity. Infect. Immun. 58:3109−3115.
  78. McConnell, M. M" H. Chart, A. M. Field, M. Hibberd, and B. Rowe. 1989. Characterization of a putative colonization factor (PCF0166) of enterotoxigenic Escherichia coli of serogroup 0166. J. Gen. Microbiol. 135:1135−1144.
  79. McConnell, M. M., H. Chart, and B. Rowe. 1989. Antigenic homology within human enterotoxigenic Escherichia coli fimbrial colonization factor antigens: CFA/I, coli-surface-associated antigens (CS)1, CS2, CS4 and CS17. FEMS Microbiol. Lett. 61:105−108.
  80. McConnell, M. M., L. V. Thomas, N. P. Day, and B. Rowe. 1985. Enzymelinked immunosorbent assays for the detection of adhesion factor antigens of enterotoxigenic Escherichia coli. J. Infect. Dis. 152:1120−1127.
  81. McConnell, M. M., M. Hibberd, A. M. Field, H. Chart, and B. Rowe. 1990. Characterization of a new putative colonization factor (CS 17) from a human enterotoxigenic Escherichia coli of serotype
  82. Oil4:H21 which produces only heat-labile enterotoxin. J. Infect. Dis. 161:343−347.
  83. McCormick, B. A., S. P. Colgan, C. Delp-Archer, S. I. Miller, and J. L. Madara. 1993. Salmonella typhimurium attachment to human intestinal epithelial monolayers: transcellular signalling to subepithelial neutrophils. J. Cell Biol. 123:895−907.
  84. McDaniel, Т. K., and J. B. Kaper. 1997. A cloned pathogenicity island from enteropathogenic Escherichia coli confers the attaching and effacing phenotype on E. coli K-12. Mol. Microbiol. 23:399−407.
  85. McGee, D. W., С. O. Elson, and J. R. McGhee. 1993. Enhancing effect of cholera toxin on interleukin-6 intestinal epithelial cells: mode of action and augmenting effect of inflammatory cytokines. Infect. Im-mun. 61:4637−4644.
  86. McKee, M. L., A. R. Melton-Celsa, R. A. Moxley, D. H. Francis, and A. D. O’Brien. 1995. Enterohemorrhagic Escherichia coli 0157: H7 requires intimin to colonize the gnotobiotic pig intestine and to adhere to HEp-2 cells. Infect. Immun. 63:3739−3744.
  87. McKee, M. L., and A. D. O’Brien. 1995. Investigation of entero-hemoiThagic Escherichia coli 0157: H7 adherence characteristics and invasion potential reveals a new attachment pattern shared by intestinal E. coli. Infect. Immun. 63:2070−2074.
  88. McKee, M. L., and A. D. O’Brien. 1996. Truncated enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) 0157: H7 intimin (EaeA) fusion proteins promote adherence of EHEC strains to HEp-2 cells. Infect. Immun. 64:2225−2233.
  89. Me’nard, R., M. C. Pre’vost, P. Gounon, P. Sansonetti, and C. De-hio. 1996The secreted Ipa complex of Shigella flexneri promotes entry into mammalian cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:1254−1258.
  90. Mead, P. S., L. Finelli, M. A. Lambert-Fair, D. Champ, J. Townes, L. Hutwager, T. Barrett, K. Spitalny, and E. Mintz. 1997. Risk factors for sporadic infection with Escherichia coli 0157: H7. Arch. Intern. Med. 157:204−208.
  91. Mecsas, J., and E. J. Strauss. 1996. Molecular mechanisms of bacterial virulence: type III secretion and pathogenicity islands. Emerg. Infect. Dis. 2:271−288.
  92. Mekalanos, J. J., D. J. Swartz, G. D. Pearson, N. Harford, F. Groyne, and M. de Wilde. 1983. Cholera toxin genes: nucleotide sequence, deletion analysis and vaccine development. Nature 306:551−557.
  93. Menard, R., and P. J. Sansonetti. 1994. ShigellaJlexneri: isolation of noninvasive mutants of gram-negative pathogens. Methods Enzymol. 236:493−509.
  94. Menard, R., P. J. Sansonetti, and C. Parsot. 1993. Nonpolar mutagenesis of the ipa genes defines IpaB, IpaC, and IpaD as effectorsof Shigella jlexneri entry into epithelial cells. J. Bacteriol. 175:58 995 906.
  95. Mendiola, V., I. Bernales, and F. de la Cruz. 1994. Differential roles of the transposon termini in IS91 transposition. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 1922−1926.
  96. Mendiola, V., Y. Jubete, and F. de la Cruz. 1992. DNA sequence of IS9/ and identification of the transposase gene. J. Bacteriol. 174:13 451 351.
  97. Meng, J., and M. P. Doyle. Microbiology of Shiga toxin-producing Echenchia coli in foods. In J. В. Kaper and A. D. O’Brien (ed.), Escherichia coli 0157: H7 and other Shiga toxin-producing Escherichia coli, in press. ASM Press, Washington, D.C.
  98. Meng, J., S. Zhao, T. Zhao, and M. P. Doyle. 1995. Molecular char-acterisaion of Escherichia coli 0157: H7 isolates by pulsed-field gel electrophoresis and plasmid DNA analysis. J. Med. Microbiol. 42:258 263.
  99. Mezoff, A. G., R. A. Giannella, M. N. Eade, and M. B. Cohen. 1992. Escherichia coli enterotoxin (STa) binds to receptors, stimulates guanyl cyclase, and impairs absorption in rat colon. Gastroenterology 102:816−822.
  100. Mietens, С., H. Keinhorst, H. Hilpert, H. Gerber, H. Amster, and J. J. Pahud. 1979. Treatment of infantile E. coli gastroenteritis with specific bovine anti-Я. coli milk immunoglobulin. Eur. J. Pediatr. 132:239−252.1. A.
  101. Miliotis, M. D., H. J. Koornhof, and J. I. Phillips. 1989. Invasive potential of noncytotoxic enteropathogenic Escherichia coli in an in vitro Henle 407 cell model. Infect. Immun. 57:1928−1935.
  102. , J. H. 1972. Experiments in molecular genetics. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y.
  103. Miller, J. R., L. Barrett, K. Kotloff, and R. L. Guerrant. 1994. A rapid diagnostic test for infectious and inflammatory enteritis. Arch. Intern. Med. 154:2660−2664.
  104. Mills, M., and S. M. Payne. 1995. Genetics and regulation of heme iron transport in Shigella dysenteriae and detection of an analogous system in Escherichia coli 0157: H7. J. Bacteriol. 177:3004−3009.
  105. , J. L. 1994. Haemolytic-uraemic syndrome: basic science. Lancet 343:393−397.
  106. Moncrief, J. S., R. Obiso, L. A. Barroso, J. J. Kling, R. L. Wright, R. L. Van Tassell, D. M. Lyerly, and T. D. Wilkins. 1995. The enterotoxin of Bacteroides fragilis is a metalloprotease. Infect. Immun. 63:175 181.
  107. Moon, H. W., S. C. Whipp, R. A. Argenzio, M. M. Levine, and R. A. Giannella. 1983. Attaching and effacing activities of rabbit and human enteropathogenic Escherichia coli in pig and rabbit intestines. Infect. Immun. 41:1340−1351.
  108. Moore, M. A., M. J. Blaser, G. I. Perez-Perez, and A. D. O’Brien. 1988. Production of a Shiga-like cytotoxin by Campylobacter. Microb. Pathog.
  109. Moyer, M. P., P. S. Dixon, S. W. Rothman, and J. E. Brown. 1987. Cytotoxicity of Shiga toxin for primary cultures of human colonic and ileal epithelial cells. Infect. Immun. 55:1533−1535.
  110. Muller, U., M. Brandsch, P. D. Prasad, Y. J. Fei, V. Ganapathy, and F. H. Leibach. 1996. Inhibition of the Hl/peptide cotransporter in the human intestinal cell line Caco-2 by cyclic AMP. Biochem. Biophys. Res. Commun. 218:461−465.
  111. Mulligan, M. E., D. K. Hawley, R. Entriken, and W. R. McClure.1984. E. coli promoter sequences predict in vitro RNA-polymerase selectivity. Nucleic Acids Res. 12:789−800.
  112. , К. В., and F. Faloona. 1987. Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase chain reaction. Methods Enzymol. 155:335−340.
  113. M., Jofre J., 1998, Abundance in sewage of bacoteriphages that infect Escherichia coli 0157:H7 and that carry the Shiga toxin 2 gene, Appl. Environ. Microbiol., 64, 2443−2448.24
  114. Murphy, G. L., and W. Dallas. 1991. Analysis of two genes encoding heatlabile toxins and located on a single plasmid from Escherichia coh. Gene 103:37−43.
  115. Murray, В. E., J. J. Mathewson, H. L. DuPont, and W. E. Hill. 1987. Utility of oligodeoxyribonucleotide probes for detecting enterotoxigenic Escherichia coh. J. Infect. Dis. 155:809−811.
  116. Myers, L. L., D. S. Shoop, B. D. Firehammer, and M. M. Border.1985. Association of enterotoxigenic Bacteroides fragilis with diarrheal disease in calves. J. Infect. Dis. 152:1344−1347.
  117. Nalin, D. R., J. C. McLaughlin, M. Rahaman, M. Yunus, and G. Curlin. 1975. Enteropathogenic Escherichia coli and idiopathic diarrhoea in Bangladesh. Lancet ii: l 116−1119.
  118. Nataro J.P., Kaper J.B., Diarrheagenic Escherichia coli, Clin. Microbiol. Rev., 1998, v. 11, Jan., p. 142−201
  119. Nataro, J. P., D. Yikang, D. Yingkang, and K. Walker. 1994. AggR, a transcriptional activator of aggregative adherence fimbria I expressioniin enteroaggregative Escherichia coli. J. Bacteriol. 176:4691−4699.
  120. Nataro, J. P., D. Yikang, J. A. Giron, S. J. Savarino, M. H. Kothary, and R. Hall. 1993. Aggregative adherence fimbria I expression in enteroaggregative Escherichia coli requires two unlinked plasmid regions. Infect. Immun. 61:1126−1131.
  121. Nataro, J. P., D. Yikang, S. Cookson, A. Cravioto, S. J. Savarino, L. D. Guers, M. M. Levine, and С. O. Tacket. 1995. Heterogeneity of enteroaggregative Escherichia coli virulence demonstrated in volunteers. J. Infect. Dis. 171:465−468.
  122. Nataro, J. P., I. C. Scaletsky, J. B. Kaper, M. M. Levine, and L. R. Trabulsi. 1985. Plasmid-mediated factors conferring diffuse and localized adherence of enteropathogenic Escherichia coli. Infect. Immun. 48:378−383.
  123. Nataro, J. P., J. B. Kaper, R. Robins Browne, V. Prado, P. Vial, and M. M. Levine. 1987. Patterns of adherence of diarrheagenic Escherichia coli to HEp-2 cells. Pediatr. Infect. Dis. J. 6:829−831.
  124. , J. P., К. O. Maher, P. Mackie, and J. B. Kaper. 1987. Characterization of plasmids encoding the adherence factor of enteropatho-genic Escherichia coli. Infect. Immun. 55:2370−2377.
  125. Nataro, J. P., M. M. Baldini, J. B. Kaper, R. E. Black, N. Bravo, and M. M. Levine. 1985. Detection of an adherence factor of enteropatho-genic Escherichia coli with a DNA probe. J. Infect. Dis. 152:560−565.
  126. Nataro, J. P., S. Hicks, A. D. Phillips, P. A. Vial, and C. L. Sears. 1996. T84 cells in culture as a model for enteroaggregative Escherichia coli pathogenesis. Infect. Immun. 64:4761−4768.
  127. Navarro-Garcia, F., C. Eslava, J. P. Nataro, and A. Cravioto. 1997. Unpublished data. 474. Neill, M. A. 1994. Pathogenesis of Escherichia coli 0157: H7 infection. Curr. Opin. Infect. Dis. 7:295−303.
  128. Society for Microbiology 1995. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
  129. Newland, J. W., and R. J. Neill. 1988. DNA probes for Shiga-like toxins I and II and for toxin-converting bacteriophages. J. Clin. Microbiol. 26:1292−1297.
  130. Nijsten R., London N., van den Bogaard A., Stobberingh E., 1995, In vivo transfer of resistance plasmids in rat, human or pig-derived intestinal flora using a rat model, J. Antimicrob. Chemother., 36, 975 985.
  131. Nishikawa, Y., S. M. Scotland, H. R. Smith, G. A. Willshaw, and B. Rowe. 1995. Catabolite repression of the adhesion of Vero cytotoxin-producing Escherichia coli of serogroups 0157 and Olll. Microb. Pathog. 18:223−229.
  132. W.M. (1976) in Handbook of Biochemistry and Molecular Biology (Fasman G.D., ed) 3rd Ed, pp. 65−235, The Chemical Rubber Co, Cleveland, OH.
  133. Nzegwu, H. C., and R. J. Levin. 1994. Neurally maintained hypersecretion in undernourished rat intestine activated by E. coli STa en-terotoxin and cyclic nucleotides in vitro. J. Physiol. (London) 479:159 169.
  134. O’Brien, A. D., and R. K. Holmes. 1987. Shiga and Shiga-like toxins. Microbiol. Rev. 51:206−220.
  135. O’Brien, A. D., J. W. Newland, S. F. Miller, R. K. Holmes, H. W. Smith, and S. B. Formal. 1984, Shiga-like toxin-converting phages from Escherichia coli strains that cause hemorrhagic colitis or infantile diarrhea. Science 226: 694−696.
  136. O’Meara, D., E. O’Shaughnessy, B. Cryan, and S. Fanning. 1995.
  137. Colorimetric detection of toxin-encoding gene of enterotoxigenic Escherichia coli by PCR. J. Clin. Microbiol. 33:1957−1960.
  138. , I. 1983. Response of mouse intestinal loop to botulinum C2 toxin: enterotoxic activity induced by cooperation of nonlinked protein components.Infect. Immun. 40:691−695
  139. Peterson J.W. and S.C. Wliipp 1995. «Comparison of the mechanisms of action of cholera toxin and the heat-stable enterotoxins of Escherichia cole.», Infect.Immun. 63:1452−1461
  140. Peterson J.W., and S.C. Wliipp 1989. «Role of prostaglandins and cAMP in the secretory effects of cholera toxin.», Science 245: 857−859.
  141. Peterson J.W., Y. Lu, S. Duncan, y. Cantee and A.K. Chopra. 1994. «Interactions of intestinal mediators in the mode of action of cholera toxin.», J.Med.Microbiol., 41:3−9
  142. Pickett, C.L., Twiddy, E.M., Coker, C. & Holmes, R.K. (1989). Cloning, nucleotide sequence, and hybridization studies of the type lib heatlabile enterotoxin gene of Escherichia coli. J. Bacteriol. 171, 49 454 952.
  143. Pickett, C.L., Weinstein, D.L. & Holmes, R.K. (1987). Genetics of type Па heat-labile enterotoxin of Escherichia coli: operon fusions, nucleotide sequence, and hybridization studies. J. Bacteriol. 169, 51 805 187.
  144. Ronecker, H. J., and В. Rak. 1987. Genetic organization of insertion element IS2 based on a revised nucleotide sequence. Gene 59:291−296.
  145. , R. E. 1988. The nucleotide sequence of pACYC177. Nucleic Acids
  146. E., Yersin A. 1888. «Contribution a l’etude de la diphtheria.», Annales de l’lnstitut Pasteur, 2:629−661
  147. Rowe, В., Taylor, J. and Bettelheim, K. A. (1970). An investigation of travellers’diarrhoea. Lancet 1, 1−5.
  148. Ruschkowski, S., I. Rosenshine, and В. B. Finlay. 1992. Salmonella typhimurium induces an inositol phosphate flux in infected epithelial cells. FEMS Microbiol. Lett. 95:121−126.
  149. A.A., Shoemaker N.B., 1996, Resistance gene transfer in anaerobes: New insights, new problems., Clin. Infect. Lis., 23, S36-S43.
  150. Sanger, F., S. Nicklen, and A. R. Coulson. 1977. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 74:54 635 467.
  151. Savelkoul, P. H., G. A. Willshaw, M. M. McConnell, H. R. Smith, A. M. Hamers, B. A. van der Zeijst, and W. Gaastra. 1990. Expression of CFA/I fimbriae is positively regulated. Microb. Pathog. 8:91−99.
  152. Schiavo G, Montecucco C. 1997. The structure and mode of action of botulinum and tetanus toxins. In: Rood JI, McClane BA, Songer JG,
  153. Titball RW, editors. The Clostridia: molecular biology and pathogenesis. San Diego: Academic Press- p. 295−322.
  154. D., Dchaechter M. «Bacterial toxins» In: Schaecheter M., Medoff G., Eisenstein B.I. editors. «Mechanisms of microbial disease.» 2nd ed. Baltimore: Williams and Wilkins- 1993, p.162−175.
  155. S., Riedl S., Blap J., Reidl J., 2000, Genetic Rearrangenents of the Regions Adjacent to Genes Encoding Heat-Labile Enterotoxins (eltAB) of Enterotoxigenic Escherichia coli Strains, Appl. Env. Micro-bil., 66: 352−358.
  156. Scotland, S. M., G. A. Willshaw, H. R. Smith, and B. Rowe. 1987. Properties of strains of Escherichia coli belonging to serogroup 0157 with special reference to production of Vero cytotoxins VT1 and VT2. Epidemiol. Infect. 99:613−624.
  157. K.P., Flint H.J., 1995, Transfer of plasmids between strains of Escherichia coli under rumen conditions, J. Appl. Bfcteriol., 78, 189 193.
  158. Sears, C. L., Kaper J. B. Enteric bacterial toxins: mechanisms of action and linkage to intestinal secretion. I/Microbiol Rev. 1996. 60, 167— 215.
  159. Seriwatana, J., P. Echeverria, D. N. Taylor, L. Rasrinaul, J. E. Brown, J. S. M. Peiris, and C. L. Clayton. 1988. Type II heat-labile en-terotoxinproducing Escherichia coli isolated from animals and humans. Infect. Immun. 56:1158−1161.
  160. Singh BR, Li B, Read D. 1995 Botulinum versus tetanus neurotoxins: why is botulinum neurotoxin but not tetanus neurotoxin a food poison? Toxicon-33:1541 -1547
  161. , Т. К., К. H. Kalk, B. A. van Zanten, Z. Dauter, J. Kingma, B. Witholt, and W. G. Hoi. 1993. Refined structure of Escherichia coli heatlabile enterotoxin, a close relative of cholera toxin. J. Mol. Biol. 230:890−918.
  162. , Т. К., Kalk, К. Н., Van Zanten, В. А. М., Dauter, Z., Kingma, J., Witholt, В., Hoi, W. G.: Refined structure of Escherichia coli heat-labile enterotoxin, a close relative of cholera toxin. J. Mol. Biol. 230, 890−918(1993).
  163. H. R. 1984. Genetics of enterotoxin production in Escherichia coli. Biochem. Soc. Trans. 12:187−189.
  164. Smith, W. H., and S. Halls. 1968. The transmissible nature of the genetic factor in Escherichia coli that controls enterotoxin production. J. Gen. Microbiol. 52:319−334.
  165. So, M., and B. J. McCarthy. 1980. Nucleotide sequence of the bacterial transposon TNI 681 encoding a heat-stable (ST) toxin and its identification in enterotoxigenic Escherichia coli strains. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4011−4015.
  166. Sobel, D. O., Yankelevich, В., Goyal, D., Nelson, D., Mazumder, A.: The B-subunit of cholera toxin induces immunoregulatory cells and prevents diabetes in the NOD mouse. Diabetes 47, 186−191 (1998).
  167. Solinas, F., A. M. Maraconi, M. Ruzzi, and E. Zemaro. 1995. Characterization and sequence of a novel insertion sequence, IS 1162, from Pseudomonasfluoresceins. Gene 155:77−82.
  168. , E. M. 1975. Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis. J. Mol. Biol. 51:503−517.
  169. Spangler B.D. Structure and function of cholera toxin and the related Escherichia coli heat-labile enterotoxin. I/Microbiol. Rev. 1992. 56, 622−647.
  170. , B.D. (1992). Structure and function of cholera toxin and the related Escherichia coli heat-labile enterotoxin. Microbiol. Rev. 56, 622−647.
  171. Sun, J.-B., Holmgren, J., Czerkinsky, C.: Cholera toxin В subunit: An efficient transmucosal carrier-delivery system for the induction of peripheral immunological tolerance. Proc. Natl. Acad. Sci. 10 795−10799(1994).
  172. Sun, J.-B., Rask, C., Holmgren, J., Czerkinsky, C.: Treatment of experimental autoimmune encephalomyelitis by feeding myelin basic protein conjugated to cholera toxin Bsubunit. Proc. Natl. Acad. Sci. 71 967 201 (1996).
  173. Svennerholm, A. M., J. Holmgren, and D. A. Sack. 1989. Development of oral vaccines against enterotoxinogenic Escherichia coli diarrhoea. Vaccine 7:196−198.
  174. M., 1994, Horizontal gene transfer: Evidence and possible consequences, Annu. Rev. Genet., 28, 237−261.
  175. Thompson, M. R., and R. A. Giannella. 1985. Revised amino acid sequence for a heat-stable enterotoxin produced by an Escherichia call strain (18D) that is pathogenic for humans. Infect. Immun. 47:834−836.
  176. Trachmann, J. D., and W. K. Maas. 1998. Temperature regulation of the heat-labile enterotoxin (LT) synthesis in Escherichia colt is mediated by an interaction of H-NS protein with the LT A-subunit. J. Bacte-riol. 180:3715−3718.
  177. Tsuji Т., Inoue Т., Miyama A., Okamoto 1С., Honda Т., Miwatami T. A single amino acid substitution in the A subunit of Escherichia coli enterotoxin results in a loss of its toxic activity. //J. Biol Chem. 1990. 265, 22 520−22 525.
  178. , P. С. B. 1981. Bacillus cereus toxins. Pharmacol. Ther. 13:453−505.
  179. , P. С. В., .Т. M. Kramer, К. Jorgensen, R. J. Gilbert, and J. Melling. 1979. Properties and production characteristics of vomiting, i diarrheal, and necrotizing toxins of Bacillus cereus. Am. J. Clin. Nutr.32:219−228.
  180. Tzipori, S., I. K. Wachsmuth, C. Chapman, R. Birner, J. Britting-ham, C. Jackson, and J. Hogg. 1986. The pathogenesis of hemorrhagic colitis caused by Escherichia cmi 0157*.Н7-т gnotooiotfc piglets. J. Infect. Dis. 154:712−716.
  181. Vellcov V. V., How environmental factors regulate mutagenesis and gene transfer in microorganisms. Journal of Biosciences, 1999, v.24, N 4, p.529−559.
  182. Vinal, A. C., and W. S. Dallas. 1987. Partition of heat-labile enterotoxin genes between human and animal Escherichia coli isolates. Infect. Immun. 55:1329−1331.
  183. M., 1998, Bacteriophage biology and bacterial virulence, Trends Microbiol., 6:295−296.
  184. Waldor, К. W., and J. J. Mekalanos. 1996. Lysogenic conversion by a filamentous phage encoding cholera toxin. Science 272:1910−1914.
  185. , R. Г., M. B. Caldwell, E. C. Lee, P. Guerry, T. Trust, and G. M. Ruiz-Palacios. 1986. Pathophysiology of Campylobacter enteritis. Microbiol. Rev. 50:81−94.
  186. Willshaw, G. A., S. M. Scotland, H. R. Smith, and B. Rowe. 1992. Properties of vero cytotoxin-producing Escherichia coli of human origin of О serogroups other than 0157. J. Infect. Dis. 166:797−802.
  187. Winsor, D. K., Jr., S. Ashkenazi, R. Chiovetti, and T. G. Cleary. 1992. Adherence of enterohemorrhagic Escherichia coli strains to a human colonic epithelial cell line (T84). Infect. Immun. 60:1613−1617.
  188. , P. К., С. T. Yamashiro, K. J. Livak, and C. A. Batt. 1996. A PCR-based assay for the detection of Escherichia coli Shiga-like toxin genes in ground beef. Appl. Environ. Microbiol. 62:1347−1353.
  189. , M. К. 1997. Occurrence, distribution, and association of О and H serogroups, colonization factor antigens, and toxins of enterotoxigenic Escherichia coli. Clin. Microbiol. Rev. 10:569−584.
  190. Wood, L. V., L. E. Ferguson, P. Hogan, D. Thurman, D. Morgan, H.
  191. L. DuPont, and C. D. Ericsson. 1983. Incidence of bacterial enteropathogens in foods from Mexico. Appl. Environ. Microbiol. 46:328−332.
  192. Wood, P. K., J. G. Morris, P. L. Small, O. Sethabutr, M. R. Toledo, L. Trabulsi, and J. B. Kaper. 1986. Comparison of DNA probes and the Sereny test for identification of invasive Shigella and Escherichia coli strains. J. Clin. Microbiol. 24:498−500.
  193. , B. W. 1992. Molecular characterisation of Clostridium difficile toxins A and B. Rev. Med. Microbiol. 3:21−27
  194. Wright, D. J., P. A. Chapman, and C. A. Siddons. 1994. Immu-nomagnetic separation as a sensitive method for isolating Escherichia coli 0157 from food samples. Epidemiol. Infect. 113:31−39.
  195. Wu, S.-X., and R.-Q. Peng. 1992. Studies on an outbreak of neonatal diarrhea caused by EPEC 0127: H6 with plasmid analysis restriction analysis and outer membrane protein determination. Acta Paediatr. Scand. 81:217−221.
  196. Yamamoto, Т., and H. Yokota. 1983. Sequence of heat-labile enterotoxin of Escherichia coli pathogenic for humans. J. Bacteriol. 155:728 733.
  197. Yamamoto, Т., and P. Echeverria. 1996. Detection of the enteroag-gregative Escherichia coh heat-stable enterotoxin 1 gene sequences in enterotoxigenic E. coli strains pathogenic for humans. Infect. Immun. 64:1441−1445.
  198. Yamamoto, Т., P. Echeverria, and T. Yokota. 1992. Drug resistance and adherence to human intestines of enteroaggregative Escherichia coh. J. Infect. Dis. 165.744−749.
  199. , Т., Т. Gojobori, and T. Yokota. 1987. Evolutionary origin of pathogenic determinants in enterotoxigenic Escherichia coli and Vibrio cholerae 01. J. Bacteriol. 169:1352−1357.
  200. Yamamoto, Т., Tamura, Т., Ryoji, M., Kaji, A., Yokota, Т., and Ta-kano, T. (1982) J. Bacteriol. 162, 506−509
  201. Yamanaka, H., M. Kameyama, T. Baba, Y. Fujii, and K. Okamoto. 1994. Maturation pathway of Escherichia coli heat-stable enterotoxin I. Requirement of DsbA for disulfide bond formation. J. Bacteriol. 176:2906−2913.
  202. Yolken, R. H., H. B. Greenberg, M. H. Merson, R. B. Sack, and A. Z. Kapikian. 1977. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Escherichia coli heat-labile enterotoxin. J. Clin. Microbiol. 5:439 444.
  203. Yu, H., and J. G. Bruno. 1996. Immunomagnetic-electrochemiluminescent detection of Escherichia coli 0157 and Salmonella typhimurium in foods and environmental water samples. Appl. Environ. Microbiol. 62:587−592.
  204. Yu, J., and J. B. Kaper. 1992. Cloning and characterization of the eae gene of enterohaemorrhagic Escherichia coli 0157: H7. Mol. Microbiol. 6:411−417.
  205. Yuhan, R., A. Koutsouris, and G. Hecht. 1995. Enteropathogenic E. coli induced phosphorylation of myosin light chain increases intestinal epithelial paracellular permeability. Gastroenterol. 108: A948. (Abstract.)
  206. Zabala, J. C., J. M. Garcia-Lobo, E. Diaz-Aroca, F. de la Cruz, and J. M. Ortiz. 1984. Escherichia coli alpha-hemolysin synthesis and export genes are flanked by a direct repetition or ISP/-like elements. Mol. Gen. Genet. 197: 90−97.
  207. Zadik, P. M., P. A. Chapman, and C. A. Siddons. 1993. Use of tellurite for the selection of verocytotoxigenic Escherichia coli 0157. J. Med. Microbiol. 39:155−158.
  208. J.R., Zambryski P., 1995, Transfer of T-DNA from Agrobac-terium to the plant cell, Plant. Physiol., 107, 1041−1047.
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?