Клинические особенности рассеянного склероза во взаимосвязи со структурно-функциональными изменениями лимфоцитарных мембран

Актуальность исследования. Рассеянный склероз — самое распространенное демиелинизирующее хроническое прогрессирующее заболевание нервной системы, поражающее в основном лиц молодого возраста и быстро приводящее к инвалидизации [Завалишин И.А., 2001; Столяров И. Д., 2002; Hauser S.L., 1994].

Несмотря на более чем 100-летшою историю изучения проблемы PC, она остаётся одной из наиболее актуальных в неврологии и нейро-иммунологии [Столяров И.Д., 2002; Шмидт Т. Е., Яхно H.H., 2003].

За последние десятилетия отмечен рост заболеваемости рассеянным склерозом во всём мире, PC стал чаще регистрироваться у детей, а также географических регионах, где ранее диагностировался редко, в частности в Сибири и на Дальнем Востоке [Хондкариан O.A. и соавт., 1987; Гусев Е. И. с соавт., 1995; Завалишин И. А., Переседова A.B.2001; Гусев Е. И. с соавт., 2001; Weinshenker BG., 1996; Riise T., 2001]. Рост показателей распространённости PC связан как с истинным ростом числа больных, так и улучшением качества диагностики заболевания. Изучение патогенеза рассеянного склероза является актуальным направлением в современной неврологии в связи трудностями диагностики, недостатком эффективных методов лечения при данной патологии и пессимистическим прогнозом [Завалишин И.А., 1982; Гусев Е. И., Бойко А. Н. 2001; Lovis G.M., 1990; Martin С., 1991; Sadovnick A.D. et Ebers G.C., 1993, 1994; Riise T., Wolfson C., 1997].

В настоящее время не вызывает сомнения огромное значение свободно-радикальных процессов в жизнедеятельности организма [Александровский Ю.А., Покровский М. В., Незнамов Г. Г., 1991; Захарова М. Н., Завалишин И. А., 1997, 2000]. В ряде работ последних лет засвидетельствована роль свободнорадикального окисления липидов в развитии многих заболеваний [Бурлакова Е.Б., Пальмина H.H., Хохлов А. П., 1982; Нелаева A.A., 1997; Захарова М. Н., 2000; Завалишин И.А.с соавт., 2000; Лебедева Д. И., 2001]. Причиной значимости липидов в реализации многих патологических процессов является высокая лабильность липидной фазы, а также свойства ряда продуктов липидного обмена вызывать деструктивные изменения в мембране [Бурлакова Е.Б., Пальмина H.H., Хохлов А. П., 1982; Захарова М. Н., 2000; Завалишин И.А.с соавт., 2000]. Изучение липидного обмена у больных рассеянным склерозом в последние годы привлекает внимание многих исследователей [Ивков В.Г., Бе-рестовский Г. Н., 1982; Гусев Е. И. и соавт., 1997; Захарова М. Н., 2000], поскольку сам факт демиелшшзации в патогенезе этого заболевания позволяет предположить, что основу патофизиологических и патомор-фологических изменений при рассеянном склерозе могут составлять мембранодестабилизирующие процессы, обусловленные изменением активности эндогенных фосфолипаз и процессов ПОЛ на фоне изменения активности антиоксидантной системы защиты. При этом лимфоцит в качестве модели наиболее привлекателен с точки зрения известных сведений о его роли в формировании иммунопатологических изменений при рассеянном склерозе. Представляет интерес изучение процессов, лежащих в основе функциональных изменений лимфоцитов, в том числе мембранодестабилизирующих процессов.

Таким образом, анализ клинических проявлений рассеянного склероза с позиций мембранной патологии несомненно актуален.

Исходя из состояния проблемы, в настоящей работе поставлена цель исследования: выявить связь между клиническими проявлениями рассеянного склероза и состоянием структурно-функциональных свойств мембран лимфоцитовизучить у больных рассеянным склерозом связь мембранодестабилизирующих процессов с состоянием системы антиоксидантной защиты и структурой липидной фазы лимфоцитарных мембран мембран с целью определения роли изучаемых процессов в патогенезе рассеянного склероза.

Цель работы определила следующие задачи:

1) исследовать состояние активности фосфолипазы А2, кислой фосфатазы и процессов свободно-радикального окисления (по содержанию диеновых коныогатов и шиффовых оснований) и корреляционной взаимосвязи данных процессов с показателями дестабилизации мембран, а также с клиническими проявлениями патологии;

2) изучить у больных рассеянным склерозом состояние системы антиоксидантной защиты во взаимосвязи с клиническими проявлениями заболевания, провести корреляционный анализ уровня активности системы антиоксидантной защиты и выраженности мембранодестабилизирующих процессов;

3) изучить физико-химические критерии дестабилизации клеточных мембран у больных рассеянным склерозом (по данным исследования фосфолипидов и холестерина лимфоцитарных мембран), содержание внутриклеточного кальция в лимфоцитах больных рассеянным склерозом во взаимосвязи с клиническими проявлениями заболевания;

4) провести корреляционный анализ тяжести клинических проявлений заболевания и параметров, свидетельствующих об изменениях структуры липидной фазы лимфоцитарных мембран.

Научная новизна исследования. В работе установлена взаимосвязь клинических проявлений рассеянного склероза с состоянием мембрано-дестабилизирующх процессов. Новым в проведенных исследованиях является установление роли процессов перекисного окисления мембранных липидов и избыточной активности эндогенных фосфолипаз в реализации патофизиологических синдромов рассеянного склероза. Установлены четкие корреляции активности данных процессов с особенностями клинического течения заболевания. Новым в трактовке патогенеза мембранодестабшшзирующих процессов при рассеянном склерозе является положение о важной роли дефицита антиоксидантов в организме больного. В процессе работы установлена связь между интенсивностью пере-кисного окисления липидов, фосфолипидным составом мембран лимфоцитов и антиоксидантным потенциалом у больных рассеянным склерозом в зависимости от тяжести клинических проявлений и прогнозаразработаны дополнительные критерии диагностики тяжести процесса и его прогноза. В процессе работы изучена структурно-функциональная организация липидной фазы мембран лимфоцитов, определена выраженность мембранодестабилизирующих процессов во взаимосвязи с состоянием механизмов антиоксидантной защиты у больных рассеянным склерозом. Доказана патогенетическая роль выявленных изменений при рассеянном склерозе.

Практическое значение работы. Результаты исследований активности эндогенных фосфолипаз, переокисления мембранных липидов и нарушения структуры липидной фазы лимфоцитарных мембран могут быть использованы в качестве дополнительных критериев диагностики тяжести и прогноза при рассеянном склерозе.

Апробация и публикации. Основные положения диссертации доложены на:

1) VIII Всероссийском съезде неврологов (Казань, 2000);

2) Тюменском областном обществе неврологов (Тюмень, 2003);

3) XII Всероссийской научно-практической конференции неврологов (Санкт-Петербург, 2003).

4) Проблемной комиссии «Современные технологии диагностики, лечения и профилактики внутренних болезней (эндокринология, неврология, дерматология, психиатрия, офтальмология — терапевтические аспекты)» (Тюмень, 2005).

По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ.

Основные положения, выносимые на защиту: ,.

1. Активация эндогенных фосфолипаз, кислой фосфатазы и ПОЛ на фоне несостоятельности антиоксидантных механизмов защиты в лимфоцитах больных РС имеет патогенетическое значение при данном заболевании.

2. Выраженность структурных изменений лимфоцитарных мембран детерминирована клинической формой и стадией заболевания.

3. Выраженность мембранодестабилизирующих процессов в лимфоцитах при РС находится в прямой корреляционной математической зависимости от тяжести клинических проявлений заболевания.

Внедрение результатов исследования. Результаты исследования внедрены в практическую деятельность Тюменской городской больницы восстановительного лечения, используются для чтения лекций в Тюменской государственной медицинской академии.

Структура и объем диссертации

Диссертация содержит 136 страницу печатного текста, 23 таблицы. Библиография — 369 источников, из них 228 отечественных и 144 иностранных автора.

ВЫВОДЫ.

1. В лимфоцитах больных рассеянным склерозом происходит активация механизмов дестабилизации клеточных мембран в виде увеличения активности фосфолипазы А2, кислой фосфатазы и процессов перекисного окисления липидов. Степень активации детерминирована клинической формой и стадией заболевания, а именно наиболее выражена при первично-прогредиентной форме рассеянного склероза и в период обострения.

2. При рассеянном склерозе в лимфоцитах больных выявляются признаки несостоятельности основных звеньев в системе антиокси-дантной защиты: снижение активности СОД, каталазы, глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы, истощение пула альфа-токоферола, пропорционально тяжести клинической формы заболевания. Меньшая несостоятельность в системе антиоксидантной защиты при ремиттирую-щей форме рассеянного склероза — фактор, обеспечивающий более благоприятное течение заболевания при данной клинической форме.

3. При рассеянном склерозе установлены структурные изменения лимфоцитарных мембран в виде увеличения интегрального показателя — соотношение холестерин/фосфолипиды за счет увеличения концентрации холестерина и снижения суммарного содержания фос-фолипидов, а также накопления лизофосфатидилхолина. Выявленные изменения детерминированы клинической формой рассеянного склероза и его стадией: структурные изменения наиболее выраженны при ВПФ и ППФ рассеяного склероза, а также в стадии обострения заболевания.

4. В лимфоцитах больных рассеянным склерозом установлено повышение внутриклеточного кальция, детерминированное клинической формой заболевания и его стадией, более значительное в лимфоцитах больных ВПФ и ППФ рассеянного склероза, а также в период обострения заболевания.

5. Тяжесть клинических проявлений заболевания положительно коррелирует с критериями дестабилизации лимфоцитарных мембран (активность ФЛА2, кислой фосфатазы, содержание шиффовых оснований и лизофосфатидилхолина) и отрицательно — с активностью су-пероксиддисмутазы и содержанием альфа-токоферола, у больных рассеянным склерозом установлена отрицательная корреляционная зависимость между критерием дестабилизации лимфоцитарных мембран (концентрация ДК) и отдельными звеньями в системе антиоксидант-ной защиты (концентрация альфа-токоферола).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. Определение активности ФЛА2, кислой фосфатазы в лимфоцитах у больных рассеянным склерозом рекомендуется в качестве объективных дополнительных критериев определения и стадии процесса (повышение активности ФЛА2, кислой фосфатазы свидетельствует об экзацербации заболевания).

2. Определение соотношения холестерин/фосфолипиды в мембранах лимфоцитов при рассеянном склерозе может быть использовано для оценки степени дестабилизации клеточных мембран в организме, для обоснования применения мембранопротекторной терапии, а также для контроля эффективности традиционных методов лечения.

3. Контроль концентрации альфа-токоферола, активности СОД, ка-талазы и Г-6-ФДГ в лимфоцитах рекомендуется для обоснования применения в терапии лекарственных форм с антиоксидантным фармакологическим эффектом.