Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Особенности культуры клеток актинидии (Actinidia chinesis Planch) и черной смородины (Ribes nigrum L.) in vitro

Диссертация: Особенности культуры клеток актинидии (Actinidia chinesis Planch) и черной смородины (Ribes nigrum L.) in vitro
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Актуальность проблемы. Достижение прогресса в области генной и клеточной биотехнологии растений непосредственно связано с разработкой фундаментальных основ культивирования клеток и тканей in vitro. При этом особый интерес представляет подбор подходящей питательной среды, установление типа и размера экспланта, а также режима культивирования с целью выявления тотипотентности у представителей… Читать ещё >

Содержание

  • Глава 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Культура клеток и тканей растений in vitro
    • 1. 2. Каллусогенез и морфогенез в культуре in vitro
    • 1. 3. О культуре клеток и тканей актинидий и черной смородины
  • Глава 2. Материал и методы исследований
  • ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
  • Глава 3. Генотипическая особенность каллусогенеза актинидии и черной смородины в зависимости от состава питательной среды и типа экспланта
    • 3. 1. Каллусообразующая способность актинидии в зависимости от пола растений, происхождения экспланта и действия фитогормонов
    • 3. 2. Особенности каллусогенеза соматических тканей растений 50 черной смородины в зависимости от состава среды и типа экспланта
    • 3. 3. Морфологические особенности каллусных тканей актинидии и черной смородины
    • 3. 4. Обсуждение
  • Глава 4. Морфогенетический потенциал каллусных тканей актинидии и черной смородины
    • 4. 1. Некоторые общие закономерности морфогенеза актинидии и черной смородины in vitro
    • 4. 2. Реализация морфогенетического потенциала каллусных структур актинидии
    • V. 4.3. Особенности морфогенеза каллусных тканей черной смородины

Особенности культуры клеток актинидии (Actinidia chinesis Planch) и черной смородины (Ribes nigrum L.) in vitro (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность проблемы. Достижение прогресса в области генной и клеточной биотехнологии растений непосредственно связано с разработкой фундаментальных основ культивирования клеток и тканей in vitro. При этом особый интерес представляет подбор подходящей питательной среды, установление типа и размера экспланта, а также режима культивирования с целью выявления тотипотентности у представителей различных таксономических групп растений. В настоящее время эта уникальная способность соматических клеток выявлена у различных культур, среди которых большую часть составляют однолетние и в практике вегетативно размножаемые растения. Это, прежде всего, овощные культуры и декоративные растения, список которых с каждым годом пополняется (Бутенко, 1983; Bajaj, 1987). Поэтому, изучение теоретических основ и разработка прикладных аспектов культуры клеток и тканей многолетних растений, в частности плодово-ягодных и лесных культур, считается весьма актуальным для разработки и налаживания биотехнологий их ускоренного, размножения, получения соматических гибридов и трансгенных растений (Biotechnology of perennial fruit crops, 1993).

Таджикистан славится богатым генофондом плодово-ягодных культур (Вавилов, 1929; Запрягаева, 1962), который пополняется интродуцированными культурами. Среди относительно новых для условий страны культур особое внимание уделяется актинидии (киви) (Actinidia chinensis Planch) и черной смородине (Ribes nigrum L), плоды которых характеризуются ценными пищевыми и лекарственными качествами. Изучение биологии этих культур с целью разработки агротехнологий их возделывания и повышения продуктивности является одной из задач в плодоводстве горных и предгорных районов. В теоретическом плане представляет интерес выявление степени тотипотентности соматических клеток актинидии и черной смородины. Также интересно изучение фундаментальных основ каллусообразования и морфогенеза соматических клеток актинидии и черной смородины путем подбора культуральных сред, типа экспланта и режима культивирования с целью для разработки прикладных аспектов микроклонального размножения этих культур.

Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования является выявление степени тотипотентности соматических клеток актинидии и черной смородины путем изучения закономерностей их каллусогенеза и морфогенеза в культуре in vitro, подбора состава питательной среды, типа экспланта и режима культивирования.

Исходя из этого, в задачи исследований входило:

— подбор подходящей питательной среды, типа экспланта и режима культивирования актинидии и черной смородины in vitro;

— изучение особенностей каллусообразования соматических клеток этих культур в зависимости от фитогормонального состава питательной среды;

— морфологическое описание типа сформировавшихся каллусных тканей и подбор морфогенных структуризучение закономерностей морфогенеза каллусных клеток и тканейвыявление морфогенетического потенциала каллусных тканей в зависимости от состава питательной среды и происхождения экспланта;

— разработка прикладных аспектов микроклонального размножения актинидии и черной смородины in vitro.

Научная новизна. Путем подбора различных по фитогормональному составу культуральных сред, типа экспланта и режима культивирования выявлена тотипотентность соматических клеток актинидии и черной смородины. Разработан состав питательных сред, позволяющий индуцировать каллусообразование у эксплантов актинидии и черной смородины и вызвать образование морфогенных структур.

Практическая значимость. Выбор подходящих эксплантов, состава питательной среды и режима культивирования позволяет наладить технологию микроклонального размножения актинидии и черной смородины с целью их ускоренного размножения. Экспериментами доказана возможность использования представителей плодово-ягодных растений в культуру in vitro. Использованный в опытах состав питательной среды, выбранные экспланты и режимы культивирования соматических тканей, каллусов и морфогенных новообразований послужат прототипом при разработке клеточных биотехнологий ряда других плодовых и лесных культур.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены (или представлены): на ежегодных профессорско-преподавательских конференциях Таджикского аграрного университета (1999;2003г.г), заседании кафедры физиологии растений и биотехнологии и межлабораторном семинаре Института физиологии растений и генетики АН Республики Таджикистан.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 статьи.

Работа выполнена в1994;2002г.г в рамках комплексной научной программы Института физиологии растений и генетики АН Республики Таджикистан и Научно-исследовательского института биотехнологии Таджикского аграрного университета.

Выводы.

1. Все типы эксплантов актинидии и черной смородины в зависимости от состояния клеток при их культивировании в определенных условиях образуют каллус. Это свидетельствует о тотипотентности клеток актинидии и черной смородины, способных к гормональной индукции и определенным образом реагировать на это влияние, изменяя программу развития по тому или иному пути органогенеза.

2. Для индукции каллусогенеза из эксплантов апикальных и пазушных меристем актинидии и черной смородины благоприятным является питательная среда МС 3, содержащая 4 мгл 2.4-Д и 0,2 мгл кинетина. Для эксплантов листьев и черешков листьев, больше подходит среда МС 4 с относительно высокими концентрациями фитогормонов (8мгл 2,4-Д и 0,4 мгп кинетина).

3. Между сортами черной смородины по скорости индукции каллусогенеза и темпам нарастания каллусных структур явных различий не обнаружено.

4. Как более низкая, так и высокая концентрация ауксинов и цитокининов не позволяет полностью реализовать каллусообразующий потенциал соматических клеток актинидии и черной смородины. Если при относительно низких концентрациях фитогормонов индукция каллусогенеза протекает медленно, то при более высоких концентрациях образовавшися каллусные структуры некротизируются и погибают. Показано, что для индукции морфогенеза нужно использовать каллусы только 1-го пассажа. .

Установлено, что наибольший выход морфологически однородных растенийрегенерантов актинидии можно получить при культивировании каллусов апикальных и пазушных почек, индуцированных на каллусогенной среде МС 3 и далее пересаженных на морфогенную среду МС 7 и ризогенную МС 8. Выход регенерантов у других морфогенных каллусов не превышает 3−5%. Выход растенийрегенерантов у черной смородины оказался относительно низким. Более однородные по морфологическим признакам растения-регенеранты черной смородины были получены из каллусов из апикальных и пазушных почек на питательной среде МСЗ.

Заключение

и выводы.

Анализ полученных результатов позволили разрабатать индукции каллусогенеза и морфогенеза у актинидии и черной смородины in vitro путем подбора оптимальных концентраций фитогормонов в составе питательных сред. Эта технология основана на использовании в будущем на совершенном уровне морфогенных клеток и их культивирование in vitro, что способствует проведению изучения молекулярных механизмов роста и развития на боли высоки уровне, а также применять методы генной инженерии и клеточной селекции для совершенствования растений актинидии и черной смородины.

В результате многолетних исследований нам удалось, используя два контрастно различающихся между собой по своим биологическим, физиологическим и народнохозяйственным признакам, представителя плодово-ягодных культур — актинидии и черной смородины и добиться в условиях in vitro каллусогенеза и морфогенеза. Для увеличения числа морфогенных клеток в культивируемых тканях ряд исследователей рекомендуют использовать питательные среды с более высокими концентрациями 2,4-Д (Понтович, 1979; Давоян, 1986; Бутенко, 1987). Однако, как показывают наши наблюдения, эта закономерность не всегда соблюдается. В наших экспериментах высокие концентрации 2,4-Д приводили к некротизации, угнетению роста и гибели каллусных структур актинидии и черной смородины.

Таким образом, сочетание гормонов, их концентрация определяют суммарный характер процессов каллусогенеза и морфогенеза. Вместе с тем, имеется определенная тенденция учитывающей концентрации гормонов, и роль этих компонентов по степени компетентности клетки к относительно постоянному уровню этих соединений, биосинтез которых находится у высших растений под строгим контролем (Кефели и др., 1990).

Показать весь текст

Список литературы

  1. В.А., Мелик-Соркисов О.С Генетические особенности морфогенеза в каллусных культурах различных сортов кортофеля\С-Х.биология, 1985,№ 3,С.67−70
  2. Алиев К. А, Каримов Б. К, КаримовБ.Б. Возделывание оздоровленного картофеля в Таджикистане-Душанбе, 1997−36с
  3. Биотехнология растений: культура клеток // Пер. с.англ.М.:Агропромиздат, 1989.-280с8 .Бишимбаева Н .К. Морфологическая гетерегенность регенерационная способность каллусной ткани ячменя- Автореферат дис. .кан.биол.наук-Душанбе, 1989−22с.
  4. Брокш В. П и др. Цитогенетическая нестабильность картофеля //Доклады ВАСХНИЛ, 1989, 12, с.10−13.
  5. Ю.Бутенко Р. Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М.- Наука. 1964−195с11 .Бутенко Р. Г. Тотопотентность растительной клетки и культура тканей, культура изолированных органов, тканей и клеток растений .-М:Наука.1970-с.84−91
  6. Р.Г. Гормональная регуляция дифференцировки растений клетки в культуре in vitro-/PocT и гормональналная регуляция жизнедеятельности растений.-Иргутск. 1974.С.67−85.
  7. Р.Г. Дифференцировка морфогенез в культуре тканей, клеток и пропластов/ Биология развития растений.-М.-.Наука.1975-с.48−49.
  8. Р.Г. Технология in vitro в сельском хозяйстве //С.-х., биология.1983.- 5.-C.3−7.
  9. Бутенко Р. Г. Новые направления в физиологии растений.М.- Наука, 1985, 411с.
  10. Р.Г. Выращивание клеток высших растений в суспензионной культуре //Изв АН.СССР. Сер биол, 1987, — 5, с.697−709.
  11. Быков О. Д и др. Фотосинтез в культуре первичного каллуса картофеля. Фотосинтез и фотобиология-Тез.докл.и сообщ.Междунар.Конф.Пущино.16−73 июня 1991-е 106−107.
  12. Винклером Г. Н Бутенко. Применение черенкованияпри выращивании безвирусных растений кортофеля методом культуры меристемы\Физиология растений-1970.т.17.№ 4.с.851−853
  13. Глеба Ю. Ю. Сытник К.Т.Клеточная инженерия растений.-Киев:Наукова думка. 1983.-187с.
  14. Горьковцева Е.А.ДОлдошев О.Х., Культура тканей и клональное микроразмножение киви\Известия АН. Таджикистана. Отд№ 1 -2−1995-е.52−55.
  15. Т.С., Ширяева Г. А. Новк-й способ выращивания культуры изолированных тканей высших растений //Растительные ресурсы. 1980.-Т. 16.-№ 14.-С.601−606.
  16. Э.Н., Кучеренко JI.A. Индукция каллусной ткани из различных органов и тканей риса //Бюл.НТН ВНИ Риса, 1978,№ 24.-С. 18−21.
  17. Доросилев JI и др Зависимость каллусогенеза и регенерацииозимого ячменя от генотипа и содержание 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты в питательной среде/Биология культивирования клеток и биотехнология растений -М.: Наука. 1991.243−246с.
  18. Долгих и др. Оздоровление посадочного материла ягодних культур //Защита раст.- М.1988-№ 8 с.22−23.
  19. .К. Биотехнологические аспекты регенерации растений в культуре клеток и протопластов пшеницы:
  20. Автореферат, дис. канд., биол .наук-Ташкент. 1994−27с.
  21. М.И. Клональное микроразмножение черной смородины/Сб.науч. тр. ВНИИ садовод.1988.№ 51-е. 141−143
  22. Жексембекова М. А Соматический эмбриогенез в культуре тканей амаранта: Автореферат дис. .канд.биол.наук.-Алма-аты-1996.-41с
  23. Иванова И. Физиологические основы микроклонального размножения растений\Международный агропромышленный журнал.-1990.-№Зс.35−40
  24. Искакова К. М. Морфогенез в длительно поддерживаемой культуре андрогенных каллусов ячменя: Автореферат дис. .канд.биол.наук.-Алма-Ата, 1991.-е 11
  25. КартельМ.А Манешина Т. В Каллуссообразовние у различных по генотипу растений ячменя (Hardeum vuigare Ь.)\Циталогия и генетики.-1997.-т.11-с.44−72
  26. Кефели В. И и др. Общие проблемы регуляции онтогенезаИтоги науки и техники.-М., 1990.С.6−40
  27. Клоконос Н. П Регенерационных способность верхушек смородины малины подвлиянием ростовых вещество в условиях культивирования. Алма-Ата .1991.-с97−102
  28. JI.A. Подходы к разработке технологии массовой регенерации растений in vitro \ Биология культивирования клеток и биотехнология растений.М. :Наука, 1991 .С.232−242.
  29. Кучеренко JI.A.0 некоторых параметрах регенерации риса.\С.-биология1994.№ 1.С.232−242.
  30. Лакин Г. Ф Биометрия: Учеб. пособие для биол.Спец.Вузов.4-е изд.перераб.идоп.-М.:Высшая шк. 1990.-352с.
  31. Jle Тхи Муой \Рост растений и его регуляция .-Кишенёв.-1985.-с. 18−28
  32. Муромцев Г. С и др Основы сельскохозяйственной биотехнологии .-М:Во.Агропромиздат .1998.-27
  33. Моисеева Н. А Молекулярные и клеточные механизмы морфогенеза в культуре клеток растенийБиология культивируемых клеток и биотехнология растений.-М., Наука, 1991.-166−185
  34. Муминджанов Х. А. Селекция и семеноводство картофеля на основефизиологических тестов и методов клеточной биотехнологии: Автореферат дис.докт.с-х.наук-Душанбе 2000.-51с
  35. Насыров Ю. С Фотосинтез и генетика хлоропластов.М.:Наука. 1975.144с
  36. И. Д. Культура зародышей и стеблевых узлов некоторых сортов ячменя\Апомикс и цитоэмбриология растений -Саратов .-1983.C.119−151.
  37. Понтович В. Э Ранний эмбриогенез покрытосеменных и его гормональная регуляция Рост растений. Первичные механизмы .-М:Наука. 1978с.208−232
  38. Рахимбаев И. Р. Тивари Ш. БишимбаеваН.К. и др. Биотехнология зерновых культур -Алма-Ата: Рылым, 1992.-240 е.
  39. JI.P., Савин В.И и др. Влияние генотипа на формирование морфогенного каллуса и регенерацию растений кукурузы in vitro \ Известия АНКаз: ССР. Серия биологическая-1991.-Вып.6.С.ЗЗ.
  40. В.А., Сидорова Н. В. Сомоклональная изменчивость-источник генетического разнообразия у растений \Цитология и генетика.-1987.-Т.21.-№ 3.
  41. В.А. Биотехнология растений. Клеточная селекция Шод.ред.Ю.Ю Глеба,-Киев- Наукова думка.1990.-290с.
  42. В.Ю., Глеба Д. М. Индукция морфогенеза у банана карликового \ Тез.докл. Межд.конф. «Биология культ, клеток и биотехнология «-Новосибирск 2−62. 1988.-С.325−326.
  43. И.М. Получение регенерантов и первичного клубного каллуса картофеля и зависимости от сорта, состава среды и положения экспланты \C.-x. биология. 1983.№ 6 с. 13−15.
  44. Ш. М. Морфогенез в культуре пылников изолированных микроспор ячменя.\Авторефер. дис. .канд., биол. наук-М., 1989.-29с.
  45. Туровская И. И Идр. Ситмуляция ризогенеза у клоновк-х подвоев яблони in vitro //Тез.докл.Международной конференции «Билогия и культивируемых клеток и биотехнология."-Новосибирск, 2−6 авг.-1988.-С.148.
  46. Тюленев М. и др. Сомоклональная изменчивость земляники Биотехнология. 1999.№ 2 с.34−40.
  47. Ф.Р. Культура растительных тканей. Перевод с англ. Штернир и др. Под ред. Б. А Рубина- М.: Колос. 1919.-212с.
  48. Ф., Филипс Н. Рост растений и дифференцировка.- М., Мир.1984.-512с.
  49. А.С. Физиологические основы микроклонального размножения ореха грецкого in vitro. Автореф.дисс.канд.биол.наук. Душанбе-1990. С. 17.
  50. JI.B. Особенности популяций культивируемых клеток Культура клеток растений.-М.: Наука .1981.С.5−15.
  51. У.А. Физиологические особенности оздоровленных сортов картофеля в условиях Гиссарского долины Таджикистана: Автореф.дисс. .канд.биол.наук.-Душанбе. 1997.-С 9−19.
  52. Хромова и др., Клеточная селекция картофеля \ с-х.-биология1986.№ 6 с.3−11.
  53. Т.А., Лаврентьева И. Ф. Морфологические потенции ели европейской в связи с индивидуальной изменчивостью и происхождением экспланта \Тез. докл. Международ. конф. Биология культивируемых клеток и биотехнология-Новосибирск 2−6 авг.-1988.-С-134−135.
  54. А.Г. и др.Метомерная изменчивость активности к пролиферации росту почек абрикоса in vitoW Тез.докл.межд.конф.'Ъиология культивируемых клеток и биология» Новосибирск, 2−6 авг.-1988.С. 144.
  55. Abe T., Futsuhara Y. Genotypic variabililaty dor callus formation and plant regeneration in rise (Oruza sativa 1) Theor and Appl.Genet.-1086.-72NL-P.3−10
  56. Aitken Y. Influence ofexplant selection on the shootforming capacity of jiwenile tissue of Pinus radiate .//Can.J.Forest Res .//1981 .-11 .-NI.-P. 112−117.
  57. Amerson H. VJodlally pine tisse culture-Laboratory greenhause and flied studies .//Tissue cult. Forest and Agr.poc.3rd Tenn Symp Sept. New York: London1985.~p271−287/
  58. Bajaj .Y.P.S., Sopory S.K.Biotechnology of potato improvement .//Biotechnology in Crops .1.V.2 1986.Berlin :Springer -Verlag .1986-p 216−218.
  59. Beswar M.R. Noland T.J., Wann S.R. A method forguantification of the level of somatic embryogenesis mound Norway Spruce callus lints.//Plant Cell Repts/-1987/-6,Nl-P.35−38
  60. Biotechnologi of Perennial fruit crops. 1993.-P.35−39.
  61. Boxus P.H. In vitro vegetative propagation of plants. //Neste Research News.-1987.-P.75−79.
  62. Brar et al. In vitro ovules and embryo culture of Gossypium. Curr. Sei. (India). 1984. 68. Camaron G.Tissue culture technigue .2nd ed. New York: Academic R, 1950.191p
  63. Campbell R.A., Durzan D.I.Induction of multiple buds and needless in tissue culturesof Picea glauca .//Can.J.Bot.~1975−53.N16.-P.1652−1637//
  64. Constantin M.I., et al, Effect of activated charocoal on calls growth and shoot organogenesis in tobacco .//In vitro ,-1977.-13−23.P.293−296/.
  65. Conzales M.I., et al., Somatic embryogenesis from chestnut cotyledon tissue cultured in vitro .//plant physiol. 1984.-115.N3 .-P217−229/
  66. Conzales et al., Characteration of cultured tobacco cell lines resistant toe thonine analog .//Plant .Phisiol.-1989.-74.-p.640−644/
  67. Hu G.Y., Wang P .J. Meristem, shoot tip and bud culture. // Handbook of plant ceii cuiture (Evans D.A. and others eds.). V. I.-chap. 5. New York: Macmillian, 1983. P. 177−227.
  68. Einzet J.W. Two effect of cytokinin on the auxin regurement of tobacco callus cuitures. //Hlant Physiol.-1977.-59, № 1.- P. 45−47.
  69. King P. et al. Mutagenesis in plant cell cultures //Annu. Rep. Friedrich-Miesher Ins. Basel. 1979. P.20−22.
  70. Kruse R.F.et al. Tissue culture metods and applications. New York: Academies Pr., 1973.-p.868.
  71. Jay- Allemand C., Cornu D., Macheix J. Characterisation du rayenissement du Noyer (Juglans sp.) par une etude spectophotomerigue globale du contenu poyphenolique.//Ann. Sci.For.-1987.-44,№ 3.-P.303−314.
  72. Jones M. G. K» P J. Dave Reproducible regeneratium of callus from suspension culture protoplasts of the grass Lolium multiform // pflanzen physiol.-1982.-Vol.l05.-P.267−274.
  73. Meins F.L. Petermination and morphogenetic, in plant tissue culture //Plant cell culture technology.- Oxford: Blaclewell sei. Publ., 1986.-P. 7−25.
  74. Messeguer J., Meie E. Clonal propagation of Coryllus avellana L.//Atti Conv.int nocciuolo, Avellino., 22−24 sett., 1983.Torino.-1984.-P.293 297.
  75. Monnete P.L. Organogenesis and plantlet regeneration following in vitro cold storage ofkiwifruit shoot tip cultures. // Sci.hort. (Neth) — 1987- 31.№ 1−2.P.101−106.
  76. Murashige T., Slcoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. // Physiol. PLANT.- 1962. 15. — P. 473- 497.
  77. Nelson S. H Effects of stock plant etiolation on the rooting of saskaton berry Amelanchier alnifolia cuttings.//Can.J.Plant.Sci.-1987−67,N.I.-P.299−303
  78. Norton M.F. Explant orididin as a determiant of in vitro shoot proliferation in Prumus and Spirae.//Hortic.Sci.-1986.№l.P. 43−48.
  79. Opatrina J., Burdova Z. Experiment of the regeneration ability of potato explants //Bio. Plantarum-1992.V. 34.P., 545−546.
  80. Panorama Economico de la Agriculture 1985. P.56−58.
  81. Paul J. Cell and tissue culture.-4 th.-Livingstore. Edinburg and London: E.S., 1970.-317p.
  82. Perez et al. «In vitro filbert (Corulus avellana L.) micropropagation from shoot and cotyledonaru node segments //Plant.Cell Report.-1985.-4−3.-P. 137−139.
  83. Pierik R.L. In vitro culture of higher plant wakening: Martins high off publishen, 1987.344p.
  84. Power W. Tissue culture // Ann rept. Scot. Crop. Rts.ins.-Perth. 1990.-P.50−56.
  85. Quak F. Meristem culture virus-free plants.//Applied and fundamental aspects of plant cell tissue and organ culture (Ed.by Reinert J. Bajaj V.P.S) Berlin. New Jork: Springer-Verlag. 1977.P.624−631.
  86. Sebastiani et al, Somaclonal variation for resistanse to Verticillilimn dahlia in potato (S tuberasum) plants regerated from eallus//Euahytica/1994.№ 280p.32−39
  87. Selby C, Harvey B. M The ihfluence of naturfl and in vitro bud flushing on adventitious production in Silka spruce (Picea sitcensis). Nong.(Carr) bud and needle cultures.//New Phytol-1985.-100,№ 4.-P. 549−562.
  88. Street H.E. ed. Plant tissue and cell culture. Oxford: Blactivell scientific publication, 1973. 503 p.
  89. Su C.Y., Tsay H.S. Anther culture of papay (Carica papay L.).//Tissue Cult. Forest. And AGR. Proc.(3rd Tenn., 9−13 Sept, 1984).- New York. London. 1985.-P.375.
  90. Thomas V, Rao P. S. In vitro propagagation of oil palm (Elais guineensis Jacg. Var. Tenera) through somatic embrogenesis in leaf-derived caiius.//Curr. Sci.(India).-1985.-54,№ 4-P.184−185.
  91. Vasil L. Cell culture and somatic cell genetics of plant. Vol. 8. Academic Press. San Diego. 1991.-P.321−350.
  92. Zok S. Multiplication vegetative in vitro par culture d apex chez les cafeires Coffea arabicaL. // 12Collog.sci. int. cafe. -1988. P. 791−800.
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?