Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Получение антигенов Mycobacterium tuberculosis и выявление наиболее значимых из них для диагностики туберкулеза

Диссертация: Получение антигенов Mycobacterium tuberculosis и выявление наиболее значимых из них для диагностики туберкулеза
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Нами были изучены антигенные спектры полных клеточных лизатов различных видов микобактерий — М. tuberculosis, М. intracellulare, М. avium, М. bovis, являющихся возбудителями туберкулеза человека. Обращает внимание большое количесво белка с М.м. 45 кДа у М. tuberculosis, М. intracellulare, М. avium и следовые количества его у М bovis, редко вызывающего туберкулез у человека, и в вакцине БЦЖ… Читать ещё >

Содержание

  • УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ И
  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Общая характеристика микобактерий
      • 1. 1. 1. Mycobacterium tuberculosis — возбудитель туберкулеза человека
      • 1. 1. 2. Особенности строения Mycobacterium tuberculosis
    • 1. 2. Туберкулез человек
      • 1. 2. 2. Роль Т-лимфоцитов в формирования иммунной защиты от Mycobacterium tuberculosis
      • 1. 2. 3. Гуморальнный иммунный ответ при туберкулезе Mycobacterium tuberculosis
    • 1. 3. Диагностикая туберкулеза
      • 1. 3. 1. Бактериоскопия и бактериогический метод диагностики Mycobacterium tuberculosis
      • 1. 3. 2. Метод полимеразной цепной реакции
      • 1. 3. 3. Иммунодиагностика
    • 1. 4. Антигены Mycobacterium tuberculosis 42 1.5.3аключение по обзору литературы
  • 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Штаммы бактерий и биологические препараты
    • 2. 2. Питательные среды для культивирования Mycobacterium tuberculosis
    • 2. 3. Основное оборудование
    • 2. 4. Основные реактивы
    • 2. 5. Условия проведения анализов
      • 2. 5. 1. Условия проведения иммуноферментного анализа
      • 2. 5. 2. Условия проведения электрофореза
      • 2. 5. 3. Условия проведения иммублотинга
      • 2. 5. 4. Гель фильтрация на сефадексе G
  • 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И PIX ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Выявление секретируемых антигенов Mycobacterium tuberculosis
    • 3. 2. Выделение антигенных комплексов из фильтрата культурального супернатанта Mycobacterium tuberculosis с помощью этонола
    • 3. 3. Выделение антигенных комплексов Mycobacterium tuberculosis фильтрата культурального супернатанта методом ультрацентрифугирования
    • 3. 4. Спектр белков различных видов микобактерий
    • 3. 5. Получение антигена с молекулярной массой 45 кДа из клеток Mycobacterium tuberculosis

Получение антигенов Mycobacterium tuberculosis и выявление наиболее значимых из них для диагностики туберкулеза (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность проблемы. Туберкулез представляет собой важную медицинскую и социально-экономическую проблему во всем мире. Анализ сложившейся эпидемиологической ситуации показывает, что заболеваемость туберкулезом в России носит характер эпидемии [Карпов, 1998; Пунга., 1999; Онищенко, 2002]. По данным ВОЗ в период с 2000 по 2020 гг. туберкулезом в мире заболеет около 200 млн. человек, умрет около 35 млн. человек, будут инфицированы приблизительно 1 млрд. человек [World Health Organization., 2009]. В связи с этим, одной из важных задач мировой медицины является разработка надежных (эффективных и специфических), простых в использовании, методов для быстрой диагностики туберкулеза.

Важную проблему в настоящее время представляет сам возбудитель заболевания, в частичности его способность к выживанию в среде обитания и все увеличивающееся число устойчивых к противотуберкулезным препаратам первого ряда (стрептомицину, изониазиду, рифампицину и этамбутолу) форм, в том числе одновременно к нескольким (полии мультирезистентных), особенно у впервые заболевших [Dwyer et al, 1993; Diaz-Infantes et al., 2000]. Микробиологические исследования играют в современных условиях важную роль в выявлении, диагностике и дифференциальной диагностике туберкулеза, выборе лечения, оценке его эффективности.

Следует отметить, что из-за многообразия форм туберкулеза диагностика этой болезни весьма сложна. Обязательный диагностический минимум включает обследование с использованием клинических анализов крови и мочи, физикальных, рентгенологических, микроскопических и бактериологических, а также иммунологических методов.

В нашей стране при диагностике туберкулеза большое внимание уделяется культур альным методам. Однако культивирование с момента посева инфекционного материала занимает от 2 до 8 недель [Клименко с соавт., 1985; Литвинов с соавт 2004], что является существенным недостатком. За рубежом большее внимание уделяют микроскопии мазков, с использованием флуоресцентного метода. В обоих случаях отмечается низкая эффективность диагностики — выявляются не более 14% больных [Калюк с соавт 1995]. До недавнего времени наиболее чувствительными и широко применяемыми методами для выявления антител к Mycobacterium tuberculosis являлись реакции пассивной гемагтгаотинации (РПГА) по Бойдену, агрегатагтлютинации (РАГА), связывания комплемента (РСК). В настоящее время используются для постановки диагноза более чувствительные серологические методы, такие как иммунофлуоресценция, радиоиммунный (РИА) и иммуноферментный анализы (ИФА).

Фактически серологические методы наиболее удобны для клинической и эпидемиологической работы по диагностике туберкулеза, так как для анализа используется легко доступный клинический материал — сыворотка или плазма крови человека. Однако эти методы, включая метод ИФА, не обладают достаточной диагностической чувствительностью [Туберкулёз., 2002].

На использованных в недавнем прошлом антигенных препаратах у лиц с установленным диагнозом туберкулез, ГГГАТ обнаруживаются в 100% случаях только при фиброзно-кавернозном туберкулезе и при бакгериовыделении [Карпов, 1998]. Однако больные с фиброзно-кавернозной формой туберкулеза составляют небольшую часть от общего количества больных туберкулезом. При очаговом туберкулезе ГГГАТ обнаруживают только в 31% случаев, а при туберкулезе бронхов — в 15,5% случаев [Карпов., 1998]. В более поздних публикациях также отмечается не очень высокий процент выявляемости ГГГАТ, в среднем в 71% случаев [Чуканов и Слогоцкая., 2007].

При применении отдельных рекомбинантных антигенов Mycobacterium tuberculosis, выявляемость ПТАТ в сыворотках больных туберкулезом, за исключением ВИЧ инфицированных пациентов, также невысока — около 60% [Mukherjee et al., 2004]. Есть сведения, что использование набора значительного количества рекомбинантных антигенов приводило к улучшению результата: ПТАТ выявляли у 93% больных туберкулезом [Houghton et al., 2002; Wang et al., 2005]. Но, поскольку не ясно, у пациентов с какой формой туберкулеза обнаруживали такой высокий процент ПТАТ, трудно оценить диагностическую ценность предложенного набора антигенов.

В последние годы стало возможным применение метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики туберкулеза, но из-за высокой стоимости анализа этот метод пока не получил широкого распространения. А если принять во внимание количество носителей палочки Коха в мире, и что большая часть их проживает в бедных и слаборазвитых странах, то вряд ли метод ПЦР будет приемлем в ближайшее время для скрининговых исследований.

Особо остро проблема туберкулеза встала с возникновением и распространением ВИЧ-инфекции. На фоне этого заболевания туберкулез развивается очень стремительно. Используемые в настоящие время скрининговые тест-системы, в связи с недостаточной чувствительностью, не позволяют своевременно выявить развитие этого заболевания. Поэтому работы по совершенствованию тест-систем, основанных на серологических реакциях, являются актуальными.

Цель исследования:

Разработка способа получения антигенных препаратов Mycobacterium tuberculosis и изучение их серологической активности в ИФА и иммуноблотинге.

Основные задачи исследования:

1. Выявление антигенов Mycobacterium tuberculosis в фильтрате культурального супернатанта.

2. Определение целесобразности использования этанола для повышения активности и специфичности антигеновиз супернатанта Mycobacterium tuberculosis, предназначенных для использования в ИФА и иммуноблотинге.

3. Определение возможности повышения специфичности антигенов Mycobacterium tuberculosis, содержащихся в супернатанте, с использованием метода ультрацентрифугирования.

4. Определение особенностей антигенных спектров различных видов микобактерий.

5. Установление возможности использования комплексов Mycobacterium tuberculosis, выделенных из клеток с помощью экстракции 10% раствором ДМСО, для получения индивидуальных специфичных антигенов, пригодных для использования в реакции иммуноблотинга.

Положения, выносимые на защиту:

1. При культивировании в среде Сотона в течение 14−28 суток Mycobacterium tuberculosis штамма «Академия» в фильтрате супернатанта обнаруживаются белки с молекулярными массами 38 кДа, 29−31 кДа и 6,5 кДа.

2. Осаждение этанолом фильтрата культурального супернатанта Mycobacterium tuberculosis приводит к повышению активности антигенсодержащего материала и позволяет избавиться от значительного количества балластных, нереагирующих с противотуберкулезными антителами, белков.

3. Метод ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы позволяет выделить из супернатанта Mycobacterium tuberculosis материал с более высоким содержанием специфических антигенов.

4. Классические приемы очистки белков, такие как осаждение их при определенных значениях pH, использование этанола, высаливание сульфатом аммония с последующей гель-фильтрацией, позволяют получить из ДМСО-экстракта М. tuberculosis антигенный препарат, содержащий практически одну серопозитивную фракцию с молекулярной массой в 45 кДа.

Научная новизна. Выявлены особенности антигенного профиля Mycobacterium tuberculosis шт. «Академия». Среди секретируемых белков серологическую активность проявляли доминирующий белок с молекулярной массой 38 кДа и белки 31 кДа, 29 кДа и 6,5 кДа. Белок с молекулярной массой 45 кДа присутствует в значительных количествах в спектрах белков Mycobacterium tuberculosis, М. intracelliilare М. avium и практически не выявляется у М. bovis и вакцинного штамма БЦЖ. Это позволяет использовать данный антиген в качестве компонента тест-системы, выявляющей противотуберкулезные антитела в сыворотке крови людей, инфицированных патогенными микобактериями, а также исключить из круга подозреваемых лиц, вакцинированных БЦЖ.

Практическая ценность. Разработаны методы получения растворимых антигенных комплексов Mycobacterium tuberculosis из супернатанта (белки с молекулярными массами 38кДа, 29−31кДа, 6,5кДа) и клеточного антигена (белок с м.м. 45кДа). Определены приемы, позволяющие сохранить большую часть диагностически значимого антигенного материала и освободиться от значительной части балластных белков. Антигены М. tuberculosis 45 кДа, 38 кДа, 29−31 кДа и 6,5 кДа планируется использовать в разрабатываемой на основе метода иммуноблотинга тест-системе, необходимой практическому здравоохранению для эффективной диагностики туберкулеза.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на Итоговых научных конференции КФУ (Казань 2011, 2012), XIX Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов — 2012», (Москва, 2012), III международной научно-практической конференции «Новые концепции механизмов воспаления, аутоиммуного ответа и развития опухли» (Казань, 2012), III Международной интернет-конференции «Актуальные проблемы биохимии и бионанотехнология» (Казань, 2012).

Выводы.

1. Фильтрат культурального супернатанта Mycobacterium tuberculosis штамма «Академия» содержит антигены с молекулярными массами 38 кДа, 31 кДа, 29 кДа и 6,5 кДа, которые проявляют серологическую активность с сыворотками больных легочной формой туберкулеза.

2. Осаждение белков из фильтрата культурального супернатанта Mycobacterium tuberculosis равным объемом этанола приводит к образованию осадка, содержащего основную долю серологически активного материала.

3. Ультрацентрифугирование фильтрата культурального супернатанта Mycobacterium tuberculosis в ступенчатом градиенте сахарозы позволяет получить антигенсодержащий материал, по специфичности превосходящий исходный супернатант.

4. Белок с М.м. 45 кДа в большом количестве представлен в спектрах основных возбудителей туберкулеза человека — М. tuberculosis, М. intracellulars и М. avium и содержится в следовых количествах в спектрах белков М. bovis и вакцинного штамма БЦЖ. Это позволит использовать данный антиген в качестве компонента тест-системы, выявляющей антитела в сыворотке крови людей, инфицированных патогенными микобактериями, а также исключить из круга подозреваемых пациентов, вакцинированных БЦЖ.

5. Обработка клеток М. tuberculosis 10% водным раствором ДМСО с последующим фракционированием супернатанта при изменении рН, осаждением этанолом и сульфатом аммония, гель-фильтрации на колонке с сефадексом G — 200 позволяют получить антигенный препарат, содержащий одну серопозитивную фракцию с молекулярной массой в 45 кДа.

Заключение

.

Результаты выполненных нами экспериментов свидетельствуют о том, что фильтрат культурального супернатанта М. tuberculosis содержит достаточно широкий спектр белков. Белками, проявляющими серологическую активность, являются доминирующий в спектре белок с молекулярной массой 38 кДа и представленные в меньших количествах антигены 31кДа, 29 кДа и 6,5 к Да. Фракционирование супернатанта с помощью этанола и ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы позволяет получить антигенные препараты с более высокой специфичностью, что подтверждено результатами иммуноферментного анализа.

Нами были изучены антигенные спектры полных клеточных лизатов различных видов микобактерий — М. tuberculosis, М. intracellulare, М. avium, М. bovis, являющихся возбудителями туберкулеза человека. Обращает внимание большое количесво белка с М.м. 45 кДа у М. tuberculosis, М. intracellulare, М. avium и следовые количества его у М bovis, редко вызывающего туберкулез у человека, и в вакцине БЦЖ. Полагая, что в сыворотке у людей, вакцинированных БЦЖ, будут отсутствовать антитела к белку 45 кДа, целесообразно использование данного антигена в качестве компонента диагностической тест-системы, которая позволит отдифференцировть вакцинированных от пациентов, инфицированных патогенными микобактериями, в частности, М. tuberculosis.

Результаты дальнейших экспериментов позволили разработать методику выделения и очистки антигена 45 кДа из клеток М. tuberculosis.

Для этого были использованы экстракция с помощью ДМСО, фракционирование этанолом и сульфатом аммония, гель-фильтрация на сефадексе G-200. Последующий анализ полученного антигена в иммуноблотинге с сыворотками 24 больных туберкулезом, подтвердил его высокую чувствительность.

Таким образом, в результате проделанной работы были определены методические подходы к выделению и наработке серологически активных антигенов М. tuberculosis 45 кДа, 38 кДа, 29−31 кДа и 6,5 кДа, которые планируется использовать в разрабатываемой на основе метода иммуноблотинга тест-системе, необходимой практическому здравоохранению для надежной диагностики туберкулеза.

Показать весь текст

Список литературы

  1. A.A. Микробиология и иммунология Текст. / М.: Медицина. 1999. — С.464.
  2. A.A. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии Текст. / А. А. Воробьев, А. С. Быков, Е. П. Пашков, А. В. Караулов, М. Я. Корн. // М.- МИА 2003.-С.232.
  3. В.В. Микробиологические методы диагностики туберкулеза Текст. / В. В. Ерохин, В. И. Голышевская, Э. В. Севастьянова, М. В. Шульгина. // Триада 2008. — С.40.
  4. Н.Г. Микробиология в определениях и иллюстрация Текст. / Н. Г Захарова, В. И. Вершинина, О. Н. Ильинская, // изд-во. ФЭН АН Р. 2012.-.800с.
  5. А.Н. Комплексные бактериологические исследования в диагностике туберкулеза Текст. /АН Калюк // Туберкулеза и экология.-1995.- № 3.-С.28−31.
  6. A.B. Сравнительная эффективность раннего выявления туберкулеза иммунологическими методами Текст. / A.B. Карпов // Вестник Новгородского государственного университета, 1998.
  7. Н.М. Ветеринарная микробиология и иммунология Текст. / Н. М. Колычев, Р. Г. Госманов, // М.: Колос. 2003.
  8. Е. Э. Особенности иммуногических показателей у больных с различными формами туберкулеза Текст. / Е. Э Комогорова, Е. В. Костенко, В. А Стаханов, [и др] // Иммунология.-2005.-№ 1.-С.45−50.
  9. М.Т. Микробиологическая диагностика туберкулеза почек Текст. / М. Т. Клименко, Т. С. Гинсбург, С. В. Сокало, И. В. Бочко, А. И. Крикун // Проблемы туберкулеза 1985. — № 8- С.37−40.
  10. Ю. К. Высокочувствительная неизотопная система гибридизации ДНК с применением амплификации (ПЦР дла идентификакции бруцелл) Текст. / Ю. К. Кулаков, В. Н. Горелов, В.Л.
  11. Мотин и др. // Молек. генетика, микробиология, и вирусология-1992.-№ 7.-8.-С.23
  12. А.Н. Патогенетическая микробиология: руководство Текст. / А. Н. Маянский // Н. Новгород: Издательство Нижегородской государственной медицинской академии, 2006.-520с.
  13. Г. Г. Эпидемиологическая ситуация в Российской Федерации и меры по ее стабилизации Текст. / Г. Г Онищенко. // Проблемы туберкулеза и болезней легких -2003. № 11. С.4−9.
  14. М.И. Консультант врача. Фтизиатрия Текст. / М. И. Перельман //М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. С. 57−65.
  15. O.K., Медицинская микробиология Текст. / О. К Поздеев. // М., ГЕОТАР-МЕД. 2001. — 765с
  16. Пиневич. А.В., Микробиология. Биология прокариотов Текст. / А. В. Пиневич.// т.1, Изд-во С-Пб. Университета. 2007, — 351с.
  17. В.В. Туберкулез в России Текст. / В. В. Пунга, Л. П. Капков. // Проблемы туберкулеза -1999. № 1.- С. 14−16
  18. Л.В. Особенности клинических исследований во фтизиатрии Текст. / Л. В. Слогоцкая, О. В. Ловачева, В. И Литвинов. //Туберкулез в России материалы VIII Российского съезда фтизиатров-2007.- С. 58.
  19. А.И. Туберкулез.Руководство по микробиологической диагностике инфекционных заболеваний Текст. /
  20. A.И. Тогунова А. И, М. А. Пешков, Г. П. Колина, и др. // под ред. К. И. Матвеева, М. И. Соколова. Москва.: Медицина, 1964.-СЗ87−421.
  21. X. Методы оценки Т и Б-системы иммунитета крупного рогатого скота при бруцеллезе и туберкулезе Текст. / X. Фримель, М. А Бажин // Иммунологическии методы. 1989. — С. 16−22.
  22. Туберкулёз. Под ред. Б. Блума. // М.: Медицина,-2002.- С.677
  23. В.И. Особенности диагностики и эффективность лечения больных туберкулезом легких без бактериовыделения Текст. /
  24. B.И. Чуканов, Л. В. Слогоцкая. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2007. — № 11. — С. 22−25.
  25. Т.Р. Способ получения антигенного препарата из Mycobacterium tuberculosis с расшеренным спектром серопозитивных фракции в реакции иммуноблотинга Текст. / Т. Р. Якупов, К. С Хаертдинов // патент № 2 010 101 484/10(2 020) .2010
  26. Abel В. Toll-like receptor 4 expression is required to control chronic Mycobacterium tuberculosis infection in mice Текст. / В. Abel, N. Thieblemont, V.J. Quesniaux, [et af. II J Immmunol. 2002.-Vol.169.- P 315 562.
  27. Abou-Zeid C. Genetic and immunological analysis of Mycobacterium tuberculosis fibronectin-binding proteins. / C. Abou-Zeid, T. Garbe, R. Lathigra, et at. II Infect Immun. 1991. — V.59. P.2712−2718.
  28. Aleman M. Mycobacterium tuberulosis-induced activation accelerates apoptosis in peripheral blood neutrophils from patients with active tuberculosis Текст. / M. Aleman, A. Garcia, M. A. Saab, [et al. II Am J Respir Cell Mol Biol-2002.-Vol-27.-P 583−92.
  29. Amicosante M. Sensitivety and specificity of a multi-antigen ELISA test for serological diagnosis of tuberculosisTeKCT. / M. Amicosante, M. Houde, G. Guaraldi, C. Saltini. // Int J Tuberc Lung Dis.-1999.-Vol.3.P.736−40.
  30. Andersen P. Specific immunebased diagnosis of tuberculosis Текст. / P. Andersen, M.E. Munk, J. M Pollock, [et al. II Lancet. 2000. -V.356.-P.1099−1104.
  31. Aqeel A. Diagnosis of tuberculosis by using elisa to detect 38 kDa mycobacterial antigen in the patients Текст. / A. Aqeel, A. Sophia, R. Chandra, C. David // Immunology 1995. — V.8(4). -P.155−160.
  32. Araujo Z. Stady of the antibody response against Mycobacterium tuberculosis antigens in Warao Amerindiam children in Venezuela Текст. / Z. Araujo, J. H Waard, D. L Fernandez, [et al. II Mem Inst Oswaldo Cruz-2004.-Vol.99,-P.517−24.
  33. Aronson NE. Long-term efficacy of Beg vaccine in American Indians and Alaska Natives: A 60-year follow-up stady Текст. / N. E Aronson, M. Santosham, G.W. Comstock, [et af. II JAMA-2004.- Vol.291.-P2086−91.
  34. Badak FZ. Use of nucleic acid probes for identification of Mycobacterium tuberculosis directly from MB/Bac T bottles Текст. / F. Z Badak, S. Goksel, R. Sertoz [et al. II J Clin Microbabiol.-1999.-Vol. 37. -P. 1602−5.
  35. Barnes PF. Cytokine production induced by Mycobacterium lipoarabinomannan. Relationship to chemical structure Текст. / P.F. Barnes, D. Chatterjee, J.S. Abrams, [et al. IIJ Immunol.-1992.-Vol.149.-541−7.
  36. Barnes PF. Rapid diagnostic test for tuberculosis: progress but no gold standard Текст. / P.F. Barnes. // Am J Respir Crit Care Med. 1997.-Vol. 155. P. 1497−8.
  37. Belisle J.T. Role of the major antigen of Mycobacterium tuberculosis in cell wall biogenesis Текст. / J. T Belisle, V. D Vissa, T. Sievert, [etal. II Science. 1997. — V.276. — P.1420−1422
  38. Belloccchio S. TLRs govern neutrophil activity in aspergillosis Текст. / S. Belloccchio, S. Moretti, K. Perruccio, [et al. II J Immunol.-2004/-Vol.173.-7406−15.
  39. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology Текст. / The Actinobacteria. 2012. — V.5. — C.1750.
  40. Bierrenbach A.L. Tuberculosis incidence and cure rates, Brazil, 2000−2004 Текст. / A. L Bierrenbach, A.B.F. Gomes, E. F Noronha, M.F.M. Souza. // Rev Saude Publica.- 2007.- Vol.41 (Suppl.l) P. 24−33
  41. Bodnar KA. Fate of Mycobacterium tuberculosis within murine dendritic cells Текст. / K. A Bodnar, N.V. Serbina, J.L. Flynn, // Infect Immun. -2001.-Vol.69.-P. 800−809.
  42. Boom W.H. Human immunity to M. tuberculosis: T cell subsets and antigen processing Текст. / W.H. Boom, D. H. Canaday, S.A. Fulton, A.J. Gehring, [etal //Tuberculosis (Edinb).- 2003.-Vol.83.-P98−106.
  43. Brock I, Comparison of tuberculin skin test and new specific blood test in tuberculosis contacts Текст. / I Brock, K. Weldingh, T. Lillebaek, F. Follmann, P. Andersen. // Am J Respir Crit Care Med.-2004.-Vol.170.-P.65−9
  44. Butler WR. Cross-reactivity of genetic probe for detection of Mycobacterium tuberculosis with newly described species Mycobacterium celatum Текст. / W. R Butler, S. P. O’Connor, M. A Yakrus, W. M. Gross. // J Clin Microbiol. 1994.-Vol.32.-P.536−8.
  45. Caminero JA. Antimycobacterial antibodies in tuberculous pleural effusions: reliability of antigen 60 Текст. / J. A. Caminero, D.C. Rodriguez, T. Carrillo, P. Cabrera. // Chest. 199l.-vol.99.-P.l315−6.
  46. Caragol I. Clinical TB in 2 of 3 siblings with IL-12 receptor betal deficiency Текст. / I. Caragol, M. Raspall, C. Fieschi, [et al. II Clin Infect Dis.-2003.-Vol 37.-P.302−6.
  47. Chan E.D. Immunologic diagnosis of tuberculosis: a review Текст. / E.D. Chan, L. Heifets, M. D Iseman. // Tuber Lung Dis. 2000. — V.80. -P.131−140.
  48. Chan CM. Detection of antibodies specific to an antigenic cell wall galactomannoprotein for serodiagnosis of Aspergillus fumigatus aspergillosis
  49. Текст. / E.D. Chan, P.C. Woo, A.S. Leung, et al. II J Clin Micobiol-2002.-Vol.40.-P.2041−5.
  50. Clemons KV. Pathogenesis I: interactions of host cells and fungi Текст. / K.V. Clemons, V.L. Calich, E. Burger, [et al II Med Mycol-2000.-Vol.38, Suppl 1.-P.99−111.
  51. Clive A Prevalence and Clinical Manifestations of Disseminated Mycobacterium avium Complex Infection in South Africans with Acquired Immunodeficiebcy Syndrome Текст. / A. P Clive, S. K Alan, H. Mark // Clin. Inf. Diss. 2001. — V.33. — P.2068−2071.
  52. Co D.O. Mycobacterial granulomas: keys to a long-lasting host-pathogen relationship Текст. / D. O Co, L. H Hogan, S. L Kim, M. Sandor. // Clin Immunol. -2004. Vol. l 13.-P.130−6.
  53. Demkow U. Humoral immune response against 38-kDa and 16-kDa mycobacterial antigens in bone and joint tuberculosis Текст. / U. Demkow, T.M. Zielonka, M. Nowak-Misiak M, [et al. II Int J Tuberc Lung Dis. 2002. -V.6. — P.1023−1028.
  54. De Bruyn J. The 32 kDa protein antigen of M. bovis BCG and M. tuberculosis H37Rv Текст. / J. De Bruyn, K. Huygen, J. Van Vooren, J. Content J, M. Turneer. //Trop.Med.Parasitol1990.- Vol.41.-P.331−332.
  55. Deshpande R.G. Superoxide dismutase activity of Mycobacterium tuberculosis patients and immunoreactivity of superoxide dismutase Текст. / R. G Deshpande, M. B Khan, R. G Navalkar // Tuber Lung. 1993. — V.74(6). -P.388−94.
  56. Doffinger R. Inherited disorders of IL-12- and IFNgamma-mediated immunity: a molecular genetics update Текст. / R. Doffinger, S. Dupuis, C. Picard, [et al. // Mol Immunol-2002.-Vol.38.-P.903−9.
  57. Dwyer B. DNA restriction fragment analysis to define an extended cluster of tuberculosis in homeless men and their associates Текст. / В. Dwyer, К. Jackson, К. Raios, A. Sievers, E. Wilshire, B. Ross. // J Infect Dis.-1993. -V.167. C.490−494.
  58. Espitia C. The PE-PGRS glycine-rich proteins of Mycobacterium tuberculosis: a new family of fibronectin-binding proteins? Текст. / С. Espitia, J. P. Laclette, M. Mondragon-Palomino, [et al. II Microbiology. 1999. -V.145. — P.3487−3495.
  59. Ferraz JC. Immune factors and immunoregulation in tuberculosis Текст. / J.C. Ferraz, F.B. Melo, M.F. Albuquerque, S.M. Montenegro, F.G. Abath // Braz J Med Biol Res. 2006. — Vol.39(l 1). — P. 1387−97.
  60. Ficapal A. Diagnosis of Brucella ovis infection of rams with an ELISA using protein G as conjugate Текст. / A. Ficapal, B. Alonso-Urmeneta, J. Velasco, I. Moriyon, J. M. Blasco // Vet Ree. 1995.Vol.l37.-P.145−7,
  61. Flynn JL. An essential role for interferon gramma in resistance to Mycobacterium tuberculosis infection Текст. / J.L. Flynn, J. Chan, K.J. Triebold, D.K. Dalton [et al И J Exp Med.-l 993 .-Vol.178.-P.2249−54
  62. Flynn JL. Tuberculosis: latency and reactivation Текст. / J.L. Flynn, J. Chan // Infect Immun-2001.-Vol.69.-P.4195−201.
  63. Flynn JL. Immunology of tuberculosis and implications in vaccine development Текст. / J.L. Flynn // Tuberculosis (Edinb).-2004.-Vol.84.P.93−101.
  64. Frieden TR. Tuberculosis Текст. / T.R. Frieden T.R. Sterling, S.S. Munsiff, C. J Watt, C. Dye // Lancet. 2003.-Vol.362.-P 887−99.
  65. Foulds J. New tools for the diagnosis of tuberculosis: the perspective of developing countries Текст. / J. Foulds, R. O’Brien //Int Tubero Lung Dis.-l 998.-V.2.-P.778−83.
  66. Garg S.K. Diagnosis of tuberculosis: available technologies, limitations, and possibilities Текст. / S.K. Garg, R.P. Tiwari, D. Tiwari [et al II J Clin Lab Anal. 2003. — V.17. -P155−163.
  67. Garlanda С. Non-redundant role of the long pentraxin PTX3 in antifungal innate immune response Текст. / С. Garlanda, E. Hirsch, S Bozza [et аГ IINature-2002. -Vol.420.-P. 182−6.
  68. Ghelani D.R. Diagnostic significance of immunoglobulins and adenosine deaminase in pleural effusion Текст. / D. R Ghelani, F. S. Parikh, A. S. Hakim, J. V. Pai-Dhungat // J Assoc Physicians India. 1999. — V.47. -P.787−790.
  69. Gillespie SH. Monitoring the therapy of pulmonary tuberculosis by nested polymerase chain reaction Текст. / S.H. Gillespie, T.D. McHugh // J Infect.-1997.-Vol.35.-P.324−5.
  70. Griese M. Pulmonary surfactant, lung function, and endobronchial inflammation in cystic fibrosis Текст. / M. Griese, R. Essl, R. Schmidt [et al II Am J Respir Crit Care Med. 2004.-Vol.170.-P 1000−5.
  71. Griffin JP. Kinetics of accumulation of gamma delta receptor-bearing T lymphocytes in mice infected with live mycobacteria. / Harshan KV, Born WK, Orme IM // Infect Immun. 1991.-Vol.59.-P.4263−5.
  72. Grubek-Jaworska H. Serum and bronchoalveolar IgG against A60 and 38 kDa antigens in the diagnosis of tuberculosis Текст. / H. Grubek-Jaworska, Z. Zwolska, P. Droszcz [et al. // Int J Tuberc Lung Dis. 1997. -V.l. — P.556−562.
  73. Harboe M. Antibodies against BCG antigen 60 in mycobacterial infection Текст. / M. Harboe, O. Closs, B. Bjorvatn, G. Bjune // Br Med J. -1977-V.2-P.430−433.
  74. Harboe M. Secreted proteins of Mycobacterium leprae Текст. / M. Harboe, H. G. Wiker, J. Scand // Immunol. 1998. — V.48. — P.577−584.
  75. Hayashi F. Toll-like receptors stimulate human neutrophil function Текст. / F. Hayashi, Т.К. Means, A.D. Luster // Blood.-2003. Vol. 102.-P. 2660−9.
  76. Havlir DV. A 19-year follow-up of tuberculin reactors. Assessment of skin reactivity and in vitro lymphocyte responses Текст. / D.V. Havlir, K.F. Van Der, E. Duffy, R. Marshall, D. Horn, J. J Ellner // Chest. 1991.-Vol.99.-P.l 172−6.
  77. Hendrickson R.C. Mass spectrometric identification of mtb81, a novel serological marker for tuberculosis Текст. / R.C. Hendrickson, J.F. Douglass, L.D. Reynolds [et al. J Clin Microbiol. 2000. — V.38. — P.2354−2361.
  78. Hernandez C. Tuberculosis in the age of biologic therapy Текст. / С. Hernandez, A.S. Cetner, J.E. Jordan, S.N. Puangsuvan, J.K. Robinson // J Am Dermatol. 2008. — Vol.59.-P.363−380.
  79. Hellyer TJ. Strand displacement amplification and the PCR for monitoring response to treatment in patients with pulmonary tuberculosis Текст. / T.J. Hellyer, T.W. Fletcher, J.H. Betes [et аГ II J Inter Dis.-1996.-Vol.l73.-P.934−41.
  80. Hill PC, Quantitative T cell assay reflects infectious of Mycobacterium tuberculosis in an endemic case contact model Текст. / P. С. Hill, A. Fox, D.J. Jeffries [et al II Clin Infect Dis. 2005.-Vol.40.-P.273−8
  81. Hirano T. Biological and clinical aspects of interleukin 6 Текст. / Т. Hirano, S. Akira, T. Taga, T. Kishimoto // Immunol Totay. 1990.-Vol.ll.-P.443−9.
  82. Houghton R.L. Use of Multiepitope Polyproteins in Serodiagnosis of Actiye Tuberculosis Текст. / R.L. Houghton, M.J. Lodes, D.C. Dillon, L.D. Reynolds, C.H. Day, P.D. et al II Clin diagn Lab Immmmunol. 2002. — V. 9(4).-P. 883−891.5.
  83. Jackett P. S. Specificity of antibodies to immunodominant mycobacterial antigens in pulmonary tuberculosis Текст. / P. S. Jackett, G.H. Bothamley, H.V. Batra [et al. II J Clin Microbiol. 1988. — V.26. — P.2313−2318.
  84. Kanaujia G.V. Detection of early secretory antigenic target-6 antibody for diagnosis of tuberculosis in non-human primates Текст. / G.V. Kanaujia, M.A. Garcia, D.M. Bouley [et аГ. II Comp Med. 2003. — V.53. -P.602−606.
  85. Kato T. Proteolytic conversion of SAT3 alpha to STAT3 gamma in human neutrophils: role of granule-derived serine proteases Текст. / Т. Kato, E. Sakamoto, H. Kutsuna, A. Kimura-Eto [et al II J Biol Chem. 2004.-Vol.279. -P.31 076−80.
  86. Kent L. Demonstration of homology between IS6110 of Mycobacterium tuberculosis and DNAs of other Mycobacterium spp. Текст. /
  87. Kent, T.D. McHugh, O. Billington, W.J. Dale, S.H. Gillespie // J Clin Microbiol.-l 995.-Vol.33 .-P.2290−3.
  88. Kurup VP. Immunology of allergic bronchopulmonary aspergillosisTeKCT. / V. P Kurup // Indian J Chest Dis Allied Sci-2000.-Vol.42.-P.225−37.
  89. Lalvani A. Enhanced contact tracing and the spatial tracking of Mycobacterium tuberculosis infection by enumeration of antigen-specific T cells Текст. / A. Lalvani, A.A. Pathan, H. Durkan [et аГ II Lancet. 2001.-Vol.357.-P.2017−21.
  90. Lawn SD. Evaluation of a commercial immunodiagnostic kit incorporating lipoarabinomannan in the serodiagnosis of pulmonary tuberculosis in Ghana Текст. / S.D. Lawn E.H. Frimpong, E. Nyarko // Trop Med Int Heath. 1997.-Vol.2.-P.978−81
  91. Levitz S.M. Mechanisms of resistance of A. fumigatus Conidia to killing by neutrophils in vitro Текст. / S.M. Levitz, R.D. Diamond [et al II J Infect Dis.-l 985 .-Vol. 187.-P. 117−23.
  92. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the bacteriophage T4.- Nature Текст. / U. K Laemmli // London. 1970. -V.227 — P.680−685.
  93. Li L.F. Serodiagnosis of tuberculosis by enzyme-linked immunosorbent assay for anti-A60 and anti-A38 Текст. / L.F. Li, M.C. Lin M, N. H. Chen [et al. II Changgeng Yi Xue Za Zhi. 1998. — V.21. — P.258−264.
  94. Liang L. The right place at the right time: novel B7 family members regulate effector T cell responses Текст. / L. Liang, W. C Sha // Curr Opin Immunol.-2002.-Vol. 14. P.384−90.
  95. Maeda J. Local production and localization of transforming growth factor-beta in tuberculous pleurisy Текст. / J. Maeda, N. Ueki, T. Ohkawa [et al. // Clin Exp Immunol—1993.-Vol.92.-P.32−8.
  96. Malen H. Comprehensive analysis of exported proteins from Mycobacterium tuberculosis H37Rv Текст. / H. Malen, F. S. Berven, К. E. Fladmark, H. G Wiker // Proteomics. 2007. — V.7. — P. 1702−1718.
  97. Manca C. Differential monocyte activation underlies strain-specific Mycobacterium tuberculosis pathogenesis Текст. / С. Manca, M. В Reed, S. Freeman [et al. И Infect Immun. 2004.-Vol 72.-P.5511−4.
  98. Maggi E. Reciprocal regulatory effects of IFN-gamma and IL-4 on the in vitro development of human Thl and Th2 clones Текст. / E. Maggi, P. Parronchi, R. Manetti [et al. II J Immunol. 1992.-Vol.l48.-P.1274−82.
  99. Maheshwari A. Diagnostic utility of estimation of mycobacterial antigen A60 specific immunoglobulins in serum and CSF in adult neurotuberculosis Текст. / A. Maheshwari, H.L. Gupta, S. Gupta [et al. II J Commun Dis. 2000. — V.32. — P.54−60.
  100. Mastroeni P. Immunity to systemic Salmonella infections Текст. / P. Mastroeni // Curr Mol Med.-2002.-Vol.2.-P.393−406.
  101. Mathema В. Molecular epidemiology of tuberculosis: current insights Текст. / В. Mathema, N.E. Kurepina, P. J Bifani, B.N. Kreiswirth // Clin. Microbiol. Rev.- 2006. Vol.19. -P.658−685.
  102. Menozzi F.D., Identification of a heparinbinding hemagglutinin present in mycobacteria Текст. / F. D Menozzi, J.H. Rouse, M. Alavi [et af. II J Exp Med. 1996. — V.184. — P.993−1001.
  103. Mori T, Specific detection of tuberculosis infection: an interferon-gamma-based assay using new antigens Текст. / Т. Mori, M. Sakatani, F. Yamagishi [et alll Am J Respir Crit Care Med. 2004.-Vol.l70.-P.59−64
  104. Mukherjee P. The RD1-encoded antigen Rv3872 of Mycobacterium tuberculosis as a potential candidate for serodiagnosis of tuberculosis Текст. / P. Mukherjee, M. Dutta M, P. Datta [et al. II Clin Microbiol Infect. 2007. -V.13. — P.146−152.
  105. Nagai S. Isolation and partial characterization of major protein antigens in the culture fluid of Mycobacterium tuberculosis Текст. / S. Nagai, G.H. Wiker, M. Harboe, M. Kinomoto // Infect Immun. 1991. — V.59. — P.372−382
  106. Nicholson L.B. T cell recognition of self and altered self-antigens Текст. / B.L. Nicholson, V.K. Kuchroo // Crit Rev Immmunol. -1997.-Vol. 17.-P .449−62.
  107. O’Toole R. A two-component regulator of universal stress protein expression and adaptation to oxygen starvation in Mycobacterium smegmatis Текст. / R. A O’Toole, M. J Smeulders, M. C. Blokpoel [et al. 11 J Bacteriol. -2003.-V.185.-P.1543−1554.
  108. Parket LC. Toll-like receptor (TLR)2 and TLR4 agonists regulate CCR expression in human monocytic cells Текст. / C. L Parket, M. K Whyte, S. N Vogel, S. K Dower, I. Sabroe // J Immunol.-2004.-Vol.l72.-P.4977−86.
  109. Proud D. Human rhinovirus infection induces airway epithelial cell production of human beta-defensin 2 both in vitro and in vivo Текст. / D. Proud, S. P Sanders, S. Wiehler // J Immunol.-2004.-Vol.l72.-P.4637−45.
  110. Rook GA. Cytokines and the Koch phenomenon Текст. / G. A Rook, R. al Attiyah // Tubercle.-1991.-Voll.72- P.13−20.
  111. Samanich K.M. Delineation of human antibody responses to culture filtrate antigens of Mycobacterium tuberculosis Текст. / K. M Samanich, J. T Belisle, M. G Sonnenberg [et ai. И J Infect Dis. 1998. — V.178. — P. l534−1538
  112. Samanich K.M. Serodiagnostic potential of culture filtrate antigens of Mycobacterium tuberculosis Текст. / K. M Samanich, M. A Keen, V. D Vissa [et ai. II Clin Diagn Lab Immunol. 2000.V.7. — P.662−668.
  113. Senol G. Humoral immune response against 38-kDa and 16-kDa mycobacterial antigens in tuberculosisTeKCT. / G. Senol, O.F. Erer, Y.A. Yalcin, M. Coskun. [et al II Eur Respir J. 2007. — V.29. P.143−148.
  114. Singh K.K. Immunogenicity of the Mycobacterium tuberculosis PPE55 (Rv3347c) protein during incipient and clinical tuberculosis Текст. / K. K Singh, Y. Dong Y, S. A Patibandla [ et al. // Infect Immun. 2005. — V.73.- P.5004−5014.
  115. Schaible U.E. CD1 molecules and CDl-dependent T cells in bacterial infections: a link from innate to acquired immunity? Текст. / U. E Schaible, S. H Kauffmann // Semin Immunol.-2000.-Vol.l2.-P.527−35.
  116. Shams H. Characterization of a M. tuberculosis peptide that is recognized by human CD4+ and CD8+ N cells in the context of multiple HLA alleles Текст. / H. Shams, P. Klucar, S. E Weis [et ai]. II J. Immunol. 2004.-Vol.173.-P.1966−77.
  117. Silva V.M. Factors associated with humoral response to ESAT-6, 38 kDa and 14 kDa in patients with a spectrum of tuberculosis Текст. / V. M Silva, G. Kanaujia, M. L Gennaro, D. Menzies // Int J Tuberc Lung Dis. 2003.- V.7. P.478−484.
  118. Somoskovi A. False-positive results for M. celatum with the AccuProbe M. tuberculosis complex assay Текст. / A. Somoskovi, J. E Hotaling, M. Fitzgenerald [et at. II J Clin Microbiol. 2000.-Vol.38-P.2743−5.
  119. Stenger S. Differential effects of cytolytic T cell subsets on intracellular infection Текст. / S. Stenger, R. J Mazzaccaro, K. Uyemura. // Science.-1997.-Vol.276.-P.1684−7.
  120. Strieter RM. Cytokines in innate host defense in the lung Текст. / R. M Strieter, J. A Belperio, M. P Keane // J Clin Invest.-2002.-Vol.109.-P.699−705.
  121. Suman L. Human humoral responses to antigens of Mycobacterium tuberculosis: Immunodominanca of High-Molecular-Mass antigens Текст. / L. Suman, M. S Karen, M. G Sonnenberg, S. Zolla-Pazner [et al] // Clin. And Diag. Lab. Immun. 1997. — V.4(l). — P.49−56.
  122. Tasneem S. Crossreactivity of SLE autoantibodies with 70 kDa hsp of M.tuberculosis. Текст. / S. Tasneem, N. Islam, R. Ali // Microbiol Immunol-2001 .Vol.45 .-P.888−92.
  123. Theilmann L. Alpha tumor necrosis factor in the serum of patients with sarcoidosis, tuberculosis or bronchial cancer Текст. / L. Theilmann, U. Meyer, B. Kommerell, R. Dierkesmann, A. Moller // Pneumologie-1990.-Vol.44.-P.735−8
  124. Tsuyuguchi I. Increase of TCR y/5-bearing Tcells in cord blood factor Текст. /1. Tsuyuguchi, H. Kawassumi, C. Ueta, I. Yano, S. Kishimoto // Infect Immmun Immun. -1991.-Vol.59-.P.3053−9
  125. Ulrichs Т. New insights into the function of granulomas in human tuberculosis Текст. / Т. Ulrichs, S.H. Kaufmann // J Pathol. 2006. — Vol.208.-P.261−269.
  126. Vassallo R. Mechanisms of defence in the lung: lessons from Pneumocystis carinni pneumonia Текст. / R. Vassallo, C. F Thomas, Z. Jr.
  127. Vuk-Pavlovic, A. H Limper // Sarcoidosis Vase Diffuse Lung Dis-2000.-Vol.l7.-P.130−9.
  128. Verbon A. Serum concentration of cytokines in patients with active ТВ and after treatment Текст. / A. Verbon, N. Juffermans, S. J Van Deventer, P. Speelman [etal //ClinExp. Immunol.-1999.-Vol.ll5.-P.110−3.
  129. Verbon A. Antigens in culture supernatant of Mycobacterium tuberculosis: epitopes defined by monoclonal and human antibodies Текст. /
  130. A. Verbon, S. Kuijper, H. M Jansen, P. Speelman, A. H Kolk // J Gen Microbiol. 1990.-Vol.l36.-P.955−64
  131. World Health Organization. The Stop ТВ Strategy, case reports, treatment outcomes and estimates of ТВ burden".Global tuberculosis control / epidemiology, strategy, financing 2009. — P.187−300.
  132. Wang B.L. Antibody response to four secretory proteins from Mycobacterium tuberculosis and their complex antigen in ТВ patients Текст. /
  133. B.L Wang, Y. Xu, Z. M Li, Y. M Xu et al И Int J Tuberc Lung Dis. 2005. -V.9(12). — P.1327−1334.
  134. Wang J. A mutation in the insulin 2 gene induces diabetes with severe pancreatic beta-cell dysfunction in the Mody mouse Текст. / J. A Wang, T. Takeuchi, S. Tanaka [etal]. II J Clin Invest.-1999.-Vol. 103.-P.27−37.
  135. Wayne L.G. Dormancy of Mycobacterium tuberculosis and latency of disease Текст. / L. G Wayne // Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 1994. -V.13. — P.908−914.
  136. Weldingh K. Assessing the serodiagnostic potential of 35 Mycobacterium tuberculosis proteins and identification of four novelserological antigens Текст. / К. Weldingh, I. Rosenkrands, L. M Okkels [et al. I IJ Clin Microbiol. 2005. — V.43. — P.57−65.
  137. Weber. The reliability of molecular weight determinations by dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis Текст. / Weber, M Osborn // J. Biol. Chem. 1969. V.244 P.4406−4412.
  138. Wiker H.G. The antigen 85 complex: a major secretion product of Mycobacterium tuberculosis Текст. / H. G Wiker, M. Harboe // Microbiol Rev. -1992.-V.56.-P.648−661.
  139. Yuan Y. III. Stationary phase-associated protein expression in Mycobacterium tuberculosis: function of the mycobacterial alpha-crystalline homolog Текст. / Y. Yuan, D. D Crane, C. E Barry // J Bacteriol. 1996. -V.178. — P.4484−4492.
  140. Yuan Y. The 16-kDa alpha-crystallin (Acr) protein of Mycobacterium tuberculosis is required for growth in macrophages Текст. / Y. Yuan, D. D Crane, R. M Simpson [et al. II Proc Natl Acad Sci USA.- 1998. V.95. — P.9578−9583
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?