Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Исследование процессов выделения и очистки микробной эндо-1, 4-?-ксиланазы из рода Geotrichum и изучение свойств фермента

Диссертация: Исследование процессов выделения и очистки микробной эндо-1, 4-?-ксиланазы из рода Geotrichum и изучение свойств фермента
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Проведено сравнительное изучение динамики накопления ферментов, активных по отношению к «-НФ-Р-С-ксилопиранозИду, и-НФ-P-D-галактопиранозиду, и-НФ-а-О-галактопиранозиду, и-НФ-a-L-арабинофуранозиду, и-НФ-р-Э-глюкопиранозид, хлопку, нерастворимому 4−0-метилглюкуроноксилану древесины березы, карбоксиметилцеллюлозе авицелу, свекловичному пектину, галактоманнану, арабиногалактану штаммами Geotrichum… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Строение клеточной стенки высших растений
    • 1. 2. Строение основных компонентов клеточной стенки высших растений
      • 1. 2. 1. Целлюлоза
      • 1. 2. 2. Гемицеллюлозы
        • 1. 2. 2. 1. Ксиланы
        • 1. 2. 2. 2. Ксилоглюканы
        • 1. 2. 2. 3. (1→3)-(1—>4)-Р-Б-Глюкан ы
        • 1. 2. 2. 4. Галактоглюкоманнаны
      • 1. 2. 3. Пектиновые полисахариды
        • 1. 2. 3. 1. Кислые пектиновые полисахариды
        • 1. 2. 3. 2. Нейтральные пектиновые полисахариды
    • 1. 3. Система ферментов, катализирующих расщепление целлюлозы
    • 1. 4. Системы ферментов, катализирующих расщепление гемицеллюлоз
  • 1. «41p™JL)"*J. *J AI^D 1сэ. ийзы
    • 1. 4. 2. р-Ксиланаз ы
    • 1. 4. 3. р-Глюкозидаз ы
    • 1. 4. 4. Маннаназы
    • 1. 5. Ферменты, катализирующие расщепление пектиновых полисахаридов
    • 1. 5. 1. Пектолитические ферменты
    • 1. 5. 2. Ферменты, деградирующие основную цепь рамногалактоуронанов первого типа
    • 1. 5. 3. Ферменты, катализирующие расщепление нейтральных пектиновых полисахаридов.,.:.,
      • 1. 5. 3. 1. Ферменты, катализирующие расщепление a-L-арабинанов
      • 1. 5. 3. 2. Ферменты, катализирующие расщепление галактанов
    • 1. 6. Молекулярная организация ферментов
    • 1. 7. Практическое применение ферментов, катализирующих расщепление полисахаридов клеточной стенки высших растений
  • ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
  • 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 2. 1. Источники ферментов
    • 2. 2. Методы определения активности ферментов
    • 2. 3. Определение белка.,.,.v.'
    • 2. 4. Определение углеводов,.:.,.,
    • 2. 5. Хроматография углеводов
    • 2. 6. Изучение ксиланолитического комплекса гриба Geotrichumcandidwn3C.r.v.»
      • 2. 6. 1. Аффинная хроматография на МКЦ
      • 2. 6. 2. Сорбция на 4-О-МеГК из древесины березы
    • 2. 7. Выделение эндо — 1,4 — р — ксиланазы
      • 2. 7. 1. Ультрафильтрация
      • 2. 7. 2. Аффинная хроматография на микрогранулированной целлюлозе
      • 2. 7. 3. Гель-хроматография на сефадексе G
      • 2. 7. 4. Ионообменная хроматография на ДЭАЭ -тойоперл
      • 2. 7. 5. ВЭЖХ — хроматография на колонке TSK — ДЭАЭ -5PW
      • 2. 7. 6. Гидрофобная хроматография на колонке фенил -суперозе
    • 2. 8. Изоэлектрическое фокусирование
    • 2. 9. Электрофорез в ПААГ
    • 2. 10. Определение Кт
    • 2. 11. Определение сорбционной способности эндо — 1,4 — |3 -ксиланазы нанерастворимом 4-О-МеГК
    • 2. 12. Выделение эндо — 1,4 — (3 — ксиланазы, способной сорбироваться на 4-О-МеГК
    • 2. 13. Выделение ксилансвязывающего домена эндо — 1,4 — Р -ксиланазы
      • 2. 13. 1. Обращенно — фазовая хроматография на колонке Аквапоре RP
      • 2. 13. 2. Гидролиз белка папаином.1. 2 Л
    • 3. 3. Обращенно — фазовая хроматография на колонке ^ Аквапоре RP
    • 2. 14. Применение ферментного препарата Цёллокандин II Г10х для роспуска макулатуры и обезвоживания суспензии
  • Целлюлозы
  • 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Исследование способности различных препаратов расщеплять полисахариды клеточной стенки высших растений
    • 3. 2. Сравнительное изучение динамики накопления ферментов, расщепляющих клеточную стенку высших растений штаммами Geotrichum candidum ЗС и ЗС
    • 3. 3. Исследование механизма расщепления клеточных стенок высших растений
    • 3. 4. Изучение ксиланолитического комплекса гриба Geotrichum candidum 3 С
      • 3. 4. 1. Аффинная хроматография на МКЦ
      • 3. 4. 2. Сорбция на 4-О-МеГК
    • 3. 5. Выделение эндо-1,4 -р -ксиланазы из Geotrichum candidum ЗС
      • 3. 5. 1. Ультрафильтрация
      • 3. 5. 2. Аффинная хроматография на микрогранулированной целлюлозе
      • 3. 5. 3. Гель-хроматография на сефадексе G
      • 3. 5. 4. Ионообменная хроматография на ДЕАЕ — тойоперл
      • 3. 5. 5. ВЭЖХ-хроматография на TSK-DEAE-5PW
  • 3. v5.6. Гидрофобная хроматография на колонке фенил суперозе. 3, 6. Исследование гомогенности полученной эндоксиланазы
    • 3. 7. Изучение, физико-химических свойств эндо-1,4-ртКСиланазы из Geotrichum candidum 3 С.*
      • 3. 7. 1. Определение молекулярной массы
      • 3. 7. 2. Влияние рН на активность эндоксиланазы
      • 3. 7. 3. Влияние температуры на активность эндоксиланазы
      • 3. 7. 4. Определение способности снижать вязкость и осахаривать раствор КМК
      • 3. 7. 5. Определение степени гидролиза различных ксиланов
    • 3. 8. Выделение эндоксиланазы, способной к сорбции на нерастворимом 4-О-МеГК древесины березы
      • 3. 8. 1. Определение сорбционной способности эндоксиланазы
      • 3. 8. 2. Отделение эндоксиланазы 1 от связанного с ней
  • МеГК из древесины березы
    • 3. 9. Физико-химические свойства эндоксиланазы
      • 3. 9. 1. Определение Кт эндоксиланазы
      • 3. 9. 2. Исследование способности эндоксиланазы 1 гидролизовать различные субстраты
      • 3. 9. 3. Изучение действия эндоксиланазы 1 на 4-О-МеГК из древесины березы
      • 3. 9. 4. Исследование способности эндоксиланазы 1 сорбироваться на МКЦ
      • 3. 9. 5. Определение рН-оптимума эндоксиланазы
    • 3. 10. Выделение ксиланосвязывающего домена эндо-1,4-|3-ксиланазы
      • 3. 10. 1. Обращенно-фазовая хроматография на колонке Аквапоре RP-300.,.,
      • 3. 10. 2. Гидролиз белка папаином
      • 3. 10. 3. Изучение действия выделенных пептидов на 4-О-МеГК, из древесины Березы
    • 3. 11. Применение ферментного препарата Целлокандин II ГЮх для роспуска макулатуры- и обезвоживания суспензии целлюлозы.&bdquo
  • ВЫВОДЫ
  • СПОСИК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Исследование процессов выделения и очистки микробной эндо-1, 4-?-ксиланазы из рода Geotrichum и изучение свойств фермента (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность темы

.

На нашей планете богатейшим возобновляемым сырьевым источником различных биополимеров являются растения. Многие из биополимеров уже давно нашли широкое применение, особенно, крахмал и целлюлоза. Очень давно возникли технологии, использующие крахмал в качестве основного сырья для хлебопечения, для различных бродильных производств, для крахмалопаточной промышленности и т. д. В последние годы уделяется особое внимание проблемам комплексной переработки растительного сырья, т. е. получение целевого продукта и утилизации древесных и растительных отходов. Растения — очень сложный многокомплексный вид сырья. Сложности возникают при обработке древесины и растительных отходов. В ряде случаев возникает необходимость освобождаться от гемицеллюлоз, что это крайне трудно, так как это неоднородное многокомпонентное образование, состоящее из самых различных полисахаридов, содержащих в своем составе разнообразные моносахариды и даже кислоты, которые формируются вбиополимер с образованием разнообразных нерегулярных аи (3- гликозидных связей. Это определяет структуру гемицеллюлоз, — в них есть линейные цепи и ветвящиеся образования. Гемицеллюлозы участвуют в формировании клеточных стенок в растениях. Первично клеточные стенки, окружающие протопласты молодых растущих клеток, состоят из аморфного матрикса, представляющего собой пластичную массу, образованную пектиновыми полисахаридами, гемицеллюлозами и белками, в которую погружены микрофибриллы целлюлозы.

Несмотря на многочисленные работы в этом направлении еще очень много неясных мест в формировании растительной ткани, а главное в способах ее гидролиза. Гемицеллюлозы — это общее название комплекса соединений, связанных тем или иным способом между собой, это: ксиланы, ксилоглюканы, (l-«3)-(l-"4)-P-D-nnoKaHbi, галактоглюкоманнаны и др. Для гидролиза 8 особенно сложны различные виды ксиланов. В связи с этим, важны и актуальны исследования, направленные на поиски активных продуцентов ферментов* гидролизующих различные типы ксиланов. Только обработанные ксиланазами эти биополимеры могут быть использованы в различных производствах, в сельском хозяйстве, при выращивании дрожжевых масс, в производстве бумаги, в роспуске макулатуры и т. д. Поэтому работа по поиску активного продуцента ксиланаз, изучение свойств фермента является актуальной проблемой в биотехнологии и биохимии.

Цель и задачи исследования

,.

Целью настоящей работы является изучение физико-химических свойств грибной эндо-1,4-(3-ксиланазы. Исходя из цели, были поставлены следующие задачи:

— провести сравнительный анализ различных препаратов, содержащих вышеупомянутые ферменты;

— селекционировать наиболее активный, продуцент ферментов, расщепляющих полисахариды клеточной стенки высших растений, основываясь на — коллекции микробных культур лаборатории «ферменты микроорганизмов» Института биохимии им. АН. Баха, ^ i любезно предоставленных нам д.б.н., проф. Родионовой Н. А.;

— изучить динамику накопления ферментов, расщепляющих клеточную стенку высших растений штаммами Geotrichum candidum ЗС и ЗС-106;

— изучить порядок расщепления клеточной стенки, для чего исследовать последовательность появления гемицеллюлолитических, целлюлолитических и пектолитических ферментов в культуральной жидкости при выращивании штамма на изолированных клеточных стенках;

— изучить ксиланолитический комплекс гриба Geotrichum candidum ЗС- 9.

— получить высокоочищенный гомогенный препарат эндо-1,4−0-ксиланазы;

— изучить физико-химические свойства полученного препарата;

— выделить эндоксиланазу, способную к сорбции на нерастворимом 4-О-метилглюкуроноксилане древесины березы;

— изучить физико-химические свойства эндоксиланазы, способной к сорбции на 4-О-метилглюкуроноксилане древесины березы;

— выделить ксиланосвязывающий домен эндо-1,4-Р-ксиланазы;

— исследовать возможность применения ферментного препарата Целлокандин Г10х для роспуска макулатуры и обезвоживания суспензии целлюлозы.

Научная новизна работы.

1. Исследована способность 11 ферментных препаратов и 9 штаммов расщеплять полисахариды клеточной стенки высших растений! Показано, что штамм: Geotrichum candidum ЗС является наиболее перспективным: штаммом для выделения эндоксиланазы.

2. Установлена последовательность атаки ферментами клеточной стенки злаков. Первоначально действуют пектиназы совместно с ксиланазами, и лишь потом целлюлолитические ферменты.

3. Показано, что в культуральной жидкости Geotrichum candidum ЗС присутствуют 3 типа эндоксиланаз: содержащая целлюлозосвязывающий домен, содержащая ксилансвязывающий домен и не содержащая полисахаридсвязывающего домена.

4. Впервые из культуральной жидкости Geotrichum candidum ЗС выделена гомогенная эндо-1,4-(3-ксиланаза, содержащая ксилансвязывающий домен. Исследованы ее физико-химические и каталитические свойства и действие на ксиланы различной структуры.

5. Впервые выделен ксилансвязывающий домен грибной эндоксиланазы.

Практическая значимость работы.

1. Установлено, что препарат Целлокандин Г10х из Geotrichum candidum ЗС-106 перспективен для применения в целлюлозно — бумажной промышленности при конверсии влагостойкой макулатуры и ускорении обезвоживания бумажной массы. Показано, что применение препарата ускоряло как роспуск бумажной макулатуры до целлюлозных волокон, так и процесс обезвоживания целлюлозной суспензии.

2. Совместно с ЦНИИ бумаги получен акт испытаний образцов ферментов, полученных на стендовой установке Института биохимии им. А. Н. Баха РАН, обладающих ксиланазной активностью на активность обезвоживания и размол бумажной массы.

3. Впервые показано наличие у грибов эндоксиланазы с ксилансвязывающим доменом.

Апробация работы,.

LsОсновные положения диссертации представлены на международных и к российских научно-технических конференциях и симпозиумах:

— «Modern problems of microbial biochemistry and biotechnology» (Pushchino,.

2000);

— «Химия и биотехнология пищевых веществ. Экологически безопасные технологии на основе возобновляемых природных ресурсов» (Москва,.

2000);

— «Молодые ученые пищевым и перерабатывающим отраслям АПК технологические аспекты производства) (Москва, 2000).

Публикации.

Основные результаты диссертации изложены в 7 работах.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ВЫВОДЫ.

1. Изучена способность различных препаратов расщеплять полисахариды клеточной стенки высших растений. Показано, что препарат Целлокандин-П Г10х содержал наиболее высокие целлюлазные и ксиланазные активности (38,9 Е/г и 126 Е/г соответственно), а также достаточно высокие пектиназные и а-галактозидазную активности (12,7 Е/г и 29,7 Е/г соответственно). Таким образом, Geotrichum candidum ЗС — 106 наиболее перспективный штамм для использования в сельском хозяйстве и промышленности. Однако при дальнейших исследованиях была замечена его некоторая нестабильность и тенденция к снижению продуцирующей способности в отношении ферментов. Мутантный штамм требовал постоянных отборов и пересевов, поэтому для упрощения последующих исследований и получения стабильных результатов был выбран исходный «дикий» штамм Geotrichum candidum ЗС как наиболее перспективный продуцент ксиланазы.

2. Проведено сравнительное изучение динамики накопления ферментов, активных по отношению к «-НФ-Р-С-ксилопиранозИду, и-НФ-P-D-галактопиранозиду, и-НФ-а-О-галактопиранозиду, и-НФ-a-L-арабинофуранозиду, и-НФ-р-Э-глюкопиранозид, хлопку, нерастворимому 4−0-метилглюкуроноксилану древесины березы, карбоксиметилцеллюлозе авицелу, свекловичному пектину, галактоманнану, арабиногалактану штаммами Geotrichum candidum ЗС и ЗС-106. Показано, что в целом накопление ферментов у «дикого» и мутантного штаммов происходило равномерно, одинаково и достигало максимума к 92−100 часам культивирования.

3. Изучена последовательность расщепления клеточной стенки злаков. Показано, что сначала клеточную стенку атакуют пектолитические ферменты, затем ксилолитические и лишь потом целлюлолитические. Показано, что при разрушении клеточной стенки, где преобладают ксиланы, эндоксиланазы.

121 появляются одновременно с пектолитическими ферментами уже через 4 часа роста.

4. Исследован ксиланолитический комплекс гриба Geotrichum candidum ЗС. Показано, что 49,7% эндоксиланазной активности сорбируется на микрокристаллической целлюлозе, 45,4% эндоксиланазной активности сорбируется на 4-О-метилглюкуроноксилане из древесины березы, а 4,6% - не содержит субстратсвязывающих доменов и не связывается ни с целлюлозой, ни с 4-О-МеГК. Таким образом, среди эндоксиланаз из Geotrichum candidum ЗС также как и среди эндоксиланаз, синтезируемых другими микроорганизмами, преобладают ферменты, содержащие целлюлозосвязывающие домены. Впервые показано наличие у грибов эндоксиланазы с ксилансвязывающим доменом.

5. Получена высокоочищенная гомогенная эндоксиланаза, со степенью очистки 23 и выходом по активности 14,2%. Активность препарата по отношению к карбоксиметилксилану составляет 34,6 Е/мг белка." - -. '<

— 6. Исследованы физико-химические свойства препарата эндокиланазы. Показано, что еш молекулярная масса — 65 кДаpi — 3,74- рН-оптимум -4,0- температурный оптимум — 50 °C.

7. Впервые выделена грибная эндоксиланаза, способная связываться с ксиланом. Изучены ее физико-химические свойства: Кт — 14, 1 мг/млрН оптимум — 4,0. Показано, что выделенная эндоксиланаза является типичным эндоферментом и неспецифичной ксиланазой.

8. Впервые выделен КСД грибной эндоксиланазы. Его молекулярная масса составляет 30 кДа.

9. Изучено действие ферментного препарата Целлокандин — II Г10х из Geotrichum candidum ЗС-106 на роспуск влагостойкой макулатуры и ускорение обезвоживания бумажной массы. Показано, что применение препарата ускоряло как роспуск бумажной макулатуры до целлюлозных волокон, так и процесс обезвоживания целлюлозной суспензии.

Показать весь текст

Список литературы

  1. ., Брэй Д., Льюис Дж. Молекулярная биология клетки. -М.: Мир, 1994. Т. 3. С. 362−444.
  2. В. А. Выделение и свойства эндоглюканаз и ксиланаз Chaetomium cellulolyticum. Дис. канд. хим. наук. М.: МГУ, 1999. 175 С.
  3. X. А. Исследование топологических- эндоглюканаз и ксиланаз ферментных комплексов Penicillium verruculosum и Trichoderma reesei. Дис. канд. хим. Наук. М.: МГУ, 1999. 170 С.
  4. A.M., Килимник А. Ю., Родионова Н. А., Капрельянс Л. В., Неустроев К, Н. Выделение и свойства арабинофуранозидазы из Geotrichum candidum ЗС. //Биохимия. 1993. Т. 58. № 6. С. 845−851.
  5. И.М., Кривова А. Ю. Технология ферментных препаратов. -М.: Элевар, 2000. 512 С. ,
  6. М., Уэбб Э. Ферменты.- М.: Мир, 1982, ТТ. 1,2, 801 С.
  7. Р., Элиот Д., Элиот У., Джонс К. Справочник биохимикаг М:Мир, 1991: С.123−138. — -. ¦ ^
  8. В. Л. Введение в энзимологию. М.: Наука, 1986: 336 С.
  9. Номенклатура ферментов. М: ВИНИТИ, 1979.-320 С.
  10. М.Л., Мельник М. С. Целлюлазы микроорганизмов// Успехи биологической химии.- 2000. Т. 40. С. 205−266.
  11. Н. А., Безбородов А. М. О локализации систем ферментов, катализирующих расщепление полисахаридов растительных клеточных стенок у высших растений. Пектиназы. //Прикладная биохимия и микробиология. -1997. Т. 33, № 5, с. 467−487.123
  12. Н.А., Горбачева И. В., Буйвид В. А. Фракционирование и очистка эндо-1,4-Р-ксиланаз и экзо-1,4-Р-ксилозидаз Aspergillus niger// Биохимия.-1977, Т. 42, № 4, с. 659−671.
  13. Н. А., Горбачева И. В!, Тавобилов И. М. Ксиланаза Aspergillus niger.// В сборнике «Проблемы биоконверсии растительного сырья» Ред. Скрябин Г. К., Головлев Е. Л., Клесов А. А. М.: Наука, 1988. С. 237−271.
  14. Н.А., Капрельянс Л. В., Середницкий П. В., Килимник А. Ю. Гемицеллюлозы зерна злаков и ферменты, катализирующие их расщепление. //Прикладная Биохимия и микробиология. -1992. Т. 28. С. 645 665.
  15. М. М., Kaneko S., Wang Q., Yura К., Go M., Hayash К. Capacity of thermomonospora alba XylA to impart thermostability in family F/10 chimeric xylanases // Enzyme and Microbial Technology. 2001. — V. 28 — P. 8−15.
  16. Albersheim P. The primary cell wall. // Plant Biochemistry.- 1976.- P. 225−274.
  17. Albersheim P. Concerning the structure and biosynthesis of the primary cell walls of plant. // Biochemistry of carbohydrate II Int. Rev. Biochem. Baltimor MD. — 1978. -V. 16.-P. 127−150.124
  18. Ali Mursheda К., Kimura Т., Sakka К., Ohmiya К. The multidomain xylanase XynlOB as a cellulose-binding protein in Clostridium stercorarium.// FEMS Microbiology Letters.- 2001.- V. 198. P. 79−83.
  19. Awano Т., Takabe K. and Fujita M. Xylan deposition on secondary wall of Fagus crenata fiber. // Protoplasma. -2000. -V. 219. -P. 127−150.
  20. Baipai P. Application of the pulp and paper industry//, Biotechnol.Progr. -1999.-V.15.-P.2147−2157.
  21. Beg Q. К., Kapoor M., Mahajan L., Hoondal G. S. Microbial xylanases and their industrial applications: a review. // Appl Microbiol Biotechnol. 2001. -V. 56. — P. 326−338.
  22. Biely P. Microbial xylanolytic systems. // Trends Biotechnol. 1985 -V: 3, -P. 288−290. .V, ¦ •
  23. Biely P. Biochemical aspects of the production of microbial hemicellulases. //Hemicellulose and Hemicellulases. 1993. -P. 29−51.
  24. Biely P., Vrsanska M., Tenkanen M., Kluepfel D. Endo-P-1,4-xylanase families: differens in catalitic properties. //J. of Biotech. 1997. V. 57. P. 151−156.
  25. Bray M.R., Jonson P.E., Gilkes N.R., Mcintosh L.P., and Kilbern D.C., Warren R.A. Probing the role of tryptophan residues in a cellulose-binding domain by chemical modification. // Protein Sci. -1991.-№ 5. P. -2311−2318.125
  26. Bryden W.L., Hew Y. L.I., Ravindran V. Mollah Influence of exogenous xylanase supplementation on apparent metabolisable energy and amino acid digestibility in wheat for broiler chickens. // Animal Feed Science and Technology.-1998.- V. 75. P. 83−92.
  27. Cao. Y, Tan H. Effects of cellulase on modification of cellulose. // Cabohydrate Research. 2002. -V. 337,-P. 1291−1296.
  28. Chavez R., Navarro C., Calderon I., Peirano A., Bull P., Eyzaguirre J. Secretion of endoxylanase A from Penicillium purpurogenum by Saccharomyces cerevisiae transformed with genomic fungal DNA. // FEMS Microbiology Letters -V. 2002.-V. 212-P. 237−241.
  29. L.P., Szakacs G., Rele M.V. & Balakrishnan H. Screening of cellulase-free fungal xylanases and evaluation of their performance on sulfitedissolving pulp. // Biotechnology Techniques -1999. -V. 13. -P. 313−316.
  30. Daniel R., Frangos Т., Bullen D., Bergquist P. Hemicellulolytic and cellulolytic functions of the domains of a b-mannanase cloned from aldicellosiruptor- saccharolyticus. // The Int. J. of Biochem. And Cell Biology.-1999. -V. 31. -P. 853 859.
  31. Dourado F., M. Mota, H. Pala and F. M. Gama. Effect of cellulase adsorption on the surface and interfacial properties of cellulose. // Cellulose-1999.-V. 6.-P. 265−282. ч
  32. Dupon C., Roberge M., Shareck F., Morosou F., Kluepfel D. Substrate binding domains of glycanases from Streptomyces lividans: characterization of xylan-binding domains. // Biochem. J. -1998. -V. 330. P.41−45.
  33. Durrand R., Rascle C., Fevrre M. Molekular characterization of Xyn 3, a member of the endoxylanase multigene family of the rumen anaerobic fungus Neocallimastix frontalis. // Curr. Genet. -1996. -V. 30. -P. 531−540.
  34. M. S., Martin J. C. & Flint H. J. Expression of a cellulase gene, celA, from the rumen fungus Neocallimastix patriciarum in Streptococcus bovis by means of promoter fusions. // Biotechnology Letters -2002. -V. 24 -P. 735−741.126
  35. Eriksson K-E. Past directions and future posibilities for biotechnology and pulp and paper industry. // 7th International Conference on Biotechnology in the Pulp and Paper Industry. Vancouver, Canada. -1998. -P. A7-A10.
  36. Flint H.J., Martin J., McPherson C.A., Daniel A.S., Zhang J.X. A bifunctional enzyme, with separate xylanase and glukanase domains, encoded by the xylanase D gene of Ruminococcus flavefaciens. // J. Bacterid. 1997. — V. 175. -P. 2943−2951.
  37. Fry S. C. The Growing Plant Cell Wall: Chemical and Metabolic Analysis.//Essex: Longma Sci. and Technical. 1988.- 333 P.
  38. Gilbert H.J., Hazlewood G.P. Bacterial cellulases and xylanases. // J. Gen. Microbiol. 1993.-V.139.-P. Г87−194. — - - - - ' r
  39. Gilkes N. R., Henrissat B. A., Kilburn D. C., Miller R. C., Warren R. A. Domains in microbial fM, 4-glucanases conservation, function and enzyme families. // J. Microbiol. — 1991. — V. 55. — P. 303−315.
  40. R.C., Kuhadm В. В., Hoondal G.S. Improved xylanaseproduction from a haloalkalophilic Staphylococcus sp. SG-13 using inexpensive agricultural residues. World Journal of Microbiology & Biotechnology//- 2001. -V. 17. «P. 5−8. V:.-. ,., L. ,.
  41. Henrissat B. and Bairoch A. New families in the classication of glycosyl hydrolases based on amino acid sequence similarities. // Biochem. J. 1993. — V. 293.-P. 781−788.
  42. Henrissat B. and Bairoch A. Updating the sequence-based classication of glycosyl hydrolases. // Biochem. J. 1996. — V. 316. — P. 695−696.127
  43. Hari К., Rao S., Babu J., Reddy D. Studies on the production and application of cellulase from Trichoderma reesei QM-9414. // Bioprocess Engineering-2000. V. 22. — P. 467−470.
  44. Henrissat B. A. Classification of glycosyl hydrolases on amino acid similarities. // Biochem. J. -1990. -V. 280. -P.309−316.
  45. Huyghebaert G. The effect of a wheat-fat-interaction on the efficacy of a multi-enzyme preparation in broiler chicken. //Animal Feed Scince and Technology. 1997. -Y. 68. -P. 55−66. .
  46. Kebir H., Dupont C., Morosoli R. Increased xylanase production in Streptomyces lividans after replacement of the signal peptide: dependence on box and inverted repeat sequence. // Biochimica et Biophysica Acta. 2000. -V. 1491. -P. 177−184.
  47. Laemmli U. K. Cleavage of structure proteins during the assembly of the head of bacteriophage T 4. //Nature. 1970. — Vol. 277. — P. 680−685.
  48. J., Wernerus H., Samuelson P., Teeri Т. Т., Stahl S. Directed immobilization of recombinant staphylococci on cotton bers by functional display of128a fungal cellulose-binding domain. //FEMS Microbiology Letters. 2001. -V. 195. -P. 197−204.
  49. Leggio L. L., Kalogiannis S., Eckert K., Teixeira S.C.M., Bhat M. K., Andrei C., Pickersgill R. W., Larsen S. Substrate specicity and subsite mobility in T. aurantiacus xylanase 10A. // FEBS Letters. -2001. V. 509. — P. 303−308.
  50. Lemos M.A., Teixeira J.A., Mota M., Gama F.M. A, simple method toseparate cellulose-binding domains of fungal cellulases after digestion by a protease. // Biotechnology Letters. 2000. -V. -22. -P. 703−707.
  51. Liab K., Azadi P., Collins R, Tolan J., Sunwoo J. K., Eriksson К. -E. Relationships between activities of xylanases and xylan structures. // Enzyme and Microbial Technology. -2000. V. 27. — P. 89−94.
  52. Matoh Т., Akaike R., Kobayashi M. A sensitive and convenient assay for boron in plant using chromotropic acid and HPLC. // Plant and Soil. 1997. — V. 192.-P.l 15−118.
  53. McAllister K. A., Marrone L., Clarke A. J. The role of tryptophan residues in substrate binding to catalytic domains A and В of xylanase С from129
  54. Fibrobacter succinogenes S85.1 I Biochimica et Biophysica Acta. 2000. — V. 1480. -P. 342−352.
  55. Mitsumori M.- Minato H. Identication of the cellulose-binding domain of Fibrobacter succinogenes endoglucanase F. // FEMS Microbiology Letters. -2000.-V. 183.-P. 99−103.
  56. Morosoli R., Roy C., Yaguchi M. Isolation and partial primary sequence of a xylanase from the yeast Cryptococcus albidus. // Biochem. Biophys. Acta. -1986. -V. 840. -P. 473−478.
  57. Nath D., Mala R. pH dependent conformational and structural changes-of xylanase from an alkalophilic thermophilic Bacillus sp (NCIM'59). // Enzyme and ~ Microbial Technology. -2001. — V. 28. — P. 39703.
  58. T. Oksanen, Pere J., Paavilainen L., Buchert J., Viikari L. Treatment of recycled kraft pulps with Trichoderma reesei hemicellulases and cellulases. // Journal of Biotechnology. -2000. V. 78. — P. 39−48.
  59. Painter T. J. Isolation of oligosaccharides in improved yield by the enzymatic degradation of polysaccharides. // Canad. J. Chem. 1959. — V. 37. — P. 497−499.130
  60. Pere J., Puolakka A., Nousiainen P., Buchert J. Action of purified Trichoderma reesei cellulases on cotton fibers and yarn. // Journal of Biotechnology. -2001.-V. 89. P. 247−255.
  61. Perez Vendrell A.M., Cosson Т., Gonzalez Т., Rene D., Taillade P., Brufau J. Enzymatic assays for xylanase and |3-glucanase feed enzymes. // Animal Feed Science and Technology. 1999. — V. 77. — P. 345−353.
  62. Pommier J. C, Fuentes J.- L., Goma G. Using enzymes to improve the process and product quality in the recycled paper industry. Part I. // Tappi J. — 1989. -V. 6. P. — 187−191.
  63. Pommier J.C., Gong G. J., Fuents J.-L., Ronsset Т., Jokinen O. Using enzymes to improvethe processahd product quality». Part II. // Tappi J. Г990. — V. 73.-P. 192:202... -
  64. Prade R.A.- Xylanases: from biology to biotechnology. // Biotechnol. Genet. Eny. Rev. 1995. — V. 13.- P. 187−194. '
  65. Puis J. Chemistry and biochemistry of hemicelluloses: relationship between hemicellulose structure and enzymes required for hydrolysis. // Macromol. Symp. 120. 1997. -P. — 183−196.
  66. Quentin M., VM., Ebbelaar J., Derksen C., Mariani H., Van der Valk. Description of a cellulose-binding domain and a linker sequence from Aspergillus fungi. // Appl Microbiol Biotechnol. 2002. — V. 58. — P. 658−662.
  67. Rao M., Kulkarni N., Shendye A. Molecular and biotechnological aspects of xylanases. // FEMS Microbiology Reviews. 1999. — V. 23. — P. 411−456.
  68. Siedenberg D., Gerlach S.R., Czwalinna A., Schugerl K., Giuseppin M.L.F., Hunik J. Production of xylanase by Aspergillus awamorion complex medium in stirred tank and airlift tower loop reactors. // Journal of. Biotechnology. -1997.-V. 56.-P.205−216.
  69. Somogyi M. Determination of reducing sugar. // J. Biol. Chem. 1945. V. 160. — № 1. — P. 61−68.
  70. Somogyi M. Determination of reducing sugar. // J. Biol. Chem. 1952. -V. 195.-№ 1.-P. 19−28.
  71. Subramaniyan S., Prema P. Cellulase-free xylanases from Bacillus and other microorganisms. // FEMS Microbiology Letters. 2000. — V. 183. P. 1−7.
  72. Subramaniyan S., Sandhia G.S., Prema P. Control of xylanase production without protease activity in Bacillus sp. by selection of nitrogen source. // Biotechnology Letters. 2001. — V, 23. — P. 369−371. fi^fe
  73. Sutton В., Ellis D. Implementing clonal proppagation and genetic engineering implications for pulp and paper. // 7th International Conference on Biotechnology in the Pulp and Paper Industry. Canada. — 1998. -A29-A31.
  74. Teleman A., Tenkanen M., Jacobs A., Dahlman O. Characterization of 0-acetyl-(4−0-methylglucurono)xylan isolated from birch and beech. // Carbohydrate Research. 2002. — V. 337. — P. 373−377.
  75. Timell Т.Е. Enzymatic Hydrolysis of a 4-O-methyl-glucuronoxylan from the wood of white birch. // Svensk Papperstidn. 1962. — V. 65. — P. 435−449.
  76. Tolan J.S., Vega R. The use of enzymes to decrease the Cl2 requirements in pulp bleaching. // Pulp and Paper Canada. -1995. V.96. — P. 107 110.
  77. Tomme P., Gilkes N.R., Robert C.MJr., Warren A.J., Kilburn D.G. An internal cellulose-binding domain mediates adsorption of an engineered bifunctional xylanase/cellulase. // Protein Eng. 1994. — V, 7. — P. 117−123.
  78. Tseng M.-J., Yap M.-N., Ratanakhanokchai K., Kyu K. L. Purification and characterization of two cellulase free xylanases from an alkaliphilic Bacillus firmus. // Enzyme and Microbial Technology. 2002. — V. 30. — P. 590−595.
  79. Tuula T. Fibre modification in nature: modes of action of cellulolytic enzymes. // 7th International Conference on Biotechnology in the Pulp and Paper Industry. Canada. — 1998. — A171-A174.
  80. Urgun M., Unyayar A., Nalcaci O.B. Alternative source and technology of the production of pulp and paper. // 7th International Conference on Biotechnology in the Pulp and Paper Industry. Canada. — 1998. — C175-C178.133
  81. Van TilbeurghH., Tomme P., Claeyssens M., Bhikhabhai R. Pettersson G. Limited proteolysis of the cellobiohydrolase I from Trichoderma reesei. Separation of functional domains. //FEBS Lett. 1986. — V. 204. — P. 223−227.
  82. Warren R. Microbial hydrolysis of polysaccharides. // Annu. Rev. Microbiol. 1996.-№ 50. — P. 183−212. .
  83. Warren R, Boraston A., Kilburn D., Stalbrand H. Mannanase Man26A from Cellulomonas 0mi has. a marman-binding module, // FEMS Microbiology Letters. 2000. — V. 183. -P. 265−269. — 7: —: .
  84. Whitaker J. R., Granum P. Determination based on difference in absorbance at 235 and 280 nm. // Analyt. Biochem. 1980. — V. 109: — P. 156−159.
  85. White Т., Thibault L" Watkinson J., Sung W., Yaguchi M., Wood M., Huang F. Protein engineerimg of xylanase for pulp bleaching application. // FEMS Microbiology Reviews. 1994. — V.13. — P.335−350.
  86. Wilson C. M. Quantitive determination of sugars on paper chromatograms. // Analit. Chem. 1959. — V. 131. — P. 7−12.
  87. Wingfield M. Diopulping of sugarcane bagasse: improvement of the semi-alkaline sulfite antraquinone progress. // 7th International Conference on Biotechnology in the Pulp and Paper Industry. Canada. — 1998. — B53-B55.
  88. Wong K.Y., Maringer U. Substrate hydrolysis by combinations of Trichoderma xylanases. // World Journal of Microbiology & Biotechnology. 1999. -V. 15.-P. 23−26.134
  89. Wong К., Saddler J. N. Applications of hemicellulases in the food feed and pulp and paper industries. // In Hemicellulose and Hemicellulases. 1992. P. 127−143.
  90. Wright J.D. Future directions and research needs of the pulp and paper industry. // 7th International Conference on Biotechnology in the Pulp and Paper Industry. Canada. — 1998. — A3-A6.
  91. Xiao Z., Gao P., Qu Y., Wang T. Cellulose-binding domain of endoglucanase III from Trichoderma reesei disrupting the structure of cellulose. // Biotechnology Letters. 2001. — V. 23. -P. 711−715.
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?