Π 1983 Π³ΠΎΠ΄Ρ Π°Π΄Π°ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠ΅Ρ
Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ ΡΠ²Π΅ΡΠ΄ΠΎΡΠ°Π·Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΠ€Π Π΄Π»Ρ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ Π»ΠΈΠΌΡΠΎΠΈΠ΄Π½ΡΡ
ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ, ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΡΡΠΈΡ
Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π° ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π½ΡΠΈΠ³Π΅Π½Ρ (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΈΠ½Ρ), in vitro. ΠΠ΅ΡΠΎΠ΄ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΠ» Π½Π°Π·Π²Π°Π½ΠΈΠ΅ ELISPOT (ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ ΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ½ΡΡ
Π·ΠΎΠ½ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΡΠ΅Π½). ΠΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΉ ΠΏΡΠΈΠ½ΡΠΈΠΏ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°:
- 1. ΠΠ° ΠΏΠΎΠ²Π΅ΡΡ
Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΡΡΠΈΡΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π»ΡΠ½ΠΊΠΈ (ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡ 24-Ρ
Π»ΡΠ½ΠΎΡΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠ°Π½Π΅Π»ΠΈ Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ) ΡΠΎΡΠ±ΠΈΡΡΡΡ Π°Π½ΡΠΈΠ³Π΅Π½Ρ ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π°, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΡΠ»ΡΠΆΠ°Ρ «Π»ΠΎΠ²ΡΡΠ΅ΡΠ½ΡΠΌΠΈ» ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ.
- 2. ΠΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΡΡ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ Π»ΠΈΠΌΡΠΎΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ, ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΡΡ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΠ°ΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΈ 37 Β°C, Π΄Π°Π²Π°Ρ ΠΈΠΌ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ Π·Π°Π½ΡΡΡ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΌΠ΅ΡΡΠΎ ΠΈ Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΡ ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΎΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΡ. ΠΠ½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π° ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π½ΡΠΈΠ³Π΅Π½Ρ, ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ ΡΠ°ΠΊΠΈΠΌΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°ΠΌΠΈ, ΡΠ»Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°ΡΡΡΡ Π°Π΄ΡΠΎΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π½Π° ΡΠ²Π΅ΡΠ΄ΠΎΠΉ ΡΠ°Π·Π΅ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ.
- 3. ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΄Π°Π»ΡΡΡ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡ Π΄Π»Ρ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠΌΡΠ²Π°ΡΡΠΈΠΉ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡ Ρ Π΄Π΅ΡΠ΅ΡΠ³Π΅Π½ΡΠΎΠΌ, Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΡΡΡΠΈΠΌ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ.
- 4. Π£ΡΠ°ΡΡΠΊΠΈ Π½Π°ΠΊΠΎΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΎΡΠ½ΡΡ
ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΎΡΠ²Π»ΡΡΡ, Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΡ ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Π½ΡΠ΅ Ρ ΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠΌ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π° (Π°Π½ΡΠΈΠ³Π»ΠΎΠ±ΡΠ»ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½Ρ).
- 5. ΠΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΡΡ ΡΠΌΠ΅ΡΡ ΡΡΠ±ΡΡΡΠ°ΡΠ° Ρ Π°Π³Π°ΡΠΎΠ·ΠΎΠΉ (ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ ΡΡΠ±ΡΡΡΠ°ΡΡ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΡΡΡΡΡ Π² Π°Π³Π°ΡΠΎΠ·Π΅ ΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²ΡΠ²Π°ΡΡ Π½Π΅ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠΈΠΌΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΡ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ), Π½Π° ΠΏΠΎΠ²Π΅ΡΡ
Π½ΠΎΡΡΠΈ ΡΠ²Π΅ΡΠ΄ΠΎΠΉ ΡΠ°Π·Ρ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΡΡΡΡ ΠΊΠΎΡΠΈΡΠ½Π΅Π²ΡΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π³ΠΎΠ»ΡΠ±ΡΠ΅ ΠΏΡΡΠ½Π° (Π² Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΎΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΡ
ΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΈ ΡΡΠ±ΡΡΡΠ°ΡΠΎΠ²), Π²ΡΡΠ²Π»ΡΡ ΡΡΠ°ΡΡΠΊΠΈ, Π³Π΄Π΅ ΡΠ°ΡΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π»ΠΈΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ.
ΠΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π²ΡΠΈΠ΅ΡΡ ΠΏΡΡΠ½Π° ΠΏΠΎΠ΄ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°ΡΡ ΠΏΠΎΠ΄ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠΎΠΌ, ΡΡΠΎ ΠΈ Π±ΡΠ΄Π΅Ρ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΡΡΠΈΡ
ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ.
Π ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ ΡΠ²Π΅ΡΠ΄ΠΎΠΉ ΡΠ°Π·Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½Π° Π½ΠΈΡΡΠΎΡΠ΅Π»Π»ΡΠ»ΠΎΠ·Π½Π°Ρ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Π° Π ΡΡΠΎΠΌ ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ Π΅ΡΡΡ ΡΡΠ΄ ΠΏΡΠ΅ΠΈΠΌΡΡΠ΅ΡΡΠ²: ΠΈΠ·-Π·Π° Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΉ Π°Π΄ΡΠΎΡΠ±ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΠ¦Π ΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ Π·Π½Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΌΠ΅Π½ΡΡΠ΅Π΅ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ Π°Π½ΡΠΈΠ³Π΅Π½Π°, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Π² ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ «Π»ΠΎΠ²ΡΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ» ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°, ΠΊΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΠΎΡΠΏΠ°Π΄Π°Π΅Ρ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ
ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΡ Π²ΠΎ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π°Π³Π°ΡΠΎΠ·Ρ Π² ΡΡΠ±ΡΡΡΠ°Ρ.
ΠΡΠΈ ΠΏΠ°ΡΠ°Π»Π»Π΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΌ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΡΡΠΈΡ
ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½ΡΠΈΠ³Π΅Π½Π° ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π° Π² Π»ΡΠ½ΠΊΠ΅, ΡΡΠΎ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΡΠΈ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ±ΡΡΡΠ°ΡΠ°, ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²ΡΡΠ²ΠΈΡΡ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Π²Π΅ΡΠ΅ΡΡΠ²Π° Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΎΠΉ.
ΠΠ°Π½Π½ΡΠΉ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ Π½Π°ΡΠ΅Π» ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΎΠ΅ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ, ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΡΡΠΈΡ
Π°Π½ΡΠΈΠ³Π΅Π½, ΡΠ»Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΡΠΉ Π°Π΄ΡΠΎΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π°ΠΌΠΈ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΡΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ, ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΡΡΠΈΡ
ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΈΠ½Ρ (ΠΠ-1, ΠΠ-2, ΠΠ-4, ΠΠ-6, ΠΠ€Π-Ρ, Π€ΠΠ-Π°).