Новые высокоэффективные ферментные препараты для гидролиза пектин-и целлюлозосодержащих субстратов на основе рекомбинантных штаммов грибов рода Penicillium
Диссертация
Одним из основных этапов переработки отходов растительного происхождения является превращение сложных полисахаридов клеточной стенки растений в простые сахара. Эффективность проведения этого процесса определяет выход конечного продукта и экономическую целесообразность процесса переработки растительного сырья в целом. Основу клеточной стенки растений с высоким содержанием пектиновых веществ… Читать ещё >
Содержание
- СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
- ГЛАВА 1. ПЕКТИН- И ЦЕЛЛЮЛОЗОСОДЕРЖАЩИЕ МАТЕРИАЛЫ
- 1. 1. Строение клеточной стенки растений с высоким содержанием пектиновых веществ
- 1. 2. Состав пектин-и целлюлозосодержащих материалов
- 1. 3. Виды технологической схемы переработки пектин- и целлюлозосодержащих отходов
- ГЛАВА 2. ПРОДУЦЕНТЫ МУЛЬТИФЕРМЕНТНЫХ КОМПЛЕКСОВ
- 2. 1. Преимущества грибных штаммов
- 2. 2. Рекомбинантные штаммы гриба Penicillium verruculosum
- 2. 2. 1. Основные компоненты комплекса внеклеточных ферментов гриба P. verruculosum
- 2. 2. 2. Этапы получения и возможности применения реципиентных штаммов P. verruculosum BlniaD^HFlOniaD"
- 2. 3. Рекомбинантные штаммы гриба Penicillium canescens
- 2. 3. 1. Основные компоненты ферментного комплекса гриба P. canescens
- 2. 3. 2. Возможности применения реципиентного штамма P. canescens RN3−11−7 niaDH для создания штаммов-продуцентов
- 2. 4. Пектолитические ферменты
- ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕНИЕ ШТАММОВ-ПРОДУЦЕНТОВ
- 3. 1. Этапы создания штамма-продуцента
- 3. 2. Системы переноса генов
- 3. 2. 1. Селективные маркеры
- 3. 2. 2. Интеграция трансформированной ДНК
- 3. 3. Трансформация мицелиальных грибов
- 3. 3. 1. Методы получения протопластов различных видов мицелиальных грибов
- 3. 3. 2. СаСЬ/ПЭГ трансформационный метод 39 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
- 4. 1. Используемые плазмидные конструкции
- 4. 2. Реактивы для клонирования генов целевых белков
- 4. 3. Реактивы и оборудование для трансформации мицелиальных грибов СаС12/ПЭГ методом
- 4. 4. Использованные ферментные препараты
- 4. 5. Субстраты и реактивы для анализа
- 4. 6. Клонирование методом независимого лигирования
- 4. 7. Получение протопластов и трансформация реципиентных штаммов
- 4. 8. Тесты на стабильность секреции целевых ферментов
- 4. 9. Культивирование грибных штаммов
- 4. 10. Методы определения активностей
- 4. 11. Определение концентрации белка
- 4. 12. Гидролиз свекловичного жома
- 4. 13. Определение концентрации восстанавливающих Сахаров, глюкозы, арабинозы
- 4. 14. Методы выделения и очистки белков
- 4. 15. Определение рН- и температурного оптимумов действия ферментов
- 4. 16. Изучение термостабильности ферментов 51 РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
- 5. 1. 1. Плазмиды для трансформации штамма P. canescens RN3−11−7 niaD ()
- 5. 1. 2. Плазмиды для трансформации реципиентного штамма P. verruculosum BI niaD () 54 5.3. Скрининг трансформантов, отбор штаммов-продуцентов
- 5. 3. 1. Культивирование рекомбинантных штаммов
- 5. 3. 2. Первичный скрининг трансформантов
- 5. 3. 3. Тестирование штаммов-продуцентов на стабильность секреции целевых ферментов
- 6. 1. Сравнение гидролитической активности коммерческих ферментных препаратов и ферментных препаратов, полученных с помощью реципиентных штаммов, к свекловичному жому
- 6. 2. Результаты гидролиза свекловичного жома смесями гомогенных ферментов
- 6. 3. Сравнение гидролитической активности новых ферментных препаратов по отношению к свекловичному жому
- 6. 4. Результаты гидролиза цитрусовых и яблочных выжимок культуральной жидкостью созданных штаммов P. canescens, являющихся продуцентами пектинлиазы, эндо-1,4-р-глюканазы и Р-глюкозидазы
- 7. 1. Оптимум Т и рН стабильность новых ферментных препаратов
- 7. 2. Компонентный состав ферментных препаратов, полученных с помощью рекомбинантных штаммов гриба Penicillium canescens
- 7. 3. Свойства рекомбинантной эндо-1,5-а-арабиназы
- 7. 4. Компонентный состав ферментных препаратов, полученных с помощью штаммов гриба Penicillium verruculosum
Список литературы
- Kaparaju P.L., Rintala J.A. Termophilic anaerobic digestion of industrial orange waste //Environ. Technol. -2006. -V. 27. -P. 623−633.
- Lopez J.A., Li Q., Thomson I.P. Biorefinery of waste orange peel //Crit. Rev. in Biotech. -2010. -V. 30. -P. 63−69.
- Bustos G., Moldes A.B., Cruz J.M., Dominigues J.M. Production of fermentable media from vine-trimming wastes and bioconversion into lactic acid by Lactobacillus pentosus //J. Sci. Food Agric. -2004. -V. 84. -P. 2105−2112.
- Li Q., Siles J.A., Tompson I.P. Siccinic acid production from orange peel and wheat straw by batch fermnetation of Fibrobacter succinogenes S85 //Appl. Microbiol. Biotechnol. -2010. -V. 88. -P. 671−678.
- Asagbra A.E., Sanni A.I., Oyewole O.B. Solid state fermentation production of tetracycline by Streptomyces strains using some agricultural wastes as substrate //World J. Microbiol. Biotechnol. -2005. -V. 21. -P. 107−114.
- Tripodo M.M., Lanuzza F., Micali G., Coppolino R. Citrus waste recovery: a new environmentally friendly procedure to obtain animal feed //Bioresour. Technol. -2004. -V. 91.-P.111−115.
- Silva D., da Silva Martins E., da Silva R., Gomes E. Pectinase production by Penicillium viridicatum RFC3 by solid state fermentation using agricultural wastes and agro-industrial by-products //J. Microbiol. -2002. -V. 91, -P. 318−324.
- Mamma D., Kourtoglou E., Christakopoulos P. Fungal multienzyme production on industrial by-products of the citrus-processing industry //Bioresour. Technol. -2008. -V. 99. -P. 2373−2383.
- Renewable Fuels Association. Acelerating Industry Innovation. Ethanol Industry Outlook. /Renewable Fuels Association. -2012. -3, 8, 10, 22 and 23 p.
- BP Statistical Review of World Energy /bp.com/statistical review. -2011. -39 p.11. van Den Brink J., de Vries R.P. Fungal enzyme sets for plant polysaccharide degradation//Appl. Microbiol. Biotechnol. -2011. -V. 91. -P. 1477−1492.
- Wilkins M.R., Widmer W.W., Grohmann K., Cameron R.G. Hydrolysis of grapefruit peel waste with cellulase and pectinase enzymes //Bioresour. Technol. -2008. -V. 98. -P. 1596−1601.
- Boluda-Aguilar M., Garcia-Vidal L., Del Pilar Gonsalez-Castaneda F., Lopez-Gomez A. Mandarin peel wastes pretreatment with steam explosion for bioethanol production //Bioresour. Technol. -2010. -V. 101. -P. 3506−3513.
- Синицына О.А., Бухтояров Ф. Е., Гусаков А. В., Окунев О. Н., Беккаревич А. О., Винецкий Ю. П., Синицын А. П. Выделение и свойства основных компонентов внеклеточного ферментного комплекса Penicillium canescens //Биохимия. -2003. -Т. 68. -С. 1494−1505.
- Carpita N., Mccann M.C. The cell wall //Biochem. and Molec. Biol, of plants. -2000. -V. 29. -P. 52−108.
- Растительная клеточная стенка как динамичная система /Горшкова Т.А. М.: Наука, 2007. -429 с.
- Zykwinska A., Thibault J.F., Ralet M.C. Competitive binding of pectin and xyloglucan with primary cell wall cellulose //Carbohydr. Polym. -2008. -V. 74. -P. 957−961.
- Carpita N.C., Mccann M.C. The functions of cell wall polysaccharides in composition and architecture revealed through mutations //Plant Soil. -2002. -V. 274. -P. 7180.
- Vorwerk S., Somerville S., Somerville C. The role of plant cell wall polysaccharide compositionin disease resistance //Trend Sin Plant Science. -2004. -V. 9. -P. 203−209.
- Mohnen D. Pectin structure and biosynthesis //Curr. Opin. Plant Biol. -2008. -V. 11.-P. 266−277.
- Caffalla K.H., Mohnen D. The structure, function, and biosynthesis of plant cell wall pectic polysaccharides //Carbohydrate Res. -2009. -V. 344. -P. 1879−1900.
- Yincken J., Schols H.A., Oomen R.J., Mccann M.C. If homogalacturonan were a side chain of rhamnogalacturonan I. Implications for cell wall architecture //Plant. Physiol. -2003. -V. 132.-P. 1781−1789.
- O’neill ma Ishii Т., Albersheim P., Darvill Ag. Rhamnogalacturonan II: structure and function of a borate cross-linked cell wall pectic polysaccharide //Annu. Rev. Plant. Biol.2004. -V. 55. -P. 109−39.
- Matsunaga Т., Ishii Т., Matsumoto S. Occurrence of the primary cell wall polysaccharide ramnogalacturonan II in pteridophytes, lycophytes and bryophytes. Implication for the evolution of vascular plants //Plant Physiol. -2004. -V. 134. -P. 339−351.
- Arnous A., Meyer A.S. Quantitative prediction of cell wall polysaccharide composition in grape (Vitis vinifera L.) and apple (Malus domestica) skins from acid hydrolysis monosaccharide profiles //Agric. Food Chem. -2009. -V. 57. -P. 3611−3619.
- Kurita O., Fujiwara Т., Yamazaki E. Characterization of the pectin extracted from citrus peel in the presence of citric acid //Carbohydr. Polym. -2008. -V. 74. -P. 725−730.
- Taherzadeh M.J., Karimi K. Pretreatment of lignocellulosic wastes to improve ethanol and biogas production: a review //Int. J. Mol. Sci. -2008. -V. 9. -P. 1621−1651.
- Edwards M.C., Doran-Peterson J. Pectin-rich biomass as feedstock for fuel ethanol production//Appl. Microbiol. Biotechnol. -2012. -V. 95. -P. 565−575.
- Wilkins M.R., Widmer W.W., Cameron R.G., Grohmann K. Effect of seasonal variations on enzymatic hydrolysis of Valencia orange peel //Proc. Fla State Hort. Soc.2005. -P. 419−422.
- Ферменты в производстве пищи и кормов /Кислухина. О.В. М.: ДеЛи-принт, 2002. -273 с.
- Micard M., Renard C., Thibault J.F. Enzymatic saccharification of sugar-beet pulp //Enzyme and Microb. Technol. -1996. -V. 19. -P. 162−170.
- Hutnan M., Drtil M., Mrafkova L. Anaerobic biodegradation of sugar beet pulp //Biodegradation. -2000. -V. 11. -P. 203−211.
- Matora A.V., Korshunova V.E., Shkodina O.G., Zhemerichkin D.A., Ptitchkina N.M. Morris E.R. The application of bacterial enzymesfor extraction of pectin from pumpkin and sugar beet //Food Hydrocolloids. -1995. -V. 9. -P. 43−46.
- Handbook of food enzymology /Whitaker J.R., Voragen A.G., Wong D. New York: Marcel Dekker Inc. Basel, 2003. 1108 p.
- Cosgrove D.J. Growth of the plant cell wall. Nat. Rev //Mol. Cell Biol. -2005. -V. 6. -P. 850−861.
- Cardoso P.G., Ribeiro J.B., Teixeira J.A., De Queiroz M.V. Overexpression of the plgl gene encoding pectin lyase in Penicillium griseoroseum //J. of Industrial Microbiol, and Biotech. -2008. -V. 35, -P. 159−166.
- Olofsson K., Bertillson M., Liden G. A short review on SSF an interesting process option for ethanol production from lignocellulosic feedstocks //Biotechnology for Biofuels. -2008. -V. 1. -P. 7−14.
- Zhisheng Y., Hongxun Z. Ethanol fermentation of acid-hydrolyzed cellulosic pyrolysate with Saccharomyces cerevisiae //Bioresour. Technol. -2003. -V. 90. -P. 95−100.
- Stavrinides A.J., Phipps D. A., Al-Shamma'a A. Current and developing lignocellulosic pretreatment methods for bioethanol production. BEAN (Built Environment & Natural Environment) 5th Annual Conference. Liverpool, UK. 2010. -233 p.
- Martens-Uzunova E.S. Schaap P.J. Assessment of the pectin degrading enzyme network of Aspergillus niger by functional genomics //Fungal Genet. Biol. -2009. -V. 46. -P. 170−179.
- Deboy R.T., Mongodin E.F., Fouts D.E., Tailford L.E. Insight into plant cell wall degradation from the genome sequence of the soil bacterium Cellvibro japonicus //J. of Bacteriology. -2008. -V. 190. -P. 5455−5463.
- Morozova V.V., Gusakov A.V., Andrianov R.M., Pravilnikov A.G., Osipov D.O., Sinitsyn A.P. Cellulases of Penicillium verruculosum //Biotechnol. J. -2010. -V. 5. -P. 871−880.
- Синицына О.А., Федорова E.A., Правильников А. Г., Рожкова A.M. Выделение и свойства ксилоглюканаз Penicillium sp //Биохимия. -2010. -Т. 75. -С. 52−62.
- Короткова О.Г., Семенова М. В., Морозова В. В., Зоров И. Н., Бубнова Т. М., Окунев О. Н., Синицын А. П. Выделение и свойства грибных р-глюкозидаз //Биохимия. -2009. -Т. 74. -С. 699−709.
- Зоров И.Н., Гусаков А. В., Баразненок В. А., Беккаревич А. О., Окунев О. Н., Синицын А. П., Кондратьева Е. Г. Выделение и свойства целлобиазы из Penicillium verruculosum //Прикл. биохим. микробиол. -2001.-Т. 37. -С. 687−693.
- Скомаровский А.А., Марков А. В., Гусаков А. В., Кондратьева Е. Г., Окунев О. Н., Беккаревич А. О., Матыс В. Ю., Синицын А. П. Новые целлюлазы для высокоэффективного гидролиза лигноцеллюлозной биомассы //Прикл. биохимия и микробиол. -2006. -Т. 6. -С. 674−680.
- Короткова. О.Г. Получение целлюлазных комплексов с увеличенной осахаривающей способностью на основе рекомбинантных штаммов Penicillium verruculosum. M.: МГУ. 2011. -171 с.
- Klyosov А.А. Trends in biochemistry and enzymology of cellulose degradation //Biochem. -1990. -V. 129. -P. 10 577−10 585.
- Szakacs G., Reczey K., Hernadi P., Dobozi M. Penicillium verruculosum WA 30 a new source of cellulase //European J. Appl. Microbiol. Biotechnol. -1981. -V. 11. -P. 120−124.
- Короткова О.Г., Рожкова A.M., Матыс Ю. В. и др. Получение комплексных биокатализаторов на основе ферментных препаратов из рекомбинантного гриба
- Penicillium verruculosum и применение их в гидролизе отходов деревообрабатывающей промышленности //Катализ в промышленности. -2011. -Т. 5. -С. 61−68.
- Синицына О.А., Федорова Е. А., Вакар И. М. и др. Выделение и свойства а-галактозидаз Penicillium canescens //Биохимия. -2008. -Т. 73. -С. 119−130.
- Синицына О.А., Федорова Е. А., Семенова М. В. и др. Выделение и свойства внеклеточной пектинлиазы Penicillium canescens //Биохимия. -2007. -Т. 72. -С. 699−706.
- Серебряный В.А., Вавилова Е. А., Чулкин А. М., Винецкий Ю. П. Клонирование гена эндо-1,4-Р-ксиланазы Penicillium canescens получение мультикопийных штаммов //Прикл. биохим. и микробиол. -2002. -Т. 38. -С. 495−501.
- Чулкин А.М., Вавилова Е. А., Беневоленский C.B. Транскрипционный регулятор углеродной катаболитной репрессии Cre, А мицелиального гриба Penicillium canescens //Молекулярная биология. -2010. -Т. 44. -С. 1−11.
- Рожкова А.М., Волков П. В., Кондратьева Е. А., Сатрутдинов А. Д. и др. Создание продуцентов биотехнологически важных ферментов на основе рекомбинантного штамма гриба Penicillium canescens //Хранение и переработка сельхозсырья. -2010. -Т. 7. -С. 37−39.
- Jensen M.H., Otten H., Christensen U. et ail. Structural and biochemical studies elucidate the mechanism of rhamnogalacturonan lyase from Aspergillus aculeatus //J. Mol. Biol. -2010. -V. 404. -P. 100−111.
- Yadav S., Kumar P., Yadav D. et ail. Pectinlyase: a review //Proc. Biochem. -2009. -V. 44.-P. 1−10.
- Семенова M.В., Гришутин С. Г. и Синицын А.П. Выделение и свойства пектиназ из гриба Aspergillus japonicus //Биохимия. -2003. -Т. 68. -С. 686−697.
- Sharma N., Rathore M., Sharma M. Microbial pectinase: sources, characterization and applications //Rev. Environ. Sci. Biotechnol. 2012. in publishing: DOI 10.1007/sl 1157−129 276−9.
- Вавилова Е.А., Винецкий Ю. Л. Индукция синтеза эндо-1,4-/?-ксиланазы и ß--галактозидазы в исходных рекомбинантных штаммах гриба P. canescens //Прикл. биохим. и микробиол. -2003. -Т. 39. -С. 167−172.
- Aleksenko A.Y., Makarova N.A., Nikolaev I.V. et all. Integrative and replicative transformation of Penicillium canescens with a heterologous nitrate-reductase gene //Curr. Genet. -1995. -V. 28. -P. 474−477.
- Brygoo Y., Debuchy R. Transformation by integration in Podospora anserina I. Methodology and phenomenology //Mol. and Gen. Genet. -1985. -V. 200. -P. 128−131.
- Ballance D.J., Turner G. Gene cloning in Aspergillus nidulans: isolation of iscitrate lyase gene {acuD) //Molec. and General Genetics. -1986. -V. 202. -P. 271−275.
- Tilburn J., Scchazzocchio C., Taylor G.G. et all. Transformation by integration in Aspergillus nidulans //Gene. -1983. -V. 26. -P. 205−221.
- Buxton F.P., Gwynne D.I. and Davies R.W. Transformation of Aspergillus niger using the argB gene of Aspergillus nidulans //Gene. -1985. -V. 37. -P. 207−214.
- Durrens P., Green P.M., Arst H.N. and Scchazzocchio C. Heterologous insertion of transforming DNA and generation of new deletions associated with transformation in Aspergillus nidulans //Mol. and Gen. Genet. -1986. -V. 203. -P. 544−549.
- Horng J.S., Linz J.E. and Pestka J.J. Cloning and characterization of the trpC gene from an aflatoxigenic strain of Aspergillus parasiticus //Appl. and Env. Microbiol. -1989. -V. 55.-P. 2561−2568.
- Kelly J.M., Hynes M.J. Transformation of Aspergillus niger by the amdS gene of Aspergillus nidulans //J. EMBO -1985. -V. 4. -P. 475−479.
- May G.S., Gambino J., Weatherbee J.A. and Morris N.R. Identification and functional analysis of ?-tubulin genes by site-specific integrative transformation in Aspergillus nidulans Hi. of Cell Biol. -1985. -V. 100. -P. 712−718.
- Kolar M., Punt P.J., van Den Hondel C.A.M.J.J. and Schwab H. Transformation of Penicillium chrysogenum using dominant selection markers and expression of an Escherihia coli lacZ fusion gene //Gene. -1988. -V. 62. -P. 127−134.
- Banks G.R. Transformation of Ustilago maydis by a plasmid containing yeast 2 micron DNA //Curr. Genet. -1983. -V. 7. -P. 73−77.
- Ward M., Wilson M.J., Carmona C.L. and Turner G.. The oliC3 gene of Aspergillus niger: isolation, sequence and use as a selectable marker for transformation //Curr. Genet. -1988. -V. 14. -P. 37−42.
- Carramolino L., Lozano M., Perez-Arando A. et all. Transformation of Penicillium chrysogenum to sulfonamide resistance //Gene. -1989. -V. 77. -P. 31−38.
- Orbach M.J., Porro E.B. and Yanofsky C. Cloning and characterization of the gene for |3-tubulin from a benomyl-resistant mutant of Neurosporra crassa and its use as a dominant selectable marker //Mol. And Cell Biol. -1986. -V. 6. -P. 2452−2461.
- Varadarajalu L.P., Punekar N.S. Cloning and use of sC as homologous marker for Aspergillus niger transformation //J. Microbiol. Methods. -2005. -V. 61. -P. 219−224.
- Fontaine Т., Simenel C., Dubreucq G. et all. Molecular organization of the alkali-insoluble fraction of Aspergillus fumigatus cell wall //J. Biol. Chem. -2000. -V. 275. -P. 27 594−27 607.
- Bernard M., Latge J.P. Aspergillus fumigatus cell wall: composition and biosynthesis //Med. Mycol. -2001. -V. 39. -P. 9−17.
- Ito H., Fukuda Y., Murata K. and Kimura A. Transformation of intact yeast cells treated with alkali cations Hi. Bacteriol. -1983. -V. 153. -P. 163−168.
- Suzuki S., Tada S., Fukuoka M. et all. A novel transformation system using a bleomycin resistance marker with chemosensitizers for Aspergillus oryzae //Biochem. Biophys. Res. Commun. -2009. -V. 29. -P. 42−47.
- Gruber S. and Seidl-Seiboth V. Self versus non-self: fungal cell wall degradation in Trichoderma //Microbiology. -2012. -V. 158. -P. 26−34.
- Haakana H., Miettinen-Oinonen A., Joutsjiki V. et all. Cloning of cellulase genes from Melanocarpus albomyces and their efficient expression in Treechoderma reesei //Enzyme and Microbial Technol. -2004. -V. 72. -P. 159−167.
- Kubodera Т., Yamashita N. and Nishimura A. Transformation of Aspergillus sp. and Trichoderma reesei using the pyrithiamine resistance gene (ptrA) of Aspergillus oryzae //Biosci. Biotechnol. Biochem. -2002. -V. 66. -P. 404−406.
- Meyer V., Mueller D., Strowig T. et all. Comparison of different transformation methods for Aspergillus giganteus //Curr. Genet. -2003. -V. 43. -P. 371−377.
- Gruber F., Visser J., Kubicek C.P. and de Graaf L.H. Cloning of the Trichoderma reesei pyrG gene and its use as a homologous marker for a high-frequency transformation system//Curr. Genet. -1990. -V. 18. -P. 447−451.
- Mach R.L., Schindler M., Kubicek C.P. Transformation of Trichoderma reesei based on the hygromycin В resistance using homologous expression signals //Curr. Genet. -1994. -V. 25. -P. 567−570.
- Aslanidis C.J., de Jong P. Ligation-independent cloning of PCR products (LIC-PCR) //Nucleic. Asid. Research. -1990. -V. 18. -P. 6069−6075.
- Методы изучения и свойства целлюлолитических ферментов /Синицын А.П., Черноглазов В. М. и Гусаков А. В. М.: Биотехнол, 1993. -152 с.
- Doner L.W., Irwin P.L. Assay of reducing end groups in oligosaccharide homologues with 2,2'-bicinchoninate //Anal. Biochem. -1992. -V. 202. -P. 50−53.
- Collmer A. and Reid J. Assay methods for pectic enzymes. //Methods in enzymology. Academic Press. -1988. -V. 161, part B. -P. 329−335.
- Pitt D. //Methods in enzymology. Academic Press. -1988. -V. 161, part B. -P. 353−359.
- Справочник биохимика. /Досон P., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. М.: Мир, 1991. -481 с.
- Березин И.В., Рабинович М. Л., Синицын А. П. Исследование возможностей кинетического спектрофотометрического метода определения глюкозы //Биохимия. -1977.-Т. 42.-С. 1631−1636.
- Martens-Uzunova E.S. and Schaap P.J. Assessment of the pectin degrading enzyme network of Aspergillus niger by functional genomics //Fungal. Genet. Biol. -2009. -V. 46. -P. 170−179.
- Morozova V.V. Gusakov A.G., Andrianov R.M., Pravilnikov A.G., Osipov D.O., Sinitsyn A.P. Cellulases of Penicillium verruculosum //Biotechnol. J. -2010. -V. 5. -P. 8 718 801. БЛАГОДАРНОСТИ