Получение антигена МРВ83 Mycobacterium bovis для диагностики туберкулеза животных методом ИФА
Диссертация
Получены устойчивые гибридомы S2H6G4, продуцирующие монокло-нальные антитела S2H6G4 против антигена МРВ83 M. bovis 8, относящиеся к подклассу иммуноглобулинов IgG2b. Моноклональные антитела S2H6G4 обладают высокими константами диссоциации (2,5×10″ 9) и распознают специфическую антигенную детерминанту на антигенах микобактерий туберкулезного комплекса, оставаясь нейтральными к антигенам… Читать ещё >
Содержание
- 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
- 1. 1. Эпизоотическая ситуация по туберкулёзу в России
- 1. 2. Современные методы диагностики туберкулёза животных
- 1. 3. Иммуногенетический аспект противотуберкулезного гуморального ответа
- 1. 4. Применение моноклональных антител в диагностике туберкулеза животных
- 1. 5. Антигены, применяемые в лабораторной диагностике туберкулеза животных
- 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
- 2. 1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
- 2. 1. 1. Материалы
- 2. 1. 2. Методы
- 2. 2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
- 2. 2. 1. Получение хроматографических фракций микобактерий разных видов и исследование их белкового состава
- 2. 2. 2. Получение моноклональных антител против антигена МРВ83 Mycobacterium bovis и изучение их иммунобиологических свойств
- 2. 2. 3. Выявление в хроматографических фракциях микобактерий разных видов антигена МРВ83 с помощью моноклональных антител S2H6G
- 2. 2. 4. Определение видоспецифичности антигена МРВ для микобактерий
- 2. 2. 5. Разработка тест-системы ИФА для диагностики туберкулеза животных
- 2. 2. 6. Оценка специфичности и чувствительности разработанной тест-системы ИФА с использованием сывороток крови здоровых и больных туберкулезом коров
- 2. 2. 7. Расчет себестоимости приготовления тест-системы ИФА для диагностики туберкулеза животных и определение экономической эффективности ее применения в сравнительном аспекте
- 2. 1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Список литературы
- Авдиенко В.Г. Анализ специфичности антимикобактериальных моно-клональных антител и химической природы их антигенных детерминант /Авдиенко В.Г., Кондратов С. Ю., Ляшенко С. М. //Пробл. туберк. 1996. — № 1.-С. 40−44.
- Авдиенко В.Г. Тканеповреждающее действие антимикобактериальных антител /Авдиенко В.Г., Кондрашов С. Ю. //Тез. докл. мат. научно-практич. конференции Российского НИИ Фтизиопульмонологии.- М.: Российская туб. ассоциация, 1995.-С. 1−2.
- Авдиенко В.Г. Серологические и иммунохимические свойства угле-водсодержащей фракции из Mycobacterium tuberculosis H37Rv /Авдиенко В.Г., Кондрашов С. Ю., Куликовская Н. В. //Пробл. туберк. 1998. — № 6. — С. 54−57.
- Авдиенко В.Г. Повышение эффективности иммунодиагностики туберкулеза путем применения моноклональных антител против IgG класса иммуноглобулинов человека /Авдиенко В.Г.- Кондрашов С.Ю.- Куликовская Н. В. //Клин. лаб. диагн. 1999. -№ 6. — С. 22−24, 33−35.
- Авербах М. М. Иммунология и иммунопатология туберкулеза /Авербах М. М. //М.: Медицина. 1976. — С. 30.
- Аликаева А.П. Методика исследования кормов, фекалий, почвы и другого материала из внешней среды для выявления микобактерий /Аликаева А. П. //Бюллетень ВИЭВ. 1979. — Вып. 34. — С. 29−30.
- Андросова М.В. Иммунологический метод идентификации M.tuberculosis и M. bovis BCG на основе применения моноклональных антител /Андросова М.В., Владимирский М. А., Алексеева Г. И. //Проблемы туберкулеза. -1989.-№ 6.-С. 12−16.5
- Бардисявичене И.А. Сравнительная эффективность ВАСТЕС 460 ТВ и ИФА в диагностике туберкулеза легких /Бардисявичене И.А., Сосновская A.M. //Сб.науч.тр.: Проблемы ускоренной бактериологической диагностики туберкулеза.- Обнинск.- 1996.-С.35.
- Басыбеков С.Д. Животные источники микобактериозов у человека /Басыбеков С.Д., Благодарный Я. А., Жанузаков Н. Ж. //Алма-Ата: Кайнар. -1985.- 78 с.
- Безгин В.М. Изучение иммунобиологических свойств растворов туберкулина при длительном хранении /Безгин В.М. //Сб. науч. тр. ВИЭВ. -вып.73. 1990.-375 с.
- Беклемишев Н.Д. Иммунитет и аллергия /Беклемишев Н.Д. //Иммунология. 1983,-№ 6.-С. 78−81.
- Билько И.П., Матусевич В. Г. Современные представления об ультраструктуре и функции клеточной стенки микобактерий туберкулеза /Билько И.П., Матусевич В. Г. //Пробл. туберк.- 1986. № 9. — 93 с.
- Благодарный Я.А. Источники туберкулеза и меры профилактики /Благодарный Я. А. //Алма-Ата: Казахстан. 1980. — 173 с.
- Вдовий Б.П. Изучение антигенных свойств некоторых фракций туберкулезных микобактерий в РСК и РДСК /Вдовий Б.П., Журнакова М. А. //Труды Ленинградского ветеринарного института. 1967.- Вып.5.- 28 — 39 с.
- Вейсфейлер Ю.К. Биология и изменчивость микобактерий туберкулеза и атипичные микобактерии /Вейсфейлер Ю.К. //Будапешт: Академия наук Венгрии. 1975. — 115 с.
- Вишневская Е.Б. Особенности выделения ДНК для ПЦР при туберкулезе внелегочных локализаций /Вишневская Е.Б. //Проблемы туберкулеза. -1998. № 5.-С.23−26.
- Вишневская Е.Б. Проблемы ПЦР-диагностики внелегочного туберкулеза/ Вишневская Е. Б. //В сб.: Генодиагностика в современной медицине.-Материалы 3-ей Всероссийской конференции, — М.- 2004.-С.281−282.
- Вишневский Б.М. Чувствительность и специфичность теста, основанного на полимеразной цепной реакции, при диагностике туберкулеза периферических лимфатических узлов /Вишневский Б.М., Мирлина Е. Д. //Проблемы туберкулеза. 1998. — № 4.-С.25−28.
- Вишневский П.П. Туберкулез крупного рогатого скота /Вишневский П.П. //М.: Сельхозгиз. 1937. — 97−99 с.
- Владимирский М.А. Иммунологические и биотехнологические методы в повышении эффективности диагностики и лечения туберкулеза /Владимирский М.А. //Автореф. дисс. доктора мед. наук. М. — 1993.
- Дзадзиева М.Ф. Диагностическая ценность ПЦР при туберкулезе /Дзадзиева М.Ф., Жербутович Н. В. //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1997. — № 5.-С.10−13.
- Драбкина P.O. Микробиология туберкулеза /Драбкина P.O. //М.: Мед-гиз. 1963.-255 с.
- Здродовский П.Ф. Проблемы инфекции, иммунитета и аллергии /Здродовский П.Ф. //М.: Медицина. 1969. — 178 с.
- Земскова З.С. Скрыто протекающая туберкулезная инфекция /Зем-скова З. С, Дорожкова И. Р. //М.: Медицина. 1984. — 256−258 с.
- Зыков М.П. Микробиология туберкулеза /Зыков М.П. //JL: Медицина. 1976.-38−41 с.
- Зыков М.П. Потенциально патогенные микобактерии и лабораторная диагностика микобактериозов /Зыков М.П., Ильина Т. Б. //М.: Медицина. -1978.- 87 с.
- Кадочкин A.M. Атипичные микобактерии и их роль в сенсибилизации животных к туберкулину /Кадочкин A.M., Ткачев-Кузьмин А.В. //Бюллетень ВИЭВ. 1983.-Вып. 51 -22 с.
- Каграманов А.И. Учение о возбудителе туберкулеза /Каграманов А.И. //Проблемы туберкулеза. 1967. — № 11. — 57 с.
- Каграманов А.И. О взаимосвязи туберкулеза человека и сельскохозяйственных животных /Каграманов А.И. //Проблемы туберкулеза. 1968. -№ 2. — 94 с.
- Калюк А.Н. Комплексные бактериологические исследования в диагностике туберкулеза /Калюк А.Н. //Туберкулез и экология. 1995. — № 3.-С.28−31.
- Кассич Ю.Я. Иммунизация животных против туберкулеза с применением различных вакцин /Кассич Ю.Я., Дикий И. Л., Шаров А. Н., Новиков Г. П., Сегал Л. С. //Вестник с.-х. науки. 1981. — № 3. — С. 113−116.
- Кассич Ю.Я. Пастеризация молока при туберкулезе методом инфракрасного электронагрева /Кассич Ю.Я., Позднякова В. Н., Хоменко В. И. //Ветеринария. 1986. — № 12. — 118 с.
- Качалова С.П. Меры борьбы и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота /Качалова С.П. //Ветеринария. 1987. — № 8. — 125 с.
- Козлов B.C. Биологические свойства микобактерий разных видов, выделенных из почвы /Козлов B.C. //Проблемы туберкулеза. 1982. — № 3. -79 с.
- Козлов Н.Н. Изменения у свиней при поражении атипичными мико-бактериями /Козлов Н.Н., Пыльдвере К. И. //Ветеринария. 1982. — № 6. — 87 с.
- Козулицыпа Т.И. Генетические процессы у микобактерий /Козули-цына Т.И., Козлова Н. В. //Проблемы туберкулеза. 1983. — № 11. — 133 с.
- Козулицына Т.И. Микробиологические исследования /Козулицыпа Т.И. //В руководстве для врачей: Туберкулез органов дыхания.- М.-1981.-С.136−149.
- Колычев Н.М. Атипичные микобактерии показатель качества дезинфекции /Колычев Н.М. //Ветеринария. — 1982. — № 7. — 147 с.
- Колычев Н.М. О сохранении вирулентности микобактерий во внешней среде /Колычев Н.М. //Ветеринария. 1987. — № 5. — 58 с.
- Колычев Н.М. Дезинфекция почвы при туберкулезе /Колычев Н.М., Сухотина В. П. //Ветеринария. 1983. — № 4. — 34 с.
- Коромыслов Г. Ф. Состояние системы Т- и В-лимфоцитов при туберкулезе /Коромыслов Г. Ф., Солодовников B.JI. //Ветеринария. 1982. — № 7. -47−49 с.
- Коромыслов Г. Ф. Состояние и перспективы научных разработок по туберкулинодиагностике крупного рогатого скота /Коромыслов Г. Ф., Овди-енко Н.П., Устинова Г. И. //Бюллетень ВИЭВ. 1983. — Вып. 51. — 18с.
- Косенко В.И. Влияние обработки патологического материала на высе-ваемость микобактерий туберкулеза. /Косенко В.И., Кадочкин A.M., Тажга-лиев Н.М. //Ветеринария. 1984. — № 5. — 34 с.
- Кузин А.И. Оздоровление животноводческих хозяйств от туберкулеза /Кузин А.И. //М.: Россельхозиздат. 1987. — 67−72 с.
- Кузина J1.H. К вопросу взаимосвязи туберкулеза человека и животных /Кузина JI.H., Беличенко С. А. //Проблемы туберкулеза. 1984. — № 12. -78 с.
- Куликовская Н.В. Получение и характеристика моноклональных антител к микобактериям smegmatis и kansassii /Куликовская Н.В.- Капица М.А.- Калинина О.А.- Черноусова JI.H. //Пробл.Туберк. 1996. -№ 1. — С.43−46.
- Лакман Э.Д. РСК с антигеном Сибирского НИВИ в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота /Лакман Э.Д., Шлыгин И. В. //Труды Сибирского н.-и. ветеринарного института Омск: СНИВИ. — 1975. — В. XXII. -С. 58−61.
- Лакман Э.Д. РСК при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота /Лакман Э.Д. //Ветеринария. 1981. — № 4. — С. 31−32.
- Латышев А.С. Опыт борьбы с туберкулезом /Латышев А. С, Шаповалов М. Б. //Ветеринария. 1985. — № 10. — С. 24−27.
- Лысенко А.П. Иммунохимический анализ хроматографических фракций М. bovis и М. tuberculosis /Лысенко А.П. //Ветеринария. 1987.- № 12. -С. 17−19.
- Мирлина Е.Д. Диагностические возможности метода ПЦР при гени-тальном туберкулезе у женщин /Мирлина Е.Д., Ланцов В. А. //Проблемы туберкулеза. 1998. — № 1.-С.22−26.
- Мартма О.В. Характеристика и патогенность для крупного рогатого скота микобактерий, выделенных из торфа /Мартма О.В. //Ветеринария. -1967.- № 6. С. 59.
- Мартма О.В. Современное состояние проблемы атипичных микобактерий в ветеринарии. /Мартма О.В. //Ветеринария. 1982. — № 5. -С. 60−61.
- Маслов Е.В. Оптимизация непрямого иммуно-ферментного анализа для выявления антител к М. bovis /Маслов Е.В., Бойко А. А., Хорьков И. А. //Ветеринария. 1986. — № 10. — С.89−92.
- Меве Е.Б. Туберкулинодиагностика /Меве Е.Б. //Минск: Беларусь.197. -220−247 с.
- Найманов А.Х. Туберкулинизация крупного рогатого скота /Найма-нов А.Х. //ветеринария. 1980. — № 6. — С. 37.
- Нечваль И.Т. Туберкулез свиней: диагностика и меры борьбы /Неч-валь И.Т. //ветеринария. 1982. — № 6. — С.40.
- Никаноров Б.А. Роль микобактерий человеческого и птичьего типов в эпизоотологии туберкулеза маралов /Никаноров Б.А. //Ветеринария. -1969. -№ 1. С.56−57.
- Овдиенко Н.П. Применение РНГА для дифференциальной диагностики неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота /Овдиенко Н.П., Козин И. А. //Труды ВИЭВ. -1979. -Т. 43. -С.147−152.
- Овдиенко Н.П. О кратности введения туберкулина крупному рогатому скоту /Овдиенко Н.П., Щуревский В. Е., Найманов А. Х., Якушева О. В. //Ветеринария. -1987. -№ 8. -С. 52−53.
- Овдиенко Н.П. Пальпебральная проба при туберкулезе крупного рогатого скота /Овдиенко Н.П., Нуратинов Р. А., Найманов А. Х., Кочаров П. Э. //Ветеринария. -1987. -№ 8. -С. 21−22.
- Поддубский И.В. Эпизоотология туберкулеза животных и организационные формы борьбы с ним /Поддубский И.В. //Вопросы эпидемиологии, эпизоотологии и дезинфекции при туберкулезе М.: Медицина. — 1968. -С. 69−94.
- Прокопьева Н.И. Выживаемость микобактерий туберкулеза в почве и методы ее обеззараживания в условиях Якутии /Прокопьева Н.И. //Туберкулез крупного рогатого скота и меры борьбы с ним /Сб. науч. трудов Новосибирск. -1986. -С. 124−128.
- Ротов В.И. Туберкулез сельскохозяйственных животных /Ротов В.И., Кокуричев П. И., Савченко П. Е., Трач Ю. А. //Киев: Урожай. -1978. -С. 117.
- Рубцова И.Н. Измененные формы микобактерий в организме животных и их значение в бактериологической диагностике туберкулеза /Рубцова И.Н. //Бюллетень ВИЭВ. -1983. -Вып. 51. -С. 13−14.
- Савенков В.И. Место генодиагностики в лабораторных методах исследования туберкулеза /Савенков В.И., Шишхов Д. М., Ященко В. В. //В сб.: Генодиагностика в современной медицине.- Материалы 3-ей Всероссийской конференции.- М.- 2000.-С.287−290.
- Сафин М.А. Современные методы диагностики и меры борьбы с туберкулезом животных /Сафин М.А., Индрисов Г. З. //Казань татарское книжное издательство. -1992. -С. 189−240.
- Сафин М.А. Вакцинация БЦЖ и противотуберкулезные мероприятия /Сафин М.А. //Ветеринария. -1982. -№ 11. -С. 17−18.
- Свиридов В.Д. Изучение иммуногенных свойств атипичных микобактерий в сравнении с БЦЖ/Свиридов В. Д. //Ветеринария. -1989. -№ 1. -С.27.
- Тузова Р.В. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птицы /Тузова Р.В. //Минск: Ураджай. -1983. -С. 14−20.
- Туркебаева К.А. Патологическая анатомия туберкулеза млекопитающих и виды микобактерий /Туркебаева К.А., Благодарный Я. А. //Алма-Ата: Наука.-1981.-С.214.
- Урбан В.П. О природе повторных вспышек туберкулеза /Урбан В.П. //Ветеринария. 1982. — № 10. — С. 19.
- Урбан В.П. О кратности туберкулиновой пробы у крупного рогатого скота в неблагополучных хозяйствах /Урбан В.П., Хайкин Б. Я., Ходун J1.M. //Ветеринария. -1988. -№ 12. -С.31−32.
- Фадеева Н.И. Значение состава внутриклеточных белков в таксономии микобактерий туберкулеза /Фадеева Н.И., Дыхно М. М., Кочемасова З. Н //Пробл. Туберк. -1981. -№ 3. -С.43−44.
- Федосеев B.C. Противотуберкулезные мероприятия в мараловодстве /Федосеев В. С, Рубцова И. П., Омарбеков Е. О., Кириленко Н. Г. //Ветеринария. -1982. -№ 4. -С.23.
- Федосеев B.C. Изменчивость возбудителя туберкулеза и ее связь с эпизоотическим состоянием /Федосеев B.C. //Бюллетень ВИЭВ. -1983. -Вып. 51.-С.29.
- Филимонов А.В. Причины повторного возникновения туберкулеза крупного рогатого скота в оздоровленных хозяйствах /Филимонов А.В. //Бюллетень ВИЭВ. -1981. -Вып.43. -С. 16−17.
- Хазипов Н.З. Туберкулез крупного рогатого скота /Хазипов Н.З., Са-фин М.А., Идрисов Г. З. //М.: Агропромиздат. -1985. -47−88 с.
- Хайкин Б.Я. Туберкулез пушных зверей /Хайкин Б.Я. //Омск: Западно-Сибирское книжное изд-во, Омское отделение. -1976. -С.31.
- Хоменко А.Г., Ерохин В. В. Современные представления о строении микобактерий туберкулеза /Хоменко А.Г., Ерохин В. В. //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -1982. -№ 12. -С.39−40.
- Черноусова J1.H. Аффинное выделение микобактериальных антигенов на моноклональных антителах /Черноусова J1.H.- Суранова Е.Д.- Калинина О. А. //Пробл. туберк. -1995. -№ 2. -С.39−42.
- Черноусова Л.Н. Исследование характеристик антигенной структуры различных микобактерий /Черноусова Л.Н.- Голышевская В.И.- Калинина О. А. //Бюл. эксп. биол. мед. -1998. -№ 125. -С. 329−331.
- Шаров А.Н. К вопросу диагностики туберкулеза /Шаров А.Н. //Ветеринария. -1982. -№ 9. -С. 40−44.
- Шаров А.Н. Интрапальпебральная туберкулиновая проба у мелкого рогатого скота /Шаров А. Н. //Ветеринария. -1986. -№ 8. -С. 19.
- Щуревский В.Е. О научных основах борьбы с туберкулезом /Щуревский В.Е., Плотников Э. С. //Ветеринария. -1973. -№ 1. -С.39−41.
- Щуревский В.Е. Атипичные микобактерии и их патогенность для сельскохозяйственных животных /Щуревский В.Е., Овдиенко Н. П., Кадочкин A.M. //Ветеринария. -1978. -№ 4. -С. 17−20.
- Щуревский В.Е. Патологоанатомическая диагностика туберкулеза /Щуревский В.Е., Якушева О. В., Овдиенко Н. П., Шаров В. А. //Ветеринария.-1980. -№ 10. -С.27−30.
- Щуревский В.Е. Быстрорастущие атипичные микобактерии и их значение в патологии крупного рогатого скота /Щуревский В.Е., Овдиенко Н. П., Кадочкин J1.M. //Ветеринария.- 1984.- № 9.- С. 37.
- Юдин Г. А. Причины, распространение, дифференциация и профилактика неспецифических реакций на туберкулин /Юдин Г. А. //Ветеринария.1987.- № 12.- С. 34.
- Юсковец М.К. Туберкулез домашних животных и методы борьбы с ним /Юсковец М.К. //М.: Сельхозгиз.- 1976.- С. 143.
- Ярных B.C. Санитарные мероприятия в системе противоэпизоотиче-ской защиты /Ярных B.C. //Ветеринария.- 1985.- № 11.- С.23−25.
- Armbrust A. Development of an ELISA for detecting antibodies in monkeys infected with M. bovis /Armbrust A.- Thoen C.- Bruner J. //Proc. Annu. Meet. US Anim. Health Assoc. -Vol.24. -1980.- P.522−527.
- Baird P. A major antigen from Mycobacterium tuberculosis which is homologous to the heat shock proteins groES from E. coli and the htpA gene product of Coxiella burneti /Baird P.- Hall L.- Coates A. //Nuclei.Acids.Res. -1988. -Vol.16. -P.9047.
- Barbolini G. Immunohistologic analysis of mycobacterial antigens by monoclonal antibodies in tuberculosis and mycobacteriosis /Barbolini G.- Bisetti A.- Colizzi V.- Damiani G.- Migaldi M.- Vismara D. //Hum.Pathol. -1989. -Vol.20. P.1078−1083.
- Beagley K.W. The Mycobacterium-Tuberculosis 71-kDa Heat-Shock Protein Induces Proliferation and Cytokine Secretion by Murine Gut Intraepithelial Lymphocytes /Beagley K.W.- Fujihashi K.- Black P.A.- Lagoo A.S.- Yamamoto
- M.- Mcghee J.R.- Kiyono H. //Eur.J.Immunol. 1993. — Vol.238. — P.2049−2052.
- Bothamley G. Serodiagnostic value of the 19 kilodalton antigen of Mycobacterium tuberculosis in Indian patients /Bothamley G.- Batra H.- Ramesh V.- Chandramui A.- Ivanyi J //Eur.J.Clin.Microbiol.Infect.Dis. -1992. -Vol.11. P.912−915.
- Bothamley G. Association of tuberculosis and M. tuberculosis-specific antibody levels with HLA /Bothamley G.H.- Beck J.S.- Schreuder G.M.- D’Amaro J.- de Vries R.R.- Kardjito Т.- Ivanyi J. //J.Infect.Dis. -1989. -Vol.159. -P.549−555.
- Bothamley G. Clinical value of the measurement of Mycobacterium tuberculosis specific antibody in pulmonary tuberculosis /Bothamley G.- Rudd R.- Festenstein F.- Ivanyi J. //Thorax. -1992. -Vol.47. -P.270−275.
- Bothamley G. Clinical evaluation of a serological assay using a monoclonal antibody (TB72) to the 38 kDa antigen of Mycobacterium tuberculosis /Bothamley G.- Rudd R. //Eur.Respir.J. -1994. -Vol.7. -P.240−246.
- Bradford M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding /Bradford M. //Anal.Biochem. Vol.72.- 1976.- P.248−254.
- Carriere J. An apprasial of the bentonite flocculation test in the detection of bovine tuberculosis /Carriere J.- Wallace R.- Diena B. //Can.J.Comp. -Vol.37.- 1973.- P.421−423.
- Closs O. The antigens of Mycobacterium bovis, strain BCG, studied by crossed immunoelectrophoresis: a reference system /Closs O.- Harboe M.- Axelsen N. //Scand.J.Immunol. -Vol.12 (3). -1980.- P.249−263.
- Collins F. Biological activity of protein antigens isolated from Mycobacterium tuberculosis culture filtrate. /Collins F.- Lamb J.- Young D. //Infect.Immun. Vol.565.- 1988.- P.1260−1266.
- Damiani G. Generation and characterization of monoclonal antibodies to 28-, 35-, and 65-kilodalton proteins of Mycobacterium tuberculosis /Damiani G.- Biano A.- Beltrame A.- Vismara D.- Mezzopreti M. //Infect.Immun. -1988.-Vol.56.- P.1281−1287.
- Daniel T. The use of immunoabsorbents for the purification of mycobacterial antigens /Daniel Т.- Anderson P. //J.Lab.Clin.Med. -1977. -Vol.90. -P.354−360.
- De Bruyn J. The 32 kDa protein antigen of M. bovis BCG and M. tuberculosis H37Rv /De Bruyn J.- Huygen K.- Van Vooren J.- Content J.- Turneer M. //Trop.Med.Parasitol. Vol.41.- 1990.- P.331−332.
- De Bruyn J. Purification, characterization and identification of a 32 kDa protein antigen of Mycobacterium bovis BCG /De Bruyn J.- Huygen K.- Bosmans R.- Fauville M.- Lippens R. //Microb.Pathog. 1987. — Vol.2. — P.351−366.
- Deshpande R. Immunological evaluation of a 12-kilodalton protein of Mycobacterium tuberculosis by enzyme-linked immunosorbent assay /Deshpande R.- Khan M.- Navalkar R. //Tuber.Lung Dis. 1993. — Vol.74. — P.382−387.
- Drowart A. Antibody levels to whole culture filtrate antigens and to purified P32 during treatment of smear-positive tuberculosis /Drowart A.- Huygen K.- De Bruyn J.- Yernault J.- Farber P.M.- Van Vooren J.P. //Chest. 1991. — Vol.100.- P.685−687.
- Espitia C. A 38-kD Mycobacterium tuberculosis antigen associated with infection. Its isolation and serologic evaluation /Espitia C.- Cervera I.- Gonzalez R.- Mancilla R. //Clin.Exp.Immunol. Vol.77 (3).- 1989.- P.373−377.
- Fifis T. Purification and characterization of major antigens from a Mycobacterium bovis culture filtrate /Fifis Т.- Costopoulos C.- Radford A.J. //Infect.Immun. Vol.59.- 1991.- P.800−807.
- Fifis T. Purification of a Major Mycobacterium bovis antigen for diagnosis of bovine tuberculosis /Fifis Т.- Plackett P.- Corner L.A.- Wood P. //Scand. J. Immunol. Vol.29.- 1989.- P.91−101.
- Fujiwara T. Epitope mapping of twelve monoclonal antibodies against the phenolic glycolipid-I of M. Leprae /Fujiwara Т.- Minagawa F.- Sakamoto Y.- Douglas J. //Int.J.Lepr.Other Mycobact.Dis. 1997. — Vol.65. — P.477−486.
- Gaylord H. Most Mycobacterium leprae carbohydrate-reactive monoclonal antibodies are directed to lipoarabinomannan /Gaylord H.- Brennan P.- Young D.- Buchanan T. //Infect.Immun. 1987. — Vol.55. — P.2860−2863.
- Gupta S. Analysis, expression and prevalence of the Mycobacterium tuberculosis homolog of bacterial virulence regulating proteins /Gupta S.- Jain S.- Tyagi A. //FEMS Microbiol.Lett. 1999. — Vol.172. — P. 137−143.
- Haga S. Purification of MPB70 and production of specific monoclonal antibodies /Haga S.- Nakagawa M.- Nagai S.- Miura K.- Honda M. //Hybridoma
- Vol.11 (4).- 1992.- P.483−492.
- Hajeer A. Monoclonal antibody epitopes of mycobacterial 65-kD heat-shock protein defined by epitope scanning /Hajeer A.- Worthington J.- Morgan K.- Bernstein R. //Clin.Exp.Immunol. 1992. — Vol.89. — P. l 15−119.
- Нага I. Development of monoclonal antibodies reacting against mycobacterial 65 kDa heat shock protein by using recombinant truncated products /Нага I.- Sato N.- Matsuura A.- Cho J.- Qi W.- Torigoe T. //Microbiol.Immunol. 1991. -Vol.35. -P.995−1007.
- Harboe M. B-cell epitopes and quantification of the ESAT-6 protein of Mycobacterium tuberculosis /Harboe M.- Malin A.- Dockrell H.- Wiker H. //Infect.Immun. 1998. — Vol.66. — P.717−723.
- Harboe M. Immunological and biochemical characterization and classification of mycobacterial antigens /Harboe M.- Wiker H. //Lepr.Rev. 1986. -Vol.57 Suppl 2. — P.33−37.
- Harboe M. The 38-kDa protein of Mycobacterium tuberculosis: a review /Harboe M.- Wiker H. //J.Infect.Dis. 1992. — Vol.166. — P.874−884.
- Harboe M. Protein G-based enzyme-linked immunosorbent assay for anti-MPB70 antibodies in bovine tuberculosis /Harboe M.- Wiker H.- Duncan J.- Garcia M.- Dukes T. //J.Clin.Microbiol. 1990. — Vol.28. — P.913−921.
- Harboe M. Homology between the MPB70 and MPB83 proteins of Mycobacterium bovis BCG /Harboe M.- Nagai S.- Wiker H.- Sletten K.- Haga S. //Scand.J.Immunol. Vol.42 (1).- 1995.- P.46−51.
- Harboe M. Generation of antibodies to the signal peptide of the MPT83 lipoprotein of Mycobacterium tuberculosis /Harboe M.- Whelan A.- Ulvund G. //Scand.J.Immunol. Vol.55 (1).- 2002.- P.82−87.
- Harboe M. MPB70 and MPB83 as indicators of protein localization in mycobacterial cells /Harboe M.- Wiker H.- Ulvund G. //Infect.Immun. Vol.66 (1).- 1998.- P.289−296.
- Harboe M. Cross-reactions between mycobacteria. II. Crossed immu-noelectrophoretic analysis of soluble antigens of BCG and comparison with other mycobacteria /Harboe M.- Mshana R.- Closs O. //Scand.J.Immunol. Vol.9 (2).-1979.- P. 115−124.
- Hewinson R. Molecular characterization of MPT83: a seroreactive antigen of Mycobacterium tuberculosis with homology to MPT70 /Hewinson R.- Michell S.- Russell W. //Scand.J.Immunol. Vol.43 (5).- 1996.- P.490−499.
- Hutchings D. Evaluation of lymphocyte stimulation tests for diagnosis of bovine tuberculosis in elk (Cervus elaphus) /Hutchings D.- Wilson S. //Am.J.Vet.Res. Vol.56 (1).- 1995.- P.27−33.
- Jackett P. Specificity of antibodies to immunodominant mycobacterial antigens in pulmonary tuberculosis /Jackett P.- Bothamley G.- Batra H.- Mistry A.- Young D.- Ivanyi J. //J.Clin.Microbiol. 1988. — Vol.26. — P.2313−2318.
- Janicki B. A reference system for antigens of Mycobacterium tuberculosis /Janicki В.- Chaparas S.- Daniel T. //Am.Rev.Respir.Dis. Vol.104 (4).- 1971.-P.602−604.
- Kadival G. Production, characterization and species specificity of five monoclonal antibodies to Mycobacterium tuberculosis /Kadival G.- Chaparas S. //J.Clin.Microbiol. 1987. — Vol.25. — P.76−76.
- Kolk A. Production and characterization of monoclonal antibodies to Mycobacterium tuberculosis, M. bovis (BCG) and M. leprae. /Kolk A.- Ho M.- Klatser P.- Eggelte T. //Clin.Exp.Immunol. 1984. — Vol.58. — P.511−521.
- Kox L. More reliableble PCR for detection of M. tuberculosis in clinical samples /Кох L., Rhienthong D., Medo Miranda A. //J.Clin.microb.- 1994.-32.-P.672−678.
- Laemmli U. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 /Laemmli U. //Nature Vol.227 (259).- 1970.- P.680−685.
- Lassence A. Detection of mycobacterial DNA from patients with tuberculosis pleurisy by means of the PCR: comarison of two protocols /Lassence A., Leccossier D. //Thorax.- 1992.- 47.- P.265−269.
- Lee B. Characterization of the major membrane protein of virulent Mycobacterium tuberculosis /Lee В.- Hefta S.- Brennan P. //Infect.Immun. 1992. -Vol.60. — P.2066−2074.
- Ljungqvist L. Affinity purification, biological characterization and serological evaluation of defined antigens from Mycobacterium tuberculosis /Ljungqvist L.- Andersen A.- Andersen P.- Haslov K. //Trop.Med.Parasitol. 1990. — Vol.41.-P.333−335.
- Ljungqvist L. Antibody responses against Mycobacterium tuberculosis and production of monoclonal antibodies in mice /Ljungqvist L.- Worsaae A.- Heron I. //Acta Leprol. 1989. — Vol.7 Suppl 1. — P. 184−185.
- Lowrie D. Genetic vaccination against tuberculosis /Lowrie D.- Silva P.- Tascon R.E. //Springer Semin.Immunopathol. 1997. — Vol.19. — P.161−173.
- Lightbody K. Mycobacterial antigen-specific antibody responses in bovine tuberculosis: an ELISA with potential to confirm disease status In Process Citation. /Lightbody K.- Skuce R.- Neill S.- Pollock J. //Vet.Rec. Vol.142 (12).-1998.- P.295−300.
- Lind A. Immunologically based diagnostic tests, Humoral antibody methods. In: The Mycobacteria.- Kubica G.- Wayne L. /Lin M.- Sugden E.- Jolley M.- Stilwell K. //New York.- 1984.- P. 221−248.
- Lyashchenko K. Novel monoclonal antibodies against major antigens of Mycobacterium bovis /Lyashchenko K.- Wiker H.- Harboe M. //Scand.J.Immunol. Vol.53 (5).- 2001.- P.498−502.
- Manjunath N. Evalution of a PCR for the diagnosis of tuberculosis /Man-junath N., Shankar P., Rajan L. //Tubercle.- 1991.-72.- P.21−27.
- Mann P. Clinicopathological correlations of tuberculosis in large zoo mammals /Mann P.- Bush M.- Janssen D. //J.Am.Vet.Med.Assoc. Vol. 179.1981.- P. l 123−1129
- Mason P. The use of monoclonal antibodies to identify mycobacteria grown in culture in Zimbabwe /Mason P.- Gwanzura L.- Lowe O.- Kolk A. //Tuber.Lung Dis. 1993. — Vol.74. — P. 195−199.
- McNair J. Characterization of the early antibody response in bovine tuberculosis: MPB83 is an early target with diagnostic potential /McNair J.- Corbett D.- Girvin R. //Scand.J.Immunol. Vol.53 (4).- 2001.- P.365−371.
- Michell S. The MPB83 antigen from mycobacterium bovis contains O-linked mannose and (1,3) mannobiose moieties /Michell S.- Whelan A.- Wheeler P. //J.Biol.Chem. Vol.278(4).- 2003.- P. l815−1820.
- Minden P. Immunological evaluation of a component isolated from Mycobacterium bovis BCG with a monoclonal antibody to M. bovis BCG /Minden P.- Kelleher P.- Freed J.- Nielsen L. //Infect.Immun. 1984. — Vol.46. — P.519−525.
- Moraes M. Cellular immune responses to Mycobacterium tuberculosis in a patient with Takayasu’s arteritis /Moraes M.- Ordway D.- Oliveira L.- Costa I. //Rev.Port.Cardiol. 1999. — Vol.18. — P.359−367.
- Morris J. The identification of antigenic determinants on Mycobacterium bovis using monoclonal antibodies /Morris J.- Thorns P.- Woolley J. //J. Gen. Microbiol. 1985. — Vol.131. — P.1825−1831.
- Morris J. A pilot study to assess the usefulness of ELISA in detecting tuberculosis in badgers /Morris J.- Stevens A.- Stuart P.- Little T. //Vet.Rec. -Vol.104.- 1979.- P.14−18.
- Morris J. Evidence for the reaction of bovine autoantibodies with Mycobacterium bovis /Morris J.- Thorns C. //Vet.Rec. Vol. 117 (8).- 1985.- P. 169.
- Newell D. The kinetics of serum antibody responses to natural infections with Mycobacterium bovis in one badger social group /Newell D.- Clifton-Hadley R.- Cheeseman C. //Epidemiol.Infect. Vol.118 (2).- 1997.- P. 173−180.
- O’Connor S. Nucleotide sequence of the gene encoding the 35-kDa protein of Mycobacterium tuberculosis /O'Connor S.- Rumschlag H.- Mayer L. //Res.Microbiol. 1997. — Vol.141. — P.407−423.
- Orme I. T-Cell Response to Mycobacterium-Tuberculosis /Orme I.- Andersen P.- Boom W. //Inf.Dis. 1993. — Vol. l676. — P. 1481−1497
- Radford A. Epitope mapping of the Mycobacterium bovis secretory protein MPB70 using overlapping peptide analysis /Radford A.- Wood P.- Billman J. //J.Gen.Microbiol. Vol.136.- 1990.- P.265−272.
- Rambukkana A. Identification of a novel B-cell epitope of restricted specificity on the hsp 65-kDa protein of Mycobacterium tuberculosis /Rambukkana A.- Yong S.- Das P. //FEMS Microbiol.Immunol. 1991. — Vol.3. — P.39−45.
- Ranadive S. Prevalence of HIV-1 antibodies in patients attending tuberculosis clinics in Pune /Ranadive S.- Thakar M.- Kulkarni S.- Sukumaran K. //J.AssoP.Physicians.India. 1991. — Vol.39. — P.427−427.
- Richards W. The stimulating effect of tuberculin skin tests on precipitin levels in cattle /Richards W.- Ellis E.- Wright H.- van Deusen R. //Am.Rev. Respir. Dis. Vol.93.- 1966.- P.912−919.
- Ritacco V. Assessment of sensitivity and specificity of ELISA for the detection of mycobacterial antibodies in bovine tuberculosis /Ritacco V.- de Kantor I.- Barrera L. //J.Vet.Med. Vol.39.- 1987.- P. l 19−125.
- Rumschlag H. Immunologic characterization of a 35-kilodalton recombinant antigen of Mycobacterium tuberculosis /Rumschlag H.- Yakrus M.- Cohen M.- Glickman S.- Good R. //J.Clin.Microbiol. 1990. — Vol.28. — P.591−595.
- Schou P. Production and partial characterization of monoclonal hybri-doma antibodies to Mycobacterium tuberculosis /Schou P.- Yuan Z.- Andersen A.- Bennedsen J. //Acta Pathol.Microbiol.Immunol.Scand.C. 1985. — Vol.93. — P.265−272.
- Shankar P. Rapid diagnosis of tuberculosis meningites by PCR /Shankar P., Manjunath N., Mohan K. //Lancet.- 1991.-387.- P.5−7.
- Shinnick T.M. The 65-kilodalton antigen of Mycobacterium tuberculosis /Shinnick T. //J.Bacterid. 1987. — Vol.169. — P. 1080−1088.
- Seibert F. Isolation of three different proteins and two polysaccharides from tuberculin by alcohol fractionation: their chemical and biological properties /Seibert F. //Am.Rev.Tuberc. Vol.59.- 1949.- P.86−101.
- Smith R. Evaluation of diagnostic tests, and Use of diagnostic tests. In: Veterinary Clinical Epidemiology: A problem-oriented Aproach /Smith R. //Anonymous Batterworth-Heinemann: Boston.-1991,-P. 29−56.
- Sorensen A. Purification and characterization of a low-molecular-mass T-cell antigen secreted by Mycobacterium tuberculosis /Sorensen A.- Nagai S.- Houen G.- Andersen P.- Andersen A. //Infect.Immun. 1995. — Vol.63. — P. 17 101 717.
- Sugden E. Competitive and indirect enzyme-linked immunosorbent assays for Mycobacterium bovis infections based on MPB70 and lipoarabinomannan antigens /Sugden E.- Stilwell K.- Rohonczy E.- Martineau P. //Can.J.Vet.Res. -Vol.61 (1).- 1997.-P.8−14.
- Surujballi О. A fluorescence polarization assay for the detection of antibodies to Mycobacterium bovis in cattle sera /Surujballi O.- Romanowska A.- Sugden E. //Vet.Microbiol. Vol.87 (2).- 2002.- P. 149−157.
- Thoen C. Detection of mycobacterial antibodies in sera of cattle experimentally exposed to M. bovis by use of a modified ELISA /Thoen C.- Hall M.- Petersburg Т.- Harrington R. //Am. Assoc. Vet. Lab. Diagn. Vol. Proc. Ann. Meet.- 1983.- P.25−38.
- Thoen C. Use of ELISA for detecting mycobacterial antigens in tissues of M. bovis infected cattle /Thoen C.- Malstrom C.- Himes E.- Mills K. //Am.J.Vet.Res. — Vol.42.- 1981.- P. 1814−1815.
- Towbin H. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications /Towbin H.- Staehelin Т.- Gordon J. //Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. Vol.76 (9).- 1979.- P.4350−4354.
- Tsuyuguchi T. Production of monoclonal antibodies for Mycobacterium tuberculosis Aoyama-B and immunological activity of the affinity-purified antigens/Tsuyuguchi T. //Kekkaku. Vol.64 (12).- 1989.- P.761−775.
- Ulstrup J. Relationship of secretion pattern and MPB70 homology with osteoblast- specific factor 2 to osteitis following Mycobacterium bovis BCG vaccination /Ulstrup J.- Jeansson S.- Wiker H.- Harboe M. //Infect.Immun. Vol.63 (2).- 1995.- P.672−675.
- Vardamann T. The complement-fixation test for detecting tuberculosis in cattle /Vardamann Т.- Larsen A. //Am.J.Vet.Res. Vol.25.- 1964.- P.690−692.
- Vismara D. Identification of a 35-kilodalton Mycobacterium tuberculosis protein containing B- and T-cell epitopes /Vismara D.- Mezzopreti M.- Gilardini M.- Del Porto P. //Infect.Immun. 1990. — Vol.58. — P.245−251.
- Vordemeier H. Identification of T cell stimulatory peptides from the 38-kDa protein of Mycobacterium tuberculosis /Vordemeier H.- Harris D.- Roman E.- Lathigra R. //J.Immunol. 1991. — Vol.147. — P. l023−1029.
- Vordermeier H. T cell repertoire in tuberculosis: selective anergy to an immunodominant epitope of the 38-kDa antigen in patients with active disease /Vordermeier H.- Harris D.- Friscia G.- Roman E. //Eur.J.Immunol. 1992. -Vol.22.-P.2631−2637.
- Vordermeier H. Development of diagnostic reagents to differentiate between Mycobacterium bovis BCG vaccination and M. bovis infection in cattle /Vordermeier H.- Cockle P.- Whelan A. //Clin.Diagn.Lab.Immunol. Vol.6 (5).-1999.- P.675−682.
- Vosloo W. Characterisation of a lipoprotein in Mycobacterium bovis (BCG) with sequence similarity to the secreted protein MPB70 /Vosloo W.- Tip-poo P.- Hughes J.- Harriman N.- Emms M. //Gene. 1997. — Vol.188. — P. 123−128.
- Wadee, A. A 25-kDa fraction from Mycobacterium tuberculosis that inhibits leukocyte bactericidal activity: reversal by gamma interferon and clofazimine/Wadee A.//Res.Microbiol. 1990. — Vol.141. — P.249−252.
- Wadee A. A 25-kilodalton fraction from Mycobacterium tuberculosis that inhibits hexose monophosphate shunt activity, lysozyme release, and H202 production: reversal by gamma interferon /Wadee A.- Clara A. //Infect.Immun. -1989.-Vol.57.-P.864−869.
- Wallis R. Identification of antigens of Mycobacterium tuberculosis using human monoclonal antibodies /Wallis R.- Aide S.- Havlir D.- Amir-Tahmasseb M. //J.Clin.Invest. 1989. — Vol.84. — P.214−219.
- Wiker H. Immunochemical characterization of the MPB70/80 and MPB83 proteins of Mycobacterium bovis /Wiker H.- Lyashchenko K.- Aksoy A. //Infect.Immun. 1998. — Vol.66. — P. 1445−1452.
- Wilkins E. Potential value of serology for diagnosis of extrapulmonary tuberculosis see comments. /Wilkins E.- Ivanyi J. //Lancet Vol.336 (8716).-1990.- P.641−644.
- Wilcke J. Clinical evaluation of MPT-64 and MPT-59, two proteins secreted from Mycobacterium tuberculosis, for skin test reagents /Wilcke J.- Jensen В.- Ravn P. //Tuber.Lung Dis. 1996. — Vol.77. — P.250−256.
- Wilkins E. A rapid, simple enzyme immunoassay for detection of antibody to individual epitopes in the serodiagnosis of tuberculosis /Wilkins E.- Bothamley G.- Jackett P. //Eur.J.Clin.Microbiol.Infect.Dis. 1991. — Vol.10. -P.559−563.
- Wood P. Production and characterization of monoclonal antibodies specific for Mycobacterium bovis /Wood P.- Ripper J.- Radford A. //J.Gen.Microbiol. 1988. — Vol.134. — P.2599−2599.
- Wood P. In vitro immunodiagnostic assays for bovine tuberculosis /Wood P.- Rothel J. //Vet.Microbiol. Vol.40 (1−2).- 1994.- P. 125−135
- Worsaae A. Monoclonal antibodies produced in BALB. B10 mice define new antigenic determinants in culture filtrate preparations of Mycobacterium tuberculosis /Worsaae A.- Ljungqvist L.- Heron I. //J.Clin.Microbiol. 1988. -Vol.26.-P.2608−2614.
- Wurche T. Differentiation of M. tuberculosis and M. avium complex using various monoclonal antibodies. /Wurche Т.- Wagner S.- Mauch H. //Pneu-mologie. 1990. — Vol.44 Suppl 1. — P.455−457.
- Wiker H. A family of cross-reacting proteins secreted by Mycobacterium tuberculosis /Wiker H.- Nagai S.- Harboe M.- Ljungqvist L. //Scand.J.Immunol. -Vol.36 (2).- 1992.- P.307−319.
- Yokomizo Y. A method for avoiding false-positive reactions in an ELISA for the diagnosis of bovine paratuberculosis /Yokomizo Y.- Yugi H.- Merkal R. //Jap.J.Vet.Sci. Vol.47.- 1987.- P. l 11−119.
- Yugi H. Serologic diagnosis of bovine tuberculosis /Yugi H.- Nozaki C.//Am.J.Vet.Res. Vol.33.- 1972.-P.1377−1384.
- Young D.B. The immune response to mycobacterial heat shock proteins /Young D. //Autoimmunity. 1990. — Vol.7. — P.237−244.1ЪЭ
- Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина»
- УДК 619:616.98:579.873.21 (06)
- ЗТВЕРЖДАЮ Ректор ФЩУ^ПО МГАВМиБ, • ^академик^АСХН, профессор —? Е.С. Воронинtjf' ¦ << Ш^ФйМяМ 2005 г.4-v * if1. ОТЧЕТо научно-исследовательской работе
- ПОЛУЧЕНИЕ АНТИГЕНА МРВ83 M. bovis И ЕГО ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА
- Проректор по научной работе ФГОУ ВПО МГАВМиБ, д.в.н., профессоргМ
- Зав. кафедрой биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ, д.б.н., профессор
- Руководитель НИР: доцент кафедры биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ, д.б.н.
- Ответственный исполнитель: аспирант кафедры биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ1. И.В. Тихонов
- А? «01?Л11.Я/Г1Я / 2005 г1. Т.Н. Грязнева/Л» QtcrjfpJ 2005 г1. А.Б. Аракелов/Оу> о a- 2005 г
- Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина"1. УДК 619:616−097.3 (06)
- УТВЕРЖДАЮ» Ректор ФГОУ ВПаЬгАВМиБ, 1. Воронин2005 г. 1. ОТЧЕТо научно-исследовательской работе
- ИММУНОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ S2H6G4, НАПРАВЛЕННЫХ ПРОТИВ АНТИГЕНА МРВ83 M. bovis
- Проректор по научной работе ФГОУ ВПО МГАВМиБ, д.в.н., профессор ЖА.А. Сидорчук/0 «ihbSdlU, 2005 г
- Зав. кафедрой биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ, д.б.н., профессод^^Г^^ /И.В. Тихонов» 0К/тЛ (рУ 2005 г
- Руководитель НИР: доцент кафедры биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ, д.б.н.
- Ответственный исполнитель: аспирант кафедры биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ1. Т.Н. Грязнева1. Яд «Q itTJfpJ 2005 г1. А. Б. Аракелов 2005 г