Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Биохимические и молекулярно-генетические исследования парвовируса В19 при оценке безопасности препаратов альбумина и иммуноглобулина

Диссертация: Биохимические и молекулярно-генетические исследования парвовируса В19 при оценке безопасности препаратов альбумина и иммуноглобулина
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Лечебные препараты альбумина и иммуноглобулина, так же как и другие препараты, получаемые из плазмы крови, могут быть потенциально опасны в отношении передачи возбудителей инфекционных заболеваний, поэтому их производство требует комплексного подхода для предотвращения контаминации патогенами конечного продукта. Несмотря на успехи, достигнутые в области повышения вирусной безопасности лечебных… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. История открытия парвовируса В
    • 1. 2. Таксономическая классификация, структура и организация генома парвовируса В
      • 1. 2. 1. Таксономия представителей семейства Parvoviridae
      • 1. 2. 2. Структура вириона и организация генома
      • 1. 2. 3. Генетическая вариабельность парвовируса В
    • 1. 3. Патогенез
      • 1. 3. 1. Жизненный цикл и тропизм вируса
      • 1. 3. 2. Культивирование парвовируса В
      • 1. 3. 3. Цитопатология
      • 1. 3. 4. Патогенез и иммунный ответ
    • 1. 4. Клинические аспекты парвовирусной инфекции
      • 1. 4. 1. Проявления инфекции у здоровых лиц
      • 1. 4. 2. Парвовирусная инфекция у лиц с иммуннодефицитными состояниями и гематологическими заболеванями
    • 1. 5. Диагностика парвовирусной инфекции
    • 1. 6. Эпидемиология и трансмиссия
    • 1. 7. Парвовирус В19 и безопасность препаратов крови
      • 1. 7. 1. Распространенность парвовируса В19 среди доноров
      • 1. 7. 2. Контаминация пулов плазмы и препаратов крови парвовирусом В
      • 1. 7. 3. Основные способы получения лечебных препаратов из плазмы крови
      • 1. 7. 4. Основные производственные методы инактивации/элиминации патогенов и их эффективность в отношении парвовируса В
  • 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 2. 1. Исследуемый материал
    • 2. 2. Подготовка образцов для исследования
    • 2. 3. Выделение ДНК парвовируса В
    • 2. 4. Выявление и количественное определение ДНК парвовируса В
    • 2. 5. Получение фрагментов ДНК парвовируса В19 для секвенирования
    • 2. 6. Секвенирование фрагментов ДНК парвовируса В
    • 2. 7. Выведение аминокислотных последовательностей
    • 2. 8. Филогенетический анализ
    • 2. 9. Выявление и определение количественного содержания антител к парвовирусу В
    • 2. 10. Модельное фракционирование контаминированных пулов плазмы
    • 2. 11. Определение фактора вирусной редукции
    • 2. 12. Статистическая обработка результатов
  • 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Выявление генетических и серологических маркеров парвовируса В19 в крови доноров
    • 3. 2. Определение генотипа и филогенетический анализ российских штаммов парвовируса В
    • 3. 3. Оценка частоты контаминации парвовирусом В19 производственных пулов плазмы для фракционирования
    • 3. 4. Исследование динамики изменения концентрации ДНК парвовируса В19 и оценка уровня вирусной редукции по стадиям технологического процесса
    • 3. 5. Исследование препаратов альбумина и иммуноглобулина на содержание генетических и серологических маркеров парвовируса В

Биохимические и молекулярно-генетические исследования парвовируса В19 при оценке безопасности препаратов альбумина и иммуноглобулина (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность проблемы. Альбумин и иммуноглобулины являются одними из основных белков крови, принимающих участие в обеспечении важнейших функций организма [7]. В связи с этим препараты альбумина и иммуноглобулина нашли широкое применение в медицинской практике. Использование альбумина и иммуноглобулина путем введения непосредственно в кровеносное русло предъявляет повышенные требования к безопасности, направленные на предотвращение вирусного инфицирования реципиентов препаратов крови.

Безопасность препаратов крови в отношении социально-значимых вирусов гепатитов В и С, вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) хорошо изучена и подтверждена многолетней практикой клинического применения. Однако спектр инфекционных агентов, передающихся через кровь, постоянно расширяется. В настоящее время все большее внимание уделяется парвовирусу В19 (В19У).

Инфицирование В19У представляет опасность для беременных, лиц с иммунодефицитными состояниями и гематологическими заболеваниями, которые являются основными реципиентами крови и ее дериватов. Поражая клетки-предшественники эритроцитов, В19У может вызвать развитие тяжелой анемии и патологии во время беременности [51]. В связи с этим в развитых странах активно ведутся комплексные исследования парвовируса В19, направленные на обеспечение безопасности препаратов крови.

Недостаточная изученность распространенности маркеров В19У среди доноров России, отсутствие знаний о молекулярно-генетических свойствах российских штаммов вируса и возможности их трансмиссии через препараты крови определили актуальность проблемы и явились основанием для проведения настоящего исследования.

Цель работы — комплексное исследование парвовируса В19 при оценке безопасности препаратов альбумина и иммуноглобулина, получаемых из плазмы крови доноров методом спиртового фракционирования.

Задачи исследования:

1. Определить частоту выявления генетических и серологических маркеров B19V в крови доноров.

2. Установить генотип выявленных штаммов B19V с использованием частичного секвенирования генома.

3. Определить частоту контаминации парвовирусом В19 производственных пулов плазмы для фракционирования.

4. Проследить изменение концентрации ДНК B19V и оценить уровень вирусной редукции по стадиям технологического процесса получения препаратов альбумина и иммуноглобулина из плазмы крови методом спиртового фракционирования в модельном эксперименте.

5. Исследовать препараты альбумина и иммуноглобулина, полученные на филиале ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России в г. Нижний Новгород «Нижегородское предприятие по производству бактерийных препаратов «ИмБио», на содержание генетических и серологических маркеров В19V.

Научная новизна работы:

Получены новые данные о распространенности B19V среди доноров.

Впервые в России определены нуклеотидные последовательности NSl/VPlu области генома российских изолятов B19V, которые депонированы в GenBank/EMBL/DDBJ под номерами JQ518457-JQ518464, что расширяет международную базу нуклеотидных последовательностей генома B19V. Установлена принадлежность обнаруженных штаммов B19V к генотипу 1 субтипу 1а.

Впервые в России определена частота контаминации парвовирусом В19 производственных пулов плазмы для фракционирования отечественных производителей препаратов крови.

Впервые показано изменение концентрации ДНК B19V и оценен уровень вирусной редукции по стадиям технологического процесса получения лечебных препаратов альбумина и иммуноглобулина из плазмы крови доноров методом спиртового фракционирования.

Практическая значимость работы:

С участием автора составлены Методические рекомендации «Порядок проведения входного контроля на вирусную безопасность сырья для производства препаратов из плазмы крови доноров» (утверждены и введены в действие приказом директора ФГБУ «ГИСК им. JI.A. Тарасевича» Минздравсоцразвития России от 21.07.2011 № 59-ОД).

Результаты, полученные в ходе настоящей работы, могут стать основой для пересмотра стратегии обеспечения вирусной безопасности в плане расширения спектра вирусных маркеров, обязательных для тестирования, не только при производстве препаратов крови, но и в отечественной трансфузионной медицине и Службе Крови России.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Генетические маркеры B19V генотипа 1а выявлены у 1,0% доноров крови.

2. Высокая частота выявления ДНК B19V в производственных пулах плазмы для фракционирования предполагает возможность контаминации готовых препаратов.

3. Спиртовое фракционирование вносит существенный вклад в редукцию B19V, но при отсутствии дополнительных стадий вирусной инактивации/элиминации не гарантирует безопасность препаратов.

4. Исследованные партии препаратов альбумина и иммуноглобулина не содержат B19V, но риск трансмиссии данного патогена через препараты крови должен рассматриваться.

Апробация работы:

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на:

VII Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (г. Москва, 2013 г.) — заседании научно-технического совета филиала ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России в г. Нижний Новгород «Нижегородское предприятие по производству бактерийных препаратов «ИмБио" — заседании Ученого Совета Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. академика И. Н. Блохиной.

Объем и структура диссертации:

Материалы диссертации изложены на 117 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка использованной литературы, включающего 222 литературных источника, из них 214 — зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 14 рисунками и 6 таблицами.

ВЫВОДЫ.

1. Частота выявления ДНК парвовируса В19 среди доноров составила 1,0%. Концентрация вирусного генома в образцах сыворотки крови находилась в.

3 6 диапазоне от 1,0×10 до 1,0×10 копий/мл.

2. Антитела класса G к парвовирусу В19 выявлены в 29,7% и 100,0% случаев среди ДНК-негативных и ДНК-позитивных доноров, соответственно. Частота обнаружения вирусспецифических антител класса М среди ДНК-позитивных доноров составила 10,0%.

3. Установлены нуклеотидные последовательности фрагмента NSl/VPlu области генома восьми штаммов парвовируса В19. Показана принадлежность исследуемых штаммов к генотипу 1 субтипу 1а. Выявлено существование двух групп внутри генотипа 1а на основе анализа нуклеотидных последовательностей. Анализ аминокислотных последовательностей показал формирование трех филогенетических линий.

4. Определена частота контаминации парвовирусом В19 производственных пулов плазмы для фракционирования, которая составила 79,5%, при этом содержание вирусного генома превышало уровень инфекционности в 36,6% случаев.

5. Проведен анализ динамики изменения содержания ДНК парвовируса В19 по стадиям технологического процесса. Уровень редукции при получении препаратов альбумина и иммуноглобулина составил (6,36±0,17) logio и (6,98±0,17) logio, соответственно.

6. Доказана безопасность в отношении парвовируса В19 препаратов «Альбумин, раствор для инфузий 10%» и «Иммуноглобулин человека нормальный, раствор для внутривенного введения», выпускаемых на филиале ФГУП «НПО «Микроген» в г. Нижний Новгород «Нижегородское предприятие по производству бактерийных препаратов «ИмБио». Исследование производственных серий показало отсутствие в препаратах генетических маркеров парвовируса В19. Уровень вирусспецифических антител в препаратах иммуноглобулина составил (77,9±33,6) МЕ/мл.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Лечебные препараты альбумина и иммуноглобулина, так же как и другие препараты, получаемые из плазмы крови, могут быть потенциально опасны в отношении передачи возбудителей инфекционных заболеваний, поэтому их производство требует комплексного подхода для предотвращения контаминации патогенами конечного продукта. Несмотря на успехи, достигнутые в области повышения вирусной безопасности лечебных препаратов из плазмы крови в отношении вирусов гепатитов В, С и ВИЧ, всё большую озабоченность производителей вызывают так называемые «неактуальные» гемотрансмиссивные агенты, одним из которых является парвовирус В19 (семейство Рап>оутс1ае, род ЕгуЖгоуггш).

В19У является этиологическим агентом парвовирусной инфекции, характеризующейся разнообразными клиническими проявлениями: от бессимптомного течения до тяжелых анемий и мертворождения. Тропность вируса к эритроидным клеткам предусматривает его передачу через кровь, её компоненты и препараты, полученные из плазмы крови. Для снижения риска инфицирования парвовирусом В19 реципиентов препаратов крови зарубежными производителями была разработана многогранная стратегия безопасности, включающая в себя идентификацию групп риска, тестирование донорской крови и валидацию вирусинактивирующих технологий.

В России данная проблема пока остается вне поля зрения отечественных производителей. Цель настоящей работы заключалась в комплексном исследовании парвовируса В19 при оценке безопасности препаратов альбумина и иммуноглобулина, получаемых из плазмы крови доноров.

Риск получения препаратов крови, контаминарованных В19У, зависит от распространенности данного патогена среди доноров. Поэтому на первом этапе работы была определена частота выявления генетических и серологических маркеров В19У среди доноров. Было исследовано 1000 образцов сыворотки крови, полученных с Нижегородской областной станции переливания крови им.

Н.Я. Климовой. Тестирование на выявление ДНК B19V проводили методом ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени.

Основываясь на данных зарубежной литературы, указывающей на генетическое разнообразие исследуемого вируса и неспособность некоторых коммерческих тест-систем выявлять B19V 2-го и 3-го генотипов, нами была проведена апробация набора реагентов для обнаружения ДНК B19V «АмплиСенс Parvovirus B19-FL» с помощью Международной референс-панели ВОЗ, включающей ДНК B19V 1−3 генотипов. Было продемонстрировано, что используемая тест-система способна идентифицировать эритровирусы всех известных генотипов и может быть использована для решения поставленных задач.

Сыворотки крови доноров тестировали в формате минипулов. Было сформировано 100 минипулов, включающих в себя 10 образцов каждый. Выявлено 10 позитивных минипулов, каждый из которых содержал по одному положительному образцу. В ДНК-позитивных пробах была определена.

3 6 концентрация вирусного генома, которая варьировала от 1,0×10 до 1,0×10 копий/мл. Таким образом, в проведенном нами исследовании частота выявления ДНК B19V среди доноров составила 1,0%, что коррелировало с результатами, описанными в зарубежной литературе.

Важную роль в предотвращении гемотрансмиссивного инфицирования эритровирусом В19 играют специфические антитела, обладающие выраженной нейтрализующей активностью. IgG к B19V могут содержаться не только в крови реципиента, но и в крови донора. В связи с этим в исследуемых образцах было определено наличие и количественное содержание вирусспецифических антител классов G и М к B19V. Установлено, что IgG к B19V присутствовали в 29,7%) проб, не содержащих ДНК B19V. Специфические IgM, указывающие на острую фазу инфекции, в представленной группе не обнаружены. Во всех образцах, содержащих ДНК B19V, были выявлены IgG к В19У, при этом в одной пробе идентифицированы также и IgM, что коррелировало с более высоким уровнем вирусной нагрузки.

В серопозитивных образцах, не содержащих и содержащих ДНК B19V, была определена концентрация IgG к B19V, которая составила 27,5 МЕ/мл (95% CI (19,6−35,4) ME/мл) и 107,3 МЕ/мл (95% CI (55,7−158,9) МЕ/мл), соответственно. Уровень IgG в ДНК-негативной группе был достоверно ниже, чем в ДНК-позитивной (р<0,0001). При последующем анализе было выявлено, что у 70% ДНК-позитивных образцов уровень вирусной нагрузки не превышал 1,0×104 копий/мл, при этом концентрация протективных антител лежала в диапазоне 64,7±17,5 МЕ/мл, что является оптимальным соотношением, способным предотвратить гемотрансмиссивное инфицирование.

Следующий этап работы был направлен на установление генотипа и филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей генома штаммов B19V, выделенных из образцов сыворотки крови доноров. Из-за недостаточного количества материала в двух пробах, генотип B19V определен для 8 из 10 штаммов.

Для решения поставленной задачи был выбран NSl/VPlu участок ДНК B19V, который является наиболее подходящим для анализа, так как включает генетическую информацию о 3-х вирусных протеинах: NS1, 7,5 kDa-протеин и YP1, охватывающих два основных нейтрализующих эпитопа, и обладает существенной дивергенцией между штаммами B19V 1−3 генотипов. Были подобраны праймеры, фланкирующие NSl/VPlu область генома эритровируса В19. Выбранный участок ДНК B19V амплифицировали в «nested» варианте ПЦР. Нуклеотидные последовательности полученного фрагмента NSl/VPlu области ДНК B19V размером 692 п. н, установленные методом частичного секвенирования генома, использовали для определения генотипа B19V с помощью онлайн-сервиса BLAST по уровню гомологии с нуклеотидными последовательностями близкородственных штаммов. Было продемонстрировано, что все выявленные изоляты B19V относились к генотипу 1 субтипу 1а. На основе филогенетического анализа нуклеотидных последовательностей NSl/VPlu области генома было показано разделение исследуемых штаммов на две группы внутри генотипа 1а и выявлено формирование трех филогенетических линий при сравнении аминокислотных последовательностей.

Установленные нуклеотидные последовательности фрагментов NSl/VPlu области генома B19V были депонированы в международной базе данных GenBank под номерами JQ518457-JQ518464, что позволило расширить базу данных нуклеотидных последовательностей штаммов эритровируса В19, циркулирующих на территории Российской Федерации.

Полученные результаты по определению частоты выявления генетических маркеров ДНК B19V в крови доноров свидетельствуют о возможности попадания вируса в стартовые пулы плазмы, формирование которых из нескольких сотен-тысяч донаций является одним из основных этапов промышленного получения препаратов альбумина и иммуноглобулина. Нами была поставлена задача, которая заключалась в определении частоты контаминации производственных пулов плазмы для фракционирования парвовирусом В19.

Было проанализировано 117 образцов котловых загрузок трех отечественных производителей препаратов крови. ДНК B19V обнаружена в 79,5% случаев. Последующая количественная оценка показала, что 36,6% производственных пулов содержали вирусный геном в концентрации, превышающей уровень инфекционности B19V, равный 104 копий/мл. Было установлено, что среди ДНК-позитивных пулов в 9,7% случаев концентрация.

6 8 ДНК B19V составляла более 1,0×10 копий/мл, а в 5,4% случаев — более 1,0×10 копий/мл.

Известно, что присутствие вируснейтрализующих антител способно существенно снизить инфектогенность плазмы. Исследуемые производственные пулы были протестированы на наличие IgG к B19V. В серопозитивных образцах было определено количественное содержание вирусспецифических антител.

Среди образцов производственных пулов, не содержащих вирусную ДНК, были выявлены в 29,2% случаев, что согласуется с полученными нами данными о частоте обнаружения антител к В19У среди ДНК-негативных доноров, которая составила 29,1%. Учитывая относительно низкое содержание ДО к В19У в данной группе доноров (27,5 МЕ/мл (95% С1 (19,6−35,4)) МЕ/мл), пулирование плазмы могло привести к снижению концентрации специфических антител до неопределяемого уровня.

Производственные пулы плазмы для фракционирования, контаминированные В19У, были разделены на две группы в зависимости от концентрации вирусного генома в пуле. Каждую группу исследовали отдельно на содержание серологических маркеров. В образцах котловых загрузок с концентрацией ДНК В19У, не превышающей уровень инфекционности (104 копий/мл), 1§-С к В19У выявлялись в 54,2% случаев, в то время как в пулах с содержанием вирусного генома более 104 копий/мл серопозитивность по составила 32,4%.

При определении количественного содержания антител, как в ДНК-негативных, так и в ДНК-позитивных производственных загрузках, было установлено, что средний уровень в серопозитивных пулах был примерно одинаковым и составил 8,3 МЕ/мл (95% С1 (7,5−20,0) МЕ/мл).

Анализ производственных загрузок, контаминированных В19У, показал, что в 53,8% случаев к В19У не выявлялись. Возможно, это связано с тем, что антитела к В19У, обладающие нейтрализующей активностью, находятся в составе иммунных комплексов и не могут быть выявлены методом ИФА. Однако присутствие свободных антител в ДНК-позитивных пулах не обязательно говорит о полной нейтрализации вируса и не гарантирует получение препаратов крови безопасных в отношении В19У.

Таким образом, на данном этапе работы было установлено, что частота контаминации производственных пулов В19У составила 79,5%, при этом концентрация вирусного генома превышала уровень инфекционности в 36,6% случаев, что предполагает возможность попадания вируса в конечный продукт.

Процесс спиртового фракционирования является одним из основных этапов, обеспечивающих вирусную редукцию. Кроме того, современные технологии получения препаратов из плазмы крови доноров включают в себя стадии, направленные на инактивацию и/или элиминацию патогенов.

Для оценки влияния технологических воздействий на вирусную нагрузку при получении препаратов альбумина и иммуноглобулина было проведено модельное фракционирование пулов плазмы, содержащих ДНК В19У (п=20), по модифицированному методу Кона-Онкли в лабораторных условиях с использованием этанола в качестве фракционирующего агента.

Исходная концентрация вирусной ДНК в модельных пулах составляла в среднем (8,31±0,17) 1о§ ю копий/мл. В процессе фракционирования плазмы с помощью этанола наблюдалось распределение вируса между фракциями. Так на стадии отделения глобулинов от альбумина средняя концентрация ДНК В19У в осадке, А (фракция И+Ш) и центрифугате, А (фракция У), полученных в процессе центрифугирования, составила (8,49±0,34) к^ю копий/г и (4,55±0,22) копий/мл, соответственно. При формировании осадка А1 концентрация ДНК В19У существенно не изменилась и составила (8,43±0,35) 1о? ю копий/г. На последующих стадиях фракционирования, было выявлено, что в осадке Б (фракция III) содержание ДНК В19У равнялось (8,60±0,26) к^ю копий/г, в то время как в осадке В (фракция ^в) концентрация ДНК В19У заметно снизилась и составила (4,36±0,26) 1о§-10 копий/г.

Постоянное изменение объема или массы получаемых фракций за счет их разбавления или концентрирования в процессе фракционирования не позволяло адекватно оценить вирусную редукцию, которая может быть обеспечена той или иной стадией. В связи с этим нами был определен уровень вирусной нагрузки в каждой исследуемой фракции с учетом объема или массы материала и оценена динамика его изменения по стадиям технологического процесса.

Было продемонстрировано, что фактор вирусной редукции для центрифугата А, являющегося целевой фракцией для производства альбумина, составил (3,52±0,30) 1о§ ю, в то время как редуцирующий фактор для осадка А, полученного на этой же стадии, не превышал (1,19±0,39) к^ш.

Формирование осадка А1 также не привело к снижению вирусной нагрузки. Однако на заключительной стадии выделения (получение осадка В) редуцирующий фактор увеличился и составил (4,30±0,22).

При получении фракции очищенногоС (от исходного сырья до осадка В) суммарный фактор вирусной редукции составил (5,69±0,23) к^ю.

Моделирование технологического процесса получения альбумина и иммуноглобулина методом спиртового фракционирования продемонстрировало переход В19У в твердые фракции. Осаждение вируса могло произойти в составе комплексов «антиген-антитело», формирующихся в случае присутствия в пулах плазмы вируснейтрализующих антител, однако уровень антител может быть недостаточным для полной нейтрализации.

Установлено, что спиртовое фракционирование способно обеспечить снижение уровня вирусной нагрузки, но при отсутствии дополнительных стадий, направленных на инактивацию и/или удаление патогенов, не гарантирует безопасность препаратов.

При исследовании образцов фракцииО после обработки гидроокисью алюминия и инкубации при низком значении рН (4,4 — 4,8) в течение 48 ч при 37 °C было выявлено снижение вирусной нагрузки до недетектируемого методом ПЦР уровня. Полученные результаты указывали на эффективность совокупности данных стадий в обеспечении редукции В19У, что согласуется с работами зарубежных авторов.

Суммарный фактор вирусной редукции В19У, определенный в нашем исследовании при получении препарата иммуноглобулина, составил (6,98±0,17) 1оею.

При тестировании методом ПЦР образцов препарата альбумина после инкубации при 60 °C в течение 10 ч ДНК В19У не была обнаружена. Применение пастеризации привело к снижению вирусной нагрузки на данном этапе по отношению к стадии получения центрифугата А, при этом редуцирующий фактор составил (2,84±0,22) к^ю.

Суммарный фактор редукции В19У от исходной плазмы до конечного продукта при получении альбумина достиг (6,36±0,17) к^ю.

С помощью модельного фракционирования пулов плазмы, контаминированных парвовирусом В19, по модифицированному методу Кона-Онкли в присутствии дополнительных стадий вирусной инактивации и элиминации были получены препараты альбумина и иммуноглобулина, не содержащие ДНК В19V.

Для подтверждения эффективности используемой технологии в обеспечении безопасности в отношении В19У препаратов альбумина и иммуноглобулина, получаемых из плазмы крови доноров с помощью спиртового фракционирования, нами были исследованы методом ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени производственные серии препарата «Альбумин, раствор для' инфузий 10%» (п=82) и препарата «Иммуноглобулин человека нормальный, раствор для внутривенного введения» (п=142), выпущенные на предприятии в период с 2008 по 2010 гг. Несмотря на высокую частоту контаминации производственных загрузок плазмы для фракционирования, определенную в настоящем исследовании (79,5%), препаратов, содержащих ДНК В19У, не было выявлено.

При изучении препаратов ИГВВ был дополнительно оценен уровень антител к В19У, обладающих выраженными протективными свойствами. Все исследуемые партии ИГВВ содержалиО к В19У, концентрация которых варьировала от 23 до 162 МЕ/мл, при этом средний уровень вирусспецифических антител составил (77,9±33,6) МЕ/мл. Отмечено значительное увеличение концентрации вирусспецифических антител в готовых препаратах ИГВВ по сравнению с исходной плазмой, в которой средний уровень составлял 8,3 МЕ/мл (95% С1 (7,5−20,0) МЕ/мл). Вероятно, это связано с распадом иммунных комплексов и концентрированием в процессе спиртового фракционирования.

Способ получения альбумина и ИГВВ из плазмы крови доноров, применяемый на филиале ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава. России в г. Нижний Новгород «Нижегородское предприятие по производству бактерийных препаратов «ИмБио», гарантирует безопасность в отношении В19У данных препаратов.

Однако существующие различия в методах производства, в параметрах процесса и в составе композиционных материалов, используемых в качестве белковых протекторов, не позволяют экстраполировать полученные нами данные на технологии получения препаратов крови, применяемые на других предприятиях. Поэтому для подтверждения безопасности в отношении В19У конкретного производства препаратов альбумина и иммуноглобулина необходима валидация процесса, в ходе которой будут оценены эффективность элиминации и инактивации вируса на основных технологических этапах.

Результаты, полученные в настоящей работе, позволяют сказать, что для обеспечения вирусной безопасности препаратов иммуноглобулина и альбумина в отношении парвовируса В19 необходимо выполнение несколько условий, включая: разработку нормативных актов, регламентирующих процедуру скрининга доноров на маркеры парвовируса В19, и организацию скриниговых исследований доноровопределение алгоритма входного контроля плазмы для фракционирования на маркеры B19V на предприятиях по производству препаратов кровииспользование для получения препаратов крови технологий, обеспечивающих эффективную элиминацию и инактивацию вирусов в процессе производствавалидацию производственных процессов получения препаратов крови с оценкой уровня редукции патогенов на основных технологических стадиях.

Показать весь текст

Список литературы

  1. , В. В. Иммуноглобулин для внутривенного введения / В. В. Анастасиев. Нижний Новгород: НГМА, 2000. — 168 с.
  2. , С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц — под ред. Н. Е. Бузикашвили, Д. В. Самойлова — пер. с англ. Ю. А. Данилова. М.: Практика, 1998.-459 с.
  3. , И. Служба крови и препараты плазмы: (междунар. аналит. обзор). / И. Левин, В. М. Русанов. М: Медпрактика — М, 2007. — 316 с.
  4. Молекулярная эпидемиология парвовирусной инфекции в Республике Беларусь / М. А. Ермолович и др. // Вопр. вирусол. 2010. — № 2. — С. 26 — 31.
  5. , С. А. Лечебные препараты крови в современной медицине / С. А. Оприщенко, В. В. Захаров, В. М. Русанов. М.: Медпрактика — М, 2011. -328 с.
  6. , В. М. Лечебные препараты крови / В. М. Русанов, И. Левин. М.: Медпрактика, 2004. — 284 с.
  7. , В. М. Фракционирование белков плазмы в производстве препаратов крови / В. М. Русанов, Л. И. Скобелев. Москва: Медицина, 1983. — 224 с.
  8. A genetically engineered cell line that produces empty capsid of В19 (human) parvovirus / S. Kajigaya et al. // PNAS 1989. — Vol. 86, N 19 — P. 7601 — 7605.
  9. A linked donor-recipient study to evaluate parvovirus В19 transmission by blood component transfusion / S. H. Kleiman et al. // Blood. 2009. — Vol. 114, N 17.-P. 3677−3683.
  10. A murine monoclonal IgM antibody specific for blood group P antigen (globoside) / A. E. von der Borne et al. // Br. J. Haematol. 1986. — Vol. 63, N 1. -P. 35 -46.
  11. A new parvovirus genotype persistent in human skin / K. Hokynar et al. // J. Virol. 2002. — Vol. 302, N 2. — P. 224 — 228.
  12. A putative nucleoside triphosphate-binding domain in the nonstructural protein of B19 parvovirus is required for cytotoxicity / M. Momoeda et al. // J. Virol. -1994. Vol. 68, N 12. — P. 8443 — 8446.
  13. A viral phospholipase A2 is required for parvovirus infectivity / Z. Zadori et al. // Dev. Cell. 2001. — Vol. 1, N 2. — P. 291 — 302.
  14. Accurate serodiagnosis of B19 parvovirus infections by measurement of IgG avidity / M. Soderlund et al. // J. Infect. Dis. 1995. — Vol. 171, N3.-P. 710 713.
  15. Acute encephalopathy with human parvovirus B19 infection in hereditary spherocytosis / K. Oshima et al. // Pediatr. Infect. Dis. J. 2008. — Vol. 27, N 7. -P. 651 -652.
  16. Acute encephalopathy with parvovirus B19 infection in sickle cell disease / S. Bakhshi et al. // Arch. Dis. Child. 2002. — Vol. 87, N 6. — P. 541 — 542.
  17. Advances in human B19 erythrovirus biology / A. Servant-Delmas et al. // J. Virol. 2010. — Vol. 84, N 19. — P. 9658 — 9665.
  18. Albumin batches and B19 parvovirus DNA / J. J. Lefrere et al. // Transfusion. 1995.-Vol. 35, N5.-P. 389−391. '
  19. Al-Khan, A. Parvovirus B-19 Infection During Pregnancy / A. Al-Khan, A. Caligiuri, J. Apuzzio // Infect Dis Obstet Gynecol. 2003. — Vol. 11, N 3. — P. 175 -179.
  20. Analysis of B19 virus contamination in plasma pools for manufacturing by using a competitive polymerase chain reaction assay / G. Gallinella et al. // Vox Sang. 2002. — Vol. 83, N 4. — P. 324 -331.
  21. Anderson, L. J. Role of parvovirus B19 in human disease / L. J. Anderson // Pediatr. Infect. Dis. J. 1987. — Vol. 6, N 8. — P. 711 — 718.
  22. Anderson, M. J. Diagnosis of human parvovirus infection by dot-blot hybridization using cloned viral DNA / M. J. Anderson, S. E. Jones, A. C. Minson // J. Med. Virol. 1985. — Vol. 15, N 2. — P. 163 — 172.
  23. Antibodies to parvovirus B19 NS-1 protein in infected individuals / A. von Podlotzki et al. // J. Gen. Virol. 1995. — Vol. 76, N 3. — P. 519 — 527.
  24. Antibodies to the nonstructural protein of parvovirus B19 in persistently infected patients: implication for pathogenesis / A. von Podlotzki et al. // J. Infect. Dis. 1995. — Vol. 172, N 5. — P. 1356 — 1359.
  25. Antiphospholipid antibodies in pediatric and adult patients with rheumatic disease are associated with parvovirus B19 infection / P. von Landenberg et al. // Arthritis. Rheum. 2003. — Vol. 48, N 7. — P. 1939 — 1947.
  26. Apoptosis of liver-derived cells induced by parvovirus B19 nonstructural protein / B. D. Poole et al. // J. Virol. 2006. — Vol. 80, N 8. — P. 4114 — 4121.
  27. Association of parvovirus B19 genome in children with myocarditis and cardiac allograft rejection / K. O. Schowengerdt et al. // Circulation. 1997. — Vol. 96, N 10.-P. 3549−3554.
  28. Baylis, S. A. Evaluation of different assays for the detection of parvovirus B19 DNA in human plasma / S. A. Baylis, N. Shah, P. D. Minor // J. Virol. Methods. -2004. Vol.121, N 1. — P. 7 — 16.
  29. Beard, C. Transient expression of B19 parvovirus gene products in COS-7 cells transfected with B19-SV40 hybrid vectors / C. Beard, J. St. Amand, C. R. Astell //Virology. 1989.-Vol. 172, N2.-P. 659−664.
  30. Biological and immunological relations among human parvovirus B19 genotypes 1 to 3 / A. Ekman et al. // J. Virol. 2007. — Vol. 81, N 13. — P. 6927 -6935.
  31. Bioportfolio: lifelong persistence of variant and prototypic erythrovirus DNA genomes in human tissue / P. Norja et al. // PNAS. 2006. — Vol. 103, N 19. — P. 7450−7453.
  32. Block to the production of full-length B19 virus transcripts by internal polyadenylation is overcome by replication of the viral genome / W. Guan et al. // J. Virol. 2008. — Vol. 82, N 20. — P. 9951 — 9963.
  33. Blood donor screening for parvovirus B19 in Germany and Austria / M. Schmidt et al. // Transfusion. 2007. — Vol. 47, N 10. — P. 1775 — 1782.
  34. Bonsch, C. Interaction of parvovirus B19 with human erythrocytes alters virus structure and cell membrane integrity / C. Bonsch, C. Kempf, C. Ros // J. Virol. -2008.-Vol. 82, N23.-P. 11 784- 11 791.
  35. Breese, C. Encephalopathy with erythema infectiosum / C. Breese, F. A. Horner // Am. J. Dis. Child. 1977. — Vol. 131, N 1. — P. 65 — 67.
  36. Brown, K. E. Erythrocyte P antigen: cellular receptor for B19 parvovirus / K. E. Brown, S. M. Anderson, N. S. Young // Science. 1993. — Vol. 262, N 5130. — P. 114−117.
  37. Bruu, A. L. Evaluation of five commercial tests for detection of immunoglobulin M antibodies to human parvovirus B19 / A. L. Bruu, S. A. Nordbo // J. Clin. Microbiol. 1995. — Vol. 33, N 5. — P. 1363 — 1365.
  38. Caul, E. O. Intrauterine infection with human parvovirus B19: a light and electron microscopy study / E. O. Caul, M. J. Usher, P. A. Burton // J. Med. Virol. -1988. Vol. 24, N 1. — P. 55 — 66.
  39. Caution in evaluation of removal of virus by filtration: misinterpretation due to detection of viral genome fragments by PCR / M. Tsujikawa et al. // J. Virol. Methods.-2011.-Vol. 178, N 1 2.-P. 39−43.
  40. Characteristics and taxonomy of Parvoviridae / G. Siegl et al. // Intervirology.- 1985. Vol. 23, N 2. — P. 61 — 73.
  41. Characterization of parvovirus B19 genotype 2 in KU812Ep6 cells / J. Bliimel et al. // J. Virol. 2005. — Vol. 79, N 22. — P. 14 197 — 14 206.
  42. Christensen, J. A novel cellular site-specific DNA-binding protein cooperates with the viral NS1 polypeptide to initiate parvovirus DNA replication / J. Christensen, S. F. Cotmore, P. Tattersall // J. Virol. 1997. — Vol. 71, N 2. — P. 1405- 1416.
  43. Chronic parvovirus B19 infection induces the production of anti-virus antibody with autoantigen binding properties / C. Lunardi et al. // Eur. J. Immunol. 1998. -Vol. 28, N3.-P. 936−948.
  44. Clinical manifestation of human parvovirus B19 in adults / A. D. Woolf et al. // Arch. Intern. Med. 1989. — Vol. 149, N 5. — P. 1153 — 1156.
  45. Cloning of the human parvovirus B19 genome and structural analysis of its palindromic termini / V. Deiss et al. // Virology. 1990. — Vol. 175, N 1. — P. 247 -254.
  46. Cohen, B. J. Genetic variants of parvovirus B19 identified in the United Kingdom: implications for diagnostic testing / B.J. Cohen, J. Gandhi, J. P. Clewley // J. Clin. Virol. 2006. — Vol. 36, N 2. — P. 152 — 155.
  47. Collaborative study to establish a World Health Organization International genotype panel for parvovirus B19 DNA nucleic acid amplification technology (NAT)-based assays / S. A. Baylis et al. // Vox Sang. 2012. — Vol. 102, N 3. — P. 204−211.
  48. Corcoran, A. Advances in the biology, diagnosis and host-pathogen interactions of parvovirus B19 / A. Corcoran, S. Doyle // J. Med. Microbiol. 2004. -Vol. 53, N6.-P. 459−475.
  49. Cryo-electron microscopy studies of empty capsids of human parvovirus B19 complexed with its cellular receptor / P. R. Chipman et al. // PNAS. 1996. — Vol. 93, N 15.-P. 7502−7506.
  50. Detection and differentiation of human parvovirus variants by commercial quantitative real-time PCR tests / K. Hokynar et al. // J. Clin. Microbiol. 2004. -Vol. 42, N5.-P. 2013−2019
  51. Detection of an erythrovirus sequence distinct from B19 in a child with acute anemia / Q. T. Nguyen et al. // Lancet. 1998. — Vol. 352, N 9139. — P. 1524
  52. Detection of antibodies and antigens of human parvovirus B19 by enzyme-linked immunosorbent assay / L. J. Anderson et al. // J. Clin. Microbiol. 1986. -Vol. 24, N4.-P. 522−526.
  53. Detection of parvovirus B19 in donated blood: a model system for screening by polymerase chain reaction / F. McOmish et al. // J. Clin. Microbiol. 1993. — Vol. 31, N2.-P. 323−328.
  54. Different susceptibility of B19 virus and mice minute virus to low pH treatment / N. Boschetti et al. // Transfusion. 2004. — Vol. 44, N 7. — P. 1079 -1086.
  55. Direct demonstration of the human parvovirus in erythroid progenitor cells infected in vitro / N. Young et al. // J. Clin. Investig. 1984. — Vol. 74, N 6. — P. 2024 — 2032.
  56. Discovery and analysis of a novel parvovirus B19 genotype 3 isolate in the United States / L. A. Rinckel et al. // Transfusion. 2009. — Vol. 49, N 7. — P. 1488 — 1492.
  57. Dot blot hybridization assay of B19 virus DNA in clinical specimens / J. Mori et al. // J. Clin. Microbiol. 1989. — Vol. 27, N 3. — P. 459 — 464.
  58. Doyle, S. The immune response to parvovirus B19 exposure in previously seronegative and seropositive individuals / S. Doyle, A. Corcoran // J. Infect. Dis. -2006.-Vol. 194, N2.-P. 154- 158.
  59. Effectiveness of nanofiltration in removing small non-enveloped viruses from three different plasma-derived products / M. C. Menconi et al. // Transfus. Med. -2009.-Vol. 19, N4.-P. 213−217.
  60. Electron microscopic estimation of removal of parvovirus B19 (HB19V) by nanofiltration with a novel filter membrane / K. Yamaguchi et al. // J. Membrane Science. 2007. — Vol. 298, N 1 — 2. — P. 99 — 109.
  61. Epidemiology of high-level parvovirus B19 viraemia among Dutch blood donors, 2003−2009 / K. Kooistra et al. // Vox Sang. 2011. — Vol. 100, N 3. — P. 261 -266.
  62. Erythroid crisis caused by parvovirus B19 transmitted via red blood cell transfusion / Y. Tsukada et al. // Intern. Med. 2011. — Vol. 50, N 20. — P. 2379 -2382.
  63. Evaluation of the virus-elimination efficacy of nanofiltration (Viresolve NFP) for the parvovirus B19 and hepatitis A virus / D. J. Oh et al. // Korean J. Lab. Med. 2010. — Vol. 30, N 1. — P. 45 — 50.
  64. Evidence for persistence of human parvovirus B19 DNA in bone marrow / P. Cassinotti et al. // J. Med. Virol. 1997. — Vol. 53, N 3. — P. 229 — 232.
  65. Experimental parvoviral infection in humans / M. J. Anderson et al. // J. Infect. Dis. 1985. — Vol. 152, N 2. — P. 257 — 265.
  66. False-negative serology in patient with acute parvovirus B19 infection / S. Bredl et al. // J. Clin. Virol. 2011. — Vol. 51, N 2. — P. 115 — 120.
  67. Fattet, S. Persistent human parvovirus B19 infection in children under maintenance chemotherapy for acute lymphocytic leukemia / S. Fattet, P. Cassinotti, M. B. Popovic // J. Pediiat. Hematol. One. 2004. — Vol. 26, N 8. — P. 497 — 503.
  68. First continuous propagation of B19 parvovirus in a cell line / S. Shimomura et al. // Blood. -1992. -Vol. 79, N 1.-P. 18 24.
  69. Genetic diversity of human parvovirus B19: sequence analysis of the VP1/VP2 gene from multiple isolates / D. D. Erdman et al. // J. Gen. Virol. 1996. — Vol. 77, N 11.-P. 2767−2774.
  70. Genetic diversity within human erythroviruses: identification of three genotypes / A. Servant et al. // J. Virol. 2002. — Vol. 76, N 18. — P. 9124 — 9134.
  71. Genetic variants of human parvovirus B19 in South Africa: cocirculation of three genotypes and indentification of a novel subtype of genotype 1 / C. Corcoran et al. // J. Clin. Microbiol. 2010. — Vol. 48, N 1. — P. 137 — 142.
  72. Genotyping of human parvovirus B19 among Brazilian patients with hemoglobinopathies / S. N. Slavov et al. // Can. J. Microbiol. 2012. — Vol. 58, N 2.-P. 200−205.
  73. Groeneveld, K. Blood products and parvovirus B19 / K. Groeneveld, J. van der Noordaa // Neth. J. Med.-2003.-Vol. 61, N5.-P. 154- 156.
  74. Heat sensitivity of human parvovirus B19 / M. Yunoki et al. // Vox Sang. -2003. Vol. 84, N 3. — P. 164 — 169.
  75. Heegaard, E. D. Human parvovirus B19 / E. D. Heegaard, K. E. Brown // Clin. Microbiol. Rev. 2002. — Vol. 15, N 3. — P. 485 — 505.
  76. Heegaard, E. D. Parvovirus B19 infection associated with encephalitis in a patient suffering from malignant lymphoma / E. D. Heegaard, N. A. Peterslund, A. Hornsleth // Scand. J. Infect. Dis. 1995. — Vol. 27, N 6. — P. 631 — 633.
  77. High prevalence of human parvovirus B19 DNA in myocardial autopsy samples from subjects without myocarditis or dilative cardiomyopathy / T. Schenk et al. // J. Clin. Microbiol. 2009. — Vol. 47, N 1. — P. 106 — 110.
  78. Higher prevalence of parvovirus B19 in Belgian as compared to Tunisian blood donors: differential implications for prevention of transfusional transmission / M. Letaief et al. // Transfus. Sci. 1997. — Vol. 18, N 4. — P. 523 — 530.
  79. High-sensitivity PCR detection of parvovirus B19 in plasma / P. Daly et al. // J. Clin. Microbiol. 2002. — Vol. 40, N 6. — P. 1958 — 1962.
  80. High-titer screening PCR: a successful strategy for reducing the parvovirus B19 load in plasma pools for fractionation / T. Weimer et al. // Transfusion. 2001. — Vol. 41, N 12.-P. 1500- 1504.
  81. Horowitz, B. Estimating the pathogen safety of manufactured human plasma products: application to fibrin sealants and to thrombin / B. Horowitz, M. Busch // Transfusion. 2008. — Vol. 48, N 8. — P. 1739 — 1753.
  82. Human parvovirus arthropathy / D. G. White et al. // Lancet. 1985. — Vol. 1, N8426.-P. 419−421.
  83. Human parvovirus B19 in clotting factor concentrates: B19 DNA detection by the nested polymerase chain reaction / K. Zakrzewska et al. // Br. J. Haematol. -1992. Vol. 81, N 3. — P. 407 — 412.
  84. Human parvovirus В19 infection and autoimmunity / C. Lunardi et al. // Autoimmun. Rev. 2008. — Vol .8, N 2. — P. 116 — 120.
  85. Human parvovirus В19 infection in hemophiliacs first infused two high-purity, virally attenuated factor VIII concentrates / A. Azzi et al. // Am. J. Hematol. 1992. -Vol. 39, N3.-P. 228−230.
  86. Human parvovirus В19 specific IgG, IgA, and IgM antibodies and DNA in serum specimens from persons with erythema infectiosum / D. D. Erdman et al. // J. Med. Virol. 1991. — Vol.35, N 2. — P. 3523 — 3524.
  87. Human parvovirus В19 surveillance in patients with rash and fever from Belarus / M. A. Yermalovich et al. // J. Med. Virol. 2012. — Vol. 84, N 6. — P. 973 -978.
  88. Human parvovirus В19: general considerations and impact on patients with sickle-cell disease and thalassemia and on blood transfusions / S. N. Slavov et al. // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2011. — Vol. 62, N 3. — P. 247 — 262.
  89. Human parvovirus В19: prevalence of viral DNA in volunteer blood donors and clinical outcomes of transfusion recipients / J. Jordan et al. // Vox Sang. 1998. -Vol. 75, N2.-P. 97- 102.
  90. Human parvovirus infection in hemophiliacs first infused with clotting factor concentrates / O. Bartolomei Corci et al. // J. Med. Virol. 1988. — Vol. 25, N 2. -P. 165- 170.
  91. Human parvovirus-associated arthritis: a clinical and laboratory description / D. M. Reid et al. // Lancet. 1985. — Vol. 1, N 8426. — P. 422 — 425
  92. Identification and characterization of a second novel human erythrovirus variant, A6 / Q. T. Nguyen et al. // Virology. 2002. — V. 301, N 2 — P. 374 — 380.
  93. Identification and characterization of persistent human erythrovirus infection in blood donor samples / D. Candotti et al. // J. Virol. 2004. — Vol. 78, N 22. — P. 12 169- 12 178.
  94. Identification and genetic diversity of two human parvovirus В19 genotype 3 subtypes / A. Parsyan et al. // J. Gen. Virol. 2007. — Vol. 88, N 2. — P. 428 — 431.
  95. Identification of the major structural and nonstructural proteins encoded by human parvovirus B19 and mapping of their genes by procaryotic expression of isolated genomic fragments / S. F. Cotmore et al. // J. Virol. 1986. — Vol. 60, N 2. -P. 548−557.
  96. Immune response to B19 parvovirus and an antibody defect in persistent viral infection / G. J. Kurtzman et al. // J. Clin. Investig. 1989. — Vol. 84, N 4. — P. 1114−1123.
  97. In vitro propagation of parvovirus B19 in primary foetal liver culture / K. E. Brown et al. // J. Gen. Virol. 1991. — Vol. 72, N 3. — P. 741 — 745.
  98. Inactivation and neutralization of parvovirus B19 genotype 3 / J. Blumel et al. // Transfusion. 2012. — Vol. 52, N 7. — P. 1490 — 1497.
  99. Inactivation of parvovirus B19 by liquid heating incorporated in the manufacturing process of human intravenous immunoglobulin preparation / M. Yunoki et al. // Br. J. Haematol. 2005. — Vol. 128, N 3. — P. 401 — 404.
  100. Inactivation of parvovirus B19 during pasteurization of human serum albumin / J. Blumel et al. // Transfusion. 2002. — Vol.42, N 8. — P. 1011−1018.
  101. Incidence of human parvovirus B19 DNA detection in blood donors / Y. Yoto et al. // Br. J. Haematol. 1995. — Vol. 91, N 4. — P. 1017 — 1018.
  102. Induction of antiphospholipid antibodies and antiphospholipid syndrome-like in naive mice with antibody against human parvovirus B19 VP1 unique region protein / B. S. Tzang et al. // Clin. Chim. Acta. 2007. — Vol. 382, N 1 — 2. — P. 31 -36.
  103. Infection of the erythroid cell line KU812Ep6 with human parvovirus B19 and application to titration of B19 infectivity / E. Miyagawa et al. // J. Virol. Methods. -1999. Vol. 83, N 1 — 2. — P. 45 — 54.
  104. Intrauterine parvovirus infection associated with hydrops fetalis / T. A. Brown et al. // Lancet. 1984. — Vol. 324, N 8410. — P. 1033 — 1034
  105. Investigation of the prevalence of human parvovirus B19 in Korean plasmapheresis donors / D. J. Oh et al. // Korean J. Lab. Med. 2010. — Vol. 30, N l.-P. 58−64.
  106. Joseph, P. R. Fifth disease: the frequency of joint involvement in adults / P.R. Joseph//N. Y. State J. Med. 1986.-Vol. 86, N l.-P. 560−563
  107. Kaufmann, B. The structure of human parvovirus В19 / В. Kaufmann, A. A. Simpson, M. G. Rossmann // PNAS. 2004. — Vol. 101, N 32. -P. 11 628 — 11 633.
  108. Kishore, J. Standardization of B19 IgG ELISA to study the seroepidemiology of parvovirus В19 in North Indian voluntary blood donors / J. Kishore, M. Srivastava, N. Choudhary // Asian J. Transfus. Sci. 2010. — Vol. 4, N 2. — P. 86 — 90
  109. Koduri, P. R. Novel cytomorphology of the giant proerythroblasts of parvovirus B19 infection / P. R. Koduri // Am. J. Hematol. 1998. — Vol. 58, N 2. -P. 95 — 99.
  110. Koenigbauer, U. F. Clinical illness due to parvovirus В19 infection after infusion of solvent/detergent-treated pooled plasma / U. F. Koenigbauer, T. Eastlund, J. W. Day // Transfusion. 2000. — Vol. 40, N 10 — P. 1203 — 1206.
  111. Koppelman, M. H. Real-time polymerase chain reaction detection of parvovirus В19 DNA in blood donations using a commercial and an in-house assay / M. H. Koppelman, P. van Swieten, H. T. Cuijpers // Transfusion. 2011. — Vol. 51, N6.-P. 1346- 1354.
  112. Ku80 autoantigen as a cellular coreceptor for human parvovirus В19 infection / Y. Munakata et al. // Blood. 2005. — Vol. 106, N 10. — P. 3449 — 3456.
  113. Laboratory infection with human parvovirus В19 / H. Shiraishi et al. // J. Infect. 1991. — Vol. 22, N 3. — P. 308 — 310.
  114. Laboratory infection with parvovirus B19 / B. J. Cohen et al. // J. Clin. Pathol. 1988. — Vol. 41, N 9. — P. 1027 — 1028.
  115. Large-scale screening for human parvovirus В19 DNA by PCR: application to the quality control of plasma for fractionation / J. T. Aubin et al. // Vox Sang. -2000.-Vol. 78, N l.-P. 7- 12
  116. Laub, R. Parvoviruses and blood products / R. Laub, P. Strengers // Pathol. Biol. 2002. — Vol. 50, N 5. — P. 339 — 348.
  117. Lefrere, J. J. B19 parvovirus DNA in solvent/detergent-treated anti-haemophilia concentrates / J. J. Lefrere, M. Mariotti, M. Thauvin // Lancet. 1994. -Vol.343, N8891.-P. 211−212.
  118. Lefrere, J. J. Use of digoxigenin-labelled probes for the detection of B19 parvovirus DNA in batches of blood products / J. J. Lefrere, M. Mariotti // Cell. Mol. Biol. 1995. — Vol. 41, N 7. — P. 985 — 988.
  119. Lehman, H. W. Parvovirus B19 infection and autoimmune disease / H. W. Lehman, P. von Landerberg, S. Modrow // Autoimmun. Rev. 2003. — Vol.2, N4-P. 218−223.
  120. Matejtschuk, P. Production of human albumin solution: a continually developing colloid / P. Matejtschuk, C. H. Dash, E. W. Gascoigne // Br. J. Anaesth. -2000. Vol. 85, N 6. — P. 887 — 895.
  121. MEGA 5: Molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods / K. Tamura et al. // Molecular Biology and Evolution. 2011. — Vol. 28, N 10. — P. 2731 — 2739.
  122. Molecular characterization of human erythrovirus B19 strains obtained from patients with several clinical presentations in the Amazon region of Brazil / R. B. Freitas et al. // J. Clin. Virol. 2008. — Vol. 43, N 1. — P. 60 — 65.
  123. Molecular characterization of human parvovirus B19 genotypes 2 and 3 / Z. Chen et al. // J. Virol. 2009. — Vol. 394, N 2. — P. 276 — 285.
  124. Molecular mechanism underlying B19 virus inactivation to other parvoviruses / B. Mani et al. // Transfusion. 2007. — Vol. 47, N 10. — P. 1765 — 1774.
  125. Molecular testing for detection of in vitro infectivity of plasma pools contaminated with B19 virus / F. Bonvicini et al. // J. Med. Virol. 2004. — Vol. 74, N2.-P. 272−276.
  126. Neutralization of human parvovirus B19 by plasma and intravenous immunoglobulins / J. Modrof et al. // Transfusion. 2008. — Vol. 48, N 1. — P. 178 — 186.
  127. Neutralizing linear epitopes of B19 parvovirus cluster in the unique and VP1-VP2 junction regions / T. Saikawa et al. // J. Virol. 1993. — Vol. 67, N 7 — P. 3004- 3009.
  128. Novel human erythrovirus associated with transient aplastic anemia / Q. T. Nguyen et al. // J. Clin. Microbiol. 1999. — Vol. 37, N 8. — P. 2483 — 2487.
  129. Novel transcription map for the B19 (human) pathogenic parvovirus / K. Ozawa et al. // J. Virol. 1987. — Vol. 61, N 8. — P. 2395 — 2406.
  130. NS1 protein of parvovirus B19 interacts directly with DNA sequences of the p6 promoter and with the cellular transcription factors Spl/Sp3 / U. Raab et al. // Virology. 2002. — Vol. 293, N 1. — P. 86 — 93.
  131. Nucleotide sequence and genome organization of human parvovirus B19 isolate from the serum of a child during aplastic crisis / R. O. Shade et al. // J. Virol.- 1986. Vol. 58, N 3. — P. 921 — 936.
  132. Ozawa, K. Characterization of capsid and noncapsid proteins of B19 parvovirus propagated in human erythroid bone marrow cell cultures / K. Ozawa, N. Young // J. Virol. 1987. — Vol. 61, N 7. — P. 2627 — 2630.
  133. Ozawa, K. Productive infection by B19 parvovirus of human erythroid bone marrow cells in vitro / K. Ozawa, G. Kurtzman, N. Young // Blood. 1987. — Vol. 70, N2.-P. 384−391.
  134. Parsyan, A. Human erythrovirus B19 and blood transfusion an update / A. Parsyan, D. Candotti // Transfus. Med. — 2007. — Vol. 17, N 4. — P. 263 — 279.
  135. Parvovirus B19 among blood donors from three hospitals in Santiago, Chile / J. Levican et al. // Rev. Med. Chil. 2011. — Vol. 139, N 2. — 143 — 149.
  136. Parvovirus B19 DNA in Factor VIII concentrates: effects of manufacturing procedures and B19 screening by nucleic acid testing / Y. Geng et al. // Transfusion.- 2007. Vol. 47, N 5. — P. 883 — 889.
  137. Parvovirus B19 DNA in plasma pools and plasma derivatives /1. Schmidt et al. // Vox Sang. 2001. — Vol. 81, N 4. — P. 228 — 235.
  138. Parvovirus B19 DNA is frequently present in recombinant coagulation factor VIII products / A. M. Eis-Hubinger et al. // Thromb. Haemost. 1996. — Vol. 76, N 6.-P. 1120.
  139. Parvovirus B19 genotypes 1 and 2 detection with real-time polymerase chain reaction assays / M. H. Koppelman et al. // Vox Sang. 2007. — Vol. 93, N 3. — P. 208−215.
  140. Parvovirus B19 infection in five European countries: seroepidemiology, force of infection and maternal risk of infection / J. Mossong et al. // Epidemiol. Infect. -2008. Vol. 136, N 8. — P. 1059 — 1068.
  141. Parvovirus B19 infection transmitted by transfusion of red blood cells confirmed by molecular analysis of linked donor and recipient samples / M. Y. Yu et al. // Transfusion. 2010. — Vol. 50, N 8. — P. 1712 — 1721.
  142. Parvovirus B19 nonstructural protein-induced damage of cellular DNA and resultant apoptosis / B. D. Poole et al. // Int. J. Med. Sei. 2011. — Vol. 8, N 2. — P. 88−96.
  143. Parvovirus B19 transmission by a heat-treated clotting factor concentrates / J. Blumel et al. // Transfusion. 2002. — Vol. 42, N 11 — P. 1473 — 1481.
  144. Parvovirus B19 transmission by a high-purityfactor VIII concentrate / C. G. Wu et al. // Transfusion. 2005. — Vol. 45, N 6 — P. 1003 — 1010.
  145. Parvovirus B19: implications for transfusion medicine. Summary of a workshop / K. E. Brown et al. // Transfusion. 2001. — Vol. 41, N 1. — P. 130 -135.
  146. Parvovirus B19-Revised / J. Blumel et al. // Transfus. Med. Hemother. -2010. Vol. 37, N 6. — P. 339 — 350.
  147. Parvovirus-like particles in human sera / Y. E. Cossart et al. // Lancet. -1975.-Vol. 1, N 7898. P. 72−73.
  148. Peptides derived from the unique region of В19 parvovirus minor capsid protein elicit neutralizing antibodies in rabbits / S. Anderson et al. // Virology. -1995. Vol. 206, N 1. — P. 626 — 632.
  149. Persistent В19 in immunocompetent individuals: implications for transfusion safety / J. J. Lefrere et al. // Blood. 2005. — Vol. 106, N 8. — P. 2890 — 2895.
  150. Persistent infection by human parvovirus В19 in qualified blood donors / H. Matsukura et al. // Transfusion. 2008. — Vol. 48, N 5. — P. 1036 — 1037.
  151. Persistent parvovirus infection / S. Kerr et al. // Lancet. 1995. — Vol. 345, N 8957.-P. 1118.
  152. Phylogenetic analysis of human parvovirus В19, indicating two subgroups of genotype 1 in Vietnamese patients / N. L. Toan et al. // J. Gen. Virol. 2006. — Vol. 87, N 10.-P. 2941 -2949.
  153. Prevalence and quantitation of parvovirus В19 DNA levels in blood donors with a sensitive polymerase chain reaction screening assay / S. H. Kleiman et al. // Transfusion. 2007. — Vol. 47, N 10. — P. 1745 — 1750.
  154. Prevalence of human erythrovirus В19 DNA in healthy Belgian blood donors and correlation with specific antibodies against structural and non-structural viral proteins /1. Thomas et al. // Vox Sang. 2003. — Vol. 84, N 4. — P. 300 — 307.
  155. Prevalence of nucleic acid sequences specific for human parvoviruses, hepatitis A and hepatitis E viruses in coagulation factor concentrates / S. Modrow et al. // Vox Sang.-2011.-Vol. 100, N4.-P. 351 -358.
  156. Prevalence of parvovirus B19 and hepatitis A virus in Portuguese blood donors /1. Henriques et al. // Transfus. Apher. Sci. 2005. — Vol. 33, N 3. — P. 305 — 309.
  157. Prevalence of parvovirus В19 and parvovirus V9 DNA and antibodies in paired bone marrow and serum samples from healthy individuals / E. D. Heegaard et al. // J. Clin. Microbiol. 2002. — Vol. 40, N 3. — P. 933 — 936.
  158. Prevention of iatrogenic transmission of B19 infection: different approaches to detect, remove or inactivate virus contamination / F. Bonvicini et al. // Clin. Lab. -2006. Vol. 52, N 5 — 6. — P. 263 — 268
  159. Pure red-cell aplasia of 10 years' duration due to persistent parvovirus B19 infection and its cure with immunoglobulin therapy / G. J. Kurtzman et al. // N. Engl. J. Med. 1989. — Vol. 321, N 8. — P. 519 — 523.
  160. Purification and characterization of the major nonstructural protein (NS-1) of Aleutian mink disease parvovirus / J. Christensen et al. // J. Virol. 1995. — Vol. 69, N3.-P. 1802- 1809.
  161. Quantitative analysis of neutralizing immune responses to human parvovirus B19 using a novel reverse transcriptase-polymerase chain reaction-based assay / J. R. Bostic et al. // J. Infect. Dis. 1999. — Vol. 179, N 3. — P. 619 — 626.
  162. Quantitative real-time detection of parvovirus B19 DNA in plasma / M. H. Koppelman et al. // Transfusion. 2004. -Vol. 44, N 1. — P. 97 — 103.
  163. Rapid sequence change and geographical spread of human parvovirus B19: comparison of B19 virus evolution in acute and persistent infections / P. Norja et al. // J. Virol. 2008. — Vol. 82, N 13. — P. 6427 — 6433.
  164. Reactivity of genotype-specific recombinant proteins of human erythrovirus B19 with plasmas from areas where genotype 1 or 3 is endemic / A. Parsyan et al. // J. Clin. Microbiol. 2006. — Vol. 44, N 4. — P. 1367 — 1375.
  165. Recipients potentially infected with parvovirus B19 by red blood cell products /M. K. Hourfar etal.//Transfusion.-2011.-Vol. 51, N l.-P. 129- 136.
  166. Regulation of human B19 parvovirus promoter expression by hGABP (E4TF1) transcription factor /1. Vassias et al. // J. Biol. Chem. 1998. — Vol. 273, N 14. — P. 8287−8293.
  167. Removal of parvovirus B19 from hemoglobin solution by nanofiltration / K. Abe et al. // Artif. Cells Blood Substit. Immobil. Biotechnol. 2000. — Vol. 28, N 5. -P. 375 -383.
  168. Removal of small nonenveloped viruses by antibody-enhanced nanofiltration during the manufacture of plasma derivatives / T. R. Kreil et al. // Transfusion. -2006.-Vol. 46, N7.-P. 1143−1151.
  169. Removal of small non-enveloped viruses by nanofiltration / T. Yokoyama et al. // Vox Sang. 2004. — Vol. 86, N 4. — P. 225 — 229.
  170. Resistance to parvovirus B19 infection due to lack of virus receptor (erythrocyte P antigen) / K. E. Brown et al. // N. Engl. J. Med. 1994. — Vol. 330, N 17.-P. 1192- 1196.
  171. Rollag, H. Viral safety of blood derivatives by immune neutralization / H. Rollag, B. G. Solheim, J. L. Svennevig // Vox Sang. 1998. — Vol. 74, N 1. — P. 213 -217.
  172. Safety of blood products and B19 parvovirus / J. J. Lefrere et al. // Transfus. Clin. Biol. 2006. — Vol. 13, N 4. — P. 235 — 241.
  173. Schwarz, T. F. Comparison of seven commercial tests for the detection of parvovirus B19-specific IgM / T. F. Schwarz, G. Jager, S. Gilch // Zentralbl. Bakteriol. 1997. — Vol. 285, N 4. — P. 525 — 530.
  174. Screening of blood donors for human parvovirus B19 and characterization of the results / C. Wakamatsu et al. // Vox Sang. 1999. — Vol. 76, N 1. — P. 14 — 21.
  175. Self-assembled B19 parvovirus capsids, produced in a baculovirus system, are antigenically and immunogenically similar to native virions / S. Kajigaya et al. // PNAS.- 1991.-Vol. 88, N 11.-P. 4646−4650.
  176. Sequence variability among different parvovirus B19 isolates / A. Hemauer et al. // J. Gen. Virol. 1996. — V. 77, N 8. — P. 1781 — 1785.
  177. Sequence variability of human erythrovirus present in bone marrow of Brazilian patients with various parvovirus B19-related hematological symptoms / S. Sanabani et al. // J. Clin. Microbiol. 2006. — Vol. 44, N 2. — P. 604 — 606.
  178. Seroprevalence of parvovirus B19 IgG among blood donors in Aden, Yemen and Alexandria, Egypt / D. A. Al-Danani et al. // J. Chin. Clin. Medicine. 2008. -Vol. 3, N3.-P. 173- 176.
  179. Seroprevalence of parvovirus B19 in the German population / C. Rohrer et al. //Epidemiol. Infect. 2008. — Vol. 136, N11.-P. 1564- 1575.
  180. Shier, M. K. Human parvovirus B19 in Saudi blood donors / M. K. Shier, M. Badr // Egypt. J. Med. Microbiol. 2005. — Vol. 14, N 2. — P. 347 — 353.
  181. Simultaneous persistence of multiple genome variants of human parvovirus B19 / B. Schneider et al. // J. Gen. Virol. 2008. — Vol. 89, N 1. — P. 164 — 176.
  182. Structure and mapping of the DNA of human parvovirus B19 / J. Mori et al. // J. Gen. Virol. 1987. — Vol. 68, N 11. — P. 2797 — 2806.
  183. Successful replication of parvovirus B19 in the human megakaryocyte leukemia cell line MB-02 / N. C. Munshi et al. // J. Virol. 1993. — Vol. 67, N 1. -P. 562 — 566.
  184. Sun, I. Acute fulminant hepatitis with bone marrow failure in an adult due to parvovirus B19 infection /1. Sun, J. C. Zhang // Hepatology. 2012. — Vol. 55, N 1. -P. 329−330.
  185. Susceptibility of human erythropoietic cells to B19 parvovirus in vitro increases with differentiation / T. Takahashi et al. // Blood. 1990. — Vol. 75, N 3. -P. 603−610.
  186. Symptomatic parvovirus В19 infection caused by blood component transfusion / M. Satake et al. // Transfusion. 2011. — Vol. 51, N 9. — P. 1887 — 1895.
  187. The association of VP1 unique region protein in acute parvovirus В19 infection and anti-phospholipid antibody production / B. S. Tzang et al. // Clin. Chim. Acta. -2007. Vol. 378, N 1 — 2. — P. 59 — 65.
  188. The genome of human parvovirus В19 can replicate in nonpermissive cells with the help of adenovirus genes and produces infectious virus / W. Guan et al. // J. Virol. -2009. Vol. 83, N 18.-P. 9541 -9553.
  189. The globoside receptor triggers structural changes in the В19 virus capsid that facilitate virus internalization / C. Bonsch et al. // J. Virol. 2010. — Vol. 84, N 22. -P. 11 737- 11 746.
  190. The prevalence of human parvovirus В19 DNA and antibodies in blood donors from four Chinese blood centers / L. Ke et al. // Transfusion. 2011. — Vol. 51, N 9. -P. 1909- 1918.
  191. The small 11 kDa nonstructural protein of human parvovirus B19 plays a key role in inducing apoptosis during infection of primary erythroid progenitor cells / A. Y, Chen et al. // Blood. 2010. — Vol. 115, N 5. — P. 1070 — 1080.
  192. The structure of human parvovirus В19 at 8 A resolution / M. Agbandji et al. //Virology. 1994.-Vol. 203, N 1.-P. 106−115.
  193. The VP 1-unique region of parvovirus В19: amino acid variability and antigenic stability / S. Dorsch et al. // J. Gen. Virol. 2001. — Vol. 82, N 1. — P. 191 — 199.
  194. Transfusion-transmitted human parvovirus В19 infection in a thalassemic patient / A. Zanella et al. // Transfusion. 1995. — Vol. 35, N 9. — P. 769 — 772.
  195. Transmission of human parvovirus В19 by plasma derived factor VIII concentrates / Y. Laurian et al. // Nouv. Rev. Fr. Hematol. 1994. — Vol. 36, N 6.1. P. 449−453.
  196. Transmission of parvovirus В19 by coagulation factor concentrates exposed to 100 degrees С heat after lyophilization / E. Santagostino et al. // Transfusion. -1997. Vol. 37, N 5. — P. 517 — 522.
  197. Transmission of serum parvovirus-like virus by clotting-factor concentrates / P. P. Mortimer et al. // Lancet. 1983. — Vol. 2, N 8348. — P. 482 — 484.
  198. Variability of parvovirus В19 genotype 2 in plasma products with different compositions in the inactivation sensitivity by liquid-heating / M. Tsujikawa et al. // Vox Sang. 2012. — Vol. 102, N 2. — P. 93 — 99.
  199. Variability of parvovirus B19 to inactivation by liquid heating in plasma products / S. Hattori et al. // Vox Sang. 2007. — Vol. 92, N 2. — P. 121 — 124.
  200. Viral safety of Nanogam, a new 15 nm-flltred liquid immunoglobulin product / F. G. Terpstra et al. // Vox Sang. 2006. — Vol. 90, N 1. — P. 21 — 32.
  201. Viral safety of solvent/detergent-treated plasma / B. G. Solheim et al. // Transfusion. 2000. — Vol. 40, N 1. — P. 84 — 90.
  202. Yee, Т. T. Life-threatening human parvovirus В19 infection in immunocompetent haemophilia / Т. T. Yee, C. A. Lee, K. J. Pasi // Lancet. 1995. -Vol. 345, N 8952. — P.794 — 795.
  203. Young, N. S. Parvovirus В19 / N. S. Young, К. E. Brown // N. Eng. J. Med. -2004. Vol. 350, N 6. — P. 586 — 597.
  204. Zaaijer, H. L., Parvovirus B19 viremia in Dutch blood donors / H. L. Zaaijer, M. H. G. M. Koppelman, C. P. Farrington // Epidemiol. Infect. 2004. — Vol. 132, N 6.-P. 1161 — 1166.
  205. European Pharmacopoeia Electronic resource. 7 ed. — Электрон, дан. -Режим доступа: //http://www.edqm.eu/en/European-Pharmacopoeia-1401.html
  206. OB 19%20 White%20Paper.pdf
  207. International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV) Electronic resource. 2011. — Электрон, дан. — Режим доступа: // http://www.ictvonline.org
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?