Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Возможности определения прижизненности и давности образования резаных ран методом атомно-силовой микроскопии

ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

При заборе пробы крови для проведения исследований необходимо учитывать то обстоятельство, что при непосредственном контакте крови с металлической иглой, имеющей малый внутренний диаметр, могут произойти изменения как физико-химического состояния мембран клеток крови, так и их деформация. Во избежание вышеуказанных изменений морфологических характеристик эритроцитов представляется целесообразным… Читать ещё >

Содержание

  • Глава 1. СОВРЕМЕННЫЕ АСПЕКТЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИЖИЗНЕН-НОСТИ И ДАВНОСТИ ОБРАЗОВАНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЙ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
    • 1. 1. Основные направления изучения прижизненности и давности образования повреждений
    • 1. 2. Исследование морфологических характеристик и физико-химических параметров эритроцитов в биологии и медицине
    • 1. 3. Сканирующая зондовая микроскопия в биологии и медицине
    • 1. 4. Исследование эритроцитов методом атомно-силовой микроскопии
    • 1. 5. Подготовка проб крови для проведения атомно-силовой микроскопии
  • Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Материал исследования
    • 2. 2. Методы исследования
  • Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 3. 1. Особенности подготовки проб крови для исследования морфологических параметров и структуры мембран эритроцитов методом атомно-силовой микроскопии
    • 3. 2. Изучаемые морфологические параметры эритроцитов
    • 3. 3. Сравнительный анализ значений величин изучаемых параметров эритроцитов
    • 3. 4. Математическое моделирование диагностики прижизненности образования повреждений
    • 3. 5. Математическое моделирование диагностики давности образования прижизненных повреждений

Возможности определения прижизненности и давности образования резаных ран методом атомно-силовой микроскопии (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность проблемы.

Одним из приоритетных вопросов судебно-медицинской экспертной практики является необходимость установления прижизненности и давности образования повреждений. Характеризуя наиболее перспективные научные проблемы судебно-медицинской науки Д. В. Богомолов (2006), B. JI Попов (2011) считают, что главным в решении указанной проблемы является поиск новых подходов и методов исследования, которые позволяют существенно повысить точность диагностики прижизненности и давности травмы. Высокие требования к качеству судебно-медицинской диагностики и достоверности её результатов в настоящее время вызывают необходимость постоянного поиска новых диагностических «инструментов» (Maeda Н. et al., 2009; Luna А., 2009; Maeda Н. et al., 2011; Bremmer R.H. et. al., 2012) необходимых для решения поставленных экспертных задач.

Поиск ответов на вопросы о прижизненности и давности образования повреждений находится в области достаточно традиционных методов морфологических исследований. Наряду с гистологическим методом, предпринимаются попытки применять гистохимический, иммуногистохимический, биохимический и биофизический методы. Однако многие ученые сходятся во мнении, что ни один из предложенных методов не может быть использован самостоятельно, и приоритет остается за комплексным исследованием объектов экспертизы (Пиголкин Ю.И. с соавт., 2001).

Традиционно наиболее широкое распространение в судебно-медицинской практике получил гистологический метод, как наиболее информативный и объективно отражающий изменения клеток и тканей. При этом ведущую роль в диагностике прижизненности и давности образования повреждений имеет оценка выраженности неспецифических реактивных и репаративных реакций в области повреждений, а также регионарных и общих ответных реакций организма на травму (Науменко В.Г., Митяева H.A., 1980; Пермяков A.B. с соавт., 1994).

Особые трудности при решении вопросов прижизненности и давности образования повреждений возникают при дифференциальной диагностике прижизненных повреждений от посмертных, если они нанесены в ранние сроки (первые часы) премортального, или постмортального периодов. Это обусловлено тем, что реактивные изменения тканей в области прижизненной травмы не успевают развиться в полной мере, а также тем, что в посмертных повреждениях в связи с «переживаемостью» тканей возможно появление морфологических изменений, схожих с прижизненными (Попов B. JL, 1996).

С развитием сканирующей зондовой микроскопии, в частности атомно-силовой микроскопии, в арсенале исследователей появилась возможность изучать морфологические и локальные свойства поверхности твердого тела с высоким пространственным разрешением. При этом применение метода атомно-силовой микроскопии предоставляет возможность исследовать биологические объекты, не используя сложных методов фиксации. В доступной литературе имеется множество публикаций, демонстрирующих эффективность метода атомно-силовой микроскопии как аналитического инструмента, используемого в медицине.

Система крови — одна из важнейших гомеостатических систем организма. Возникающие в ней патологические процессы могут быть как проявлениями критических и терминальных состояний, так и причинами развития последних. Именно поэтому клетки крови, и в первую очередь эритроциты, являются постоянным объектом медицинских исследований. В судебно-медицинской литературе имеются лишь единичные публикации об использовании атомно-силовой микроскопии как инструмента для определения давности смерти (Chen Y., Cai J., 2006) и давности «образования» пятен крови (Strasser S. et al., 2007).

В то же время, в доступных литературных источниках приведены различные сведения о методике подготовки образцов для исследования эритроцитов методом атомно-силовой микроскопии. До сих пор не исследованными остаются особенности динамики морфологических изменений параметров эритроцитов и структуры мембран клеток в случаях образования прижизненных и посмертных повреждений. Отсутствуют также критерии дифференциальной диагностики прижизненности и давности образования повреждений при изучении эритроцитов методом атомно-силовой микроскопии. Изложенные обстоятельства позволили сформулировать цель и задачи данного диссертационного исследования.

Цель исследования: выявить морфологические изменения эритроцитов периферической крови и их динамику при экспериментально причиненных прижизненных и посмертных резаных ранах методом атомно-силовой микроскопии для расширения теоретической основы, характеризующей морфологические аспекты патогенетических механизмов развития раневого процесса, и поиска новых диагностических критериев судебно-медицинской диагностики прижизненности и давности образования повреждений.

Задачи исследования:

1. Определить оптимальный способ подготовки проб периферической крови для исследования морфологических параметров эритроцитов методом атомно-силовой микроскопии.

2. Выявить морфологические признаки эритроцитов периферической крови, обладающие значимой для диагностики изменчивостью в связи с развитием раневого процесса.

3. Изучить характер и проследить хронологическую последовательность изменений морфологических параметров эритроцитов периферической крови методом атомно-силовой микроскопии в ранний (до 40 минут) преи постмортальный период при нанесении экспериментальных резаных ран.

4. Разработать математическую модель для определения факта прижизненного (посмертного) образования резаных ран по результатам исследования изменений морфологических характеристик эритроцитов периферической крови методом атомно-силовой микроскопии.

5. Разработать математическую модель для определения давности образования прижизненных резаных ран по результатам исследования эритроцитов периферической крови методом атомно-силовой микроскопии.

Научная новизна результатов исследования.

Для расширения современных представлений о динамике раневого процесса и решения практических вопросов судебно-медицинской экспертизы впервые использован прецизионный исследовательский метод атомно-силовой микроскопии, позволяющий производить изучение объектов в нанометровом диапазоне.

Установлено, что оптимальным способом подготовки пробы для атомно-силовой микроскопии является фиксация мазка крови высушиванием на воздухе, позволяющая регистрировать морфологические параметры эритроцитов в максимальной близости к их нативному состоянию.

Впервые выявлены динамические изменения морфологических признаков эритроцитов периферической крови, открывающие возможность решения проблем исследования патогенетических механизмов развития раневого процесса.

Результаты проведенного экспериментального исследования показали значимые морфологические параметры эритроцитов периферической крови и динамику их изменений в зависимости от давности образования резаных ран по отношению к моменту наступления смерти.

Разработаны эффективные математические модели, позволяющие выполнять дифференциально-диагностическое определение прижизненности (факта прижизненного причинения) и давности образования резаных ран в пределах короткого (до 40 минут) премортального временного диапазона.

Доказана целесообразность внедрения метода атомно-силовой микроскопии в практику патоморфологических и судебно-медицинских исследований эритроцитов периферической крови для диагностики временных интервалов раневого процесса и перспективность проведения дальнейших исследований, направленных на получение новых научных знаний в патологической анатомии и судебной медицине указанным методом.

Теоретическая значимость.

Полученные в результате проведенного исследования данные в виде выявленных закономерностей изменений морфологических характеристик эритроцитов периферической крови в ранних премортальном и постмортальном периодах дополняют существующие представления о причастности системы крови к течению раневого процесса. Наибольшую ценность эти данные приобретают для расширения теоретической базы морфологической диагностики патогенетических механизмов развития раневого процесса и судебно-медицинской диагностики прижизненности и давности образования повреждений.

На этой основе доказана принципиальная возможность разработки высокоэффективных математических моделей, позволяющих устанавливать прижизненность и давность образования резаных ран в эксперименте.

Материалы диссертации могут быть использованы в учебном процессе в высших образовательных медицинских учреждениях при преподавании по курсам патологической анатомии, судебной медицины, гистологии, гематологии.

Практическая значимость работы.

В результате проведенных экспериментальных исследований определен оптимальный способ подготовки пробы крови для регистрации размерных параметров эритроцитов и ультраструктурных характеристик поверхности мембран клеток методом атомно-силовой микроскопии, который заключается в высушивании мазка крови на воздухе.

Разработана методика определения прижизненности и давности экспериментальных резаных ран в раннем премортальном периоде по морфологическим параметрам эритроцитов периферической крови.

Доказанная эффективность метода атомно-силовой микроскопии для диагностики временных диапазонов развития раневого процесса предопределяет перспективу его внедрения в перечень методов, используемых патологической анатомией и судебной медициной для проведения новых научных исследований.

Методология и методы исследования.

Экспериментальное исследование выполнено в соответствии с законами и нормативно-правовыми актами, регулирующими работу с экспериментальными животными.

На проведение исследований получено разрешение локального независимого комитета по вопросам этики при Военно-медицинской академии имени С. М. Кирова (протокол № 135 от 19.03.2013 года).

Использованные в работе методы исследования составили две группы:

— метод атомно-силовой микроскопии;

— методы статистической обработки полученных результатов.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Оптимальным способом подготовки пробы для атомно-силовой микроскопии является фиксация мазка крови высушиванием на воздухе, позволяющая регистрировать морфологические параметры эритроцитов в максимальной близости к их нативному состоянию.

2. В пределах исследованных раннего (до 40 минут) премортального, а также раннего (до 40 минут) постмортального периодов морфологические признаки эритроцитов периферической крови претерпевают статистически достоверные изменения.

3. Применение метода атомно-силовой микроскопии позволяет устанавливать факт прижизненного (посмертного) нанесения резаной раны и давность ее нанесения в пределах короткого (40 минут) премортального временного диапазона.

4. На основании выявленных статистически значимых различий значений морфологических параметров эритроцитов периферической крови разработана методика, позволяющая производить дифференциально-диагностическое определение прижизненности и давности образования резаных ран с использованием эффективных математических моделей.

Степень достоверности и апробация результатов.

Адекватность примененных автором методов исследования определяет высокую степень достоверности результатов исследования. В ходе статистической обработки полученных данных и решения поставленных задач автором использованы адекватные (с позиций доказательной медицины) математические методы. Исследование достаточного по объему экспериментального материала проведено на сертифицированном оборудовании, установлено качественное совпадение авторских результатов с данными литературы по теме исследования.

По теме диссертации опубликовано 9 работ, из них 3 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Основные результаты исследования доложены и обсуждены на Всероссийской научной конференции с международным участием «Современная военно-полевая хирургия и хирургия повреждений» (г. С. Петербург, 2011), Всероссийской научно-практической конференции посвященной современным проблемам военной медицины, обитаемости и профессионального отбора (г. Санкт-Петербург, 2011), Международном молодежном медицинском конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения -2011» (г. Санкт-Петербург, 2011), Научно-практической конференции с международным участием «Актуальные проблемы судебно-медицинской экспертизы» (г. Москва, 2012), рабочем совещании научно-исследовательских лабораторий крови и тканей и электронной микроскопии и гистохимии ВМедА имени С. М. Кирова (2012), заседаниях Санкт-Петербургского общества судебных медиков (г. С.-Петербург, 2012, 2013), Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы судебной медицины и медицинского права» (г. Суздаль, 2013), а также межкафедральных совещаниях кафедр судебной медицины и патологической анатомии (2011, 2013).

Основные результаты работы используются в научной работе научно-исследовательских лабораторий крови и тканей и электронной микроскопии и гистохимии ВМедА имени С. М. Кирова, а также в учебном процессе кафедры судебной медицины Военно-медицинской академии имени С. М. Кирова.

Личный вклад автора в проведенные исследования.

Автор непосредственно собрала и провела анализ данные отечественной и зарубежной литературы в отношении выбранной темы исследования, сформулировала цель, задачи и положения, выносимые на защиту, выполнила планирование, подготовку и проведение экспериментального исследования, произвела анализ и выполнила статистическую обработку полученных в ходе исследования данных, сформулировала выводы и практические рекомендациипринимала непосредственное участие в исследованиях экспериментального материала при помощи атомно-силового микроскопа.

Автор выражает свою глубокую благодарность научным руководителям — Игорю Анатольевичу Толмачеву и Александру Александровичу Гайдашу за отеческую требовательность, заботу и снисходительность, профессорско-преподавательскому составу кафедры судебной медицины ВМедА имени С. М. Кирова за творческую и доброжелательную атмосферу, сотрудникам кафедры нанотехнологий и материаловедения Национального Исследовательского Университета Информационных технологий, механики и оптики (г. Санкт-Петербург) за плодотворное сотрудничество, профессорам Ольге Николаевне Гайковой и Вадиму Семеновичу Чирскому за конструктивную критику, позволившую в законченном виде представить результаты диссертационного исследования, профессору Анатолию Никифоровичу Белых и доктору медицинских наук Александру Петровичу Божченко за практическую помощь при написании работы.

ВЫВОДЫ.

1. Оптимальным способом подготовки пробы крови для атомно-силовой микроскопии, позволяющим регистрировать морфологические параметры эритроцитов (диаметр, высоту и глубину центральной впадины, а также наноструктуры поверхности мембраны) в максимальной близости к их нативному состоянию, является фиксация мазка крови высушиванием на воздухе.

2. Выявлены морфологические признаки эритроцитов периферической крови, обладающие изменчивостью в связи с нанесением резаной раны и последующим развитием раневого процесса: объемные параметры клетки (диаметр, высота и глубина центральной впадины диска эритроцита), ультраструктурные характеристики мембраны эритроцита (количество пор, глубина и площадь «эрозий» мембраны эритроцита).

Указанные изменения, выявляемые методом атомно-силовой микроскопии, могут являться одним из факторов, способствующих формированию стазов и сладжей эритроцитов в сосудах.

3. Установлена следующая хронологическая последовательность изменений морфологических параметров эритроцитов периферической крови в раннем (до 40 минут) преи постмортальном периодах:

— при прижизненно причиненных резаных ранах к 20-ой минуте выявлено: увеличение объема эритроцита (за счет увеличения диаметра и высоты клетки), увеличение глубины центральной впадины диска эритроцита, увеличение количества пор, уменьшение количества эритроцитов, имеющих «эрозии» поверхности мембраны (по сравнению с группой контроля), уменьшение глубины и увеличение площади «эрозий» мембранык 40-ой минуте при прижизненно причиненных резаных ранах: значения диаметра, высоты, глубины и площади «эрозий» мембраны от контрольных значений не отличались, а глубина центральной впадины диска клетки и количество пор в мембране эритроцита достоверно увеличивались;

— при посмертно причиненных резаных ранах к 40-ой минуте выявлено увеличение диаметра и снижение высоты эритроцита, уменьшение выраженности центральной впадины диска клетки, двукратное увеличение количества пор в мембране эритроцита, уменьшение площади поверхности «эрозий» мембраны.

4. Атомно-силовая микроскопия мазков периферической крови с использованием предложенной математической модели дискриминантного анализа может служить лабораторным методом определения прижизненности образования повреждений.

5. Разработанное посредством регрессионного анализа уравнение является математической моделью, позволяющей определять давность образования резаных ран по результатам исследования эритроцитов периферической крови в пределах 40 минут после причинения повреждения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

При решении диагностической задачи определения прижизненности и/или давности образования прижизненного повреждения методом атомно-силовой микроскопии объектом исследования являются эритроциты периферической крови.

При заборе пробы крови для проведения исследований необходимо учитывать то обстоятельство, что при непосредственном контакте крови с металлической иглой, имеющей малый внутренний диаметр, могут произойти изменения как физико-химического состояния мембран клеток крови, так и их деформация. Во избежание вышеуказанных изменений морфологических характеристик эритроцитов представляется целесообразным выполнение забора крови при помощи игл, покрытых силиконом или венозного катетера для канюлирования вены с минимальной травматичностью, состоящего из иглы, покрытой силиконом и биосовместимого материала собственно катетера.

Мазок крови готовят по стандартной методике, используют шпатель для приготовления мазка из «мягкого пластика» с закругленным краем. Капля крови должна быть небольшой и соразмерна стеклянной подложке так, чтобы весь мазок помещался на стекле, не доходя 0,2−0,3 см до его края. При приготовлении мазка крови нельзя сильно прижимать шпатель к стеклу, дабы механически не повредить клетки крови. Мазки «густо-розового» и красного цвета непригодны для проведения исследований, так как клеточные элементы в таких мазках расположены в несколько слоев.

Для исследований мазков крови методом атомно-силовой микроскопии мазок должен содержать только один слой клеток. Хорошо выполненный мазок имеет слабый желтый цвет и оканчивается «метелочкой». После приготовления мазка его сушат на воздухе до исчезновения влажного блеска. Для хранения мазков крови можно использовать полиэтиленовые упаковочные пакеты с «застежкой».

Показать весь текст

Список литературы

  1. , Г. В. Установление давности происхождения кровоподтеков методом калориметрии и электрофотопигментометрии / Г. В. Ананьев // Материалы II Всесоюзного съезда судебных медиков. М. — Минск, 1982.-С. 127−129.
  2. , П.К. Узловые вопросы теории функциональной системы / П. К. Анохин. М.: Наука, 1980. — 201 с.
  3. Бадмаева, J1.H. Судебно-медицинская диагностика давности травматических внутричерепных кровоизлияний по изменениям некоторых биохимических показателей: автореф. дис.. канд. мед. наук: 14.00.24 / Бадмаева Людмила Николаевна. М., 2004. — 24 с.
  4. , Л. М. Установление прижизненности и давности механических повреждений в судебной медицине / Л. М. Бедрин, C.B. Ерофеев // Судебно-медицинская экспертиза. 1986. — № 3. — С. 48−52.
  5. , О.В. Морфофункциональные изменения мышечной ткани в области последовательно причиненных премортальных колото-резаных ран: автореф. дис.. канд. мед. наук: 14.03.05 / Беломестнова Оксана Валерьевна. М., 2010. — 19 с.
  6. , В.Д. Структурно-системный подход в медицине (уровни организации жизни и их отражение в медицинской теории и организации медицинской науки): актовая речь в день 183-й годовщины академии 29 декабря 1981 г. / В. Д. Беляков. Л.: ВМедА, 1981. — 18 с.
  7. , В.Л. Морфодинамика воспалительного процесса / В. Л. Белянин // Патоморфологические критерии давности механической травмы инекоторых патологических процессов: сб. науч. тр. СПб., 1996. — С. 9−10.
  8. Белянин, B. JL Диагностика воспалительных процессов в биопсийном, операционном и аутопсийном материале: учебное пособие / B.JI. Белянин. СПб., 1998. — 18 с.
  9. , Д.В. Проблемы, нуждающиеся в ускоренной разработке / Д. В. Богомолов // Вестник судебно-медицинской службы. 2006. — № 3. — С. 12−14.
  10. , A.B. Атомно-силовая микроскопия фиксированных клеток: автореф. дис.. канд. физ.-мат. наук: 01.04.07 / Большакова Анастасия Владимировна. М., 2002. — 23 с.
  11. , И.В. Развитие и автоматизация методов измерения рельефа и локальных свойств биологических объектов в атомно-силовой микроскопии: дис.. канд. физ.-мат. наук: 01.04.01 / Быков Иван Вадимович. М., 2010. -116 с.
  12. , А.Г. Морфологические критерии определения давности возникновения ран волосистой части головы: автореф дис.. д-ра мед. наук: 14.00.24 / Гаибов Абдулло Гаибович. Л., 1974. — 35 с.
  13. , А.Г. Местная ранняя морфологическая реакция кожных ран в условиях высокогорья / А. Г. Гаибов // Современная диагностика в судебной медицине: сб. науч. тр. Кишинев, 1981. — С. 92−94.
  14. , Ю.В. Сравнительная характеристика морфологических изменений скелетной мышцы в условиях ее прижизненного и посмертного повреждения: дис.. канд. биол. наук: 03.00.25 / Григорьева Юлия Владимировна. Саранск, 2006. — 134 с.
  15. Джемс-Леви, Д. Е. Посмертные кровоизлияния: автореф. дис.. канд. мед. наук: 14.00.24 / Д.Е. Джемс-Леви. Горький, 1975. — 28 с.
  16. , И.А. Экстремальное состояние организма. Элементы теории и практические проблемы на клинической модели тяжелой сочетанной травмы / И. А. Ерюхин, С. А. Шляпников. СПб.: Эскулап, 1997. — 296 с.
  17. , И.А. Клиническая гематология / И. А. Кассирский, Г. А. Алексеев. М.: Медицина, 1970. — 802 с.
  18. , С.К. Гистохимическое исследование некоторых ферментов для установления прижизненности и давности ран / С. К. Кидралиев // Актуальные вопросы судебно-медицинской травматологии: сб. науч. тр. -Москва, 1975. С. 39−42.
  19. , С.К. Функциональная цитохимия тучных клеток кожи и подкожной клетчатки при повреждениях / С. К. Кидралиев // Судебно-медицинская экспертиза. 1975 — № 2. — С. 16−18.
  20. , М.С. Определение давности образования кровоподтеков методом импедансометрии: дис.. канд. мед. наук: 14.00.24 / Ковалева Маргарита Сергеевна. М., 2006. — 100 с.
  21. , И.А. Прижизненные реакции и их судебно-медицинское значение / И. А. Концевич, С. П. Дидковская, В. А. Шевчук, И. А. Полищук, Т. Я. Пазенко, С. Т. Джигора // Первый Всесоюзный съезд судебных медиков: тез. докл. Киев, 1976. — С. 108−109.
  22. , А.И. О сроках заживления ссадин / А. И. Крат, В. М. Рубин // Второй Всероссийский съезд судебных медиков: тез. докл. Минск, 1982. — С. 122−123.
  23. , И.В. Судебно-медицинское определение давности ран морфологическими методами : автореф. дис.. д-ра мед. наук: 14.774 / И. В. Крыжановская. Киев, 1969. — 40 с.
  24. , И.В. Микроскопические особенности ран человека в зависимости от характера повреждающих предметов / И. В. Крыжановская // Судебно-медицинская экспертиза и криминалистика на службе следствия: сб. науч. тр. Ставрополь, 1971. — С. 318−319.
  25. , И.В. Особенности заживления ран при различных состояниях человека / И. В. Крыжановская // Первый Всесоюзный съезд судебных медиков: тез. докл. Киев, 1976. — С. 101−102.
  26. , В.Н. Электрофоретическая подвижность и морфометрия эритроцитов крыс при стрессовых воздействиях / В. Н. Крылов, A.B. Дерюгина, С. Н. Плескова // Современные технологии в медицине. 2010. — № 4. — С.23−26.
  27. , М.И. Раны и раневая инфекция / М. И. Кудин, Б. М. Костюченок. М., 1981. — 591 с.
  28. Лазаров, И. К Исследование морфологии эритроцитов в резаных ранах кожи с помощью сканирующей электронной микроскопии / И. К. Лазаров, М. Б. Димитров, Г. А. Меченов, И. И. Цанков // Судебно-медицинская экспертиза. 1984. — № 4. — С. 16−18.
  29. , И.К. Исследование количественных изменений простагландина F2a для установления прижизненного характера и давности резаных ран кожи / И. К. Лазаров, С. Францова, Т. Н. Русева // Судебно-медицинская экспертиза. 1987. — № 1. — С. 22−25.
  30. , В.А. Гистоморфологическая характеристика кожных ран головы, верхних и нижних конечностей в зависимости от времени их возникновения / В. А. Лисаковский, A.B. Пермяков // Судебно-медицинские записки: сб. науч. тр. Кишинев, 1977. — С. 98.
  31. , Т.Г. Атомно-силовая микроскопия новый метод исследования биологических объектов / Т. Г. Матюхина // Морфология. — 1999. -№ 1.-С. 51−54.
  32. , Т.Г. Определение эластических свойств ядер и митохондрий методом атомно-силовой микроскопии / Т. Г. Матюхина, А. И. Шельманов, С. А. Чижик // Морфологические ведомости. 2002. — № 3−4. — С. 26−29.
  33. , В.Л. Основы сканирующей зондовой микроскопии: учебное пособие / В. Л. Миронов. Нижний Новгород: РАН ИФМ, 2004. — 114 с.
  34. , Н.П. Изменения поверхностной архитектоники эритроцитов у пострадавших с сочетанной травмой / Н. П. Миронов, И. В. Зайцев, Г. И. Назаренко // Патогенез и лечение изолированных и сочетанных травм: сб. науч. тр. Л.: ВМедА, 1989. — С. 30−31.
  35. , Б.В. Определение прижизненности механических повреждений по количественному содержанию свободного гистамина в травмированной коже: автореф. дис.. канд. мед. наук: 14.00.24 / Михайличенко Борис Валентинович. М., 1987. — 24 с.
  36. , В.В. Атомная силовая микроскопия структуры мембран эритроцитов при острой кровопотере и реинфузии / В. В. Мороз, A.M. Черныш, Е. К. Козлова, А. К. Кирсанова, И. С. Новодержкина, В. В. Александрии, П.Ю.
  37. , У.А. Близнюк, P.M. Рысаева // Общая реаниматология. 2009. -№ 5.-С. 5−9.
  38. , В.Г. Церебральные кровоизлияния при травме / В. Г. Науменко, В. В. Грехов. М., 1975. — 198 с.
  39. , В.Г. Гистологический и цитологический методы исследования в судебной медицине / В. Г. Науменко, H.A. Митяева. М.: Медицина, 1980. — 303 с.
  40. , А.Д. Анатомия крысы (лабораторные животные) / А. Д. Ноздрачев, E. J1. Поляков- под ред. А. Д. Ноздрачева. СПб.: Лань, 2001. — 464 с.
  41. , Т.Я. Судебно-медицинская диагностика прижизненности и давности образования ссадин: автореф. дис.. канд. мед. наук: 14.00.24 / Пазенко Тарас Яковлевич. Киев, 1977. — 20 с.
  42. , Г. А. Диагностика давности смерти по ЭПР-спектрам / Г. А. Пашинян, В. В. Жаров, И. И. Резников // Актуальные вопросы практической медицины. Вып. 3. М.: Грант, 1999. — С. 342−345.
  43. , A.B. Прижизненные и посмертные повреждения. Установление давности и последовательности нанесения повреждений / A.B. Пермяков, В. И. Витер, В. Ю. Толстолуцкий // Основы судебно-медицинской гистологии. Ижевск, 1994. — С. 180−188.
  44. , A.B. Степень выраженности лейкоцитоза показатель давности кожных ран / A.B. Пермяков, C.B. Хасанянова // Проблемы экспертизы в медицине. — 2007. — № 4. — С. 6−7.
  45. , Ю.И. Современные методы определения давности наступления смерти / Ю. И. Пиголкин, Д. В. Богомолов, A.A. Коровин // Судебно-медицинская экспертиза. 1999. — № 3. — С. 31−33.
  46. , Ю.И. Возможности гистоморфометрии в судебно-медицинской теории и практике / Ю. И. Пиголкин, И. Н. Богомолова, Д.В.
  47. , А.Х. Амандурадов // Проблемы экспертизы в медицине. 2001. — № 4.-С. 31−35.
  48. , В.П. Морфологические особенности формирования трупных пятен, локализующихся на различных участках тела: автореф. дис.. канд. мед. наук: 14.00.24 / Подоляко Виталий Петрович. М., 1998. — 24 с.
  49. Попов, B. J1. О методологии установления давности возникновения повреждений / B. J1. Попов // Патоморфологические критерии давности механической травмы и некоторых патологических процессов: сб. науч. тр. -СПб., 1996.-С. 3−8.
  50. Попов, B. JL Решенные и нерешенные проблемы судебной медицины / B. J1. Попов // Судебно-медицинская экспертиза. 2011. — № 1. -С.4−9.
  51. Приказ МЗ СССР от 12.08.1977 г. № 755 «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных».
  52. , А.Д. Определение давности наступления смерти с учетом нозологических причин: автореф. дис.. канд. мед. наук: 14.00.24 / Рамишвили Автандил Демурович. М., 1997. — 23 с.
  53. , И.И. Использование метода ЭПР для диагностики прижизненности и давности травмы / И. И. Резников // Материалы третей международной конференции «Радиоэлектроника в медицинской диагностике». -М., 1999.-С. 168−169.
  54. , Д.С. Очерки истории общей патологии / Д. С. Саркисов. -М.: Медицина, 1988. 336 с.
  55. , М.Ю. Сравнительная оценка морфофункциональных характеристик нативных и фиксированных эритроцитов / М. Ю. Скоркина, М.З.
  56. , С.Д. Чернявских, H.A. Забиняков, Е. А. Сладкова // Цитология. -2011. Т.53. — № 1. — С. 17−21.
  57. , Ю.И. Особенности заживления ссадин при летальной тупой травме / Ю. И. Соседко // Материалы второго Всероссийского съезда судебных медиков. Минск, 1982. — С. 120−122.
  58. , К.В. Нормальная физиология. Курс физиологии функциональных систем: учеб. для студ. мед. вузов / К. В. Судаков. М.: Медицинское информационное агентство, 1999. — 718 с.
  59. , A.A. Проблемы диагностики давности, прижизненности и последовательности нанесения повреждений / A.A. Теньков, С. С. Михайлов // Экспертиза повреждений тупыми предметами: сб. науч. тр. Барнаул, 1978. -С. 84−85.
  60. , И.В. Морфогенез травматической болезни у раненых / И. В. Тимофеев // Общая патология боевой травмы: руководство для врачей и слушателей академии- под общ. ред. Ю. Л. Шевченко. СПб, 1994. — С. 112 126.
  61. , Г. М. Иммунохимический анализ динамики заживления кожных ран / Г. М. Харин, Ю. А. Челышев, Т. Р. Джорджикия, К. В. Ситкина, А. З. Шакирова // Альманах судебной медицины: сб. науч. тр. СПб., 2001. — № 2. -С.125−127.
  62. , С.В. Судебно-медицинское определение давности образования прижизненных кожных ран: автореф. дис.. канд. мед. наук: 14.03.05 / Хасанянова Светлана Владимировна. Ижевск, 2002. — 28 с.
  63. , К.И. Динамика патоморфологии черепно-мозговой травмы / К. И. Хижнякова. М.: Медицина, 1983. — 192 с.
  64. , Ю.Н. Раневая болезнь / Ю. Н. Шанин // Раневая болезнь и медицинская реабилитация: сб. науч. тр. СПб.: Из-во Глаголь, 1995. — С. 8−34.
  65. , В.И. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований / В. И. Юнкеров, С. Г Григорьев // СПб.: ВМедА, 2005. 292 с.
  66. , О.Д. Гистогематический барьер как диагностический критерий при морфологических исследованиях в судебной медицине / О. Д. Ягмуров // Судебно-медицинская экспертиза. 2013. — № 1. — С. 58−62.
  67. AFM force mapping on healthy and EPO red blood cells: project work / O. Hekele, C.G. Goesselsberger. Technische Universitat Wien, Institut fuer Allgemeine Physik, 2006. -41 p.
  68. Afrin, R. Force profiles of protein pulling with or without cytoskeletal links studied by AFM / R. Afrin, A. Ikai // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2006. -Vol. 348(1).-P. 238−244.
  69. Alessandrini, A. AFM: a versatile tool in biophysics / A. Alessandrini, P. Facci // Measurement Science and Technology. 2005. — Vol. 16. — P.65−92.
  70. Bai, R. The time-dependent expressions of IL-lbeta, COX-2, MCP-1 mRNA in skin wounds of rabbits / R. Bai, L. Wan, M. Shi // Forensic Sei. Int. -2008. Vol. 175(2−3). — P. 193−197.
  71. Binnig, G. Scanning tunneling microscopy / G. Binnig, H. Rohrer // Helv. Phys. Acta. 1982. — № 6. — P. 726−735.
  72. Binnig, G. Tunneling through a controllable vacuum gap / G. Binnig, H. Rohrer, Ch. Gerber, E. Weibel // Appl. Phys. Lett. 1982. — Vol. 40. — P. 178.
  73. Binnig, G. Atomic force microscope / G. Binnig, C.F. Quate, Ch. Gerber // Phys. Rev. Lett. 1986. — Vol. 56. — P. 930.
  74. Bremmell, K.E. Deformation and nano-rheology of red blood cells: an AFM investigation / K.E. Bremmell, A. Evans, C.A. Prestidge // Colloids Surf. B. Biointerfaces. 2006. — Vol. 50(1). — P. 4318.
  75. Bremmer, R.H. Forensic quest for age determination of bloodstains / R.H. Bremmer, K.G. de Bruin, M.J. van Gemert, T.G. van Leeuwen, M.C. Aalders // Forensic Sci. Int. 2012. — Vol. 216(1−3). — P. 1−11.
  76. Butt, H.-J. Imaging cells with the atomic force microscope / H.-J. Butt, E.K. Wolff, S.A.C. Gould, B.D. Northern, C.M. Peterson, P.K. Hansma // J. of Structural Biology. 1990. — Vol. 105. — P. 54−61.
  77. Chen, Y. Membrane deformation of unfixed erythrocytes in air with time lapse investigated by tapping mode atomic force microscopy / Y. Chen, J. Cai // Micron. 2006. — Vol. 37(4). — P. 339−346.
  78. Chicea, D. The application of AFM for biological samples imaging / D. Chicea, B. Neamtu, R. Chicea, L.M. Chicea // Digest. J. of Nanomaterials and Biostructures. 2010. — Vol. 5(4). — P. 1015−1022.
  79. Ebner, A. Normal and pathological erythrocytes studied by atomic forcemicroscopy / A. Ebner, H. Schillers, P. Hinterdorfer // Methods Mol. Biol. 2011. -Vol. 736.-P. 223−241.
  80. Fan, Y.Y. Time-dependent expression and distribution of Egr-1 during skeletal muscle wound healing in rats / Y.Y. Fan, G.H. Ye, K.Z. Lin, L.S. Yu, S.Z. Wu, M.W. Dong, J.G. Han, X.P. Feng, X.B. Li // J. Mol. Histol. 2013. — Vol. 44(1). -P. 75−81.
  81. Grandbois, M. Affinity Imaging of Red Blood Cells Using an Atomic Force Microscope / M. Grandbois, W. Dettmann, M. Benoit, H.E. Gaub // The J. of Histochemistry and Cytochemistry. 2000. — Vol. 48(5). — P. 719−724.
  82. Guler, H. The importance of tenascin and ubiquitin in estimation of wound age / H. Guler, E.O. Aktas, H. Karali, S. Aktas // Am. J. Forensic Med. Pathol.-2011.-Vol. 32(1).-P. 83−89.
  83. Hategan, A. Adhesively tensed cell membranes: lysis kinetics and atomic force microscopy probing / A. Hategan, R. Law, S. Kahn, D.E. Discher // Biophysical J. 2003. — Vol. 85. — P. 2746−2759.
  84. Hekele, O. Nanodiagnostics performed on human red blood cells with atomic force microscopy / O. Hekele, C.G. Goesselsberger, I.C. Gebeshuber // Materials Science and Technology. 2008. — Vol. 24(9). — P. 1162−1165.
  85. Hofmann, U.G. Investigating the cytoskeleton of chicken cardiocyteswith the atomic force microscope / U.G. Hofmann, C. Rotsch, W.J. Parak, M. Radmacher // J. of Structural Biology. 1997. — Vol. 119. — P. 84−91.
  86. Ishida, Y. Expression of oxygen-regulated protein 150 (ORP150) in skin wound healing and its application for wound agedetermination / Y. Ishida, A. Ki-mura, T. Takayasu, W. Eisenmenger, T. Kondo // Int. J. Legal Med. 2008. — Vol. 122(5).-P. 409−414.
  87. Ishida, Y. Detection of fibrocytes in human skin wounds and its application for wound age determination / Y. Ishida, A. Kimura, T. Takayasu, W. Eisenmenger, T. Kondo // Int. J. Legal Med. 2009. — Vol. 123(4). — P. 299−304.
  88. Ishida, Y. Immunohistochemical analysis on cyclooxygenase-2 for wound age determination / Y. Ishida, A. Kimura, M. Nosaka, Y. Kuninaka, T. Takayasu, W. Eisenmenger, T. Kondo // Int. J. Legal Med. 2012. — Vol. 126(3). — P. 435−440.
  89. Ji, X.-L. Application of atomic force microscopy in blood research / X.-L. Ji, Y.-M. Ma, T. Yin, M.-S. Shen, X. Xu, W. Guan // World J. Gastroenterol. -2005.-Vol. 11(10).-P. 1709−1711.
  90. Jin, H. Detection of erythrocytes influenced by aging and type 2 diabetes using atomic force microscope / H. Jin, X. Xing, H. Zhao, Y. Chen, X. Huang, S. Ma, H. Ye, J. Cai // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2010. — Vol. 391(4). — P. 16 981 702.
  91. Kondo, T. Molecular pathology of wound healing / T. Kondo, Y. Ishida // Forensic Sci. Int. 2010. — Vol. 203(1−3). — P. 93−98.
  92. Kotynska, J. Changes in Surface-Charge Density of Blood Cells After Sudden Unexpected Death / J. Kotynska, A.D. Petelska, M. Szeremeta, A. Niemcunowicz-Janica, Z.A. Figaszewski // J. Membr. Biol. 2012. — Vol. 245(4). -P. 185−190.
  93. Kubo, N. Structural Analysis Using Atomic Force Microscopy of the Surface of Red Blood Cells to Detect Anti-Red Blood Cell Autoantibody / N. Kubo, R. Hirota, T. Okada, T. Ohara, M. Kawano, K. Itoh // Laboratory Hematology. -2003. Vol. 9. — P. 4719.
  94. Laiho, К. Autolytic changes in blood cells and other tissue cells of human cadavers. I. Viability and ion studies / K. Laiho, A. Penttila // Forensic Sci. Int.-1981.-Vol. 17(2).-P. 109−120.
  95. Lekka, M. Erythrocyte stiffness probed using atomic force microscope / M. Lekka, M. Fornal, G. Pyka-Fosciak, K. Lebed, B. Wizner, T. Grodzicki, J. Styczen // Biorheology. 2005. — Vol. 42(4). — P. 307−317.
  96. Liu, F. Sample preparation and imaging of erythrocyte cytoskeleton with the atomic force microscopy / F. Liu, J. Burgess, H. Mizukami, A. Ostafin // Cell. Biochem. Biophys. 2003. — Vol. 38(3). — P. 251−270.
  97. Luna, A. Is postmortem biochemistry really useful? Why is it not widely used in forensic pathology? Электронный ресурс. / A. Luna // Legal Med. 2009. — Vol. 11. — P. 27−30. — Режим доступа: http://10.1016/j.legalmed.2009.02.040.
  98. Mao, S. Supplementary pathway for vitality of wounds and wound age estimation in bruises using the electric impedance spectroscopy technique / S. Mao, F. Fu, X. Dong, Z. Wang // J. Forensic Sci. 2011. — Vol. 56(4). — P. 925−929.
  99. Millholland, M.G. The Malaria Parasite Progressively Dismantles the Host Erythrocyte Cytoskeleton for Efficient Egress / M.G. Millholland, R. Chandramohanadas, A. Pizarro, A. Wehr, H. Shi, C. Darling, С. T. Lim, D.C.
  100. Greenbaum. The American Society for Biochemistry and Molecular Biology, 2011. -40 p.
  101. Mozhanova, A. A. Local elastic properties of biological materials studied by SFM / A.A. Mozhanova, N.I. Nurgazizov, A.A. Bukharaev // SPM-2003. Proc. Nizhni Novgorod, March 2−5, 2003. P. 266−267.
  102. Nowakowki, R. Imaging erythrocytes under physiological conditions by atomic force microscopy / R. Nowakowki, P. Luckham, P. Winlove // Biochimica et Biophysica Acta. 2001. — Vol. 1514. — P. 170−176.
  103. Penttila, A. Autolytic changes in blood cells of human cadavers. II. Morphological studies / A. Penttila, K. Laiho // Forensic Sci. Int. 1981. — Vol. 17(2).-P. 121−132.
  104. Querido, D. Linear rate of change in the product of erythrocyte water content and potassium concentration during the 0−120-hour postmortem period in the rat / D. Querido, B. Pillay // Forensic Sci. Int. 1988. — Vol. 38(1−2). — P. 101−112.
  105. Querido, D. In vitro loss of potassium from erythrocytes during the 0108 h postmortem period in rats: relationship between potassium loss and postmortem interval / D. Querido // Forensic Sci. Int. 1991. — Vol. 51(1). — P. 111 123.
  106. Sen, S. Indentation and Adhesive Probing of a Cell Membrane with AFM: Theoretical Model and Experiments / S. Sen, S. Subramanian, D.E. Discher // Biophys. J. 2005. — Vol. 89(5). — P. 3203−3213.
  107. Shroff, S.G. Dynamic micromechanical properties of cultured rat atrial myocytes measured by atomic force microscopy / S.G. Shroff, D.R. Saner, R. Lai // Biophys. J. 1997. — Vol. 73(2). — P. 653−658.
  108. Strasser, S. Age determination of blood spots in forensic medicine by force spectroscopy / S. Strasser, A. Zink, G. Kada, P. Hinterdorfer, O. Peschel, W.M. Heckl, A.G. Nerlich, S. Thalhammer // Forensic Sci. Int. 2007. — Vol. 170(1). — P. 8−14.
  109. Swihart, A.H. Atomic force microscopy of the erythrocyte membrane skeleton / A.H. Swihart, J.M. Mikrut, J.B. Kertterson, R.C. Macdonold // J. of microscopy. 2001. -Vol. 204. — P. 212−225.
  110. Takeuchi, M. Structure of the erythrocyte membrane skeleton as observed by atomic force microscopy / M. Takeuchi, H. Miyamoto, Y. Sako, H. Komizu, A. Kuzumi // Biophysical J. 1998. — Vol. 74. — P. 2171−2183.
  111. Takeichi, S. Fluidity of cadaveric blood after sudden death: part I. Posmorten fibrinolysis and plasma catecholamine level / S. Takeichi, C. Wakasugi, I. Shikata // Am. J. Forensic Med. Pathol. 1984. — Vol. 5. — P. 223−227.
  112. Takeichi, S. Fluidity of cadaveric blood after sudden death: part II. Mechanism of release of plasminogen activator from blood vessels / S. Takeichi, C. Wakasugi, I. Shikata // Am. J. Forensic Med. Pathol. 1985. — Vol. 6. — P. 25−29.
  113. Takeichi, S. Fluidity of cadaveric blood after sudden death: part III. Acid-base balance and fibrinolysis / S. Takeichi, C. Wakasugi, I. Shikata //Am. J. Forensic Med. Pathol. 1986. — Vol. 7. — P. 35−38.
  114. Wang, H. Preparation of cell membranes for high resolution imaging by AFM / H. Wang, X. Hao, Y. Shan, J. Jiang, M. Cai, X. Shang // Ultramicroscopy. -2010. Vol. 110(4). — P. 305−312.
  115. Wu, Y. The analysis of morphological distortion during AFM study of cells / Y. Wu, Y. Hu, J. Cai, S. Ma, X. Wang, Y. Chen // Scanning. 2008. — Vol. 30(5). — P. 426−432.
  116. Wu, Y. Time-dependent surface adhesive force and morphology of RBC measured by AFM / Y. Wu, Y. Hu, J. Cai, S. Ma, X. Wang, Y. Chen, Y. Pan // Micron. 2009. — Vol. 40(3). — P. 359−364.
  117. Yu, T.S. The cannabinoid receptor type 2 is time-dependently expressed during skeletal muscle wound healing in rats / T.S. Yu, Z.H. Cheng, L.Q. Li, R. Zhao, Y.Y. Fan, Y. Du, W.X. Ma, D.W. Guan // Int. J. Legal Med. 2010. — Vol. 124(5). — P. 397−404.
  118. Zhang, Y. Detection of erythrocytes in patient with iron deficiency anemia using atomic force microscopy / Y. Zhang, W. Zhang, S. Wang, C. Wang, J. Xie, X. Chen, Y. Xu, P. Mao // Scanning. 2011. — Vol. 33. — P. 1−6.
Заполнить форму текущей работой