Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Влияние белка CRABP1 на биологические характеристики трансформированных клеток мезенхимального происхождения, ассоциированные с опухолевой прогрессией

Диссертация: Влияние белка CRABP1 на биологические характеристики трансформированных клеток мезенхимального происхождения, ассоциированные с опухолевой прогрессией
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Предшественники малых шпилечных РНК к кодирующей последовательности CRABP1 были заклонированы в лентивирусный вектор pLKO. l puro по сайтам Agel и EcoRI. В данной работе использовались следующие последовательности малых шпилечных РНК: shA 5' TCTATATCAAGACATCCACCACTCGAGTGGTGGATGTCTTGATATAGAT TTTG3'- ShB 5' CACAAGAATTTATGTCCGGGACTCGAGTCCCGGACAT AAATTCTTGTGTTTTTG3', shC 5' CGGACGC AAGTGCAGGAGTTTCTCG… Читать ещё >

Содержание

  • Список использованных сокращений

1. Обзор литературы. Функции белка CRABP1 в норме и при опухолевой трансформации: регуляция метаболизма и биологической активности ретиноевой кислоты.

1.1 Введение.

1.2 Функции ретиноевой кислоты в организме.

1.3 Рецепторы ретиноевой кислоты: RAR- и RXR-белки.

1.4 Метаболизм и транспорт ретиноевой кислоты.

1.5 Строение и внутриклеточные функции белка CRABP1.

1.6 Роль CRABP1 в патогенезе промиелоцитарного лейкоза.

1.7 Экспрессия CRABP1 в развитии солидных опухолей.

Влияние белка CRABP1 на биологические характеристики трансформированных клеток мезенхимального происхождения, ассоциированные с опухолевой прогрессией (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Опухолевая прогрессия — сложный, многоступенчатый процесс, включающий в себя развитие первичной опухоли и распространение опухолевых клеток по организму, что приводит к образованию узлов вторичного роста опухоли в отдаленных органах. Именно этот процесс, называемый метастазированием, чаще всего приводит к гибели больного. Процессы, приводящие к формированию метастатического фенотипа трансформированных клеток, очень разнообразны и одновременно взаимосвязаны и затрагивают самые разные аспекты клеточной жизнедеятельности. Несмотря на достижения последних лет, касающиеся роли отдельных белков и внутриклеточных сигнальных каскадов, картина событий, происходящих в процессе малигнизации, достаточно противоречива и фрагментарна. Идентификация и функциональный анализ ключевых белков и сигнальных каскадов, задействованных в регуляции опухолевой прогрессии и метастазирования, безусловно, является одной из важнейших фундаментальных задач молекулярной биологии и экспериментальной онкологии.

Злокачественные опухоли мягких тканей (ОМТ) составляют 2% от всех зарегистрированных злокачественных новообразований и характеризуются большим разнообразием форм, что затрудняет их исследование. Следует отметить, что данные опухоли, как правило, развиваются у лиц молодого возраста, что часто приводит к потере трудоспособности. Одним из отличительных свойств ОМТ является повышенная частота рецидивирования и метастазирования, а также характер метастазирования — преимущественно гематогенный и трансплантационный. С точки зрения молекулярных изменений опухоли мягких тканей на сегодняшний день охарактеризованы довольно плохо, хотя очевидно, что они отличаются по спектру молекулярных нарушений от опухолей органного и эпителиального происхождения. Также мало освещен вопрос о факторах прогрессии этих новообразований. Исследование особенностей прогрессии сарком и механизмов, обеспечивающих их высокий метастатический потенциал, является чрезвычайно актуальным и представляет собой фундаментальную проблему, решение которой может способствовать успешному прогнозированию течения заболевания и развитию таргетной терапии.

Одним из основных подходов к изучению механизмов метастазирования и опухолевой прогрессии являются исследования на экспериментальных моделях. Одной из таких моделей является панель клеточных линий мезенхимального происхождения — фибробластов сирийского хомяка, трансформированных вирусом саркомы Рауса, принципиально отличающихся между собой по уровню органоспецифического метастазирования в легкие при введении экспериментальным животным. Основным достоинством этой модели является возможность проведения теста на спонтанную метастатическую активность (СМА) на иммунокомпетентных животных. Данный тест позволяет смоделировать все этапы прогрессии — возникновение первичной подкожной опухоли, интравазию и распространение опухолевых клеток по кровотоку, выживание в кровотоке, экстравазию в органы-мишени и пролиферацию в очаге вторичного роста в условиях активного противоопухолевого иммунитета. Таким образом, данная модель представляется чрезвычайно перспективной для изучения механизмов опухолевой прогрессии и обнаружения потенциальных маркеров метастазирования.

Ранее Зуевой Э. Ш. при сравнении профилей экспрессии двух клеточных линий из описанной выше панели — низкометастазной НЕТ-8Я и высокометастазной НЕТ-БЮ с помощью двумерного гель-электрофореза были получены первичные данные, свидетельствующие о принципиальном различии в уровне продукции клеточного белка, связывающего ретиноевую кислоту — СЯАВР1. Основной функцией этого белка является участие в модуляции клеточного ответа на действие ретиноевой кислоты. Изменение экспрессии CRABP1 характерно для ряда новообразований человека, таких как опухоли молочной железы, аденокарциномы эндометрия, немелкоклеточный рак легкого, рак яичников и нейрогенные опухоли, и, по некоторым сведениям, может коррелировать с неблагоприятным медицинским прогнозом. При этом молекулярные механизмы участия данного белка в процессах канцерогенеза практически не изучены. На сегодняшний день в научной литературе отсутствуют данные о роли этого белка в процессе метастазирования.

Целью данной работы было изучение роли белка CRABP1 в регуляции ключевых биологических характеристик трансформированных клеток мезенхимального происхождения, ассоциированных с опухолевой прогрессией in vitro и in vivo.

В соответствии с указанной целью были поставлены следующие экспериментальные задачи:

1. Выявить корреляцию между экспрессией CRABP1 и уровнем спонтанной метастатической активности клеточных линий панели RSVтрансформированных фибробластов сирийского хомяка;

2. Гиперэкспрессировать кодирующую последовательность мРНК CRABP1 хомяка в низкометастазной клеточной линии HET-SRисследовать влияние экзогенного CRABP1 на туморогенность и спонтанную метастатическую активность клеток данной линии;

3. Получить производные высокометастазной клеточной линии HET-SR1 с подавленной экспрессией CRABP1 и изучить их туморогенность, а также экспериментальную и спонтанную метастатическую активность;

4. Провести сравнительный анализ основных клеточных характеристик полученных линий in vitro: динамики пролиферации, миграционной активности, клоногенности и способности к неприкрепленному росту, а также экспрессии ряда протеаз, разрушающих внеклеточный матрикс (uPA, ММР-2, ММР-9, ММР-13) и маркеров клеточной дифференцировки (CD24, RALDH1, RAR (3 и CYP26A1);

5. Получить мутантную форму С11АВР1, не связывающую ретиноевую кислоту, и изучить влияние экспрессии данной конструкции на туморогенность низкометастазной клеточной линии НЕТ-БЫ;

6. Провести анализ экспрессии С ЛАВР 1 в образцах злокачественных опухолей мягких тканей человека.

выводы.

1. Обнаружена прямая корреляция между экспрессией СЯАВР1 и уровнем спонтанной метастатической активности Я8У-трансформированных фибробластов сирийского хомяка;

2. Гиперэкспрессия СЯАВР1 в низкометастазной клеточной линии НЕТ-8Я вызывает значительное повышение ее туморогенности;

3. Подавление экспрессии эндогенного СЯАВР1 в высокометастазной клеточной линии НЕТ-БЮ приводит к достоверному снижению туморогенности и спонтанной метастатической активности, а также к уменьшению количества легочных макрометастазов при внутривенном введении клеток;

4. Снижение экспрессии СЯАВР1 в линии НЕТ-БШ стимулирует направленную миграционную активность клеток в камерах Бойдена и их способность к колониеобразованию в полужидкой среде;

5. Производные линии НЕТ-БЮ с подавленной экспрессией СЯАВР 1 характеризуются уменьшением экспрессии ММР-14 и снижением активности секретируемых коллагеназ;

6. Гиперэкспрессия мутантной формы СЯАВР 1 ЯША, неспособной связывать ретиноевую кислоту, повышает туморогенность низкометастазной клеточной линии НЕТ-8Я наравне с гиперэкспрессией СЯАВР 1 дикого типа;

7. Показано изменение экспрессии СЯАВР! в 60% исследованных образцов злокачественных опухолей мягких тканей человекаповышение экспрессии СЯАВР 1 наблюдается в 46% случаях синовиальных сарком и ЗФГ.

1.8 Заключение.

Безусловно, на сегодняшний день белок СЫАВР1 недостаточно хорошо охарактеризован с точки зрения его функционирования. Данные о его роли в формировании клеточного ответа на воздействие РК противоречивы и, несмотря на их многообразие, не позволяют однозначно судить об его участии в РК-опосредованных дифференцировочных программах и процессах метаболизма РК. Схожая ситуация наблюдается и при анализе сведений об участии этого белка в патогенезе неопластических заболеваний. Изменение экспрессии СКАВР1 характерно для гемобластозов и солидных новообразований разнообразного происхождения, однако механизмы, позволяющие этим изменениям играть роль в опухолевой прогрессии, практически не установлены и, несомненно, представляют теоретический и практический интерес.

Исследования, посвященные влиянию белка С11АВР1 на метаболизм РК, тем более актуальны, если принять во внимание, что терапия ретиноевой кислотой представляет собой один из первых и, безусловно, ярких примеров успешной генонаправляемой дифференцировочной терапии в лечении острых лейкозов. Подобные исследования открывают новые возможности для применения так называемой «транскрипционной терапии», являющейся частью современного перспективного направления, каковым является генотерапия рака.

2. Материалы и Методы.

2.1 Клеточные линии.

В качестве экспериментальной модели для данного исследования использовались эмбриональные фибробласты сирийского хомяка (Mesocricetus auratus трансформированные вирусом саркомы Рауса штамма Шмидт-Руппин D: HET-SR, HET-SR-1, HET-SR-8 и HET-SR-2SC. Для получения ретрои лентивирусных частиц использовались линии эпителиальных клеток GP293 (Clonetech) и 293FT (Invitrogen) (производные линии НЕК-293 — линии эмбриональных клеток почки человека). Все клеточные линии культивировали в С02-инкубаторе при +37 °С, 5% СОгВ качестве среды для культивирования использовали среду DMEM с 0,294 мг/мл L-глутамина с добавлением 10% эмбриональной сыворотки крупного рогатого скота (РАА Laboratories), 0,1 мг/мл стрептомицина, 100 ед./мл пенициллина.

2.2 Выделение нуклеиновых кислот.

2.2.1 Выделение плазмидной ДНК.

Отдельная колония клеток E. coli, содержащая трансформированные плазмидой клетки, перекалывалась с культуральной чашки с LB-агаром с ампициллином (50 мкг/мл) в 10 мл среды LB с ампициллином той же концентрации и выращивалась в течение ночи при +37 °С при интенсивном перемешивании (200 об/мин). Затем плазмидную ДНК выделяли из бактериальных клеток методом щелочного лизиса.

Бактерии осаждали центрифугированием (3000 g, 10 мин, +4 °С). Осадок клеток ресуспендировали в 150 мкл раствора 1 и инкубировали 5 мин на льду. Затем добавляли 400 мкл лизирующего раствора 2, содержимое пробирки аккуратно перемешивали и инкубировали на льду 5 мин до полного лизиса клеток. После этого вносили 250 мкл раствора 3, пробирку немедленно встряхивали 5−6 раз и центрифугировали 15 мин при 10 000−15000g для отделения осадка, содержащего геномную ДНК бактерий, связанных с ней компонентов клеточной стенки и выпавших в осадок белков. Надосадочную жидкость переносили в новые пробирки и добавляли 500 мкл изопропилового спирта. Содержимое пробирок центрифугировали 10 мин при 10 000−15 000 g. Надосадочную жидкость удаляли, осадок промывали 70% этиловым спиртом и подсушивали. Осадок растворяли в 200 мкл раствора РНКазы, А (100−200 мкг/мл) в воде и инкубировали при +37 °С 15−30 мин для деградации бактериальной РНК.

После инкубации к раствору добавляли равный объем смеси фенола-хлороформа в соотношении 1:1. Производили интенсивное перемешивание с последующим центрифугированием в течение 5 мин при 15 000 g. Верхнюю водную фазу аккуратно переносили в новую пробирку, и процедуру повторяли. Затем к отобранной водной фазе добавляли равный объем хлороформа, пробирку тщательно встряхивали и проводили пятиминутное центрифугирование при 15 000 g. Надосадочную жидкость отбирали и переосаждали плазмидную ДНК 2,5 объемами 96% этилового спирта в присутствии 0,1 М NaCl, смесь охлаждали 20 мин при -20 °С и центрифугировали 10 мин. при 10 000−15 000 g. Осадок промывали 70% этиловым спиртом, высушивали и растворяли в 50 мкл воды. Концентрация плазмидной ДНК определялась на спектрофотометре NanoDrop ® ND-1000 («NanoDrop Technologies Inc.», США).

2.2.2 Выделение РНК из клеточных культур и образцов опухолевых тканей.

За день до эксперимента исследуемые клетки высаживали на 60 мм чашку Петри в количестве 5×105 клеток. На следующий день для выделения тотальной РНК клетки лизировали на чашке в 1 мл Trizol-reagent (Invitrogen). В случае опухолевых тканей образец, замороженный в жидком азоте, гомогенезировали в 1 мл Trizol-Reagent. В дальнейшем процедура выделения не отличалась. К лизату добавляли 200 мкл хлороформа, затем центрифугировали 15 мин при 12 000 g при +4 °С. Верхнюю водную фазу переносили в новую пробирку и осаждали добавлением равного объёма изопропилового спирта с последующим центрифугированием 15 мин при 12 000 g при +4°С. Осадок РНК промывали 1 мл 70% этилового спирта на DEPC-обработанной воде, подсушивали на воздухе и растворяли в соответствующем объеме DEPC-обработанной деионезированной воды. Концентрации растворов РНК и качество их спектров определяли на спектрофотометре NanoDrop ® ND-1000 («NanoDrop Technologies Inc.», США). Далее использовались образцы РНК, для которых соотношение А260/А280 составляло не менее 1.8−2.0.

2.2.3 Выделение фрагментов ДНК из агарозных гелей Для выделения ДНК из агарозных гелей использовали 1% смесь агароз [0.75% легкоплавкой агарозы (Nu Sieve GTG) и 0.25% обычной агарозы (GibcoBRL)]. После электрофоретического разделения ДНК полоску геля из легкоплавкой агарозы, содержащую нужный фрагмент (объемом около 100 мкл), переносили в микропробирку, плавили при +70 °С в течение 3−4 мин и затем быстро замораживали в жидком азоте. После этого содержимое пробирки оттаивали при комнатной температуре и центрифугировали 15 мин при 15 000 g для удаления из раствора агарозы.

2.3 Аналитический электрофорез ДНК в агарозных гелях Процентное содержание агарозы (GibcoBRL) в буфере ТАЕ (см. список использовавшихся растворов и сред), оптимальное для разделения фрагментов ДНК в геле, определяли в соответствии с длинами анализируемой ДНК: 0,6% - 1 — 20 т.п.н., 0,9% - 0,5 — 7 т.п.н., 1,2% - 0,4 — 6 т.п.н., 1,5% - 0,2 — 3 т.п.н., 2,0% - 0,1 — 2 т.п.н. Гель содержал 0,5 мкг/мл бромистого этидия. Перед нанесением на гель к образцу ДНК добавляли буфер для нанесения (1/6 объема образца) (см. список растворов и сред).

Разделение фрагментов ДНК проводилось с учетом расстояния между электродами при максимальном напряжении 5 В/см. ДНК в геле регистрировали по флюоресценции в проходящем ультрафиолетовом свете с длиной волны от 240 до 360 нм. Для анализа размера ДНК использовались маркеры молекулярного веса фирм Fermentas, Invitrogen.

2.4 Молекулярное клонирование.

2.4.1 Получение компетентных клеток Е. coli.

В работе использовали штамм бактерий Е. coli DH5ot. Замороженный бактериальный сток разводился в 100, 1000 и 10 000 раз. Разведения рассевали на чашки с LB-агаром без ампициллина в асептических условиях. Чашки инкубировали в течение ночи при +37 °С. На следующий день выбирали чашку с примерно 10 000 отдельных колоний. Бактерии смывали 2,5−3 мл среды LB без ампициллина. Далее суспензию клеток переносили в 300 мл среды SOB, содержащей ЮмМ MgSU4, до оптической плотности OD6oo=0,05. Суспензия клеток инкубировалась при +37 °С в шейкере (200−250 об/мин) примерно в течение 50−60 мин до достижения оптической плотности OD600=0,15, после чего немедленно помещали в ледяную баню на 10 мин. Клетки собирали центрифугированием при 4000 g, 10 мин при +4 °С, образовавшийся осадок клеток ресуспендировали в 150 мл ледяного раствора RF1. Клетки осаждали повторным центрифугированием в тех же условиях. После повторного центрифугирования осадок ресуспендировали в 15−30 мл ледяного раствора RF2. Затем клеточная суспензия делилась на аликвоты по 100 мкл, которые помещали в охлажденные стерильные микропробирки и замораживали в жидком азоте.

Для оценки степени компетентности полученных клеток проводили трансформацию разными количествами плазмиды pBS2SKM. Компетентность клеток составляла 10″ 6 — 10~8 мкг/мкл плазмиды.

2.4.2 Трансформация компетентных клеток E.coli.

К 100 мкл компетентных клеток на льду добавляли аликвоту лигазной смеси или плазмидной ДНК (до 10 мкл) и инкубировали 30 мин на льду. После этого клетки подвергали тепловому шоку (+42 °С, 90 сек) и снова инкубировали на льду 5 мин. Затем к клеткам добавляли 1 мл среды LB без ампициллина и проводили инкубацию при +37 °С в течение 60 мин. Суспензию клеток центрифугировали при 3000 g 10 мин. Осадок клеток в остаточном объеме 100 мкл высевали на чашки Петри с LB-агаром и 50 мкг/мл ампициллина. Чашки инкубировали в течение 16−24 часов при +37 °С. Плазмидную ДНК клонов анализировали с помощью рестрицирующих эндонуклеаз, ПЦР in situ, а также секвенированием.

2.4.3 Обработка ДНК рестрицирующими эндонуклеазами.

Гидролиз ДНК рестрицирующими эндонуклеазами проводили с использованием ферментов разных фирм в условиях, рекомендуемых производителями. Обычно реакционная смесь содержала рестрикционный буфер (1/10 от общего объема), необходимое количество ДНК и рестриктаз, бычий сывороточный альбумин (до концентрации 1 мг/мл) и деионизированную воду до конечного объема 20 мкл. Рестрикцию проводили при оптимальной для фермента температуре (обычно +37 °С) в течение 1−2 часов. Продукты рестрикции анализировали с помощью электрофореза в агарозном геле.

2.4.4 Реакция лигирования.

Реакцию лигирования «липких» концов плазмидной ДНК проводили с использованием ДНК-лигазы бактериофага Т4 (Fermentas) в условиях, рекомендованных производителем (1−2 единицы на 20 мкл лигазной смеси). Выделенные из геля векторную ДНК и клонируемый фрагмент лигировали в молярном соотношении 1:2−1:3. Реакция проводилась при +16 °С в течение часа, либо при +4 °С в течение ночи. Полученную смесь использовали для трансформации компетентных клеток Е. coli. Перед трансформацией лигазу инактивировали инкубацией в течение 10 мин при +65 °С.

2.4.5 Клонирование кодирующей последовательности гена с кДНК.

Для клонирования кодирующей последовательности гена CRABP1 сирийского хомяка использовали праймеры, подобранные на консенсусные последовательности, фланкирующие кодирующую область мРНК CRABP1 у мыши и крысы — CRABP1 cloning F 5'TATCTCGAGACCATGCCCAACTTC3' и CRABP1 cloning F — 5'TAAGG^rCCGGССАССТТТАСТССЗ'.(рестриктиые сайты выделены курсивом, части отжигающиеся на мРНК подчеркнуты). В качестве матрицы для ПЦР использовали кДНК из линии HET-SR1, т.к. мРНК CRABP1 экспрессируется там на высоком уровне. Амплификацию проводили в присутствии высокоточной полимеразы PFX (Invitrogen) согласно протоколу производителя. Очистку ПЦРного продукта и выделение рестриктных фрагментов из агарозного геля проводили с использованием QIAquick Gel Extraction Kit (Qiagen) согласно протоколу производителя. Секвенирование плазмидной ДНК проводили с помощью набора реактивов ABI PRISM® BigDye™ Terminator v. 3.1 с последующим анализом продуктов реакции на автоматическом секвенаторе ДНК ABI PRISM 3730 Applied Biosystems.

2.4.6 Клонирование предшественников малых шпилечных РНК.

Предшественники малых шпилечных РНК к кодирующей последовательности CRABP1 были заклонированы в лентивирусный вектор pLKO. l puro по сайтам Agel и EcoRI. В данной работе использовались следующие последовательности малых шпилечных РНК: shA 5' TCTATATCAAGACATCCACCACTCGAGTGGTGGATGTCTTGATATAGAT TTTG3'- ShB 5' CACAAGAATTTATGTCCGGGACTCGAGTCCCGGACAT AAATTCTTGTGTTTTTG3', shC 5' CGGACGC AAGTGCAGGAGTTTCTCG AGAAACTCCTGCACTTGCGTCCGTTTTTG3' (смысловая и антисмысловая последовательность подчеркнуты). Для клонирования каждого конструкта синтезировали олигонуклетоиды (F и R для каждой конструкции), модифицированные липкими концами для соответствующих рестриктных сайтов. Олигонуклеотиды отжигали друг на друге при 95 °C в эквимолярном соотношении в течение 10 минут. Затем проводили киназную реакцию 20 пмолей полученной смеси в присутствии киназы Т4 (Fermentas) согласно протоколу производителя. Полученные конструкции использовали для молекулярного клонирования. Секвенирование плазмидной ДНК проводили с помощью набора реактивов ABI PRISM® BigDye™ Terminator v. 3.1 с последующим анализом продуктов реакции на автоматическом секвенаторе ДНК ABI PRISM 3730 Applied Biosystems 2.4.7 Сайт-направленный мутагенез Для получения мутантного белка Crabpl R131A использовался обратный праймер Crabpl R131A R: GCCGG^rCCGGCCACCTTTACT CCCGGACATAAATTGCTGTGCACA (кодон с мутацией подчеркнут, рестриктный сайт выделен курсивом) и праймер pLXSN F (см. таблицу 1). В качестве матрицы для ПЦР использовали плазмиду pLXSN, несущую кодирующую последовательность мРНК CRABP1 сирийского хомяка. Амплификацию проводили в присутствии высокоточной полимеразы PFX (Invitrogen) согласно протоколу производителя. После амплификации проводили очистку ПЦР-продукта в агарозном геле. Выделение из агарозного геля проводили с использованием QIAquick Gel Extraction Kit (Qiagen) согласно протоколу производителя. Секвенирование плазмидной ДНК проводили с помощью набора реактивов ABI PRISM® BigDye™ Terminator v. 3.1 с последующим анализом продуктов реакции на автоматическом секвенаторе ДНК ABI PRISM 3730 Applied Biosystems 2.5 Обратная транскрипция РНК.

Для получения одноцепочечных кДНК в реакцию брали 2 мкг суммарной РНК, предварительно обработанной ДНКазой I согласно протоколу производителя (1ед на 1 мкг РНК) (Fermentas). Два мкг тотальной РНК смешивали с 80 пмоль random 9 праймера в общем объеме 25 мкл. Реакционная смесь инкубировалась 2 мин при +70°С. Затем к смеси на льду добавлялось 25 мкл смеси «RT-MIX» (см. список использовавшихся растворов и сред).

Полученная смесь инкубировалась при +37°С в течение 5 мин. Затем в смесь добавлялось 200 ед. ревертазы MMuLV (Fermentas). Полученная смесь инкубировалась при +42°С в течение одного часа, затем проводилась инактивация ревертазы при +70°С в течение 10 минут. Объем пробы доводился до 200 мкл. Пробы хранились при -20°С.

2.6. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

2.6.1 Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Матрицей для полимеразиой цепной реакции служила геномная или плазмидная ДНК или кДНК. Реакционная смесь включала: 10 пмоль 5' и З’праймеров, 2 мМ М§ С12, 0,125 мкМ сГЫТРв, амплификационный буфер (Силекс), 1−2 ед. Тая-ДНК полимеразы (Сиб-Энзим). Реакционная смесь проходила необходимое число циклов денатурации (95 °С), отжига (14 °С в зависимости от СС/АТ состава праймера и его длины) и полимеризации (72 °С).

Последовательности праймеров, использованных для проведения ПЦР, а также условия проведения реакций и размер продуктов приведены в таблице 1. Температура отжига коротких праймеров рассчитывалась по стандартной методике: 4 °C для Ои Снуклеотидов, и 2 °C для Аи Т-нуклеотидов. Количество циклов, при котором происходила амплификация каждого из фрагментов, подбирали экспериментально. Поскольку геном сирийского хомяка не секвенирован, праймеры подбирали на консервативные последовательности исследуемых мРНК человека, крысы и мыши. Выравнивание мРНК и подбор праймеров осуществляли в программе УесЮгШТ (1пукго§ еп). В качестве референсного гена для выравнивания внесенного в реакцию количества транскриптов использовали рибосомальный белок ЯРЬРО.

Название гена Последовательность Оптима льная 10 отжига Размер продук та, п.о. рЬХБЫ Прямой Обратный 5' - СССТТСААССТССТСОТТСО — 3' 5' - ТТТССАСАССТООГГССТОА — 3' 56 °C.

ЫРЬРО Прямой Обратный 5' - ОООСОАССЛХЮААОТССААС — 3' 5' - ОТТСТГССССАТСАССАССАС — 3' 59 °C 158.

СКАВР1 Прямой Обратный 5' - ССАССОАОААТТТСОАСОАО — 3' 5' - ТССОАССТТСААОТТСАТСТ — 3' 56 °C 173.

ММР-1 Прямой Обратный 5' - СААОТССОСТАТТТСАААОО — 3' 5' - САТСАТАССТССАОТАСАТС — 3' 59 °C 190.

ММР-9 Прямой Обратный 5' - ААСАОССТСТАСССТТСОТС — 3' 5' - ТССТАСТСГСССТССАССАС — 3' 60 °C 296.

ММР-8 Прямой Обратный 5' - ТООАСССААТООААТССТТС — 3' 5' - ОАТвСССГСТССАОА АОТАС — 3' 60 °C 401.

ММР-13 Прямой Обратный 5' -ТАААОАСАОАТТСТТСТООСО — 3' 5^-CCATTПTCTCATAGACAGCATC-3^ 60 °C 408.

ММР-14 Прямой Обратный 5' - ССССААвСАСАТТААвОАвС — 3' 5' - ОСОТСТСААСААОААОАСАС — 3' 60 °C 496 иРА Прямой Обратный 5' - ТОАТТТСССААТТАООААОТС — 3' 5' ~ АОТв Ав в АТТвС АТС, А АСТ АО- 3' 59 °C 447.

С024 Прямой Обратный 5' - ТСОСАСГССТССТАСССАС — 3' 5' - СОТТТСТГССССГСАОТСТС — 3' 60 °C 211.

КАЬШ1 Прямой Обратный 5' - ААОАССССТТОСАТТОТС — 3' 5' - ТССТТОТСААТСТСАССС- 3' 60 °C 239.

Сур26А1 Прямой Обратный 5' - АТССАСССАСТАААОСААТС — 3' 5' - СТТСАОАвСААСССОАААС — 3' 60 °C 279.

Прямой Обратный 5* - ТТААТСТОТООАОАССОС — 3' 5' - ССАТГСАТССАООААТТТС — 3' 60 °C 220.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Р. С. 1996. «All-Trans-Retinoic Acid Pharmacology and Its Impact on the Treatment of Acute Promyelocytic Leukemia.» Oncologist., 1(5):305−314.
  2. Aoto J., Nam С. I., Poon M. M., Ting P. and Chen L. 2008. «Synaptic signaling by all-trans retinoic acid in homeostatic synaptic plasticity.» Neuron, 60(2):308−320.
  3. Argast G. M., Croy С. H., Couts K. L., Zhang Z., Litman E., Chan D. C. and Ahn N. G. 2009. «Plexin B1 is repressed by oncogenic B-Raf signaling and functions as a tumor suppressor in melanoma cells.» Oncogene, 28(30):2697−2709.
  4. J. В., Lam M. S. and Aitken S. 2008. «A bioinformatics approach for identifying candidate transcriptional regulators of mesenchyme-to-epithelium transitions in mouse embryos.» Dev.Dyn., 237(10):2748−2754.
  5. Beehler В. C., Brinckerhoff С. E. and Ostrowski J. 2004. «Selective retinoic acid receptor ligands for rheumatoid arthritis.» Curr.Opin.Investig.Drugs, 5(11):1153−1157.
  6. Biesalski H., Reifen R., Furst P. and Edris M. 1999. «Retinyl palmitate supplementation by inhalation of an aerosol improves vitamin A status of preschool children in Gondar (Ethiopia).» Br.J.Nutr., 82(3): 179−182.
  7. Blaese M. A., Santo-Hoeltje L. and Rodemann H. P. 2003. «CRABP I expression and the mediation of the sensitivity of human tumour cells to retinoic acid and irradiation.» Int.J.Radiat.Biol., 79(12):981−991.
  8. Bogos K., Renyi-Vamos F., Kovacs G., Tovari J. and Dome B.'2008. «Role of retinoic receptors in lung carcinogenesis.» J.Exp.Clin.Cancer Res., 27:18.
  9. Boudjelal M., Wang Z., Voorhees J. J. and Fisher G. J. 2000. «Ubiquitin/proteasome pathway regulates levels of retinoic acid receptor gamma and retinoid X receptor alpha in human keratinocytes.» Cancer Res., 60(8):2247−2252.
  10. Boylan J. F. and Gudas L. J. 1992. «The level of CRABP-I expression influences the amounts and types of all-trans-retinoic acid metabolites in F9 teratocarcinoma stem cells.» J.Biol.Chem., 267(30):21 486−21 491.
  11. Boylan J. F. and Gudas, L. J. 1991. «Overexpression of the cellular retinoic acid binding protein-I (CRABP-I) results in a reduction in differentiation-specific gene expression in F9 teratocarcinoma cells.» J. Cell Biol., 112(5):965−979.
  12. Breitman T. R., Selonick S. E. and Collins S. J. 1980. «Induction of differentiation of the human promyelocytic leukemia cell line (HL-60) by retinoic acid.» Proc. Natl .Acad. S ci .U. S. A, 77(5):2936−2940.
  13. Budhu A., Gillilan R. and Noy N. 2001. «Localization of the RAR interaction domain of cellular retinoic acid binding protein-II.» J.Mol.Biol., 305(4):939−949.
  14. Budhu A. S. and Noy N. 2002. «Direct channeling of retinoic acid between cellular retinoic acid-binding protein II and retinoic acid receptor sensitizes mammary carcinoma cells to retinoic acid-induced growth arrest.» Mol. Cell Biol., 22(8):2632−2641.
  15. Bushue N. and Wan Y. J. 2010. «Retinoid pathway and cancer therapeutics.» Adv. Drug Deliv.Rev., 62(13):1285−1298.
  16. Chen C. F., Goyette P. and Lohnes D. 2004. «RARgamma acts as a tumor suppressor in mouse keratinocytes.» Oncogene, 23(31):5350−5359.
  17. M. 2005. «Retinoid therapy for acne. A comparative review.» Am.J.Clin.Dermatol., 6(1):13−19.
  18. Chryssanthi D. G., Dedes P. G., Karamanos N. K., Cordopatis P. and Lamari F. N. 2010. «Crocetin Inhibits Invasiveness of MDA-MB-231 Breast Cancer Cells via Downregulation of Matrix Metalloproteinases.» Planta Med.
  19. Collins C. A. and Watt F. M. 2008. «Dynamic regulation of retinoic acid-binding proteins in developing, adult and neoplastic skin reveals roles for beta-catenin and Notch signalling.» Dev.Biol., 324(l):55−67.
  20. S. J. 2002. «The role of retinoids and retinoic acid receptors in normal hematopoiesis.» Leukemia, 16(10):1896−1905.
  21. Dodge R., Loomans C., Sharma A. and Bonner-Weir S. 2009. «Developmental pathways during in vitro progression of human islet neogenesis.» Differentiation, 77(2): 135−147.
  22. Dong D., Ruuska S. E., Levinthal D. J. and Noy N. 1999. «Distinct roles for cellular retinoic acid-binding proteins I and II in regulating signaling by retinoic acid.» J.Biol.Chem., 274(34):23 695−23 698.
  23. Dreier R., Grassel S., Fuchs S., Schaumburger J. and Bruckner P. 2004. «Pro-MMP-9 is a specific macrophage product and is activated by osteoarthritic chondrocytes via MMP-3 or a MT1-MMP/MMP-13 cascade.» Exp. Cell Res., 297(2):303−312.
  24. Dressier D., Sarang Z., Szondy Z., Engelhart K. and Grafstrom R. C. 2002. «Expression of retinoid-related genes in serum-free cultures of normal, immortalized and malignant human oral keratinocytes.» Int.J.Oncol., 20(5):897−903.
  25. M. J. 2004. «The urokinase plasminogen activator system: role in malignancy.» Curr.Pharm.Des, 10(l):39−49.
  26. Duong V. and Rochette-Egly C. 2010. «The molecular physiology of nuclear retinoic acid receptors. From health to disease.» Biochim.Biophys.Acta.
  27. Dzhagalov I., Chambon P. and He Y. W. 2007. «Regulation of CD8+ T lymphocyte effector function and macrophage inflammatory cytokine production by retinoic acid receptor gamma.» J.Immunol., 178(4):2113−2121.
  28. E X, Zhang L., Lu J., Tso P., Blaner W. S., Levin M. S. and Li E. 2002. «Increased neonatal mortality in mice lacking cellular retinol-binding protein II.» J.Biol.Chem., 277(39):36 617−36 623.
  29. Edinger A. L. and Thompson C. B. 2004. «An activated mTOR mutant supports growth factor-independent, nutrient-dependent cell survival.» Oncogene, 23(33):5654−5663.
  30. , G. 1989a. «Retinoic acid induces a pattern of digits in anterior half wing buds that lack the zone of polarizing activity.» Development, 107(4):863−867.
  31. , G. 1989b. «Retinoids and vertebrate limb pattern formation.» Trends Genet., 5(8):246−251.
  32. Elizondo G., Medina-Diaz I. M., Cruz R., Gonzalez F. J. and Vega L. 2009. «Retinoic acid modulates retinaldehyde dehydrogenase 1 gene expression through the induction of GADD153-C/EBPbeta interaction.» Biochem.Pharmacol., 77(2):248−257.
  33. Esteller M., Guo M., Moreno V., Peinado M. A., Capella G., Galm O., Baylin S. B. and Herman J. G. 2002. «Hypermethylation-associated Inactivation of the Cellular Retinol-Binding-Protein 1 Gene in Human Cancer.» Cancer Res., 62(20):5902−5905.
  34. Fiorella P. D. and Napoli J. L. 1991. «Expression of cellular retinoic acid binding protein (CRABP) in Escherichia coli. Characterization and evidence that holo-CRABP is a substrate in retinoic acid metabolism.» J.Biol.Chem., 266(25): 16 572−16 579.
  35. Fosang A. J., Last K., Knauper V., Murphy G. and Neaine P. J. 1996. «Degradation of cartilage aggrecan by collagenase-3 (MMP-13).» FEBS Lett., 380(l-2):17−20.
  36. Genaro Pde S. and Martini L. A. 2004. «Vitamin A supplementation and risk of skeletal fracture.» Nutr.Rev., 62(2):65−67.
  37. Gesell M. S., Brandes M. J., Arnold E. A., Isaacs J. T., Ueda H., Millan J. C. and Brandes D. 1982. «Retinoic acid binding protein in normal and neopolastic rat prostate.» Prostate, 3(2): 131−138.
  38. Ghyselinck N. B., Dupe V., Dierich A., Messaddeq N., Gamier J. M., Rochette-Egly C., Chambon P. and Mark M. 1997. «Role of the retinoic acid receptor beta (RARbeta) during mouse development.» Int.J.Dev.BioL, 41(3):425−447.
  39. Gorry P., Lufkin T., Dierich A., Rochette-Egly C., Decimo D., Dolle P., Mark M., Durand B., and Chambon P. 1994. «The cellular retinoic acid binding protein I is dispensable.» Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A, 91(19):9032−9036.
  40. Guruvayoorappan C. and Kuttan G. 2008. «13 cis-retinoic acid regulates cytokine production and inhibits angiogenesis by disrupting endothelial cell migration and tube formation.» J.Exp.Ther.Oncol., 7(3):173−182.
  41. Han J., Li L., Zhang Z., Xiao Y., Lin J., Zheng L. and Li Y. 2007. «Platelet-derived growth factor C plays a role in the branchial arch malformations induced by retinoic acid.» Birth Defects Res. A Clin.Mol.Teratol., 79(3):221−230.
  42. Haselbeck R. J. and Duester G. 1997. «Regional restriction of alcohol/retinol dehydrogenases along the mouse gastrointestinal epithelium.» Alcohol Clin.Exp.Res., 21(8): 1484−1490.
  43. Hawthorn L., Stein L., Varma R., Wiseman S., Loree T. and Tan D. 2004. «TIMP1 and SERPIN-A overexpression and TFF3 and CRABPI underexpression as biomarkers for papillary thyroid carcinoma.» Head Neck, 26(12): 1069−1083.
  44. Helms J. A., Kim C. H., Eichele G. and Thaller C. 1996. «Retinoic acid signaling is required during early chick limb development.» Development, 122(5):1385−1394.
  45. Heyman R. A., Mangelsdorf D. J., Dyck J. A., Stein R. B., Eichele G., Evans R. M. and Thaller C. 1992. «9-cis retinoic acid is a high affinity ligand for the retinoid X receptor.» Cell, 68(2):397−406.
  46. Hind M. and Maden M. 2004. «Retinoic acid induces alveolar regeneration in the adult mouse lung.» Eur.Respir.J., 23(l):20−27.
  47. Hoffmann S., Rockenstein A., Ramaswamy A., Celik I., Wunderlich A., Lingelbach S., Hofbauer L. C. and Zielke A. 2007. «Retinoic acid inhibits angiogenesis and tumor growth of thyroid cancer cells.» Mol. Cell Endocrinol., 264(l-2):74−81.
  48. W. K., Endicott J., Itri L. M., Doos W., Batsakis J. G., Bell R., Fofonoff S., Byers R., Atkinson E. N., Vaughan C. 1986. «13-cis-retinoic acid in the treatment of oral leukoplakia.» N.Engl.J.Med., 315(24):1501−1505.
  49. Houle B., Rochette-Egly C. and Bradley W. E. 1993. «Tumor-suppressive effect of the retinoic acid receptor beta in human epidermoid lung cancer cells.» Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A, 90(3):985−989.
  50. Huang M. E., Ye Y. C., Chen S. R., Chai J. R., Lu J. X., Zhoa L., Gu L. J. and Wang Z. Y. 1988. «Use of all-trans retinoic acid in the treatment of acute promyelocytic leukemia.» Blood, 72(2):567−572.
  51. Huang Y., Boskovic G. and Niles R. M. 2003. «Retinoic acid-induced AP-1 transcriptional activity regulates B16 mouse melanoma growth inhibition and differentiation.» J. Cell Physiol, 194(2): 162−170.
  52. Illan Rubio L., Tavitian B. and Zueva E. 2010. «Similar expression profiles of a core of genes and proteins in cells that have acquired a metastatic phenotype, genetically or by in vivo evolution.» Clin.Exp.Metastasis, 27(6):409−418.
  53. Iwata M., Hirakiyama A., Eshima Y., Kagechika H., Kato C. and Song S. Y. 2004. «Retinoic acid imprints gut-homing specificity on T cells.» Immunity., 21(4):527−538.
  54. Kastner P., Lawrence H. J., Waltzinger C., Ghyselinck N. B., Chambon P. and Chan S. 2001. «Positive and negative regulation of granulopoiesis by endogenous RARalpha.» Blood, 97(5):1314−1320.
  55. Kastner P., Mark M. and Chambon P. 1995. «Nonsteroid nuclear receptors: what are genetic studies telling us about their role in real life?» Cell, 83(6):859−869.
  56. Kawaguchi R., Yu J., Honda J., Hu J., Whitelegge J., Ping P., Wiita P., Bok D. and Sun H. 2007. «A membrane receptor for retinol binding protein mediates cellular uptake of vitamin A.» Science, 315(5813):820−825.
  57. Khuri F. R., Lippman S. M., Spitz M. R., Lotan R. and Hong W. K. 1997. «Molecular epidemiology and retinoid chemoprevention of head and neck cancer.» J.Natl.Cancer Inst., 89(3): 199−211.
  58. Kim M. S., Kim Y. K., Eun H. C., Cho K. H. and Chung J. H. 2006. «Alltrans retinoic acid antagonizes UV-induced VEGF production and angiogenesis via the inhibition of ERK activation in human skin keratinocytes.» J. Invest Dermatol., 126(12):2697−2706.
  59. Kini A. R., Peterson L. A., Tallman M. S. and Lingen M. W. 2001. «Angiogenesis in acute promyelocytic leukemia: induction by vascular endothelial growth factor and inhibition by all-trans retinoic acid.» Blood, 97(12):3919−3924.
  60. A. M. 1997. «The treatment of acne with topical retinoids: one man’s opinions.» J.Am.Acad.Dermatol., 36(6 Pt 2):S92-S95.
  61. Knauper V., Bailey L., Worley J. R., Soloway P., Patterson M. L. and Murphy G. 2002. «Cellular activation of proMMP-13 by MT1-MMP depends on the C-terminal domain of MMP-13.» FEBS Lett., 532(1−2):127−130.
  62. F. V. 1984. «Relationship between cellular retinoic acid-binding protein and histology of human lung tumors.» J. Cancer Res.Clin.Oncol., 108(3):357−361.
  63. Kosa K., Jones C. S. and De Luca L. M. 1995. «The H-ras oncogene interferes with retinoic acid signaling and metabolism in NIH3T3 cells.» Cancer Res., 55(21):4850−4854.
  64. Krezel W., Dupe V., Mark M., Dierich A., Kastner P. and Chambon P. 1996. «RXR gamma null mice are apparently normal and compound RXR alpha +/-/RXR beta -/-/RXR gamma -/- mutant mice are viable.» Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A, 93(17):9010−9014.
  65. Krishnan S., Krishnan A. D., Mustafa A. S., Talwar G. P. and Ramalingaswami V. 1976. «Effect of vitamin A and undernutrition on the susceptibility of rodents to a malarial parasite, Plasmodium berghei.» J.Nutr., 106(6):784−791.
  66. Levadoux-Martin M., Li Y., Blackburn A., Chabanon H. and Hesketh J. E. 2006. «Perinuclear localisation of cellular retinoic acid binding protein I mRNA.» Biochem.Biophys.Res.Commun., 340(l):326−331.
  67. Lim S. C. 2005. «CD24 and human carcinoma: tumor biological aspects.» Biomed.Pharmacother., 59 Suppl 2: S351-S354.
  68. Lin M., Zhang M., Abraham M., Smith S. M. and Napoli J. L. 2003. «Mouse retinal dehydrogenase 4 (RALDH4), molecular cloning, cellular expression, and activity in 9-cis-retinoic acid biosynthesis in intact cells.» J.Biol.Chem., 278(11):9856−9861.
  69. Lippman S. M. and Meyskens F. L., Jr. 1987. «Treatment of advanced squamous cell carcinoma of the skin with isotretinoin.» Ann.Intern.Med., 107(4):499−502.
  70. Lohnes D., Kastner P., Dierich A., Mark M., LeMeur M. and Chambon P. 1993. «Function of retinoic acid receptor gamma in the mouse.» Cell, 73(4):643−658.
  71. Lu Y., Lemon W., Liu P. Y., Yi Y., Morrison C., Yang P., Sun Z., Szoke J., Gerald W. L., Watson M., Govindan R. and You M. 2006. «A gene expressionsignature predicts survival of patients with stage I non-small cell lung cancer.» PLoS.Med., 3(12):e467.
  72. Lufkin T., Lohnes D., Mark M., Dierich A., Gorry P., Gaub M. P., LeMeur M. and Chambon P. 1993. «High postnatal lethality and testis degeneration in retinoic acid receptor alpha mutant mice.» Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A, 90(15):7225−7229.
  73. Luo P., Lin M., Lin M., Chen Y., Yang B. and He Q. 2009. «Function of retinoid acid receptor alpha and p21 in all-trans-retinoic acid-induced acute T-lymphoblastic leukemia apoptosis.» Leuk. Lymphoma, 50(7): 1183−1189.
  74. Mac tier H. and Weaver L. T. 2005. «Vitamin A and preterm infants: what we know, what we don’t know, and what we need to know.» Arch.Dis.Child Fetal Neonatal Ed, 90(2):F103-F108.
  75. M. 2002. «Retinoid signalling in the development of the central nervous system.» Nat.Rev.Neurosci., 3(ll):843−853.
  76. M. 2004. «Retinoids in lung development and regeneration.» Curr.Top.Dev.Biol., 61:153−189.
  77. Marill J., Cresteil T., Lanotte M. and Chabot G. G. 2000. «Identification of human cytochrome P450s involved in the formation of all-trans-retinoic acid principal metabolites.» Mol.Pharmacol., 58(6):1341−1348.
  78. Martens J. H., Brinkman A. B., Simmer F., Francoijs K. J., Nebbioso A., Ferrara F., Altucci L. and Stunnenberg H. G. 2010. «PML-RARalpha/RXR Alters the Epigenetic Landscape in Acute Promyelocytic Leukemia.» Cancer Cell, 17(2):173−185.
  79. Mehta R. G., Kute T. E., Hopkins M. and Moon R. C. 1982. «Retinoic acid binding proteins and steroid receptor levels in human breast cancer.» Eur.J.Cancer Clin.Oncol., 18(3):221−226.
  80. Melnick A. and Licht J. D. 1999. «Deconstructing a disease: RARalpha, its fusion partners, and their roles in the pathogenesis of acute promyelocytic leukemia.» Blood, 93(10):3167−3215.
  81. Mic F. A., Haselbeck R. J., Cuenca A. E. and Duester G. 2002. «Novel retinoic acid generating activities in the neural tube and heart identified by conditional rescue of Raldh2 null mutant mice.» Development, 129(9):2271−2282.
  82. Mitelman F., Johansson, B. and Mertens F. 2007. «The impact of translocations and gene fusions on cancer causation.» Nat.Rev.Cancer, 7(4):233−245.
  83. Miyake T., Ueda Y., Matsuzaki S., Miyatake T., Yoshino K., Fujita M., Nomura T., Enomoto T. and Kimura T. 2010. «CRABP1-reduced expression is associated with poorer prognosis in serous and clear cell ovarian adenocarcinoma.» J. Cancer Res.Clin.Oncol.
  84. Molotkov A., Fan X., Deltour L., Foglio M. H., Martras S., Farres J., Pares X. and Duester G. 2002a. «Stimulation of retinoic acid production and growth by ubiquitously expressed alcohol dehydrogenase Adh3.» Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A, 99(8):5337−5342.
  85. Molotkov, A., Fan, X., and Duester, G. 2002b. «Excessive vitamin A toxicity in mice genetically deficient in either alcohol dehydrogenase Adhl or Adh3.» Eur.J.Biochem., 269(10):2607−2612.
  86. Moon R. C. and Mehta R. G. 1981. «Retinoid binding in normal and neoplastic mammary tissue.» Adv.Exp.Med.Biol., 138:231−249.
  87. Morikawa K. and Nonaka M. 2005. «All-trans-retinoic acid accelerates the differentiation of human B lymphocytes maturing into plasma cells.» Int.Immunopharmacol., 5(13−14):1830−1838.
  88. J. L. 1996. «Biochemical pathways of retinoid transport, metabolism, and signal transduction.» Clin.Immunol.Immunopathol., 80(3 Pt 2):S52-S62.
  89. J. L. 1999. «Interactions of retinoid binding proteins and enzymes in retinoid metabolism.» Biochim.Biophys.Acta, 1440(2−3):139−162.
  90. Nauss K. M., Anderson C. A., Conner M. W. and Newberne P. M. 1985. «Ocular infection with herpes simplex virus (HSV-1) in vitamin A-deficient and control rats.» J.Nutr., 115(10):1300−1315.
  91. Okuducu A. F., Janzen V., Ko Y., Hahne J. C., Lu H., Ma Z. L., Albers P., Sahin A., Wellmann A., Scheinert P. and Wernert N. 2005. «Cellular retinoic acid-binding protein 2 is down-regulated in prostate cancer.» Int.J.Oncol., 27(5): 12 731 282.
  92. Osanai M., Sawada N. and Lee G. H. 2010. «Oncogenic and cell survival properties of the retinoic acid metabolizing enzyme, CYP26A1.» Oncogene, 29(8): 1135−1144.
  93. Palan P. R. and Romney S. L. 1980. «Cellular binding proteins for vitamin A in human carcinomas and in normal tissues.» Cancer Res., 40(11):4221−4224.
  94. Pavone M. E., Reierstad S., Sun H., Milad M., Bulun S. E. and Cheng Y. H. 2010. «Altered retinoid uptake and action contributes to cell survival in endometriosis.» J.Clin.Endocrinol.Metab, 95(11):E300-E309.
  95. Perez-Castro A. V., Tran V. T. and Nguyen-Huu M. C. 1993. «Defective lens fiber differentiation and pancreatic tumorigenesis caused by ectopic expression of the cellular retinoic acid-binding protein I.» Development, 119(2):363−375.
  96. Perissi V., Jepsen K., Glass C. K. and Rosenfeld M. G. 2010. «Deconstructing repression: evolving models of co-repressor action.» Nat.Rev.Genet., 11(2):109−123.
  97. Pfahl M. and Piedrafita F. J. 2003. «Retinoid targets for apoptosis induction.» Oncogene, 22(56):9058−9062.
  98. Piantedosi R., Ghyselinck N., Blaner W. S. and Vogel S. 2005. «Cellular retinol-binding protein type III is needed for retinoid incorporation into milk.» J.Biol.Chem., 280(25):24 286−24 292.
  99. Purton L. E., Dworkin S., Olsen G. H., Walkley C. R., Fabb S. A., Collins S. J. and Chambon P. 2006. «RARgamma is critical for maintaining a balance between hematopoietic stem cell self-renewal and differentiation.» J.Exp.Med., 203(5):1283−1293.
  100. Rattanapanone V., Tashiro S., Tokuda H., Rattanapanone N. and Ito Y. 1981. «Cellular retinoic acid-binding protein in virus-induced Shope papillomas of rabbit skin.» Cancer Res., 41(4): 1483−1487.
  101. Ray W. J., Bain G., Yao M. and Gottlieb D. I. 1997. «CYP26, a novel mammalian cytochrome P450, is induced by retinoic acid and defines a new family.» J.Biol.Chem., 272(30): 18 702−18 708.
  102. A. C. 1993. «Cellular metabolism and activation of retinoids: roles of cellular retinoid-binding proteins.» FASEB J., 7(2):317−327.
  103. Ruberte E., Friederich V., Morriss-Kay G. and Chambon P. 1992. «Differential distribution patterns of CRABP I and CRABP II transcripts during mouse embryogenesis.» Development, 115(4):973−987.
  104. Ruff S. J. and Ong D. E. 2000. «Cellular retinoic acid binding protein is associated with mitochondria.» FEBS Lett., 487(2):282−286.
  105. Seeliger M. W., Biesalski H. K., Wissinger B., Gollnick H., Gielen S., Frank J., Beck S. and Zrenner E. 1999. «Phenotype in retinol deficiency due to a hereditary defect in retinol binding protein synthesis.» Invest Ophthalmol.Vis.Sci., 40(1):3−11.
  106. Siddikuzzaman Guruvayoorappan C., and Berlin Grace, V. 2010. «All Trans Retinoic Acid and Cancer.» Immunopharmacol.Immunotoxicol.
  107. Singh B., Murphy R. F., Ding X. Z., Roginsky A. B., Bell R. H. Jr. and Adrian T. E. 2007. «On the role of transforming growth factor-beta in the growth inhibitory effects of retinoic acid in human pancreatic cancer cells.» Mol. Cancer, 6:82.
  108. Spinella M. J., Kerley J. S., White K. A., and Curtin J. C. 2003. «Retinoid target gene activation during induced tumor cell differentiation: human embryonal carcinoma as a model.» J.Nutr., 133(1):273S-276S.
  109. Sucov H. M., Dyson E., Gumeringer C. L., Price J., Chien K. R. and Evans. R. M. 1994. «RXR alpha mutant mice establish a genetic basis for vitamin A signaling in heart morphogenesis.» Genes Dev., 8(9):1007−1018.
  110. Tang X. H., Vivero M. and Gudas L. J. 2008. «Overexpression of CRABPI in suprabasal keratinocytes enhances the proliferation of epidermal basal keratinocytes in mouse skin topically treated with all-trans retinoic acid.» Exp. Cell Res., 314(1):38−51.
  111. Tchevkina E., Agapova L., Dyakova N., Martinjuk A., Komelkov A. and Tatosyan A. 2005. «The small G-protein RalA stimulates metastasis of transformed cells.» Oncogene, 24(3):329−335.
  112. Thaller C. and Eichele G. 1987. «Identification and spatial distribution of retinoids in the developing chick limb bud.» Nature, 327(6123):625−628.
  113. Thaller C. and Eichele G. 1996. «Retinoid signaling in vertebrate limb development.» Ann.N.Y.Acad.Sci., 785:1−11.
  114. Tsonis P. A., Trombley M. T., Rowland T., Chandraratna R. A. and del Rio-Tsonis K. 2000. «Role of retinoic acid in lens regeneration.» Dev.Dyn., 219(4):588−593.
  115. Uy G. L., Lane A. A., Welch J. S., Grieselhuber N. R., Payton J. E. and Ley T. J. 2010. «A protease-resistant PML-RAR{alpha} has increased leukemogenic potential in a murine model of acute promyelocytic leukemia.» Blood, 116(18):3604−3610.
  116. Vasiliou V., Bairoch A., Tipton K. F. and Nebert D. W. 1999a. «Eukaryotic aldehyde dehydrogenase (ALDH) genes: human polymorphisms, and recommended nomenclature based on divergent evolution and chromosomal mapping.» Pharmacogenetics, 9(4):421−434.
  117. Vasiliou V., Reuter S. F., Williams S., Puga A., and Nebert D. W. 1999b. «Mouse cytosolic class 3 aldehyde dehydrogenase (Aldh3al): gene structure and regulation of constitutive and dioxin-inducible expression.» Pharmacogenetics, 9(5):569−580.
  118. Wang L., Li Y. and Yan H. 1997. «Stmcture-function relationships of cellular retinoic acid-binding proteins. Quantitative analysis of the ligand binding properties of the wild-type proteins and site-directed mutants.» J.Biol.Chem., 272(3): 1541−1547.
  119. Wei L. N., Chang L. and HU X. 1999. «Studies of the type I cellular retinoic acid-binding protein mutants and their biological activities.» Mol. Cell Biochem., 200(l-2):69−76.
  120. G. 2007. «Identification of a membrane receptor for retinol-binding protein functioning in the cellular uptake of retinol.» Nutr.Rev., 65(8 Pt 1):385−388.
  121. Wu S., Donigan A., Platsoucas C. D., Jung W., Soprano D. R. and Soprano K. J. 1997. «All-trans-retinoic acid blocks cell cycle progression of human ovarian adenocarcinoma cells at late Gl.» Exp. Cell Res., 232(2):277−286.
  122. Wu X., Blanck A., Norstedt G., Sahlin L. and Flores-Morales A. 2002. «Identification of genes with higher expression in human uterine leiomyomas than in the corresponding myometrium.» Mol.Hum.Reprod., 8(3):246−254.
  123. Yamauchi P. S., Rizk D. and Lowe N. J. 2004. «Retinoid therapy for psoriasis.» Dermatol.Clin., 22(4):467−76, x.
  124. Yang Q., Graham T. E., Mody N., Preitner F., Peroni O. D., Zabolotny J. M., Kotani K., Quadro L. and Kahn B. B. 2005. «Serum retinol binding protein 4 contributes to insulin resistance in obesity and type 2 diabetes.» Nature, 436(7049):356−362.
  125. Zanotti G. and Berni R. 2004. «Plasma retinol-binding protein: structure and interactions with retinol, retinoids, and transthyretin.» Vitam.Horm., 69:271−295.
  126. Zhang В., Cao X., Liu Y., Cao W., Zhang F., Zhang S., Li H., Ning L., Fu L., Niu Y., Niu R., Sun B. and Нао X. 2008. «Tumor-derived matrix metalloproteinase-13 (MMP-13) con-elates with poor prognoses of invasive breast cancer.» BMC. Cancer, 8:83.
  127. Zhang Y., Zolfaghari R. and Ross A. C. 2010. «Multiple retinoic acid response elements cooperate to enhance the inducibility of CYP26A1 gene expression in liver.» Gene, 464(l-2):32−43.
  128. Zuccari G., Carosio R., Fini A., Montaldo P. G., and Orienti I. 2005. «Modified polyvinylalcohol for encapsulation of all-trans-retinoic acid in polymeric micelles.» J. Control Release, 103(2):369−380.
  129. M.A. и Аничков H.M. 2005. Атлас патологии опухолей человека. М.: ОАО «Издательство «Медицина».
  130. А.В. 1993. «Опухоли и опухолеподобные поражения мягких тканей.» Патолого-анатомическая диагностика опухолей человека. М.: Медицина. 195−408.
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?