Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Свойства фосфолипаз А2 митохондрий печени крысы

Диссертация: Свойства фосфолипаз А2 митохондрий печени крысы
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Проведенные наш исследования по определению локализации фосфолипазы Ag в митохондриях с использованием маркерных ферментов при выделении и фрагментации митохондрий позволили объяснить ряд противоречий, имеющихся в литературе по этому вопросу. Показано, что после субфракционирования митохондрий активность фосфолипазы Ag проявляется только во фракциях наружных и внутренних мембран и полностью… Читать ещё >

Содержание

  • ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
    • 1. 1. Внутриклеточные фосфолипазы
    • 1. 2. Фосфолипаза Ag митохондрий
  • ГЛАВА 2. ЭКСПЕРШШТАЛЬНАЯ ЧАСТ
    • 2. Л.Материалы
      • 2. 2. Выделение и фрагментация митохондрий
      • 2. 3. Определение активности фосфолипазы Ag
      • 2. 4. Определение активностей маркерных ферментов
      • 2. 5. Синтез поликефамида — сорбента для иммо- 53 билизации фосфолипазы Ag
      • 2. 6. Иммобилизация фосфолипазы Ag митохондрий на биоспецифическом сорбенте
  • ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЗДЕНИЕ
    • 3. 1. Локализация фосфолипазы Ag в митохондриях
    • 3. 2. Свойства мембраносвязаняых форм фосфолипазы Ag внутренней и наружной мембран митохондрий
    • 3. 3. Каталитические свойства адсорбционно иммобилизованной фосфолипазы Ag митохондрий
    • 3. 4. Влияние циклического АМФ и АТФ на эндогенные фосфолипазы митохондрии. ЮО

Свойства фосфолипаз А2 митохондрий печени крысы (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Исследование каталитических свойств мембраносвязанных ферментов является одной из наиболее актуальных задач современного мембранного катализа. Особый интерес представляет изучение мито-хондриальной фосфолипазы Ag, играющей ключевую роль в функционировании биологических мембран, в процессах регуляции их фосфоли-пидного состава и активности липидзависимых ферментов митохондрий. В настоящее время неоспоримо доказано, что митохондриальная фосфолипаза Ag принимает непосредственное участие в развитии «скрытых» повреждений мембран при патологических и стрессорных состояниях, а также в адаптационных процессах организма.

В то же время в изучении каталитических и функциональных свойств этого фермента имеется ещз целый ряд проблем, которые к настоящему времени полностью не изучены или же содержат много противоречий. Известно, что в митохондриях фосфолипаза Ag находится только в мембраносвязанном состоянии, однако до сих пор нет однозначного мнения о локализации его в мембранах митохондрий. Све-дения относительно каталитических свойств этого фермента малочисленны и носят разрозненный характер, фактически отсутствуют данные по изучению каталитических свойств фермента в модельных системах и, в частности, в иммобилизованном состоянии. .

В этой связи целью настоящего исследования было: I) изучить локализацию фосфолипазы Ag в митохондриях- 2) исследовать каталитические свойства мембраносвязанной митохондриальной фосфолипазы А2- 3) разработать метод адсорбционной иммобилизации на нерастворимых фосфолипидах и изучить свойства фермента в иммобилизованном состоянии- 4) изучить влияние циклического АМФ и АТФ на проявление каталитических свойств митохондриальной фосфолипазы Ag.

На основании проведенных исследований с использованием маркерных ферментов получены новые данные о локализации фосфолипазы как на внутренней, так и на наружной мембранах митохондрий, в сравнительном аспекте изучены каталитические свойства фермента обеих мембран митохондрий, исследованы свойства митохондриальной фосфолипазы А£, иммобилизованной на субстратефосфатидэтаноламине, изучено влияние АМФ и АТФ на проявление гидролитических свойств фермента в мембраносшзанном состоянии. Полученные данные представляют интерес для спещалистов, работающих в области биофизики и биохимии по выяснению механизмов участия фосфолипазы Ag в регуляции функционального состояния митохондрий, Результаты работы могут быть использованы в медицине для разработок методов диагностики различных патологических процессов, связанных с нарушением функционирования митохондрий.

ВЫВОДЫ:

1. Фосфолипаза Ag в митохондриях локализована как на внутренней, так и на наружной мембранах. При этом удельная активность фермента на наружной мембране в 3 раза выше, чем на внутренней. Общая активность фосфолипазы Ag на наружной и внутренней мембранах митохондрий соотносится как 1:4,5.

2. Мембраносвязанные формы фосфолипазы Ag внутренней и наружной мембран митохондрий различаются по ряду каталитических свойств, а именно: рН-оптимумами гидролитического действия, кинетикой гидролиза фосфолипидов, чувствительностью к присутствию двухвалентных катионов (кальций, медь, стронций, цинк, магний), детергентов (Тритон Х-100, додецилсульфат натрия), термостабильностью, чувствительностью к изменению температуры.

3. Биоспецифическая адсорбционная иммобилизация митохондриальной фосфолипазы Ag на сорбенте с ковалентно связанным фосфа-тидилэтаноламином не изменяет каталитических свойств фермента, но позволяет значительно увеличить стабильность при хранении. Образование комплекса фосфолипазы Ag с иммобилизованным субстратом обусловлено как электростатическим, так и гидрофобным взаимодействиями.

4. Фосфолипаза Ag внутренней мембраны митохондрий по каталитическим свойствам и молекулярной массе соответствует детергент-чувствительной фракции фермента, выделенной в работе /160/ из митохондрий гомогенеза печени.

5. Мембраносвязаяная фосфолипаза Ag чувствительна к изменению концентрации цАМ£ и АТФ в клетке. Сделано предположение, что активность мембраносвязанной фосфолипазы Ag регулируется изменением концентрации цАМФ в клетке. Предложена гипотетическая схема регуляции.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Анализ представленных результатов позволяет сделать некоторые обобщающие заключения о свойствах митохондриальной фосфолипазы Ag из печени крыс.

Проведенные наш исследования по определению локализации фосфолипазы Ag в митохондриях с использованием маркерных ферментов при выделении и фрагментации митохондрий позволили объяснить ряд противоречий, имеющихся в литературе по этому вопросу. Показано, что после субфракционирования митохондрий активность фосфолипазы Ag проявляется только во фракциях наружных и внутренних мембран и полностью отсутствует во фракциях матрикса и межмембранных белков. Данный факт подтверждает литературные данные о том, что в митохондриях имеется только мембраносвязанная форма этого фермента. При этом фосфолипаза Ag в митохондриях локализована, в основном, на внутренней мембране митохондрий, на долю которой приходится 82 $ общей активности фермента против 18 $ в наружной мембране. В то же время удельная активность фосфолипазы Ag во фракции наружных мембран в 3 раза выше, чем на внутренних.

Мембраносвязанные формы фосфолипазы Ag внутренней и наружной мембран митохондрий различаются по ряду каталитических свойств. В частности, обнаружены различия в рН-оптимумах гидролитического действия: рН 7,5 и 8,5 соответственно для фермента наружных и внутренних мембран. Противоречия, имеющиеся в литературе относительно рН-оптимума митохондриальной фосфолипазы Ag, по-видимому, были связаны с детектированием активности ферментов, связанных с различными мембранами митохондрий.

Температурный оптимум ферментов обеих мембран совпадает, однако фосфолипаза А? внутренней мембраны, по сравнению с наружной, в меньшей степени чувствительна к изменению температуры. Соответствующие различия обнаружены при изучении термостабильности, фермент наружной мембраны отличается более высокой стабильностью к действию высоких температур.

Активность фосфолипазы Ag внутренней и наружной мембран митохондрий увеличивается при добавлении в реакционную среду экзогенных ионов кальция, достигая максимума при концентрации кальция 2 мМ. ЭДТА ингибирует активность фермента обеих мембран, однако для проявления максимальной ингибирующей способности необходимы довольно высокие концентрации ЭДТА (10−12 мМ), что, по-вводимому, связано со связыванием эндогенных двухвалентных катионов.

Интересные результаты получены при изучении действия ионов двухвалентной меди: фермент внутренней мембраны активируется в 2+ присутствии Си, достигая максимума при 0,5 мМ последнего. В то же время для фермента наружной мембраны Си2+ является эффективным ингибитором. Ингибирующее влияние на активность фермента обеих мембран оказывают также ионы цинка, стронция, магния.

Обнаружены различия в чувствительности ферментов к присутствию детергентов — Тритона X-I00, додецилсульфата натрия, что, по-видимому, обусловлено различным липидным окружением их в биологических мембранах.

Малочисленность и противоречивость сведений относительно мембраносвязанных ферментов, и в частности, митохондриальной фосфолипазы А2 во многом связаны с нестабильностью ферментов в очищенном виде. В связи с этим нами были проведены исследования по определению условий стабилизации этого фермента. Установлено, что иммобилизация митохондриальной фосфолипазы Ag на ковалентно связанном субстрате фосфатидилэтаноламине является надежным методом стабилизации фермента, сохраняя до 90 $ активности в тече ние 4-х месяцев при хранении при температуре 40 °C.

Изучение химической природы сил, обуславливающих иммобилизацию фосфолипазы Ag на нерастворимом субстрате, показало, что в этом процессе основная роль принадлежит гидрофобным взаимодействиям. Однако электростатические силы также играют определенную роль. Показано, что иммобилизация сказывается на проявление каталитических свойств фермента, при этом увеличивается стабильность фермента к действию высоких температур.

Проведены исследования по выделению и очистке фосфолипазы Ag из митохондрий печени крысы методом биоспецифической адсорбционной хроматографии на сорбенте с ковалентно связанным субстратом — фосфатидилэтаноламином. Выделена фракция фосфолипазы Ag с 813-кратной очисткой, выход фермента составил 12 $. Исследование молекулярного веса и некоторых каталитических свойств фермента позволило сделать вывод, что на внутренней мембране митохондрий локализована одна форма фосфолипазы Ag с молекулярной массой 18 тыс. дальтон, отнесенная в соответствии с работой Муратовой У. З. к детергент-чувствительной фракции.

Высказано предположение о физиологической функции мембрано-связанной фосфолипазы Ag в общем механизме регуляции биохимических процессов в клетке.

Известно, что в механизме регуляции биохимических процессов в клетке важная роль принадлежит мембраносвязанной аденилатцик-лазе, которая образует цАМФ из АТФ. Гормоны эндокринных желез, циркулирующие в крови, воздействуют на аденилатциклазу и этот процесс регулируется простагландинами, которые, возбуждая или угнетая функцию аденилатциклазы, вызывают либо увеличение, либо уменьшение внутриклеточных количеств цАМФ. Изменение количества цАШ приводит к соответствующему изменению скорости биохимических реакций в клеше. С другой стороны, известно, что проста-гландины синтезируются из арахидоновой кислоты — продукта действия фосфолипазы Ag на субстраты, содержащие ненасыщенные жирные кислоты. В этой связи физиологическая функция мембраносвязанной фосфолипазы Ag в механизме регуляции биохимических процессов в клетке, по-видимому, заключается в следующем. Уменьшение количества цАШ в клетке (от Ю" ®до 10″ ^ М) приводит к активации фосфолипазы Ag и соответствующему образованию ненасыщенных жирных кислотиз них с участием ферментов синтезируются циклические эндоперекиси, а затем простагландиныпростагландины возбуждают аденилатциклазувозбужденная аденилатциклаза образует цАМФ из.

АТФ, восстанавливая в клетке необходимую физиологическую конценR трацию цАШ. Увеличение количества цАШ выше 10 М угнетает функцию фосфолипазы Ag, что, по-видимому, сопровождается снижением количества ненасыщенных жирных кислот в мембране и соответствующим подавлением биосинтеза простагландиновснижение количества простагландинов, в свою очередь, угнетает активность аденилатциклазы и приводит к соответствующему уменьшению количества цАМФ в клетке.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Slotta К.Н. Chemistry and biochemistry of snake venoms. -Progress in the chera. of ory. nat. products, 1955, v.12, p.406−465.
  2. Hayashi 0. Phospholipases. Methods in Enzymol., v.1, Acad, Press. N.Y., 1955, p.660−668.
  3. Condrae E., de Vries A. Venom pMspholipase A: a review. -Toxicon, 1965, v.2, p.201−273.
  4. Habermann E. Bee and Wasp venoms. Soience, 1972, v.177, p. 314−322.
  5. Van den Bosh H. Intracellular phospholipase A. Biochim. Bio-phys. Acta, 1980, v.604, p.191−246.
  6. Howard B.D., Gundersea C, B. Effects and mechanisms if poli-peptide neurotoxins that act presynaptically. Jinn. Rev. Pharmacol. Toxicol., 1978, v.20, p.307−336.
  7. Verheij H.M., Slotboora A.J., de Haas G.H. Rev. Physiol. -Biochem. and Pharmacol. 1981, v.91, p.91−203.
  8. Slotboom A.J., Van Dam-Mieras M.C.E., Jansen E.H.J.M., Pattus F., Verheij Н.Ы., de Haas G.H. in: Enzymes of lipid metabolism. ~ (eds. Gatt S., Freysz L. and Mandel P.) Plenum Press. 1978, New York, p.137−152.
  9. Neumann W", Hagermann E. Puripication and properties of protein litic factor of the venom Naja naja. Arch. Exp. Pathol. Pharmacol., 1965, v.222, p.367−370.
  10. Augustin J.M., Elliot W.B. Isolation of a phospholipase A. -Biophys. Acta, 1970, v.206, p.98−108*
  11. Condrae E, Barzilay M., Mayer J. Role of cobra venom direct2+litic factor and Ca in promoting the activity of snake venom, phospholipase A. Biochim. Biophys. Acta, 1970, v.20,p.65−73.
  12. Salach J.J., Seng К., Tisdale H.D., Singer T.P. Phospholipa-se A snake venom. 2″ Catalitic properties of the enzyme from Naja naja. J. Biol. Chem., 1971, v.246, p.340−347.
  13. Long C., Penny J.F. The structure of the naturally occuring phosphoglycerides. 3* Action of moccasin-venom phospholipase A on ovolecithin and related substranes. Biochem. J., 1957, v.65, p.382−389.
  14. Roholt O.A., Schlarnauntz M. Studies of the use of dihexanoyl-lecithin and other lecithins as substrates for phospholipase A, With adendum on aspects of micelle properties of dihexanoi yllecithin. Arch. Biochem. Biophys., 1961, v.94, p.364−379.
  15. Tu А.Т., Rassey R.B., loom P.M. Isolation and characterization of phospholipase A from sea snake Laticauda semifasciata venom. Arch. Biochem. Biophys., 1970, v.140, p.96−104.
  16. Uthe J.F., Magee W.L. Phospholipase A^i Action on purified phospholipids as effected by desoxycholate anfi divalent cations. Can. J. Biochem., 1971, v.49, p.776−784.
  17. Kurup P.A. Phospholipase A of the venom of South Indian Eete-rometrus scaber. Indian J. Biochem., 1966, v.3, p.164−168.
  18. Heinricson R.L., Krueger E.I., Keim P. S. Amino acid sequence of phospholipase A, from the phospholipase A^ based upon structural determinantes. J# Biol. Chem., 1977, v.252, p.4913 -4921.
  19. Brockerhoff H. A model of ponereatic lipase and the orientation of enzymes at interfaces. Chem. Phys. Lipids. 1973, v. 10, p.215−222.
  20. Lands W.E.M. Metabolism of glicerolipids. 2. The enzymatic acylation of lysolecithin. J. Biol. Chem., 1960, v.235, p. 2233−2240.
  21. Lands W.E.M. Metabolism of glycerolipids: A comparison of lecithin and triglyceride synthesis. J". Biol. Chem., 1958, v. 231, p.83−88.
  22. Lands W.E.M. Metabolism of intracellular phospholipids. Ann. Rew. Biochem., 1965, v.34, p.313.
  23. Rossi C.K., Sartorelli L., Tato L., Baretta L., Silliprandi N. Phospholipase A activity of rat-liver mitochondria. Biochim. Biophys. Acta, 1965, v.98, p.207−208.
  24. Rossi C.K., Sartorelli L., Tato L., Silliprandi N. Relationship betv/een oxidative phosphorilation efficiency and phospholipid content in rat liver mitochondria. Arch. Biochem. Biophys., 1964, v.107, p.170−175.
  25. Nachbaur J., Vignais P.M. Localization of phospholipase A^ in outer membrane of mitochondria. Biochem. and Biophys. Res. Communs, 1968, v.33, p.315−320.
  26. Scherphof G.L., Van Deenen L.L.M. Phospholipase A activity of rat-liver mitochondria. Biochim. Biophys. Acta, 1965, v.98, p.204−209.
  27. Paysant M., Bitran M., Etienne J., Polonovski J. P ho sp ho lipase A du plasma sanqu in de rat cinetique et proprietes existence d’um precursceur inactif. Bull, Soc. Chim. Biol., 1969, v. 51, p.863−873.
  28. Schrbder I., Kivilaakso E., Kinnuner, P.K.J., Lempinen Ы. Phospholipase A^ in acute pancreatitis" Hepato — Gastroenterol., •1980, v.27, Suppl- p.307.
  29. Longmore V/. J., Oldenborg V., Golde L.M.G. Phospholipase A^ in rat-lung microsomesB Substrate specipicity towards endogenous phosphatidylcholines. Biochim. Biophys. Acta, 1979, v.572, p. 45 2−460.
  30. Gray N.C., Strickland К.P. The purification and characterization of a phospholipase A^ activity from the 106 000 g pellet (microsomal fraction) of bovine brein acting on phosphatidyl-inositol. Can. J. Biochem, 1982, v, 60, p.108−117.
  31. Fowler S., de Duve C. Digestiv activity of lisosomes. 3. The digestion of lipids by extracts of rat liver lysosomes. J. Biol. Chem., 1969, v.244, p.471−481.
  32. Wait M., Scherphof G.L., Boshouwers F.M.G., Van Deenen L.L.M. Differentiation of phospholipases A.,.'in mitochondria and lisoro. somes of rat liver. J. Lipid Res., 1969, v.10, p.411−420.
  33. Victoria E.J., Van Golde L.M.G., Hostetler К.Y., Scherphof G. L., Van Deenen L.L.M, Some studies on the metabolism of phospholipids in plasma’membranes from rat liver. Biochim. Bior. phys. Acta, 1971, v.239, p.443−457.
  34. Scandela C.J., Kornbery A. A membrane bound phospholipase A^ purified from Escherichia coli. Biochemistry, 1971, v.10, p. 4447−4456.
  35. Riberio L.P. Lipoprotein lipase in guinea pig skin milk fractionated by sephadex gel filtration. Biochimie, 1971, v.53, p.865−869.
  36. Doi 0., Foj’ima S. Detergent-resistant phospholipase A^ and A^ in Escherichia coli. J. Biochem., 1973, v.74, p.667−674.
  37. Nishijima M., Akamatzu J., Nojima S. Purification and proper--. ties of a membrane-bound phospholipase A^ from Mycobacterium phlei. J. Biol. Chem., 1974, v.249, p.5658−5667.
  38. Raybin D.M., Bertsch L.L., Kornberg A. A phospholipase in Bacillus megaterium unique to spores and sporangia. Biochemistry, 1972, v.11, p.1754−1760.
  39. Shakir K.M.M. Phospholipase A^ activity of post-heparin plasma. A rapid and sensitive assay and partial characterization. Frensenius Z. Anal. Chem., 1982, v.312, p.192.
  40. Etienne J., Grtiber A., Polonovski J. Activitie phospholipasi-que A? du serum de rat" Association de deux proteines. Bio-chim. Biophys. Acta, 1980, v.601, p.693−698.
  41. Schroder J., Kivilaakso E., Kinnunen P.K.J., Lempinen M. Phospholipase A^ in acute рал ereatitis. Hepato-Gastroenterol., 1980, v.27, p.307.
  42. Frei E., Zahler P. Phospholipase A^ from sheep erythrocyte2+membranes. Ca dependence and localization. Biochim. Biophys. Acta, 1979, v.550, p.450−463.
  43. Krumer K.M., V/athrich C., Bollier C., Altergrni P.R., Zahler P-. Isolation of phospholipase A^ from sheep erythrocyte membranes in the presence of detergents. Biochim. Biophys. Acta, 1978, v.507, p.381−394.
  44. Lagarde M., Suzanne M., Neville C. Localization of phospholi-. pase A^and diglyceride lipase activities in human platelet intracellular membranes. FEBS Lett., 1981, v.124, p.23−26.
  45. Chan A.C., Pritchard E.T., Gerrard J.M., Man R.Y.K., Choy D.C. Biphasic modulation of platelet phospholipase A^ activity and platelet aggregation by mepacrine (quinacrine). Biochim. Biophys. Acta, 1982, v.713, p.170−172.
  46. Sutherland C.A., Amin D. relative activities of rat and dog platelet phospholipase A^ and diglicerid lipase. Selectiv inhibition of diglyceride lipase by RHC 80 267. J. Biol. Chem., 1982, v.257, p.14 006−14 010,
  47. Kanngi R., Koizumi K. Phospholipid deacylating enzymes of rabbit platelets. — Arch. Biochem. and Biophys., 1979, v.196, p.534−542.
  48. Vadas P., Hay Tohn В., The release of phospholipase A2 from aggregated platelets and stimulated macrophages of sheep. -Life Sci., 1980, v.26, p.1721−1729.
  49. Etienne J., Gruber A., Polonovski J. Phospholipase A^ activa-bles des plaauittes sanguimes de rat. Bioohimie, 1982, v.64, p.377−380.
  50. Chignard M., Vargaftig B.B., Le Couedic J .P., Benveniste J. Is phospholipase A2 (PLA) involved in puf acether formation by platelets? — Thromb. and Haemost., 1981, v.46, p.270.
  51. Franson R., Waite M. Relation between calcium requirement, substrate charge, and rabbit polymorphonuclear leucocyte phospholipase A^ activity. Biochemistry, 1978, v.17, p.4029−4033.
  52. Victor M., Weiss J., Klenrpner M.S., ElsbachP. Phospholipase A^ activity in the plasma membrane of human polymorphonuclear leukocytes. ~ FEBS Lett., 1981, v.136, p.298−300.
  53. Traynor J.R., Authi K.S. Phospholipase A^ activity of lisosomal origin secreted by polymorphonuclear leukocyte diring phagocytosis or on treatment with calcium. Biochim. Biophys. Acta, 1981, v.665, p.571−577.
  54. Suzuki T. Phospholipase A^ activity of Fcr~receptor o? human
  55. В lymphocytes- a possible immunoregulatory signal. «B lymphocytes Immune Response: Funct., Bevelop., Interactipe Drop2 2nd Int. Conf. В limphocytes Immune Response, Scottsdale. Ariz, act. 8−22 1980» New York e. a., 1981, p.163−167.
  56. Suzuki Т., SadasivanK., Saito-Toki T., Stechschulte D.J., Balentine 1., Helmkamp G.M. Studies of Fey receptors of human В lymphocytes: Phospholipase A^ activity of For receptors. -Biochemistry, 1980, v.19, p.6037−6044.
  57. Wightman P.D., Humes J.L., Pavies P., Bonney R.J. Identificatio tion and characterization of two phospholipase A^ activitiesin resident mouse peritoneal macrophages. Biochem. J., 1981, v.195, p.427−433.
  58. Rahman -Y.E., Verhagen J. Evidence of a membrane-bound phospholipase A in rat liver lysosomes. Biochem. and Biophys. Res. Communs, 1970, v.38, p.670−677.
  59. Jaiswal A.K. Effect of starvation on enzymes related to lipid metabolism in guineapig lungs. Experientia, 1983, v.39, p. 161−163.
  60. Blackwell G.J., Flower R.J., Nijkamp F.P., Vane J.R. Phospholipase A^ activity of guinea-pig isolated perfused lungs: Stimulation and inhivition by anti-inflammatory steroids. -Brit. J. Pharm., 1978, v.62, p. 79−89.
  61. Sahn Saura, Cynn Williams. Characterization of phospholipase A from pulmonary secretions of patients with alveolar proteinosis. Biochim. Biophys. Acta, 1977, v.489, p.307−317.
  62. Bruckner S.R., Jackisch R., Hertting G. On the mechanismoof noradrenaline-induced prostaglandin E^ synthesis in primary cell cultures from rabbit splrnic pulpa. Arch. Int. Pharma-codin. et. ther, 1981, v.253, p.266−277.
  63. Nachbaur J., Phospholipase A lie6s aux membranes subcellular— res de foie de rat. Renouvellement des phospholipides mitd-chondriaux. These doct-sci. natur. univ. sci. et med., Grenoble, 1972, p.86.
  64. Franson S.C., Weir D.L. Isolation and characterization of a membrane-associated, calcium-dependent phospholipase A^ from rabbit lung. lung, 1982, v.160, p.275−284.
  65. Woelk H., Poreellati G. Subcellular distribution and kineticproperties of rat brain phospiiollpases A^ A^. Hoppe -Sellers Z. Physiol. Chera., 1972, v.354, p.90−100.
  66. Moskowitz N., Schook V/., Puszkin S. Interaction of brain sy2+naptic vesicles induced by endogenous Ca -dependent phospholipase A2. Science, 1982, v.216, p.305−307.
  67. Edgar A.D., Strosznaider Т.Н., Horrocks L.A. Activation of ethanolamine phospholipase A^ in brain during ischemia. J. Neurochem., 1982, v.39, p.1111−1116.
  68. Woelk H., Arienti G., Gaiti A., KaningE., Porcellati G. Action of phospholipase A^ of rabbit neuronal and glial cells on 1.2-diacyl-, 2-acyl-1-alk-1'-enyl-, and 2-acyl-1-alkil-glyce-rophosphatides. Neurochem. Res., 1981, v.6, p.23−32.
  69. Eisenberg S., Stein 0., Stein Y. Lipid metabolism in arteries in relation to ageing and atherosclerosis. !!10th Int. Congr. Gerontol., Jerusalem, 1975, Congr. Abstrs., vol. IJ! S.I., s a. p.128−129.
  70. Castle A.M., Castle J.D. The purification and partial characterization of phospholipase A^, a secretory protein of rabbit parotid gland. Biochim. Biophys. Acta, 1981, v.666, p.259−274. •
  71. Yerger Robert, Forrato Francine, Mansbach Charles M., Pieroni Gerand. Novel intestinal phospholipase A9: Purification andsome molecullar characteristics. Biochemistry, 1982, v.21, p.6883−6889.
  72. Wassef M.M., Lin Yuh N., Horowitz M.I. Phospholipiddeacylating enzymes of rat stomach mucosa. Biochim. Biophys. Acta, 1976, v.424, p.183−194.
  73. Wolf M. de, Lagrou A., Hilderson H.J., Dierick W. Phospholipase A^ and A^ in bovine thiroid. Biochim. Biophys. Acta, 1976, v.424, p.183−194.
  74. Limas C., Goldman P., Limas C.J. Age-dependency of vascular phospholipid deacylation reacylation in spontaneously hypertensive rats. — Biochim. Biophys. Acta, 1982, v.713, p.446−455.
  75. Limas C., Goldman P., Limas C.J. Aortic phospholipid deacyla-tion reacylation cycle in spontaneously hipertensive rats. — Amer. Physiol., 1981, v.240, p.33−38.
  76. Thakkar J.K., Sperelakis N., Pang D., Frason R.C. Characterization of phospholipase Ag activity in rat aorta smooth muscle cells. Biochim. Biophys. Acta, 1983, v.750, p.134−140.
  77. Hong S.L., Deykin D. Activation of phospholipase Ag and С in pig aortic endothelial cells syntesizing prostacyclin. J. Biol. Chem., 1982, v.257, p.7151−7154.
  78. Ellis L.C., Cosentino M.J. Sperm maturation and transport: Phospholipase Ag activity, prostaglandin sinthesis, and prostaglandin metabolism. Arch. Androl., 1982, v.9, p.81−82.
  79. B.E., Schultz F.M., Macdonald P.C., Johnston J.M. -Initiation of human parturition. 4. Demonstration of phospholipase А^ in the lysosomes of human fetg.1 membranes. Amer, J. Obstet. and Gynecol., 1976, v.125, p.1089−1092.
  80. Schultz F.M., Schwarz B.E., Macdonald P.C., Johnston J.M. Initiation of human partusition. 2. Identification of phospholi-.pase A^ in petal chorioamnion and uterine decidua. Amer. Obstet. and Gynecol., 1975, v.123, p.650−653.
  81. Schwarz B.E., Schulta P.M., blacdonalcl P. C., Johnston J.M. Initiation of human paruturition. 3. Fetal membrane content of prostaglandin E^ and F^a precursor. Amer. Obstet. and Gynecol., 1975, t.46, p.564−568.
  82. Cox C., Cheng H.C., Dey S.K. Phospholipase A, activity in the rat uterus during early pregnancy. Prostagland. Leukotrien. and Med., 1982, v.8, p.375−382.
  83. Lokesh B.R., Ivlyrthy S.IC. Purification and properties of oleate- phospholipase A^of chicken intestine. Indian J. Biochem. and Biophys., 1978, v.15, p.19−24.
  84. Forster S., Ilderton E., Summerly К., Yardley H.J. The level of phospholipase A^ activity is raised in the uninvoled epidermis of psoriasis. Brit. J. Dermatol., 1983, v.108, p.103−105.
  85. OhuchiK., Watanabe M., Numajiri N., Tsurufuji S. Phospholipase A^ activity in carragenin induced inflammatdry tissue of rats.- Biochem. Pharmacol., 1982, v.31, p.2993−2998.
  86. Cingolani G.E., Chiappe de, Bosch H. Van den, Deenen L.L.M. Van. Phospholipase A and lysophospholipase activities in isolated fat cells: Effect of cyclic % И? / —AlvIP. Biochim. Biophys. Acta, 1972, v.260, p.387−392.
  87. Mallorca P., Tallman J.F., Henneberry R.C., Hirata F., Strit-tmatter W.T., Axelrod J. Mepacrine blocks adrenergic agoni-st-iiiduced desensitization in astrocytoma cells. — Proc. Nat. Sci. USA Biol. Sci., 1980, v.77, p.1341−1345.
  88. Natori Y., Nishijima M, Nojima S., Satoh H. Purification and properties of membrane- bound phospholipase A^from rat ascitez hepatoma 108A cells. J. Biochem., 1980, v.87,p.959 -967.
  89. Nachbaur J., Colleau A., Vignais P.M. Distribution of membrane confined phospholipase A in the rat hepatocyte. Biochim. Biop2iys. Acta, 1972, v.274, p.426−446.
  90. Nev/kirk J.D., Waite M. Identification of a phospholipase A^ in plasma membran6s of rat liver. Biochim. Biophys* Acta, 1971, v.225, p.224−233.
  91. Newkirk J.D., Waitв M. Phospholipid hydrolisis by phospholi-pases A and A^ in plasma membranes of rat liver. Biochim. Biophys. Acta, 1973, v.298, p.562−576.•J01. Koizumi K., Ito Y., Okuda J., Fujii Т., Tamua-Kdizumi К.,
  92. Eojima K. Phospholipase A in the plasma membranes of ascites hepatomas and of normal livers in rat. J. Biochem., 1980, v.88, p.949−954.
  93. Collard-Torquebian 0., Bereziat G., Polonovski J. Etudes des phospholipase A a des membranes plasmiques de foic de rat.- Biochimie, 1975, v.57, p.1221−1227.
  94. Collard-Torguebian 0., Wolf C., Bereziat G. Phospholipase A^ and A, of rat liver plasma membranes: Mechanism of action.
  95. Biochimie, 1976, г. 53, p.587−592.
  96. Polonovski J., Bard D., Collard 0., Bereziat G. Modification des activities phospholipasiques des membranes plasmiques des hepatocytes de rat sous. I’influence de i’insuline et du glucagon. C. r. Soc. Biol., 1974, v.108, p.1211−1215.
  97. ScherpMf G.L., Waite M., Yan Deenen L.L.M. Formation of rat liver. Biochim. Biophys. Acta, -}966, v.125, p.406−409.
  98. Lumb R.H., Allen K.F. properties of microsomal phospholipases in rat liver and hepatoma. Biochim. Biophys. Acta, 1976, v.450, p.175−184.
  99. Gray N.C.C., Strickland К .P. On the specificity of a phospholipase A^ purified from the 106 000 g pellet of bovine brain.- Lipids, 1982, v.17, p.91−96.
  100. Franson R., Waite M., La Yia M. Identification of phospholipase' A^ and A^ in the soluble fraction of rat liver lysosomes.- Biochemistry, 1971, v.10, p.1942−1946.
  101. Lumb R.H., Allen K.F. Properties of microsomal phospholipases in rat liver and hepatoma. Biochim. Biophys. Acta, 1976, v.450, p.175.184.
  102. Colbeau A., Cuault F., Yignais P.M. Characterization and subcellular localization of lipase activities in rat liver cell. Comparison with phospholipase A. Biochimie, 1974, v.56, p. 275−288.
  103. Lumb R.H., Allen K.F. Properties of microsomal phospholipases in rat liver and hepatoma. Biochim. Biophys. Acta, 1976, v.450, p.175−184.
  104. Waite Ы., Yan Deenen L.L.M. Hydrolysis of phospholipids and glycerides by rat-liver preparations. Biochim. Biophys,
  105. Acta, 1967j v.137, p.498−517.
  106. V/aite M., Scherphof G.L., Boshouwers F.G., Van Deenen L.L. Ivl. Differentiation of phospholipase A in mitochondria and lisosomes of rat liver. J. Lipid Res., 1969, v.10, p.411 -420.
  107. Van Golde L.M.G., Fleischer В., Fleischer S. Soma studies on the metabolism of phospholipids of in Golgi complex from bovine and rat liver in cmparison to other subcellular fractions. Biochim. Biophys. Acta, 1972, v.249, p.318−330.
  108. Scherphof G.L., V/aite M., Van Deenen L.L.M. Formation of ly-sophosphatidilethanolamine in cell fraction of rat liver. -Biochim. Biophys. Acta, 1966, v.125, p.406−409.
  109. Van den Bosch H. Intracellular phospholipase A. Biochim. Biophys. Acta, 1980, v.604, p.191−246.
  110. V/aite M., Scherphof G.L., Boshouwers F.LI.G., Van Deenen L.L. II. Differentiation of phospholipase A in mitochondria and lysosomes of rat liver. J. Lipid Res., 1969, v.10, p.411−420.
  111. V/aite M., SissonP., Patial purification and characterization of the phospholipase A, from rat liver mitochondria. Biochemistry, 1971, v.10, p.2377−2383.
  112. E.П., Евтодиенко Ю. В. Исследование локализации фосфолипазы Ао в митохондриях. Биохимия, X98I, т.46,1. С¦"с.1199−1201. •
  113. Zurini I.!., Hugentobler G., Gazotti Р. Activity of phospholipase A^ in the inner membrane of rat-liver mitochondria. -Eur. J. Biochem., 1981, v. 119, p.517−521.
  114. Scherphof G.L., Scarpa A., Van Toorenenbergen A. The effectof local anesthetics the hydrolysis of free and membrane bound phospholipids catalyses by various phospholipases. -Biochim. Biophys. Acta, 1972, v.270, p.226−240.
  115. Pappu A.S., Fatterspaker P., Sreenivason A. Phospholipase Ag of rat liver mitochondria in vitamin E deficiency. Biochem. J., 1978, v.172, p.349−352.
  116. Yamaguchi K., Sa, tomura Y. Effect of sclerin on energy linked functions and phospholipase activity in mitochondria isolated from rat liver and some plants. Agr. and Biol. Chem., 1974, v.38, p.1289−1296.
  117. Chiappe de Cingolani G.E., Van den Bosch II., Van Deenen L.L. M. Phospholipase A and lysophospholipase activities in isolated fat cells- effect of cyclic 3^, 5-'AMP. Biochim. Biophys. Acta, 1972, v.260, p.387−392.
  118. Lapetina E.G., Chondrabose K.A., Cuatrecasas P. Ionophdire
  119. A 32 187 and thrombin-induced platelet aggregation: Independence from cycloxygenase products. Proc. Nat. Aca, d. Sci. USA, 1978, v.75, p.818−822.
  120. Vvaite M., Isolation of rat liver mitochondrial membrane fractions and localization of the phospholipase Ag. Biochemistry, 1969, v.8, p.2536−2542.
  121. Waite M., SissonP. Studies on the substrate specificity ofthe phospholipase A of the plasma membrane of rat liver. -J. Biol. Chem., 1974, v.249, p.6401−6405.
  122. Scarpa A., Lindsay J.G. Maintenance of energy-linked functions in rat liver mitochondria aged in the presens of nuper-caine. Eur. J. Biochem., 1972, v.27, p.401−407.
  123. Parce J.W., Cunningham С. C., V/aite M. Mitochondrial phospholipase А^ activity and mitochondrial aging. Biochemistry, 1973, v.17, p.1634−1639.
  124. Е.И., Владимиров Ю. А. Повреждение митохондрий при аноксии. В кн. «Биофизика» 1975, т.5, ВИНИТИ, Москва, с.11−15.
  125. Е.О., Сороковой В. И., Коган З. М., Владимиров Ю. А. Роль ионов кальция в аноксическом повреждении окислительного фосфорилирования в митохондриях. Вопросы Мед. Химии, 1975, т.21, с.150−154.
  126. А.П. Влияние острого физического перегревания животных на процессы перекисного окисления липидов. Вопросы Мед. Химии, 1976, т.22, с.47−51.
  127. X. Изучение скрытых повреждении полиферментных систем внутренней мембраны митохондрий при патологических процессах и стрессовых воздействиях. Дисс.. канд. биол. наук., Ташкент, 1982.
  128. К.Т., Агзамов X., Рахимов М. М. Окислительное фосфорилирование в митохондриях органов пищеварения при хроническом аллергическом колите. Вопросы Мед. Химии, 1982, с.44−49.
  129. X., Алматов К. Т., Рахимов М. М., Туракулов Я. Х. Функционирование митохондрий при аллоксановом диабете. Вопросы Мед. Химии, 1983, т.29, с.61−66.
  130. К.Т. Изучение деградации полиферментных систем внутренней мембраны митохондрий в норме и патологии и их стабилизации. Дисс.. канд. наук. Ташкент, 1978.
  131. Cassut о Y., Chiaffее R.R.J. The thermogenic role of the livers in the heat-acclimated hamster (Mesecricetus auratus). Canadian J. Biochem. and Physiol., 1963, v.41, p.1840−1842.
  132. Frastella D., Frankel H.M. Liver pyridine nucleotides, lactate and pyruvate in hyperthermic rats. Amer. J. Physiol., 1969, v.21-, p.200−209.
  133. Mela L., Goodwin С.7/., Miller L.D. Correlation of mitochond-i, rial cytochrome concentration and activity to oxygen availability in the newborn. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975, v.64, p.384−390.
  134. К.Х., Чирко Ю. Т. Окисление янтарной кислоты в митохондриях печени при хроническом энтероколите и послерезекции тонкой кишки. Вопросы Мед. Химии, 1975, т.21, с. 62−65.
  135. Белоус М. УБондаренко В.А., Бондаренко Т. П. Влияние замораживания-оттаивания на. липидный состав митохондрии. -Биохимия, 1978, т.43, с.2175−2183.
  136. .П. Трансформация энергии в биомембранах, м., 1972, изд-во Наука, Москва, с. 203.146. 2? zagolof? A., Maclennan D.E., I'.icConneli D.G., Green D.E. Studies on the electron transfer system. J. Eiol. Chem., 1967, v.242, p.2051−2061.
  137. Kagawa Y., Racher E. Partial resolution of the enzymes cata-lizing oxidative phosphorilation. J. Bilo. Chem., 1971, v. 246, p.5477−5487.
  138. Racker E., Kandrach. A. Re constitution of the third site of oxidative phosphorilation. J. Biol. Chem., 1971, v.246, p.7069−7071.
  139. Racker E., Kandrach A. Partial lesolution of the enzymes ca-talizing oxidative phosphorilation.
  140. Ragan C.L., Racker E., Partial of the enzymes catalizing oxidative phosphorilation. J. Biol. Chem., 1973, v.248, p.2563−2569.
  141. Kam Hung Leung, Hinkle P.C. Re constitution of ion transport and respiratory control in vesicles formed from reduced coenzyme Q -cytochrom С reductase and phospholipids. J. Biol. Chem., 1975, v.250, p.8467−8471.
  142. Ragan C.L., Hincle P.C. Ion transport and respiratory control in vesicles formed from reduced nicotinamide adenin dinucleotide coenzyme Q reductase and phospholipids. J. Biol. Chem., 1975, v, 250, p.8472−8476.
  143. B.H. Регуляция формирования митохондрий, м., изд-во Наука, Москва, 1980, с. 318.
  144. В.Н., Сакс В. Н., Еерезин И. В. Защитное действие субстратов дыхательной цепи при инакцивации митохондриальныхчасциц переноса электронов протеолитическими ферментами и ядом кобры. Биохимия, 1969, т.34, с.874−877.
  145. В.Н., Рахимов М.^., Еерезин й.В. Некоторые закономерности деградации и стабилизации реконструированной дыхательной цепи митохондрий в связи с изучением механизма ее формирования. Биохимия, 1968, т.33, с.1115−1123.
  146. В.Н., Рахимов М. М., Сакс В. А., Еерезин И. В. Защитное действие субстратов при инактивации НАД-Н^-оксидазы и сукци-натоксидазы ядом кобры и трипсином. Биохимия, 1967, т.32,с.1134−1141.
  147. Estrada О.я., Cweabes A. i'., Cabeza A.G. Effect of phospholi--' pids on induced enzyme releas from mitochondria. Biochemistry, 1966, v.5, p.3432−3440.
  148. У.З. Фосфолипаза Ag митохондриальной фракции печени крысы: Выделение и функциональная характеристика. Дисс.. канд. биол. наук, Ташкент, 1982.
  149. Муратова У.З.,.Мадьяров Ш. Р., Ахмеджанов Р., Рахимов М. М., Ташмухамедов Б. А. Некоторые функциональные свойства митохондриальной фосфолипазы Ag- Тезисы докладов.3 конференции биохимиков республик Средней Азии и Казахстана. 1981, т.2, с. 1717.
  150. Yasuhiro Iv., Arai H., Tamori-Natori Y., Nojima S. Partial purification and properties of phospholipase A^ from rat liver mitochondria. J. Biochem., 1983, v.93, p.631−637.
  151. Singleton W.S., Gray K., Brown M., White J.L. Chromatographi-aly homogenous lecithin from egg phospholipids. J. Amer. Oil. Chem. Soc., 1965, v.42, p.53−57.
  152. Rhodes D.N., Leu C.H. Phospholipids. 4. On the composition of hen^-s egg phospholipids. Bio chem. J., 1957, v. 65, p. 526 -533.
  153. Koid H., Oda T. Clin. Chim. Acta, 1959, v.4, p.53−59,
  154. King Т.Е. Preparation of succinate dehydrogenase and recon-stitution of succinate oxidase. Adv. Enzymol., 1966, v.28, p. 155−236.
  155. Lowry O.H., Rosenbrough IT.J., Farr A.E., Randall K.J. Frote-in measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 1951, v.5, p.265−275.
  156. Haztee e.f., A modification of Lowry method. Anal. Biochem. 1972, v.41, p.326−329.1. Л 1/
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?