Определение антимикробной активности методом диска

Изучение антимикробной активности лекарственных пленок проводилось по отношению к штаммам грамположительных бактерий Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, к грамотрицательным штаммам Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa, к дрожжевому грибу Сandida albicans методом диффузии в агар (лунок). Исследуемые образцы растворяли в дистиллированной воде в концентрации 1 мг/мл. Препараты сравнения — линкомицина гидрохлорид для бактерий и нистатин для дрожжевого гриба С. аlbicans.

Культуры выращивали на жидкой среде рН 7,3 ± 0,2 при температуре от 30 до 35⁰С в течение 18−20 часов. Культуры разводили 1:1000 в стерильном 0,9% растворе натрия хлорида изотоническом, вносили по 1 мл в чашки с соответствующими элективными питательными средами для изучаемых тест-штаммов и засевали по методу «сплошного газона». После подсушивания на поверхности агара формировали лунки размером 6,0 мм, в которые вносили растворы исследуемых образцов и препаратов сравнения. Посевы инкубировали при 37⁰С, учет растущих культур проводили через 24 часа.

Антимикробная активность образцов оценивалась по диаметру зон задержки роста тест-штаммов (мм). Диаметр зон задержки роста меньше 10 мм и сплошной рост в чашке оценивали как отсутствие антибактериальной активности, 10−15 мм — слабая активность, 15−20 мм — умеренно выраженная активность, свыше 20 мм — выраженная. Каждый образец испытывался в трех параллельных опытах. Статистическую обработку проводили методами параметрической статистики с вычислением средней арифметической и стандартной ошибки.