Фармакогностическое изучение четырех видов рода Ledum L

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Заболевания сердечно-сосудистой, нервной, пищеварительной и других систем прогрессируют в современном обществе, что нередко связано с ухудшением экологической обстановки. В связи с этим важным направлением фармацевтической науки является поиск безопасных, экологически чистых, не вызывающих побочных эффектов и привыкания препаратов. В этом аспекте заслуживают внимания лекарственные растения, т.к. они не обладают теми недостатками, которые свойственны многим средствам синтетического происхождения. Одно из таких растений — багульник болотный, широко распространенный в РФ. Запасы его сырья огромны (Г.И. Олешко и др., 1984;1989; В. Ф. Левинова и др., 1986; В. Н. Косицын, 1996;1998; В. Д. Белоногова и др., 2005 и др.). Кроме него, в народной медицине находят разнообразное применение и другие виды этого рода (A.JI. Бу-данцев, Е. Е. Лесиовская, 2001). Отдельные фармакологические эффекты багульника болотного, проявляющиеся умеренным местным раздражающим действием на слизистые оболочки, усилением секреции бронхиальных желез и спазмолитическим действием на гладкую мускулатуру бронхов, связывают с наличием в нем эфирного масла, состав и накопление которого довольно глубоко исследованы. Побеги багульника болотного — источник противокаш-левого и бронхолитического препарата «Ледин», созданного на основе сеск-витерпенового спирта ледола (A.M. Задорожный и др., 1988). Вместе с тем многие виды терапевтического действия багульников, в частности диуретический, противовоспалительный, кардиотонический, желчегонный, обусловлены также содержанием богатого комплекса фенольных соединений, макро-и микроэлементов, однако недостаточно изученных (М.В. Белоусов, 2004). Кроме того, багульник болотный широко применяется в гомеопатии в локальной терапии опорно-двигательного аппарата. На его основе отечественной фармацевтической промышленностью выпускаются оподельдок и мазь «Ледум», стандартизация которых не разрешена до настоящего времени.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью работы явилось сравнительное фармакогностическое изучение видов багульника (Ledum L.) флоры России (б. болотного — L. palustre, б. крупнолистного — L. macrophyllum Tolm., б. стелющегося — L. decumbens (Ait.) Lodd. ex Stend., б. подбела — L. hypoleucum Кот.), а также углубленное изучение багульника болотного из различных мест произрастания на территории европейской и азиатской частей страны, разработка методов стандартизации сырья и препаратов на его основе.

Для выполнения поставленной цели следовало решить следующие задачи:

— провести критический анализ данных литературы по современному состоянию морфолого-анатомических и химико-фармакологических исследований багульников;

— предпринять сравнительное изучение их химического состава, в частности веществ первичного (аминокислот, монои полисахаридов, макрои микроэлементов) и вторичного обмена (арбутина, гидроксикоричных кислот, флавоноидов, полифенольных окисляемых соединений);

— выявить с помощью рентгенофлуоресцентного и атомно-адсорбционного анализа степень экологической чистоты сырья;

— проанализировать сезонную и суточную динамику накопления фенольных соединений для определения оптимальных сроков заготовки побегов багульника;

— разработать методики количественного определения арбутина, гидроксикоричных кислот и флавоноидов в сырье, гомеопатической матричной настойке и мази «Ледум» для возможной их стандартизации;

— составить нормативную документацию (ФСП, дополнения к ФС) на побеги и гомеопатические лекарственные формы багульника.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ. Впервые предпринят фармакогно-стический анализ 4-х видов багульника (б. болотного, б. крупнолистного, б. стелющегося и б. подбела), произрастающих в европейской и азиатской частях РФ. С использованием современных методов (рентгенофлуоресцентного и атомно-адсорбционного) изучен их макрои микроэлементный состав.

Проведены исследования по стандартизации побегов багульника, в результате чего разработаны методики количественного определения арбутина и гидроксикоричных кислот (методом прямой спектрофотометрии), флавоноидов (методом спектрофотометрии по реакции комплексообразова-ния с алюминия хлоридом).

Впервые определено содержание фенольных соединений в сырье багульника болотного, заготовленном в различных регионах РФ, в Украине и Беларуси, а также реализуемом в аптечных учреждениях.

На основании аналитических исследований подготовлены дополнения к фармакопейной статье № 1 ГФ XI «Побеги багульника болотного».

Впервые изучены сезонная и суточная динамики накопления фенольных соединений в побегах багульника.

Разработаны методики качественного и количественного анализа гомеопатических лекарственных форм на основе багульника.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Предложены методики стандартизации сырья багульника, позволяющие объективно оценивать их доброкачественность. Результаты качественного обнаружения и количественного определения основных групп ФАВ внедрены и используются в учебном процессе Курского государственного медицинского университета (акт о внедрении № 224 от 16.02.2005, № 227 от 2.09.2005), а также в работе Вологодского областного центра контроля качества и сертификации лекарст.

— 10венных средств (акт об апробации от 16.10.2005).

Результаты исследований положены в основу изменений к фармакопейной статье № 1 ГФ XI «Побеги багульника болотного», ФСП «Настойка багульника гомеопатическая», ФСП «Ледум мазь гомеопатическая» (Ивановская фармацевтическая фабрика, акт о внедрении от 10.10.2005).

Токсико-экологическое значение тяжелых металлов нашло отражение в опубликованном учебном пособии для преподавателей и студентов «Экологическая оценка техногенного загрязнения Ярославской области».

Разработаны сборы с условными названиями «Вера», «Исцеление» и «Себавал», показанные на основании испытаний на кафедре терапии педиатрического факультета ЯГМА (зав. кафедрой проф. А.А. Зотов) в лечении гипертонической болезни и других заболеваний сердечно-сосудистой системы. ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

— итоги изучения химического состава веществ первичного и вторичного обмена побегов багульника болотного и других видов этого рода,.

— результаты рентгенофлуоресцентного и атомно-адсорбционного анализов элементного состава сырья упомянутых видов растений,.

— экспериментальные данные по обоснованности замены фармакопейной методики количественного определения арбутина на спектрофото-метрическую, более точную и достовернуюпо стандартизации и разработке нормативной документации на гомеопатические лекарственные формы багульника.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения работы доложены и обобщены: на научно-практической конференции, посвященной 85-летию высшего образования на Урале (Пермь, 2001), научно-практических конференциях «Актуальные проблемы экологии Ярославской области» (Ярославль, 2002, 2005), научной конференции студентов и молодых ученых (Курск, 2002), конгрессе молодых ученых «Науки о человеке» (Томск, 2002), X Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2003) — научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава.

ВУЗЫ И РЕГИОН" (Пермь, 2003), научной конференции, посвященной 100-летию образования фармацевтического факультета Запорожского государственного медицинского университета (Запорожье, 2004), научной конференции, посвященной 50-летию Алтайского государственного медицинского университета (Барнаул, 2004), на ежегодных научных конференциях студентов и молодых ученых Ярославской государственной медицинской академии (Ярославль, 2002;2005) — на совместном заседании кафедры фармакогнозии, фармацевтической химии, управления и экономики фармации, фармацевтической технологии фармацевтического факультета ЯГМА (Ярославль, 2005).

ПУБЛИКАЦИИ МАТЕРИАЛОВ ИССЛЕДОВАНИЯ. По теме диссертации опубликовано 39 работ, из них 12 в журналах. Составлено и издано учебное пособие для преподавателей и студентов на тему «Экологическая оценка техногенного загрязнения Ярославской области», предназначенное для подготовки к занятиям по экологии.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований Ярославской государственной медицинской академии (номер гос. регистрации 01.20.211 931).

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Работа изложена на 156 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (1 глава), экспериментальной части (3 главы), общих выводов, списка литературы и приложенияиллюстрирована 49 рисунками и 76 таблицами.

Список литературы

включает 263 источника, из них 21 на иностранных языках.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ.

1. Впервые с использованием рентгенофлуоресцентного анализа побегов багульника болотного, б. крупнолистного, б. стелющегося, б. подбела, собранных в европейской части РФ, Сибири и на Дальнем Востоке, обнаружено. 5 макро- (К, Са, S, Р, С1) и 25 микроэлементов (Ва, Br, V, Fe, I, Cd, Со, Си, La, Mn, Mo, As, Nd, Ni, Rb, Pb, Se, Sr, Sn, Sb, Ti, Cr, Ce, Zn, Zr), имеющих определенное значение в хемотаксономическом, экологическом, токсикологическом и медицинском аспектах.

2. В результате атомно-адсорбционного анализа определено содержание 8 (Pb, Cd, Си, Zri, Fe, Mn, As, Hg) элементов в официнальном сырье багульника болотного, заготовленного в 7 регионах РФ, и отмечены самые высокие концентрации марганца в нем, тем самым указывая на то, что растение является марганофилом. Допустимые уровни техногенных элементов не превышены ни в одном из образцов при сравнении с требованиями СанПиНа 2.3.2.1078−01.

3. Проведена количественная оценка фенольных соединений и элементного состава различных разновидностей и видов багульника флоры России и отмечено, что среди них наиболее богат фенольным комплексом багульник крупнолистный. В результате сравнительного рентгенофлуоресцентного анализа побегов различных разновидностей багульника болотного, а также побегов азиатских видов багульника установлено, что они содержат идентичный элементный состав, принципиально не различающийся в количественном отношении как между разновидностями, так и видами, что свидетельствует о его малой информативности в хемотаксономическом аспекте для разных видов, в известной мере довольно различающихся микродиагностическими признаками, в частности наличием и обилием волосков.

4. При рентгенофлуоресцентном анализе разработанных сборов с условными названиями «Вера», «Исцеление» и «Себавал», обладающих успокаивающими, болеутоляющими, спазмолитическими и другими свойствами, отмечено высокое содержание отдельных жизненно необходимых элементов и в то же время в них завышено в сравнении с ПДК, принятыми для овощей и фруктов, содержание Cd, РЬ и Zn, но оно соответствует нормам СанПиНа 2.3.2.1078−01.

5. Хроматографией на бумаге изучен качественный состав флавоноидов и гидроксикоричных кислот в надземных органах, разработаны методики прямого спектрофотометрического определения арбутина и гидроксикоричных кислот, а также флавоноидов по реакции комплексообразования с алюминия хлоридом в уксусно-уротропиновом буфере в официнальном сырье багульника болотного. На основе проведенных исследований предложены дополнения к статье № 1 ГФ XI издания «Побеги багульника болотного».

6. В результате количественного определения фенольных соединений в побегах багульника болотного из различных мест произрастания в европейской и азиатской частях страны обнаружено, что они в большей степени накапливались в высокоширотных регионах РФ — в Республике Коми, Саха и Вологодской области.

7. На основании изучения сезонной динамики накопления фенольного комплекса в побегах официнального вида видно, что в холодное время года его содержание увеличивалось, а в теплое — снижалосьсуточной динамики — максимальное накопление фенольных соединений простой химической структуры происходило в утренние часы, минимальное — в вечерние и ночные, а фенольных соединений сложной химической структуры больше всего содержалось в послеобеденные и вечерние часы, меньше всего — в утренние.

8. Разработаны методики количественного определения арбутина, флавоноидов, гидроксикоричных кислот и полифенольных окисляемых соединений в матричных настойках и этанольных извлечениях из мази багульника болотного. Методики положены в основу проектов ФСП «Настойка багульника гомеопатическая», ФСП «Ледум мазь гомеопатическая» для ОАО «Ивановская фармацевтическая фабрика», что создает условия для их стандартизации по действующим веществам.