Актуальность темы
Расширение ассортимента группы тонизирующих и иммуномодулирующих лекарственных средств (ЛС) путем внедрения в медицинскую практику новых отечественных фитопрепаратов, безопасных, эффективных и доступных по цене широким слоям населения, является социально и экономически важным направлением в современной фармации.
Большинство применяемых препаратов вышеуказанного спектра действия являются индивидуальными химическими веществами, которые нередко грубо вмешиваются в деятельность нервной и иммунной систем и вызывают целый ряд побочных эффектов [85, 95, 97, 104]. В этом плане в качестве сырьевых источников получения мягких тонизирующих и иммуномодулирующих препаратов представляют интерес лекарственные растения, у которых основная группа биологически активных соединений (БАС) представлена фенилпропаноидами [26, 48, 61, 69, 112].
В частности, при фитохимическом изучении сирени обыкновенной (Syringa vulgaris L., Oleaceae) выявлено, что доминирующим БАС коры данного растения является циннамилгликозид сирингин (элеутерозид В) [64, 73, 75, 77], который был предложен учеными СамГМУ и ВИЛАРа в качестве государственного стандартного образца (ГСО) для стандартизации сырья и препаратов элеутерококка колючего (Запесочная Г. Г., Куркин В. А., 1996). Кроме того, данными исследователями установлено, что содержание сирингина в коре сирени на порядок больше такового в корневищах элеутерококка (0,1%) [79, 113], поэтому именно кора сирени обыкновенной предложена в качестве источника получения ГСО сирингина (В ФС 42−2088;92).
Указанное соединение данного растения обусловливает адаптогенные и им-муномодулирующие свойства препаратов элеутерококка колючего (экстракт элеутерококка сухой и экстракт элеутерококка жидкий) [40, 79, 78], что позволяет по аналогии с ними прогнозировать подобный спектр фармакологической активности и для препаратов сирени обыкновенной. Кроме того, высока вероятность, что эффективность новых препаратов будет выше, так как ранее было указано содержание сирингина в коре сирени обыкновенной на порядок выше такового в корневищах элеутерококка {Eleutherococcus senticosus Maxim, Araliaceae) [79].
Оценка качества лекарственного растительного сырья (JIPC) сирени обыкновенной осуществляется в соответствии с ВФС 42−2106−92 «Кора сирени обыкновенной» также по содержанию сирингина.
Необходимость совершенствования нормативной базы возникает в связи с тем, что современные тенденции развития методов стандартизации лекарственных средств служат предпосылкой для формирования новых фармакопейных требований к их качеству (Арзамасцев А.П., 2000; Багирова В. Д., 2001).
В отношении обсуждаемого объекта целесообразным представляется пересмотр разделов «Качественные реакции» и «Количественное определение», что обусловлено расширением спектра представлений о химическом составе и повышением уровня требований к объективности и унифицированности методов анализа сырья, фитосубстанций и лекарственных средств, а также включения некоторых новых разделов (Самылина И.А., 1995). Решение вопросов стандартизации новых лекарственных средств замыкается на разработке объективных и унифицированных методов анализа сырья и препаратов по ведущей группе БАС (Куркин В.А., 2002; 2004).
Таким образом, представляется актуальным дальнейшее фитохимическое исследование сырья сирени обыкновенной, в плане разработки новых препаратов на ее основе, обладающих иммуномодулирующими и тонизирующими свойствами, а также поиск новых путей к решению проблемы химической стандартизации сырья и препаратов.
Цель и задачи исследования
Целью настоящей работы является изучение аналитических и технологических аспектов разработки новых лекарственных средств на основе коры сирени обыкновенной, обладающих тонизирующими и иммуномодулирующими свойствами.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
1. Изучение химического состава коры сирени обыкновенной произрастающей в Самарской области.
2. Разработка подходов к стандартизации сырья и препаратов коры сирени обыкновенной с позиций определения ведущей группы БАС и с учетом принципа унификации методик в ряду JIPC — субстанция — лекарственная
3. фждра^отка методик качественного анализа J1PC «Кора сирени обыкновенной».
4. Разработка методик количественного анализа коры сирени обыкновенной.
5. Разработка методик качественного и количественного анализа препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп».
6. Разработка и изучение в процессе хранения числовых показателей препаратов: «Сирени настойка» и «Сирени сироп».
7. Обоснование целесообразности внедрения новых лекарственных препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп» в качестве тонизирующих и иммуномо-дулирующих средств в медицинскую практику.
8. Разработка и оформление соответствующей нормативной документации.
Научная новизна: В результате изучения химического состава коры сирени обыкновенной (Syringa vulgaris. L.), произрастающей в Самарской области, выделено и идентифицировано 9 индивидуальных соединений, относящихся к фе-нольным соединениям. Установление структуры и изучение физико-химических свойств выделенных соединений проводилось методами УФ-, 'Н-ЯМР-спектроскопией и масс-спектрометрией, наряду с традиционными методами химического анализа. Для коры сирени обыкновенной произрастающей в Самарской области данные соединения выделены впервые.
Показана целесообразность проведения стандартизации сырья и препаратов сирени обыкновенной по ведущей группе БАС — фенилпропаноидам, и в частности, по содержанию сирингина.
Разработаны новые унифицированные методики качественного и количественного анализа сырья «Сирени обыкновенной кора» и препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп» с использованием ГСО сирингина методами тонкослойной хроматографии (ТСХ), спектрофотометрии и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
На основе изучения химического состава сырья и с учетом методологических подходов по выделению целевой группы действующих веществ выполнены фитохимические и аналитические исследования по разработке новых ЛС «Сирени настойка» и «Сирени сироп».
Практическая значимость: Разработаны методики качественного и количественного анализа коры и препаратов сирени обыкновенной основанные на обнаружении и количественного определения доминирующего фенилпропанои-да — сирингина — с использованием методов ТСХ, спектрофотометрии и ВЭЖХ.
Определены и изучены в процессе хранения числовые показатели качества препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп», в том числе «Содержание сирингина», «Сухой остаток», «Концентрация спирта», «Микробиологическая чистота», а также установлены сроки годности.
Показана на доклиническом этапе целесообразность использования разработанных препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп» в качестве тонизирующих и иммуномодулирующих средств в медицинской практике.
Оформлен и принят к рассмотрению в Фармакопейный государственный комитет Министерства здравоохранения и социального развития РФ проект ФС Сирени обыкновенной кора" (письмо № 131 от 27.01.05) для включения в ГФ XII РФ, а также подготовлены проекты ФСП «Сирени настойка» и ФСП «Сирени сироп».
Результаты исследований используются в научных изысканиях и в учебном процессе на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета (акты внедрения от 15.06.2005).
Положения, выдвигаемые на защиту:
1. Результаты изучения химического состава коры сирени обыкновенной, произрастающей в Самарской области.
2. Данные исследований по разработке методов стандартизации сырья и препаратов сирени обыкновенной. (
3. Методики качественного и количественного анализа ЛРС и препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп» с использованием ГСО сирингина.
4. Результаты разработки и определения показателей качества ЛРС и препаратов «Сирени настойка», «Сирени сироп».
5. Технология получения препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп».
6. Результаты доклинических исследований новых лекарственных средств на основе коры сирени обыкновенной.
Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО «Самарский государственным медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (Государственная регистрация № 1 200 105 332) и Республиканских программ:
1. «Совершенствование лекарственного обеспечения населения и лечебно-профилактических учреждений в рыночных условиях» по теме: «Создание лекарственных средств природного происхождения антимикробного, адаптогенного и гепатопротекторного действия» (Государственная регистрация № 1 990 005 277).
2. «Разработка методик качественного и количественного анализа сырья и препаратов лекарственных растений, содержащих фенилпропаноиды и флаво-ноиды» (Государственная регистрация № 1 990 005 277).
Апробация работы и публикации Материалы работы доложены и обсуждены на XXII международной конференции по полифенолам (Хельсинки, 2004) — на IV Международном симпозиуме «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» (Пущино, 2004) — на IX и XI Российских национальных конгрессах «Человек и лекарство» (Москва, 2002;2004) — на VI и VII Всероссийском конгрессе «Экология и здоровье человека» (Самара, I
2001; 2002) — на Межрегиональной конференции «Аспирантские чтения» (Самара 2002; 2003; 2004) — на VI Симпозиуме по фенольным соединениям (Москва, 2004) — на 58-й Межрегиональной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2003);
Основное содержание диссертации опубликовано в 16 научных работах.
Объем и структура работы: Диссертационная работа изложена на 132 страницах машинописного текста, содержит 20 таблиц, 9 рисунков. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, описания объектов и методов исследования, 3-х глав, отражающих результаты собственных экспериментальных исследований и их обсуждение, общих выводов, приложения и списка литературы, включающего 202 источника, из которых 71 на иностранных языках.
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ
1. В результате изучения химического состава коры сирени обыкновенной {Syringa vulgaris. L.), произрастающей в Самарской области, выделено 9 индивидуальных соединений, относящихся к фенольным и иридоидным соединениям соединениям.
2. Выделенные вещества идентифицированы с использованием УФ-, 'Н-ЯМР-спектроскопии и масс-спектрометрии, а также различных химических превращений как циннамилгликозид сирингин, кониферин, актеозид и фортиазид (фенилпропаноиды), (+)-ларицирезинол-4−0-Р-0-глюкопиранозид (лигнан), са-лидрозид, тирозол и гидрокситирозол (производные фенилэтилового спирта) и олеуропеин (иридоид).
3. Обоснована целесообразность выделения в качестве ведущей п анализируемой группы соединений в сырье и препаратах коры сирени обыкновенной доминирующей группы веществ фепилпропаноидпой природы и, в частности, сирингина.
4. Разработаны методики качественного анализа коры и препаратов сирени методами ТСХ, спектрофотометрии и ВЭЖХ с использованием ГСО сирингина.
5. Разработаны методики количественного определения сирингина в сырье и препаратах «Сирени настойка» и «Сирени сироп» с использованием хроматос-пекрофотометрии и ВЭЖХ. В качестве нижнего предела содержания сирингина в коре сирени обыкновенной рекомендован показатель «не менее 2.0%».
6. Определены показатели качества новых препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп», в том числе содержание сирингина, сухой остаток, содержание спирта, и установлены сроки годности. В качестве нижнего предела содержания сирингина рекомендован показатель «не менее 0,4%» и «не менее 0,02%» для настойки и сиропа соответственно.
7. Обоснована целесообразность внедрения новых лекарственных препаратов «Сирени настойка» и «Сирени сироп» в качестве тонизирующих и иммуно-модулирующих средств в медицинскую практику.
8. Оформлена и принята к рассмотрению в Фармакопейный государственный комитет Министерства здравоохранения и социального развития РФ проекты ФС для ГФ XII «Сирени обыкновенной кора» (письмо № 131 от 27.01.05) и подготовлены проекты ФСП «Сирени настойка» и «Сирени сироп».
