Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Разработка иммунохимических методов диагностики LT подобных токсинов

Диссертация: Разработка иммунохимических методов диагностики LT подобных токсинов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В настоящее время во многих районах земного шара острые диарейные заболевания остаются нерешенной проблемой ветеринарии и медицины. Причинами роста распространенности кишечных инфекций является увеличение спектра микроорганизмов, которые вызывают развитие инфекционных процессов и целый ряд факторов, способствующих повышению вирулентных свойств условнопатогенной микрофлоры. Практическая… Читать ещё >

Содержание

  • Список используемых сокращений
  • Глава 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Токсины энтеробактерий
      • 1. 1. 1. Энтеротоксины
        • 1. 1. 1. 1. 8Т-энтеротоксины
        • 1. 1. 1. 2. Термолабильный энтеротоксин
    • 1. 2. Распространение способности токсинообразования среди различных групп микроорганизмов
    • 1. 3. Методы культивирования токсигенных эшерихий
    • 1. 4. Методы выделение и очистки термолабильного энтеротоксина
    • 1. 5. Методы обнаружения термолабильного энтеротоксина
      • 1. 5. 1. Методы биологического обнаружения термолабильного энтеротоксина
      • 1. 5. 2. Иммунохимические методы диагностики термолабильного энтеротоксина
      • 1. 5. 3. Другие методы детекции термолабильного энтеротоксина
    • 1. 6. Моноклональные антитела
  • Глава 2. Собственные исследования
    • 2. 1. Материалы и методы
      • 2. 1. 1. Штаммы бактерий
      • 2. 1. 2. Лабораторные животные
      • 2. 1. 3. Среды для культивирования микроорганизмов и клеточных культур
      • 2. 1. 4. Буферные растворы
    • 2. 2. Методы исследования
      • 2. 2. 1. Получение биомассы штамма продуцента термолабильного энтеротоксина
        • 2. 2. 2. 1. Получение препаратов термолабильного энтеротоксина ультразвуком
        • 2. 2. 1. 2. Экстракция термолабильного энтеротоксина из клеток продуцентов 8 М мочевиной
        • 2. 2. 1. 3. Выделение термолабильного энтеротоксина с использованием лизоцима
      • 2. 2. 2. Осаждение термолабильного энтеротоксина сульфатом аммония
      • 2. 2. 3. Гель-фильтрация
      • 2. 2. 4. Аффинная хроматография
      • 2. 2. 5. Определение концентрации белка
      • 2. 2. 6. Электрофорез в ПААГе
      • 2. 2. 7. Иммуноблотинг
      • 2. 2. 8. Определение антигенной активности
      • 2. 2. 9. Реакция радиальной иммунодифузии по
  • Ухтерлони
    • 2. 2. 10. Тест на биологическую активность термолабильного энтеротоксина
    • 2. 2. 11. Получение поликлональных антител
    • 2. 3. Методы работы с культурами клеток
    • 2. 3. 1. Клонирование гибридом
    • 2. 3. 2. Хранение клеток
    • 2. 3. 3. Размораживание клеток
    • 2. 3. 4. Получение препаративного количества мкАт
    • 2. 3. 5. Очистка мкАт с помощью ионообменной хроматографии
    • 2. 4. Иммуноферментный анализ
    • 2. 4. 1. Приготовление конъюгата мкАт и поликлональных антител с пероксидазой хрена
    • 2. 4. 2. Приготовление проявляющего раствора
    • 2. 4. 3. Непрямой метод иммуноферментного анализа
    • 2. 4. 4. Двухцентровой метод иммуноферментного анализа
    • 2. 4. 5. Определение токсигенности бактериальных штаммов
    • 2. 5. Иммунохроматографический анализ
  • Глава 3. Результаты исследований
    • 3. 1. Выделение и очистка термолабильного энтеротоксина эшерихий
      • 3. 1. 1. Получение биомассы штамма продуцента
      • 3. 1. 2. Получение грубых-экстрактов штамма продуцентов
      • 3. 1. 3. Фракционирование грубого экстракта сульфатом аммония
      • 3. 1. 4. Очистка препарата энтеротоксина посредство гель -фильтрации
      • 3. 1. 5. Аффинная хроматография на голубой агарозе
      • 3. 1. 6. Определение чистоты полученных препаратов термолабильного энтеротоксина
      • 3. 1. 7. Определение антигенной активности термолабильного энтеротоксина
      • 3. 1. 8. Определение биологической активности термолабильного энтеротоксина
      • 3. 1. 9. Определение специфичности мкАт с использованием иммуноблотинга
    • 3. 2. Получение поликлональной антисыворотки против термолабильного энтеротоксина
      • 3. 2. 1. Выделение и очистка поликлональных антител из антитоксической сыворотки
      • 3. 2. 2. Хроматография поликлональной сыворотки на ЭБАЕ Тоуореаг! 650 М
      • 3. 2. 3. Определение специфичности препаратов поликлональных антител
      • 3. 2. 4. Получение конъюгатов поликлональных антител с пероксидазой хрена
      • 3. 2. 5. Подбор оптимальных условий для сорбции поликлональных антител на пластик
    • 3. 3. Получение и очистка препаративных количеств мкАт
      • 3. 3. 1. Использование перитониальных макрофагов
      • 3. 3. 2. Получение препаративных количеств мкАт
      • 3. 3. 3. Хроматографическая очистка мкАт на сорбенте ОЕАЕ-ТоуореаН 650 М
      • 3. 3. 4. Определение чистоты полученных препаратов мкАт
      • 3. 3. 5. Исследования используемых мкАт методом ИФА
        • 3. 3. 5. 1. Получение конъюгатов мкАт с пероксидазой хрена
        • 3. 3. 5. 2. Подбор специфической пары мкАт для обнаружения термолабильного энтеротоксина
        • 3. 3. 5. 3. Определение оптимальных условий сорбции мкАт на иммунологические планшеты
    • 3. 4. Создание иммуноферментной тест-системы для определения термолабильного энтеротоксина
      • 3. 4. 1. Аналитические параметры иммуноферментной тест-системы для обнаружения термолабильного энтеротоксина
    • 3. 5. Определение термолабильного энтеротоксина при помощи иммунохроматографического анализа
    • 3. 6. Испытание иммуноферментной тест системы
      • 3. 6. 1. Анализ бактериальных штаммов на токсинообразование
      • 3. 6. 2. Определение термолабильного энтеротоксина в кормах
      • 3. 6. 3. Определение термолабильного энтеротоксина в биологических образцах
  • Глава 4. Обсуяедение результатов
  • Выводы

Разработка иммунохимических методов диагностики LT подобных токсинов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность темы

В настоящее время во многих районах земного шара острые диарейные заболевания остаются нерешенной проблемой ветеринарии и медицины. Причинами роста распространенности кишечных инфекций является увеличение спектра микроорганизмов, которые вызывают развитие инфекционных процессов и целый ряд факторов, способствующих повышению вирулентных свойств условнопатогенной микрофлоры.

Установлено, что изменения патогенности у бактерий реализуются на генетическом уровне через мутации и генетические рекомбинации (В.М. Бондаренко, 1999).

Если раньше наиболее известными возбудителями острых кишечных инфекций были Vibrio cholerae, а также патогены из родов Shigella и Salmonella, то в настоящее время все большее этиологическое значение приобретают условнопатогенные энтеробактерии в том числе и Escherichia coli (А.Р. Мавсютов, С. В. Фиалкина, 2002).

Многочисленными исследованиями было установлено, что ведущую роль в патогенезе диарейных заболеваний играют так называемые цитотонические токсины: термолабильный (LT) и термостабильиый (STI, STII) энтеротоксины, синтез которых кодируется плазмидами (Ю.В. Вертиев 1996; В. Spangler 1992; Dallas et al., 1980).

В большинстве случаев от токсикоинфекций страдает молодняк сельскохозяйственных животных, а также пушных зверей. Поскольку токсикоинфекции, обусловленные различными представителями семейства энтеробактерий, наносят серьезный ущерб сельскому хозяйству (Д.Д. Новак, Т. А. Гришина, И. И. Сидорчук и др., 1995), актуальной задачей является борьба с ними.

Серьезная роль в борьбе с токсикоинфекциями отводится их ранней диагностике. Поскольку нет четкой корреляции между принадлежностью энтеробактерий к той или иной серогруппе и типом продуцируемых ими токсинов (О.А. Полякова, 1986), возникает необходимость определения энтеротоксина.

Большинство соответствующих биологических тестов трудоемки, характеризуются низкой чувствительностью, неудовлетворительной воспроизводимостью результатов. В случае энтеротоксинов эшерихий это биопроба на мышах-сосунках (Dean et al., 1972), тест отека лап у мышей (R.A. Finkelsein, 1976; Вартанян и др., 1978), тест на изолированной петле кишечника кролика (Evans et al., 1973; Holmgren et al., 1982), результат которых зависит от многих факторов и не всегда объективен. Применяемые для определения LT тесты на культурах клеток (C.N. Kwan 1974; S.T. Donta, 1976; Nozawa et al., 1978) так же мало специфичны.

Вышеперечисленных недостатков лишены иммунохимические методы определения энтеротоксинов. Оптимальной, на наш взгляд, является разработка иммуноферментных тест-систем (ИФА) и радиоиммунологических тест-систем (РИА) для определения энтеротоксинов. ИФА, так же как и РИА, намного более специфичен и чувствителен, чем биологические методы или методы, основанные на преципитации, но не требует применения радиоактивных реагентов. Идеальным инструментом для создания подобных методов индикации энтеротоксинов эшерихий являются моноклональные антитела (мкАт).

В настоящее время за рубежом получены мкАт к LT и ST энтеротоксинам эшерихий (М. Thomson et. al, 1984). Разработаны также твердофазный метод ИФА для определения ST энтеротоксина на основе мкАт и РИА системы для определения LT и ST энтеротоксинов (Yolken et al., 1977).

Учитывая все вышеизложенное, целью нашего исследования является разработка иммунохимических методов для качественного определения термолабильного энтеротоксина в исследуемых образцах.

Оптимальным в данном случае является создание иммуноферментного диагностикума с использованием специфических моноклональных антител.

Цель исследования. Целью настоящего исследования является разработка на основе оригинальных мкАт иммуноферментной тест-системы для качественного определения термолабильного энтеротоксина в исследуемых образцах.

Задачи исследования.

1. Выделить и очистить препаративное количество термолабильного энтеротоксина эшерихий.

2. Получить и очистить мкАт к термолабильному энтеротоксину в препаративных количествах.

3. Изучить возможность создания иммунохроматографической тест-системы (ИХА) на основе мкАт.

4. Разработать на основе мкАт специфическую и высокочувстви гельную иммуноферментную тест-систему для качественного определения термолабильного энтеротоксина.

5. Провести лабораторные испытания разработанной иммуноферментной тест-системы.

Научная новизна исследования.

Новизна настоящего исследования состоит в следующем:

1. С целью увеличения выхода высокоочищенного термолабильного энтеротоксина эшерихий модифицирована схема его выделения и очистки.

2. Показана принципиальная возможность разработки на основе мкАт иммунохроматографического диагностикума для определения термолабильного энтеротоксина.

3. Впервые разработана с использованием оригинальных мкАт иммуноферментная тест-система для качественного определения термолабильного энтеротоксина.

Практическая значимость. На основе проведенных исследований разработан технологический регламент на иммуноферментную тест-систему для качественного определения термолабильного энтеротоксина (ЬТ-ИФА-ТЕСТ). Разработанная тест-система может быть использована при исследованиях биологического материала в ветеринарной и медицинской практике на наличие ЬТ-подобных токсинов.

Результаты исследований использованы при написании нормативно-технической документации по изготовлению и применению диагносгикума для определения термолабильного энтеротоксина (утвержден Секцией пушного звероводства РАСХН протокол № 6 от 20 сентября 2005).

Основные положения, выносимые на защиту. Полученные экспериментальные данные позволяют вынести на защиту следующие основные положения:

— результаты модифицированной схемы по выделению и очистке термолабильного энтеротоксина эшерихий;

— результаты качественного определения ЬТ-подобных токсинов иммуноферментной тест-системой, разработанной на основе оригинальных мкАт;

— результаты качественного определения термолабильного энтеротоксина с помощью иммунохроматографической тест-системы;

— результаты лабораторных исследований по обнаружению термолабильного энтеротоксина в образцах кормов и пробах фекалий с помощью иммуноферментной тест-системы.

Выводы.

1. Модифицированный метод выделения и очистки термолабильною энтероюксина эшерихий делает возможным получение биологически и иммунологически активного энтеротоксина из клеток штаммов суперпродуцента с высокой степенью очистки.

2. Показана возможность использования полученною высокоочищенного термолабильного энтеротоксина для определения иммунологической активности мкАт, иммунизации лабораторных животных, а так же при разработке и производстве иммуноферментной тест-системы.

3. Подобрана специфическая пара мкАт К4з, К94 и впервые разработан на их основе иммунохроматографический диагностикум для качественного определения термолабильного энтероюксина.

4. Разработана на основе оригинальных мкАт высокочувствительная иммуноферментная тест-система для качественного определения термолабильного энтеротоксина в исследуемых образцах. Чувствительность тест-системы составила 6 нг/мл, специфичность подтверждена в опыте с использованием шигаподобных токсинов I и 11 типа, а так же термостабильных энтеротоксинов БТI и БТII.

5. Проведенные лабораторные испытания разработанного диагностикума показали его эффективность при определении термолабильного энтеротоксина в лизатах, полученных из коллекции штаммов энтеробактерий. Из 83 исследуемых штаммов энтеротоксин достоверно определен в изолятах 22% штаммов. В образцах кормов и пробах фекалий термолабильный энтеротоксин обнаруживался в 100% случаев.

Показать весь текст

Список литературы

  1. К., Горская Е. М., Бондаренко В. М. Транслокация кишечной микрофлоры и ее механизмы // Журн. микроб., эпидем., иммун.- 1991.-№ 10.-С. 74−78.
  2. В.М. Токсические биомолекулы патогенных энтеробактерий // Аграрная Россия. 2002. — № 2 — С. 29−32.
  3. В.М. «Острова» и «островки» патогенности бактерий // Аграрная Россия. 2002. — № 2. — С. 33 — 35.
  4. В. М. Мавзютов А.Р., Габидуллин З. Г. Термостабильные энтеротоксины условно патогенных представителей Enterobacter! асеае // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1998. — № 3. — С. 104−107.
  5. В.М., Мавзютов А. Р. Ингибиторы полимеразной цепной реакции // Генодиагностика инфекционных заболеваний, 4 Всеросс. Науч.-практич. конфер. 2002. — С.399−402.
  6. В.М., Мавзютов А. Р. Секретируемые факторы патогенности энтеробактерий // Микробиология. 2002. — № 1. — С. 84−90.
  7. В.М., Тимофеева И. Т., Степанова М. В., Вертиев Ю. В. О значимости высеваемости клебсиелл, энтеробактер. цитробактер и кишечных иерсиний при бактериологических исследованиях // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1987. — № 6. — С. 74−78.
  8. В.М. Факторы патсиенности бактерий и их роль в развитии инфекционного процесса // Микробиология. 1999. — № 5. -С. 34−39.
  9. Бухарин О. В, Туйгунов М. М., Зурочка A.B., и др. Феномен апоптоза в выживании энтеробактерий в системе паразит хозяин // Журн. микроб., эпидем., иммун. — 2002. — № 1. — С. 79−81.
  10. Ю.П. Методы биологического тестирования энтеротоксинов // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1981. — № 3. — С. 19−24
  11. Ю.П., Северцова М. К., Введенская О. И., Станиславский Е. С. Отек лап белых мышей тес г для оценки активности энтеротоксинов E.coli // Бюл. экспер. биол. — 1978. — № 2. — С. 150−152.
  12. Ю.В. Бактериальные токсины: биологическая сущность и происхождение // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1996. — № 3. — С. 43−46.
  13. Ю.В., Шагинян И. А., Степанова М. В. Определение токсигенности штаммов кишечной палочки и холерного вибриона радиоиммунологическим методом // Молек. ien. микробиол. и вирусол. 1985. — № 3. — С.38−40.
  14. Ю.В. Молекулярная структура бактериальных токсинов и генетический контроль их биосинтеза // М. 1985.
  15. Ю.В. Токсин-опосредованная обусловленность инфекционных заболеваний // Журн.микроб., эпидем., иммун. 1987. — № 3. — С. 86−92.
  16. A.B., Ливанова Л. Ф., Ерошенко Г. А., Щербаков A.A., Смирнова Н. И. Конструирование штаммов E.coli // Ветеринария. -2000,-№ 9.-С. 27−31.
  17. М.Я., Вартанян Ю. П., Станивлавский Е. С., Табачник А. Л., Гиршович Е. С. Выделение термолабильного энтеротоксина и изучение его биологических свойс1 В // Бюл. экспер. биол. 1976. — № 10.-С. 1237−1239.
  18. Л.И. Разработка технологии получения очищенных препаратов термолабильного энтеротоксина эшерихий // Диссертационная работа на соискание ученой степени кандидата биологических наук. М. 1998. 146 с.
  19. И.В. Вирулентность бактерий как функция адаптации // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1997. — № 4. — С. 16−20.
  20. И.В. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий к окружающей среде // Журн. микроб., эпидем., иммун. -1997.-№ 4.-С. 31−35.
  21. К.В., Попова А. Е. Количественная оценка биологической активности фильтратов культуры холерного вибриона на белых мышах // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1974. — № 9. — С. 52−56.
  22. Ю.В. Биомолекулярные основы патогенности бактерий // М.1985.- 240 с.
  23. А.Н., Шипулин Г. А., Бочкарев Е.Г, Рюмин Д. В. Новейшие технологии в генодиагностике: полимеразная цепная реакция в реальном времени (real-time PCR) // Вестник последипломн.медицинск. образования. 2002. — 3. — С.7−10
  24. П.А. Биологические методы ващиш животных oi бактериальных энгероюксинов // Докл. Рос. сель.-хоз. наук. 2004. -№ 1. — С. 52−53.
  25. П.А., Козловский Ю. Е., Тинаева Е. А. Экспериментальное обоснование защиты пушных зверей о г токсикозов бактериальной этиологи // «Проблемы пушного звероводства и кролиководства». Матер, конфер. 1997. — С. 81−82.
  26. Э.В., Ша1инян H.A., Гайлонская H.H. Определение энтеротоксина холерных вибрионов методом пассивного иммунного гемолиза//Журн. микроб., эпидем., иммун. 1981. — № 4. — С. 55−59.
  27. Зенин-Бермес H.H., Мальцева Т. В., и др. Этиология энтеробактериальных кишечных заболеваний у детей раннего возраста //Журн. микроб., эпидем., иммун. 1985. — № 9. — С. 17−20.
  28. Л.Ф., Дунаев Г. С. Получение и свойства энтеротоксина неагглютинирующихся вибрионов // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1974.-№ 3.-С. 62−66.
  29. С.М., Адаричев В. А., Дымшиц Г. М. Иммобилизация ДНК на микропористых мембранах с помощью УФ-облучения // Биоорганич. химия. 1992. — т. 18. — № 1. — С. 52−62.
  30. Н.Б. Энтеротоксины сальмонелл // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1983. — № 3. — С. 9−15.
  31. С.К., Левина E.H. и др. Условно-патогенная микрофлора семейства Enterobacteriaceae здоровых и больных детей раннего возраста с острыми кишечными инфекциями невыясненой этиологии //Журн. микроб., эпидем., иммун. 1981. — № 4. — С. 82−85.
  32. Л.А., Макарова М. А., Егорова С. А. Геноиндикация факторов патогенности эшерихий как метод достоверной лабораторной диагностики острых кишечных инфекций //Сб.тр.науч.-практ.конф."Генодиагностика инфекционных заболеваний". 2004. -T.2.-C. 45−46.
  33. .С., Голубева И. В. Дифференциация и идентификация бактерий семейства Enterobacteriaceae // Сборник трудов. Диагностические препараты и методы лабораторной диагностики заболеваний, вызываемых энтеробактериями / ВНИИВС. 1977. — С. 39−40.
  34. Д.Г. Внехромосомные факторы наследственное ж бактерий и их значение в инфекционной патологии // М., Медицина. 1977. — 224с.
  35. А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований // М. 1978.
  36. Г. Ф. Биометрия // М.:Высшая школа. 1990. — 352 с.
  37. В.Г., Табачник А. Л., Шулыа М. Г. Плазмиды кишечных бактерий // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1978. — № 12. — С. 3−9.
  38. Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование // М., Мир. 1984.
  39. А.В., Доморадская Т. И. и др. Клонирование и экспрессия гена термостабильного энтеротоксина Escherichia coli // Биоорганическая химия. 1992. — т. 18. — № 1. — С. 63−70.
  40. Д. Эксперименты в молекулярной генетике // М., 1976.
  41. С.Т. Сочетание факторов патогенности у Escherichia coli, выделенных от детей и домашних животных // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1987. — № 6. — С. 36−38.
  42. С.Т. Факторы колонизации у эшерихий, выделенных от детей с острыми кишечными заболеваниями // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1983. — № 7. — С. 41−42.
  43. В.М. Справочник методов биохимической экспресс-индикации микробов // Кишинев: Картя Молдовеняскэ. 1986. — 296 с.
  44. В.Г., Бондаренко В. М. Общие принципы генетического контроля патогенности бактерий // Журн. микроб., эпидем., иммун. -1994. № 3. — С. 106−110.
  45. В.Г., Бондаренко В. М. Энтеротоксины энтеротоксигенных Escherichia coli: характеристика, механизм действия и генетический контроль // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1990.-№ 7.-С. 92−98.
  46. Н.А., Шилов В. М. и др. Биологические свойства условно-патогенных энтеробактерий, выделенных от здоровых людей и соматических больных с дисбактериозом кишечника // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1986. — № 2. — С. 34−38.
  47. Ю.Е., Бондаренко В. М., Ефремов В. Е. Патогенез кишечных инфекций и морфологическая оценка вакцин // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1992. — № 5. — С. 51−57.
  48. О.А., Евглевская Н. И. и др. Адгезивный антиген К99 итермостабильный энтеротоксин у патогенных эшерихий, возбудителей колибактериоза телят// Ветеринария. 1986. — № 8. — С.37.40.
  49. И.В. Молекулярно-генетический анализ распространения токсигенной микрофлоры // Диссертационная работа на соискание ученой степени кандидата биологических наук, п Родники, Мое. обл., 1998. 143 с.
  50. М.К., Вартанян Ю. П., Горбачев И. Д., Станиславский Е. С. Динамика выделения биологически активного энтеротоксина E.coli // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1978. — № 7. — С. 15−17.
  51. С. Н., Вербицкий М. Ш., Емельяненко П. А., Козловский Ю. Е. Получение гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к различным вариантам термолабильного энтеротоксина эшерихий // Сб. науч. тр. ВИЭВ. 1998.
  52. С.Н. Получение моноклональных антител к термолабильному энтеротоксину эшерихий // Диссертационная работа на соискание ученой степени кандидата биологических наук. М 1998. 132 с.
  53. Р. Методы очистки белков.- М.: «Мир», 1985.-358 с.
  54. JI.A. Сравнительная характеристика токсинов Escherichia coli // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1984 — № 1. — С. 56−59.
  55. Н. И. Основные факторы патогенности холерного вибриона и их генетический контроль // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1987-№ 7.-С. 103−109.
  56. Е.С., Волынский М. Я. Энтеротоксины энтеробактерий // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1976. — № 10. — С. 3−9.
  57. М.В., Вертиев Ю. В. Использование иммуноферментного метода для определения токсигенности штаммов кишечной палочки // Бактериальные токсины: Сб. науч. тр. НИИЭМ им. И. Ф. Гамалеи., -1987.-С. 151−157.
  58. М.В., Вертиев Ю. В. Определение токсигенности штаммов кишечной палочки и холерного вибриона радиоиммунологическим методом // Молек. генетика, микробиол., вирусол. 1985. — № 3. — С.38.40.
  59. А.Л., Гиршович Е. С. Получение и анализ биологических свойств энтеротоксина эшерихий // Сб. науч. тр. НИИ эпидемиологии и микробиологии. 1976. — С. 145−148.
  60. A.JI., Гиршович Е. С., Темпер P.M. Энтеротоксигенные E.coli //Журн. микроб., эпидем., иммун. 1977. -№ 3. — С. 31−38.
  61. A.B., Герасимова J1.K., Колупаева Л. И., Черенкевич С. Н. Межклеточная агрегация тимоцитов и бактериальных клеюк Escherichia coli // Биополимеры и клетка. 1991. — № 3. — С. 98−102.
  62. И.Н., Степанова М. В., Вертиев Ю. В., Батуро А. П. Энтеротоксигенные эшерихии у больных острыми кишечными инфекциями // Журн.микроб., эпидем., иммун. 1988. — № 8. — С. 4852.
  63. Л.Я., Саппо С. Г., Колесник B.C. О факторах патогенности Vibrio cholerae // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1988. — № 9. — С. 105−109.
  64. В. А., Головко А. Н. Факторы патогенности E.coli, выделенные от телят// Ветеринария. 1992. — № 4. — С. 23−24.
  65. Ю.Н., Брылин А. П., Досталева М. И. Факторы патогенности энетеротоксигенных E.coli и перспективы применения моноклональных антител при эшерихиозах животных // Сельскохоз. биология, 1988,-№ 5.-С. 117−124.
  66. А.Б., Ильичев Ю. А., Андроновская И. Б., Кирьякова Л. С. Мониторинг токсигенных штаммов холеры в Украине // Генодиагностика инфекционных заболеваний, 4 Всеросс. Науч.-практич. конфер. 2002. — С.304−305.
  67. Е.И., Яровой П. И., Калинская Т. П. и др. Этиологическая структура острых кишечных инфекций // Лаб. дело. 1990. — № 2. — С. 40−44.
  68. И.А., Маракуша Б. Н. Модификация метода пассивною иммунного гемолиза на плотной среде для выявлении продукции термолабильных энтеротоксинов штаммами холерных вибрионов и кишечной палочки // Журн. микроб., эпидем., иммун. — 1983. № 7.- С. 92−97.
  69. Л.Я., Лунькина М. В., Русанова H.H. Энтеротоксины эшерихии, выделенные при диарее у недоношенных новорожденных детей // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1988. — № 10. — С. 105.
  70. И.А., Алексеева Л. П., Грищенко H.A., Сомова А. Г. Возможности использования серологических меюдов выявления холерного токсина // Журн. микроб., эпидем., иммун. 1987. — № 11.- С. 60−63.
  71. Энтеробакгерии: Руководство для врачей под ред. В. И. Покровского // М, «Медицина». 1985. — 320 с.
  72. Acres S. Enterotoxigenic Escherihia coli infection in newbord calves: a review//J. Dairy Sei. 1985. — 68 (1). — P. 229−256.
  73. Ajaib S., Monan K.S., Sethi S.K., Vadenra D.V. Cross-neutralisation reactions of E. coli and V. cholerae enterotoxins as studied by rabbit skin inoculation test // Acta Microb. Acad. Sci.Hyng. 1977. — 21 (1). — P. 3339.
  74. Blake M.S., et al. A Rapid, Sensitive Method for Detection of Alkaline Phosphatase Conjugated Antibody on Western Blots. Anal. Biochem., 136:175−178,1984.
  75. Blome’n I., Lo"fdahl S., Stenstro’m T.A., Norberg R. Identification of enterotoxigenic Escherichia coli isolates: a comparison of PCR, DNA hybridization, ELISAs and bioassays // J. Microbiol. Methods. 1993. -17. — P. 181−191
  76. Bopp C.A., Threatt V.L., Moseley S.L., Wells J.G., Wachsmuth I.K. A comparison of alkaline phosphatase and radiolabeled gene probes with bioassays for enterotoxigenic Escherichia coli //Mol. Cell Probes. 1990, -4(3).-P. 193−203.
  77. Boros 1., Posfai G., Venetianer P. High-copy-number derivatives of the plasmid cloning vector pBR322 // Gene. 1984. — 30. — P. 257−260.
  78. Brunton J., Hinde D., Langston C., Gross R., Rowe В., Gurwith M. Enterotoxigenic Escherichia с oli in central Canada // J. Clin. Microbiol. -1980.- 11.-P. 343−348.
  79. Clarke D.R., Harpor I.A., Thompson R.Q. The detection of E. coli heat-labile enterotoxins by ELISA // J.Infection. 1980. — V.9.-N.1. — P. 224 251.
  80. Clements J.D., Finkelstein R.A. Isolation and characterization of homogeneous heat-labile enterotoxins with high specific activity from Escherichia coli cultures // Infect. Immun. 1979. — 24. — P. 760−769.
  81. Clements J.D., Flint D.C., Klhpstein F.A. Immunological and physiochemical characterization of heat-labile enterotoxins isolated from two strains of Escherichia coli // Infect. Immun. 1982. — 38. — P. 806−809.
  82. Dahlen P., Syvanen A.C., Hunskainer P. et al. Sensitive detection of genes by sandwich hibridization and time resolved fluorometry // Mol. Cell. Probes. — 1987.- 1.-P. 159−168.
  83. Dallas W.S. Conformity between heat-labile toxin genes from human and porcine enterotoxigenic Escherichia coli // Infect. Immun. 1983. — 40. — P. 647−652.
  84. Dallas W.S., Falkow S. Amino acid sequence homology between cholera toxin and Escherichia coli heatlabile toxin // Nature (London). 1980. -288.-P. 499−501.
  85. De S.N., Chatterje D.N. An experimental study of the mechanism of action of Vibrio cholerae on the intestinal mucous membrane // J. Pathol. Bacterid. 1953. — 66. — P. 559−562.
  86. Dean A.G., Ching Y.C., Williams R.B., Harden L.B. Test for Escherichia coli enterotoxin using infant mice: application in a study of diarrhea in children in Honolulu//J. Infect. Dis. 1972. — 125. — P. 407−411.
  87. DeBoy J. M., Wachsmuth I.K., Davis B.R. Serotypes of enterotoxigenic Escherichia coli isolated in the United States // Infect. Immun. 1980.- 29. -P. 361−368.
  88. Donta S.T. Interaction of choleragenoid and Gm, ganglioside with enterotoxins of V. cholerae and E. coli in cultured adrenal cells // J.Infect.Dis.Suppl. 1976. — 133. — P. 115−119.
  89. Donta S.T., Moon H.W., Whipp S.C. Detection of heat-labile Escherichia coli enterotoxin with the use of adrenal cells in tissue culture // Science. -1974, — 183.- P. 334−336.
  90. Dragas A.Z., Zaicsatter J., Jane M., Hren V. H., Drinovec B., Strnad S. Some biological characteristics of E. coli strains isolated from acute diarrhoeal diseases of infants // Bacteriol. Parasit.Infect. 1979. — 244 (4). -P. 439−451.
  91. Echeverria P., Orskov F., Orskov I., Plianbangchang D. Serotypes of enterotoxigenic Esclherichia coli in Thailand and the Philippines // Infect. Immun. 1982.-36.-P. 851−856.
  92. Echeverria P., Taylor D.N., Seriwatana J., Moe C. Comparative study of synthetic oligonucleotide and cloned polynucleotide enterotoxin gene probes to identify enterotoxigenic Escherichia coli // J. Clin. Microbiol. -1987.- 25.-P. 106−109.
  93. Edelman R., Levine M.M. Actual diarrheal infections in infants. II. Bacterial and viral causes // Hosp. Pract. 1980. — 15. — P. 97−104.
  94. Eisenstein B.I., Engleberg N.C. Applied molecular genetics: new tools for microbiologists and clinicians// J. Infect. Dis. 1986. — 153. — P. 416−430.
  95. Evans D.J., Jr., Evans D.G., Gorbach S.L. Polymixin B-induced release of low-molecular-weight heatlabile enterotoxin from Escherichia coli // Infect. Immun. 1974. — 10. — P. 1010−1017.
  96. Evans D.G., Evans D.J., Gorbach S.L. Identification of enterotoksigenic Escherichia coli and serum antitoxin activity by the vascular permeability factor assay // Infect. Immun. 1973. — 8. — P. 731−735.
  97. Evans D.J., Jr., Evans D.G. Direct serological assay for the heat-labile enterotoxin of Escherichia coli, using passive immune hemolysis // Infect. Immun. 1977.- 16.-P. 604−609.
  98. Evans D.G., Evans D.J., Jr. Pierce N. F. Differences in the response of rabbit small intestine to heat-labile and heat stable enterotoxins of Escherichia coli // Infect. Immun. 1973. — 7. — P. 873−880.
  99. Feinberg A.P., Vogelstein B.A. A technique for radiolabelling DNA restriction endonuclease fragment to high specific activity // Analyt. Biochem.- 1983.- 132 (1).-P. 6−13.
  100. Finkelstein R.A. Progress in the study of cholera and related enterotoxins // In A. W. Bernheimer (ed.), Mechanisms in bacterial toxinology. John Wiley & Sons, Inc. 1976. — P. 53−84.
  101. Finkelstein R.A., Jehl I.I., Goth A. Patogenesis of experimental cholerae: choleragen-induced rat foot odema a method of screening anticholeradrugs // Pros.Soc.Exper.Biol.Med., New.York. 132. — P. 835−841.
  102. Finkelstein R.A., Yang Z. Rapid test for identification of heat-labile enterotoxin-producing Escherichia coli colonies // J. Clin. Microbiol. -1983.- 18.-P. 23−28.
  103. Georges M.C., Wachsmuth I.K., Birkness K.A., Moseley S.L., Georges A.J. Genetic probes for enterotoxigenic Escherichia coli isolated from childhood diarrhea in the Central African Republic // J. Clin. Microbiol. -1983.-18.-P. 199−202.
  104. Greenberg, H. B., D. A. Sack, W. Rodriguez, R. B. Sack, R. G. Wyatt, A. R. Kalica, R. L. Horswood, R. M. Chanock, and A. Z. Kapikian. 1977. A microtiter solid-phase radioimmunoassay for detection of
  105. Escherichia coli heat-labile enterotoxin. Infect. Immun. 17:541−545.
  106. Gill D.M., Clements J.D., Robertson D.C., Finkelstein R.A. Subunit number and arrangement in Escherichia coli heat-labile enterotoxin // Infect. Immun. 1981. — 33. — P. 677−682.
  107. Gill D.M., Evans D.J., Evans D.G. Mechanism of activation of adenylate cyclase in vitro by polymixin-released, heat-labile enterotoxin of Escherichia coli//J. Infect. Dis. 1976. — 133. — P. 103−107.
  108. Giugliano L.G., Mann G.F., Drasar B.D. Response of mammalian cell lines to the toxin of Escherichia coli // J.Med.Microbiol. 1982. — 15. — P. 531−539.
  109. Guanella A.A. Sucking mous model for detection of ST E. coli enterotoxin: characteristics of the Model // Infection and Immunology. 1976. — 14. — P. 95−99.
  110. Guerrant R.L., Moore R.A., Kirschenfeld P.M., Sande M.A. Role of toxigenic and invasive bacteria in acute diarrhea of childhood // N. Engl. J. Med. 1975.-293.-P. 567−573.
  111. Guth B.E. C., Trabulsi L.R. Evaluation of antisera used for detecting enterotoxigenic Escherichia coli in Sao Paulo // J. Clin. Microbiol. 1985.- 22 (4). P. 626−628.
  112. Guth B.E.C., Twiddy E.M., Trabulsi L.R., Holmes R.K. Variation in chemical properties and antigenic determinants among type II heat-labile enterotoxins of Escherichia coli // Infect. Immun. 1986. — 54. — P. 529 536.
  113. Gyles C.L., So M., Falkow S. The enterotoxin plasmids of Escherichia coli //J. Infect. Dis. 1974. — 130. — P. 40−49.
  114. Gylles C.L. Limitation of the infant mouse test for Escherichia coli heat-stable enterotoxin // Canad. J. comp. med. 1979. — 15. — P. 289−301.
  115. Hawhey P.M., Lewis D.A. Medical bacteriologi: a practical approach // IRL Press, Oxford.
  116. Hirst T.R., Randall L.L., Hardy S.J.S. Cellular location of heat-labile enterotoxin in Escherichia coli // J. Bacteriol. 1984. — 157 (2). — P. 637 642.
  117. Holmgren J., Fredman P., Lindblad M., Svennerholm A.M., Svennerholm L. Rabbit intestinal glycoprotein receptor for Escherichia coli heat-labile enterotoxin lacking affinity for cholera toxin // Infect. Immun. 1982. — 38.- P.424−433.
  118. Holmgren J. Comparison of the tissue receptors for Vibrio cholerae and Escherichia coli enterotoxins by means of gangliosides and natural cholera toxoid // Infect. Immun. 1973. — 8. — P. 851- 859.
  119. Honda T., Taga S" Takeda Y., Miwatani T. Modified Elek test for detection of heat-labile enterotoxin of enterotoxigenic Escherichia coli // J. Clin. Microbiol. 1981,-13.-P. 1−5.
  120. Honda T., Tsuiji T., Takeda T., Miwatani T. Immunological non-Identity of heat-labile enterotoxins from humans and porcine enteropathogenic Escherichia coli // infect. Immun. -1981.-34.- P.337−340.
  121. Hsu S.M., Raine L., Fanger H. Use of avidin -biotin peroxidase complex (ABC) in immunoperoxidase techniques: a comparison between ABC and unlabeled antibody (PAP) procedures // J. Histochem. — 1981. — 29 (4). — P. 577−589.
  122. Hunkapiller M.W., Lujan E., Ostrander F., Hood L.E. Methods in enzymology // Academic Press, New York. 1983. — 91. — P. 227.
  123. Iida T., Tsuji T., Honda T., Miwatani T., Wakabayashi S., Wada K., Matsubara H. A single amino acid substitution in B subunit of Escherichia coli enterotoxin affects its oligomer formation // J.Biol.Chem. 1989. -264 (24).-P. 14 065−14 070.
  124. Jablonski E., Moomaw E.W., Tullis R.H., Ruth J.L. Preparation of oligodeoxynucleotide-alkaline phosphatase conjugates and their use as hybridization probes // Nucleic Acids Res. 1986.- 14. — P. 6115−6128.
  125. Kafos F.C., Jones C.W., Efstratiadis A. Determination of nucleic acid sequence homologies and relative concentrations by a dot hybridization procedure // Nucleic Acids Res. -1979. 7. — P. 1541 -1552.
  126. Kantor H.S. Action of E. coli enterotoxin adenilate cyclase behavior of intestinal cells in culture // Infection and Immunology. 1974. — v.9 — P. 1003−1006.
  127. Kantor H.S. Enterotoxin of E. coli and V. cholerae model for molecular biologist//J. Infect. Dis. 1975. — 131. — P. 22−32.
  128. Kessler C. The digoxigenin: anti-digoxigenin (DIG) technology a survey on the concept and realization of a novel bioanalytical indicator system // Mol. Cell. Probes. — 1991. — 5. — P. 161−205.
  129. G., Donta S. // J.Infect.Dis. 1975. — 131. — № 1.-P.58−62.
  130. Khatib L.A., Tsai Y.L., Olson B.H. A biomarker for the identification of cattle fecal pollution in water using the LTIIa toxin gene from enterotoxigenic Escherichia coli // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002. -59.-P. 97−104.
  131. Kirii Y., Danbara H., Komase K., Arita H., Yoshikawa M. Detection of enterotoxigenic Escherichia coli by colony hybridization with biotinylated enterotoxin probes // J. Clin. Microbiol. 1987. — 25. — P. 1962−1965.
  132. Klipstein F.A., Engert R.F. Immunological relationship of different preparations of coliform enterotoxins // Infection and Immunity. 1978.21(3).-P. 771−778.
  133. Kunkel S., Robertson D. C. Purification and chemical characterization of heat-labile enterotoxin produced by enterotoxigenic Escherichia coli. // Infect. Immun. 1979. — 25. — P. 586−596.
  134. Kwan C.N., Wishnow R.M. E. coli enterotoxin-induced steroidogenesis in cultured adrenal tumor cells // Infection and Immunology. 1974. — 10. — P. 146−151.
  135. Landegren U., Kaiser R., Caskey C.T., Hood L. DNA diagnostics-molecular techniques and automation // Science 1988. — 242. — P. 229 237.
  136. Langer P.R., Waldrop A.A., Ward D.C. Enzimatic synthesis of biotin -lebeled polynucleotides: Novel nucleic acid affinity probes // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. -1981. 78 (1 1). — P. 6633−6637.
  137. Leary J.J., Brigati D.J., Ward D.C. Rapid and sensitiv colorimetrik method for visualising biotin labeled DNA or RNA immobilised on nitrocellulose: Bio-blot // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. — 1983. — 80 (13). -P. 4045−4049.
  138. Levine M.M. Escherichia coli that cause diarrhea: enterotoxigenic, enteropathogenic, enteroinvasive, enterohemorrhagic and enteroadherent // J. Infect. Dis. 1987. — 155. — P. 377−389.
  139. Li P., Medon P.P., Skingle D.C., Lanser J.A., Symons R.H. Enzyme-linked synthetic oligonucleotide probes: non-radioactive detection of enterotoxigenic Escherichia coli in faecal specimens // Nucleic Acids Res. 1987.- 15.-P. 5275−5287
  140. Maas R., Silva R.M., Gomes T.A.T., Trabulsi L.R., Maas W. Detection of genes for heat-stable enterotoxin I in Escherichia coli strains isolated in Brazil // Infect. Immun. 1985. 49. — P. 46−51.
  141. Manning J.E., Hershey N.D., Broker T. R. et al. A new method of in situ hybridization // Chromosoma (Berlin). 1975. — 53 (2). — P. 107−117.
  142. Medon P.P., Lanser J.A., Monckton P.R., Li P., Symons R.II. Identification of enterotoxigenic Escherichia coli isolates with enzyme-labeled synthetic oligonucleotide probes// J. Clin. Microbiol 1988. — 26. -P. 2173−2176.
  143. Meinkoth J., Wahl G. Hybridization of nucleic acids immobilized on solid supports // Anal. Biochem. 1984. — 138. — P. 267−284.
  144. Mekalanos J.J., Swartz D. J., Pearson G.D.N., Harford N., Groyne F., M. de Wilde. Cholera toxin genes: nucleotide sequence, deletion analysis and vaccine development // Nature (London). 1983. — 306. — P. 551 -557.
  145. Merson M.H., Orskov F., Orskov I., Sack R.B., Huq I., Koster F.T. Relationship between enterotoxin production and serotypes in enterotoxigenic Escherichia coli // Infect. Immun. 1979. — 23. — P. 325 329.
  146. Merson M.H., Black R.E., Gross R.J., Rowe B., Huq I., Eusof A. Use of antisera for identification of enterotoxigenic Escherichia coli // Lancet ii -1980.-P. 222−224.
  147. Meyers J.A., Sanchez D., Elwell L.P., Falkow S. Simple agarose gel electrophoretic method for the identification and characterization of plasmid deoxyribonucleic acid//J. Bacteriol. 1976. 127. — P. 1529−1537
  148. Mills K., Tietze K. Monoclonal antibody enzyme-linked immunosorbent assay for identification of K99 positive Echerichia coli isolates from calves//J.Clin. Microbiol., 1984. — 19, 4. — P. 498−501
  149. Minami J., Okabe A., Nagata A., Hayashi H. Quantitative analysis of the production of heat-labile enterotoxin by enterotoxigenic Escherichia coli // Acta Med Okayama. 1984. — 38 (5). — P. 461−469.
  150. Moon H.W. Mechanisms of association of enteropatogenic E. coli with intestinal epithelium //Amer.J.Clin.Nut. 1979. — 32(1). — P. 119−127.
  151. Moseley S.L., Huq I., Alim A.R.M.A., So M., Samadpour- Motalebi M., Falkow S. Detection of enterotoxigenic E. coli by DNA colony hybridization //J. Infect. Dis. 1980. — 142. — P. 892−898.
  152. Moseley S.L., Hardy J.W., Huq M.I., Echeverria P., Falkow S. Isolation and nucleotide sequence determination of a gene encoding a heat-stable enterotoxin of Escherichia coli // Infect. Immun. 1983. — 39. — P. 11 671 174.
  153. Moss J., Richardson S.H. Activation of adenylate cyclase by heat-labile enterotoxin. Evidence for ADP-ribosyl transferase activity similar to that of choleragen // J. Clin. Invest. 1978. — 62. — P. 281−285
  154. Mullis K.B., Faloona F. Specific synthesis of DNA «in vitro» via a polymerase-catalysed chain reaction // Methods Enzymol. 1987. — 155. -P.335.
  155. Murray B. E., Mathewson J. J., DuPont H. L., Hill W. E. Utility of oligodeoxyribo-nucleotide probes for detecting enterotoxigenic Escherichia coli // J. Infect. Dis. 1987. — 155. — P. 809−811.
  156. Nogareda M., Arias M., Sanches-Vizcaino J. Factor de adhesion K88 de cepas eterotoxigenicas porcinas de Echerichia coli y su adaption a la tecnica elisa sandwiche in directo // An. INIA Ser. Ganadera. 1984. — 20. -P. 105−119.
  157. Norval M., Bingham R. W. Advances in the use of nucleic acid probes in diagnosis of viral disease of man // Arch. Virol. 1987. — 97. — P. 151−165.
  158. Nozawa B.T., Yokota T., Kuwahara S. Assay method for Vibrio cholerae and Escherichia coli enterotoxins by automated counting of floating Chinese hamster ovary cells in culture medium // J. Clin. Microbiol. -1978.-7.-P. 479−485
  159. Olive D.M. Detection of enterotoxigenic Escherichia coli after polymerase chain reaction amplification with a thermostable DNA polymerase // J. Clin. Microbiol. 1989. — 27. — P. 261−265.
  160. Olive D.M., Atta A.I., Setti S.K. Detection of toxigenic Escherichia coli using biotin-Iabelled DNA probes following enzymatic amplification of the heat labile toxin gene // Mol. Cell. Probes. 1988. — 2. — P. 47−57.
  161. Olive D.M., Khalik D.A., Sethi S.K. Identification of enterotoxigenic Escherichia coli using alkaline phosphataselabeled synthetic oligodeoxynucleotide probes // Eur. J. Clin.Microbiol. Infect. Dis. 1988. -7.-P. 167−171.
  162. Olsvik 0., Wasteson Y., Lund A., Homes E. Pathogenic Escherichia coli found in food//Int. J. Food Microbiol. 1991.
  163. Olsvik O., Strockbine N.A. PCR detection of heat-stable, heat-labile, and Shiga-Iike toxin genes in Escherichia coli. In D. H. Persing, T. F. Smith, F.
  164. C. Tenover, and T. J. White (ed.) // Diagnostic molecular microbiology. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 1993. — P. 271 276.
  165. O’Meara D., O’Shaughnessy E., Cryan B., Fanning S. Colorimetric detection of heat-labile toxin-encoding gene of enterotoxigenic Escherichia coli by PCR // J. Clin. Microbiol. 1995. — 33. — P. 1957−1960
  166. Orskov F., Orskov I., Evans D.J., Sack R.B., Sack D.A., Wadstrom T. Special Escherichia coli serotypes among enterotoxigenic strains from diarrhea in adults and children // Med. Microbiol. Immunol. 1976. — 162.- P. 73−80.
  167. Osek J. Multiplex polymerase chain reaction assay for identification of enterotoxigenic Escherichia coli strains // J. Vet. Diagn. Invest. 2001. -13.-P. 308−311.
  168. Palva E.T., Hirst T.R., Hardy S.J.S., Holmgren J., Randall L. Synthesis of a precursor to the B subunit of heatlabile enterotoxin in Escherichia coli // 1981.- 146.-P. 325−330.
  169. Pickering L.K., Evans D.J., Munoz Jr.0., DuPont H.L., Coelho-Ramirez P., Vollet J.J., Conklin R.H., Olarte J., Kohl S. Prospective study of enteropathogens in children with diarrhea in Houston and Mexico // J. Pediatr.- 1978.-93.-P. 383−388.
  170. Pickett C.L., Twiddy E.M., Belisle B.W., Holmes R.K. Cloning of genes that encode a new heat-labile enterotoxin of Escherichia coli // J. Bacteriol.- 1986.- 165.-P. 348−352.
  171. Qeary S.J., Marchlewicz B.A., Finkelstein R.A. Comparison of heat-labile enterotoxins from porcine and human strains of Escherichia coli // Infect. Immun. 1982.-36.-P. 215−220.
  172. Raab-Traub N., Pagano J.S. Hibridization of viral nucleik acids: newer metods of solid media and in solution // Meth. Virol. 1984. — 8. — P. 1−39.
  173. Reis M.H.L., Matos D.P., Castro A.F.P., Toledo M.R.F., Trabulsi L.R. Relationship among enterotoxigenic phenotypes, serotypes, and sources of strains in enterotoxigenic Escherichia coli // Infect. Immun. 1980. — 28. -P. 24−27.
  174. Renz M., Kurz С. A colorimetric method for DNA hybridization // Nucleic Acids Res. 1984. — 12. P. 3425−3444.
  175. Rigby P.W.J., Dieckmann M., Rhodes C., Berg P. Labeling DNA to high specific activity in vitro by nick translation with DNA polymerase I // J. Mol. Biol. 1977.- 1 13.-P. 237−251
  176. Riley L.K., Caffrey C.J. Identification of enterotoxigenic Escherichia coli by colony hybridization with nonradioactive digoxigenin-Iabeled DNA probes//J. Clin. Microbiol. 1990. — 28. — P. 1465−1468.
  177. Riley L.W., Remis R.S., Helgerson S.D., McGee H.B. et al. Hemorrhagic colitis associated with a rare E. coli serotype // N. Engl. J. Med. 1983. -308.-P. 681−685.
  178. Ronnberg В., Soderlind O., Wadstrom T. Evaluation of a competitive enzyme-linked immunosorbent assay for porcine Escherichia coli heat-stable enterotoxin//J. Clin. Microbiol. 1985.
  179. Ryskov A.P., Jincharadse A.O., Prosnyak M.I. et al. M13 phag as universal marker for DNA fingerprint of animals, plant and microorganisms // FEBS Letters. 1988. — 233. — P. 388−392
  180. Sack B. R. Human diarrheal disease caused by enterotoxigenic Escherichia coli // Annu. Rev. Microbiol. 1975. — 29. — P. 333−353.
  181. Sack D.A., Sack R.B. Test for enterotoxigenic Escherichia coli using Y1 adrenal cells in miniculture // Infect, mmun. 1975. — 11. — P. 334−336.
  182. Sack R.B. Human diarrheal disease caused by enterotoxigenic Escherichia coli //Annu. Rev. Microbiol. 1975. — 29. — P. 333−353.
  183. Sack R.B. Enterotoxigenic Escherichia coli: identification and characterization//J. Infect. Dis. 1980. — 142. — P. 279−286.
  184. Saez-Llorens X., Guzman-Verduzco L.M., Shelton S., Nelson J.D., Kupersztoch Y.M. Simultaneous detection of Escherichia coli heat-stable and heat-labile enterotoxin genes with a single RNA probe // J. Clin. Microbiol. 1989. — 27 (7). — P. 1684−1688.
  185. Saiki R.K., Gelfand D.H., Stoffel S., Scharf S.J., Higuchi R., Horn G.T., Mullis K.B., Erlich H.A. Primerdirected enzymatic amplification of DNAwith a thermostable DNA polymerase // Science. 1988. — 239. — P. 487 491.
  186. Saiki R.K., Bugawan T.L., Horn G.T., Mullis K.B., Erlich H.A. Analysis of enzymatically amplified P-globin and HLA-DQa DNA with allele-specific oligonucleotide probes // Nature (London). 1986. — 324. — P. 163 166.
  187. Saulnier P., Andremont A. Detection of genes in feces by booster polymerase chain reaction // J. Clin. Microbiol. 1992. — 30. — P. 20 802 083.
  188. Seed B. In: Genetic engineering: principles and methods (ed J.K. Setlow, A. Hollaender) // Plenum Publishing, New York. 1982. — 4. — P. 91.
  189. Serafim M.B., Pestana de Castro A.F., Leonardo M.B., Monteiro A.R. Single radial immune hemolysis test for detection of Escherichia coli thermolabile enterotoxin // J. Clin. Microbiol. 1981. — 14. — P. 473−478.
  190. Seriwatana J., Echeverria P., Taylor D.N., Rasrinaul L., Brown J.E., M. Peiris J.S., Clayton C.L. Type II Heat-Labile Enterotoxin-Producing Escherichia coli Isolated from Animals and Humans // Infection. and Immunity.- 1988.-56 (5).-P. 1158−1161.
  191. Seriwatana J., Echeverria P., Escamilla J., Glass R., Huq I., Rockhill R., Stoll B. J. Identification of enterotoxigenic Escherichia coli in patients with diarrhea in Asia with three enterotoxin gene probes // Infect. Immun. 1983.-42.-P. 152−155.
  192. Sethabutr O., Hanchalay S., Echeverria P., Taylor D.N., Leksomboo U. A nonradioactive DN probe to identify Shigella and enterotoxigenic Escherichia coli in stools of children with diarrhea // Lancet ii 1985. — P. 1095−1097.
  193. Smith H.W., Gyles C.L. The relationship between two apparently different enterotoxins produced by enterotoxigenic strains of E. coli of porcine origin// J.Med.Microbiol. 1970. — 3. — P. 387−401.
  194. Smith H.W., Halls S. Observation by the ligated intestinal segments and oral inoculation methods on E. coli ifections in pigs, calves, lambs and rabbits // J. Pathol, and Bacter. 1967. — 93. — P. 499−529.
  195. Smith H.W., Halls S. The transmissible nature of the genetic factor in E. coli that controls enterotoxin production // J. Gen. Microbiol. 1968. — v. 52.-P. 319−334.
  196. So M., McCarthy B.J. Nucleotide sequence of the bacterial transposon Tnl681 encoding a heat stable (ST) toxin and its identification in enterotoxigenic Escherichia coli strains // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1980.-77.-P. 4011−4015.
  197. So M., Dallas W.S., Falkow S. Characterization of an Escherichia coli plasmid encoding for synthesis of heat-labile toxin: molecular cloning of the toxin determinant. // Infect Immun. 1978. — 21. — P. 405−411.
  198. Sommerfeit H.S., Grewal H.M.S., Bhan M.K. Simplified and accurate nonradioactive polynucleotide geneprobe assay for identification of enterotoxigenic Escherichiacoli // J. Clin. Microbiol. 1990. — 28. — P. 4954.
  199. Southern E.M. Detection of specific sequence among DNA fragments separated by gel electrophoresis//J. Mol. Biol. 1975. — 98. — P. 503−517.
  200. Spicer E.K., Noble J.A. Escherichia coli heat-labile enterotoxin. Nucleotide sequence of the A subunit gene // J. Biol. Chem. 1982. — 257. -P. 5716−5721.
  201. Stacy-Phipps S., Mecca J.J., Weiss J.B. Multiplex PCR assay and simple preparation method for stool specimens detect enterotoxigenic Escherichia coli DNA during course of infection // J. Clin. Microbiol. 1995. — 33. — P. 1054−1059.
  202. Stavric S. A modified bioassay for E. coli enterotoxin // Can. J. Microbiol. 1977.-23 (3).-P. 331−336.
  203. Stoll B.J., Rowe B., Glass R.I., Gross R.J., Huq I. Changes in serotypes of enterotoxigenic Escherichia coli in Dhaka over time: usefulness of polyvalent antisera // J. Clin. Microbiol. 1983. — 18 — P. 935−937.
  204. Suggs S.V., Hirose T., Miyake T., Kawashima E.H., Johnson M.J., Itakura K., Wallace R.B. Use of synthetic oligodeoxyribonucleotides for the isolation of specific cloned DNA sequences // UCLA Symp. Mol. Cell, Biol. 1981.-23.-P. 683−693.
  205. Svennerholm A.M., Holmgren J. Identification of Escherichia coli heat-labile enterotoxin by means of a ganglioside immunosorbent assay (GMI-ELISA) procedure. //Curr. Microbiol. 1978. — 1. — P. 19−23.
  206. Takeda Y., Shimonishi Y., Takeda T., Miwatani T. Molecular structure and function of heat stable enterotoxins of enterotoxigenic Escherichia coli // Microecol. Ther. 1984. — 14. — P. 43−52.
  207. Tamanai-Shacoori Z., Jolivet-Gougeon A., Pommepuy M., Cormier M., Colwell R.R. Detection of enterotoxigenic Escherichia coli in water by polymerase chain reaction amplification and hybridization // Can. J. Microbiol. -1994. 40. — P. 243−249.
  208. Taub F., Thompson E.B. An improved method for preparing large arrays of bacterial colonies containing plasmids for hybridization: in situ purification and stable binding of DNA on paper filters // Anal. Biochem. -1982.- 126.-P. 222−230.
  209. Thomas P. S. Hibridization of denatured RNA and small DNA fragments transferred to nitrocellulose paper // Proc. Natl. Acad. Sei. -1980. 77. — P. 5201−5205.
  210. Thompson M.R., Brandwein H., LaBine-Racke M., Giannella R.A. Simple and reliable enzyme-linked immunosorbent assay with monoclonal antibodies for detection of Escherichia coli heat-stable enterotoxins // J. Clin. Microbiol.- 1984. 20. — P. 59−64.
  211. Tsen H.Y., Jian L.Z. Development and use of a multiplex PCR system for the rapid screening of heat labile toxin I, heat stable toxin II and shiga-like toxin I and II genes of Escherichia coli in water // J. Appl. Microbiol.1998.-84.- P. 585−592.
  212. Uhle’n. Magnetic separation techniques in diagnostic microbiology // Clin. Microbiol. Rev. 1994. — 7.- P. 43−54.
  213. Vaughan M., Moss J. Mechanism of action of choleragen // J. Supramol. Struct. 1978.- 8.-P. 73−488.
  214. Wachsmuth I.K. Escherichia coli: typing and pathogenicity // Clin. Microbiol. Newsl. 1980. — 2. — P. 4−7.
  215. Weller M. G. Immunochromatographic techniques a critical review // Anal Chem 366 :635−645, 2000
  216. Zuk R.F., Ginsberg VK, Houts T, Rabbie J, Merrick H, Ullman EF, Fischer MM, Sizto CC, Stiso SN and Litman DJ // Enzyme immunochromatography a quantitative immunoassay requiring no instrumentation. Clinical Chemistry 31: 1144−1150, 1985
  217. Yam W.C., Lilung M., Ng M.H. Evaluation and optimization of the DNA filter assay for direct detection of enterotoxigenic Escherichia coli in the presence of stool coliforms//J. Clin. Microbiol., 1986. — 24 (1). — P. 149 151.
  218. Yamamoto T., Gojobori T., Yokota T. Evolutionary origin of pathogenic determinants in enterotoxigenic Escherichia coli and Vibrio cholerae Ol. // J. Bacteriol. 1987. 169. — P. 1352−1357.
  219. Yamamoto T., Nakazawa T., Miyata T., Kaji A., Yokota T. Evolution and structure of two ADP-ribosylation enterotoxins, Escherichia coli heat-labile toxin and cholera toxin // FEBS Lett. 1984. — 169. P. 241 -246.
  220. Yamamoto, T., Tamura T., Yokota T. Primary structure of heat-labile enterotoxin produced by Escherichia coli pathogenic for humans // J. Biol. Chem. 1984. — 259. — P. 5037−5044.
  221. Yamamoto T., Tamura T.A., Ryoji M., Kaji A., Yokota T., Takano T. Sequence analysis of the heat-labile enterotoxin subunit B gene originating in human enterotoxigenic Escherichia coli //J. Bacteriol. 1982. — 152. — P. 506−509.
  222. Yavzori M., Porath N., Ochana O., Dagan R., Orni-Wasserlauf R., Cohen D. Detection of enterotoxigenic Escherichia coli in stool specimens by polymerase chain reaction // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 1998. — 31.1. P.503−509.
  223. Yoh M., Yamamoto K., Honda T., Takeda Y., Miwatani T. Effects of lincomycin and tetracycline on production and properties of enterotoxins of enterotoxigenic Escherichia coli // Infect. Immun. 1983. — 42. — P. 778−782.
  224. Yolken R.H., Greenberg H.B., Merson M.H., Sack R.B., Kapikian A.Z. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Escherichia coli heat-labile enterotoxin // J. Clin. Microbiol. 1977. — 6. — P. 439−444.
  225. Zhu Q.Y., Li L.Q., Lin W.M., Zhou Z.J., Liu C.J. Detection of genes for heat-stable enterotoxin in Escherichia coli by biotinylated ST-DNA probes // Chin. Med. J. (Engl). 1994. -107(5). — P. 338−41.
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?