Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Разработка биокаталитических систем для синтеза оптически активных веществ и утилизации эпихлоргидрина и хлоргидринов глицерина

Диссертация: Разработка биокаталитических систем для синтеза оптически активных веществ и утилизации эпихлоргидрина и хлоргидринов глицерина
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Разработана установка локальной очистки сточной воды от ЭПХГ с помощью консорциума микроорганизмов, иммобилизованного на полика-проамидном носителе. Проведены производственные испытания установки для очистки сточных вод производства эпоксидных смол ОАО «Уфахим-пром» от ЭПХГ. Показано, что иммобилизованные микроорганизмы консорциума полностью разрушают ксенобиотик, содержащийся в воде… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Экологический и биокаталитический потенциал микроорганизмов-деструкторов ЭПХГ и хлоргидринов глицерина 1О
    • 1. 1. Микробиологическая деградация ЭПХГ и хлоргидринов глицерина 1О
    • 1. 2. Микроорганизмы-деструкторы ЭПХГ и хлоргидринов глицерина — новые инструменты для получения оптически активных соединений
      • 1. 2. 1. Применение микроорганизмов-деструкторов ХОС в синтезе оптически активных соединений. Альтернативные методы синтеза
      • 1. 2. 2. Кинетическое разделение рацемических смесей 3-ХПД и 2,3-ДХП (или 2,3-дибромпропанола)
      • 1. 2. 3. Трансформация 1,3-ДХП
      • 1. 2. 4. Кинетическое разделение эпоксидов ¦
    • 1. 3. Биотехнологические способы обезвреживания низкомолекулярных ХОС и эпоксидов
      • 1. 3. 1. Использование локальных установок для детоксика-ции хлорорганических ксенобиотиков
      • 1. 3. 2. Иммобилизация микроорганизов-деструкторов в процессах очистки сточных вод от ксенобиотиков
      • 1. 3. 3. Биотестирование очищенных сточных вод
  • 2. ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Объекты исследования
    • 2. 2. Материалы исследования
      • 2. 2. 1. Синтез (Я) — и/или (8)-ЭПХГ
      • 2. 2. 2. Синтез (Я) — и/или (Б)-3-ХПД
    • 2. 3. Методы исследования
      • 2. 3. 1. Культивирование микроорганизмов
      • 2. 3. 2. Получение накопительных культур
      • 2. 3. 3. Выделение чистых культур микроорганизмов-деструкторов ХОС
      • 2. 3. 4. Идентификация микроорганизмов
      • 2. 3. 5. Определения совместимости штаммов
      • 2. 3. 6. Иммобилизация микроорганизмов на ПКА-волокне
      • 2. 3. 7. Выделение и очистка ферментов
        • 2. 3. 7. 1. Получение клеточных экстрактов
        • 2. 3. 7. 2. Выделение и очистка ферментов из клеточных экстрактов АнЬ/оЬаМег яр
        • 2. 3. 7. 3. Электрофорез клеточных экстрактов АпкоЬаМег Бр. 15−4 в агарозном геле
        • 2. 3. 7. 4. Определение концентрации белка
        • 2. 3. 7. 5. Определение концентрации ионов хлора 48 23.1 .в. Определение дегалогеназной и эпоксидгидролазной активности клеточных экстрактов
      • 2. 3. 8. Обработка клеток микроорганизмов акридиновым оранжевым
      • 2. 3. 9. Трансформация хлорорганических соединений покоящимися клетками микроорганизмов
        • 2. 3. 9. 1. Определение концентрации биомассы
        • 2. 3. 9. 2. Определение дегалогеназной активности клеток
        • 2. 3. 9. 3. Определение эпоксидгидролазной активности клеток
        • 2. 3. 9. 4. Определение концентрации хлорорганических субстратов и продуктов трансформации
        • 2. 3. 9. 4. 1. Обнаружение 3-хлормолочной кислоты
        • 2. 3. 9. 4. 2. Определение карбонилсодержащих соединений
        • 2. 3. 9. 5. Идентификация продуктов трансформации хлорорганических соединений
      • 2. 3. 10. Определение оптической чистоты продуктов биотрансформации
      • 2. 3. 11. Селекция устойчивых к повышенным концентрациям ХОС микроорганизмов
      • 2. 3. 12. Определение ЭПХГ в отходящих газах из биореактора 53 2.3.1.3 Определение показателей качества воды (сточных вод производства эпоксидных смол)
        • 2. 3. 13. 1. Определение ХПК
        • 2. 3. 13. 2. Количественное определение натрия хлористого (хлорид-ионов) в воде
        • 2. 3. 13. 3. Определение глицерина и хлоргидринов глицерина в воде
        • 2. 3. 13. 4. Определение токсичности воды 54 2.3.14. Математическая обработка результатов
  • 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Скрининг микроорганизмов — деструкторов ХОС
      • 3. 1. 1. Выделение микроорганизмов из природных источников
      • 3. 1. 2. Исследование конверсии ХОС покоящимися клетками микроорганизмов
      • 3. 1. 3. Исследование продуктов трансформации ХОС микроорганизмами
    • 3. 2. Разработка биокатализаторов для синтеза оптически активных веществ путем кинетичекого разделения рацемических смесей
      • 3. 2. 1. Поиск стереоселективных эпоксидгидролаз и дега-логеназ
      • 3. 2. 2. Идентификация штаммовпродуцентов стереоселективных ферментов
      • 3. 2. 3. Исследование продуктов трансформации рацемического 3-ХПД и ЭПХГ энантиоселективными штаммами
      • 3. 2. 4. Исследование ассимиляции рацемического 3-ХПД и ЭПХГ энантиоселективными микроорганизмами
      • 3. 2. 5. Генетическая модификация биокатализаторов синтеза оптически активного 3-ХПД из ЭПХГ
      • 3. 2. 6. Исследование возможности многократного использования биокатализатора при трансформации ЭПХГ
      • 3. 2. 7. Разработка биокатализаторов для синтеза оптически активных веществ из прохиральных соединений
    • 3. 3. Создание консорциума микроорганизмов для обезвреживания ХОС
      • 3. 3. 1. Отбор прототрофных штаммов, ассимилирующих ХОС
      • 3. 3. 2. Селекция штаммов, устойчивых к повышенным концентрациям ХОС
      • 3. 3. 3. Оценка обезвреживающей активности микроорганизмов
      • 3. 3. 4. Исследование совместимости и патогенности микроорганизмов консорциума
      • 3. 3. 5. Исследование иммобилизации микроорганизмов консорциума на полиакриламидных волокнах
      • 3. 3. 6. Исследование морфологических, физиолого-биохимических и хемотаксономических свойств микроорганизмов — компонентов консорциума
    • 3. 4. Иммобилизация консорциума в биореакторе
    • 3. 5. Исследование условий очистки модельных стоков, содержащих ЭПХГ
    • 3. 6. Исследование работы биофильтра
    • 3. 7. Исследование очистки сточных вод производства эпоксидных смол
  • ВЫВОДЫ

Разработка биокаталитических систем для синтеза оптически активных веществ и утилизации эпихлоргидрина и хлоргидринов глицерина (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность проблемы. Сложная экологическая ситуация во многих регионах страны определяется отсутствием эффективных, надежных технологий обезвреживания выбросов промышленных предприятий, использующих или производящих хлорорганические соединения, а также длительным применением высокотоксичных хлорированных гербицидов в сельском хозяйстве.

Многолетнее воздействие хлорорганических соединений, многие из которых помимо токсического действия обладают еще и канцерогенным действием, приводит к значительному росту заболеваний, в том числе и онкологических. В связи с этим остро стает вопрос: как защитить природу от дальнейшего загрязнения хлорорганикой со стороны многочисленных предприятий.

Перспективным подходом для решения этого чрезвычайно сложного вопроса может служить использование биотехнологических методов деток-сикации вредных соединений. Однако применение традиционных технологий биологической очистки от хлорорганики, используемых на заводских биологических очистительных станциях, не дает требуемого качества. Снижение концентрации хлорорганических соединений в стоках зачастую происходит вследствие «отдувки» воздухом (для низкомолекулярных, летучих соединений), а также сорбции активным илом, что в свою очередь ведет к загрязнению воздушного пространства и образованию высокотоксичных свалок.

Весте с тем во многих странах (США, Япония, Германия, Финляндия, Россия, Казахстан, Украина и др.) ведутся работы по разработке современных технологий локальной детоксикации токсичных соединений с участием специализированных микроорганизмов-деструкторов. Создание высоких концентраций микроорганизмов за счет иммобилизации клеток на носителях, правильное сочетание аэробных и анаэробных стадий, а также реализация принципа «пространственной суксцессии» в прямоточной системе позволяет реализовать эффективную очистку сточной воды от токсичных соединений при образовании значительно меньшего избытка активного ила по сравнению с действующими биологическими очистными сооружениями.

Основная сложность в разработке эффективных методов локальной очистки связана с отсутствием высокоактивных микроорганизмов-деструкторов, устойчивых к высоким концентрациям хлорорганических соединений.

Вместе с тем такие микроорганизмы представляют интерес для решения экологических проблем не только путем детоксикации ксенобиотиков, но и путем замены устаревших токсичных биоцидов (гербицидов, инсектицидов, пестицидов) на современные средства защиты растений, а также путем перехода на лекарственные препараты нового поколения. Такие вещества зачастую представляют собой хиральные молекулы, у которых физиологической активностью обладает только один из возможных стереоизомеров изомеров. Для синтеза таких соединений требуются оптически активные синтоны, с целью получения которых в последние годы интенсивно развиваются биокаталитические методы с применением ферментов и клеток микроорганизмов.

В этом плане микроорганизмы-деструкторы хлорорганических соединений могут служить источником уникальных ферментов, обладающих высокой активностью и стереоселективностью, которые могут синтезироваться в сверхколичествах.

Эпихлоргидрин (ЭПХГ) и хлоргидрины глицерина: 1,3-дихлорпропанол-2 (1,3-ДХП), 2,3-дихлорпропанол-1 (2,3-ДХП), 3-хлорпропандиол (3-ХПД), широко используются в химической промышленности. Эти соединения, в особенности ЭПХГ, хотя и не обладают кумулятивным действием, но в силу своей реакционной способности относятся к числу наиболее опасных ксенобиотиков, воздействующих на генетический аппарат человека.

Микроорганизмы, ассимилирующие эти соединения могут быть использованы для их обезвреживания в сточных водах и газо-воздушных выбросах промышленных предприятий, а также могут служить источником стереоселективных ферментов, в частности галогидрин-дегалогеназ и эпоксидгидролаз. Эти ферменты считаются наиболее перспективным инструментом для синтеза оптически активных эпоксидов, вицинальных диолов и галогидринов, являющихся важнейшими синтонами в синтезе ряда биологически активных веществ и жидких кристаллов.

Целью работы является поиск микроорганизмов-деструкторов ЭПХГ и хлоргидринов глицерина и оценка возможности их использования в биокатализе для синтеза оптически активных продуктов и очистке воды от хлорорганических ксенобиотиков.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

• скрининг микроорганизмов-деструкторов эпихлоргидрина и хлоргидринов глицерина;

• идентификация продуктов метаболизма хлорорганических соединений;

• поиск микроорганизмов для синтеза оптически активных ЭПХГ и 3-ХПД;

• создание консорциума микроорганизмов для обезвреживания хлорорганических соединений в сточной воде;

• исследование очистки иммобилизованным консорциумом модельной сточной воды от ЭПХГ на проточной лабораторной установке;

• оценка возможности использования консорциума микроорганизмов для очистки стоков производства эпоксидных смол;

• исследование морфологических, хемотаксономических и физиолого-биохимических свойств практически важных микроорганизмов.

Научная новизна. Выделены новые эффективные штаммы-деструкторы ЭПХГ и хлоргидринов глицерина, исследованы пути биодеградации этих ксенобиотиков и получены данные, указывающие на их отличие от известных путей.

Найдены новые биокатализаторы для синтеза оптически активных эпоксидов и диолов (в том числе галогенсодержащих), путем разделения их рацемических смесей или трансформацией прохирального предшественника. Впервые разработаны методы синтеза ® — и (8)-ЭПХГ, а также ® — и (8)-3-ХПД путем кинетического разделения рацемических смесей с помощью штаммов Rhodococcus sp. 18−19, Pseudomonas sp. 28−12 и Pseudomonas sp. 31−3, позволяющие получать продукты высокой энантиомер-ной чистоты (97 и 98% ее).

Научно обосновано создание консорциума на основе штаммов Pseudomonas sp. 28−1, Pseudomonas sp. 28−21, Microbacterium laevanifor-mans R27−33, Arthrobacter sp. 22−11 и Nocardioides simplex R50−5 для обезвреживания ЭПХГ и хлоргидринов глицерина в промышленных выбросах.

Практическая значимость. Разработаны стереоселективные биокатализаторы (.Pseudomonas sp. 31−3, Rhodococcus sp. 18−19 и Pseudomonas sp. 28−12) для получения оптически активных синтонов биологически активных веществ путем кинетического разделения рацемических смесей ЭПХГ и 3-ХПД. С помощью этих микроорганизмов созданы препаративные методы синтеза высокочистых ® — и (8)-энантиомеров этих соединений (97 — 98% ее) с выходом более 95% (в расчете на конвертированный субстрат).

Создан новый эффективный консорциум микроорганизмов на основе штаммов Pseudomonas sp. 28−1, Pseudomonas sp. 28−21, Microbacterium laevaniformans R27−33, Arthrobacter sp. 22−11 и Nocardioides R50−5 для очистки сточных вод от эпихлоргидрина и хлоргидринов глицерина.

Разработана установка локальной очистки сточной воды от ЭПХГ с помощью консорциума микроорганизмов, иммобилизованного на полика-проамидном носителе. Проведены производственные испытания установки для очистки сточных вод производства эпоксидных смол ОАО «Уфахим-пром» от ЭПХГ. Показано, что иммобилизованные микроорганизмы консорциума полностью разрушают ксенобиотик, содержащийся в воде в концентрации до 4 г/л, подвергнутой предварительной нейтрализации до pH 7,0−7,2 и разбавлению в два раза. При этом достигается снижение концентрации сопутствующих веществ (глицерина и хлоргидринов глицерина) на 96,5% и уровня ХПК воды на 91,3%. 9.

Апробация работы. Результаты исследований доложены на Международном симпозиуме «Микробиология охраны биосферы в регионах Урала и северного Прикаспия» (Оренбург, 1991), XII Международной конференции по производству и применению химических реагентов «Ре-актив-99» (Москва, 1999), V международной конференции по интенсификации нефтехимических процессов «Нефтехимия-99» (Нижнекамск, 1999), II Международной конференции молодых ученых «Актуальные тенденции в органическом синтезе на пороге новой эры» (г. Санкт — Петербург, 1999), Международной научно-технической конференции, посвященной 50-летию УГНТУ (Уфа, 1998), Международной научно-практической конференции «Сервис большого города» (Уфа, 1999), Всесоюзной конференции «Новые направления биотехнологии» (Пущино, 1990), Всероссийской научно-технической конференции «Проблемы нефтегазового комплекса России» (Уфа, 1995), VII Всероссийской научной конференции «Проблемы теоретической и экспериментальной химии» (Екатеринбург, 1997), научно-технических конференциях студентов, аспирантов и молодых ученых (Уфа, 1989, 1990, 1994; 1996).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 23 научные работы.

Структура и объем работы. Диссертация включает введение, обзор литературы (1 глава), описание объектов и методов исследования (2 глава), экспериментальную часть и обсуждение результатов (3 глава), выводы и список цитируемой литературы, содержащей 159 ссылок. Работа изложена на 130 страницах машинописного текста и содержит 26 рисунков и 27 таблиц.

Выводы.

1. Из природных источников выделены и идентифицированы штаммы Pseudomonas spp. 31−3, 28−12, 28−1, 28−21, Rhodococcus sp. 18−19, No-cardioides simplex 50−5, Arthrobacter spp. 22−11, 15−4, Microbacterium lae-vaniformans 27−33, способные деградировать эпихлоргидрин и хлоргидри-ны глицерина. Показано, что в ходе подготовительного метаболизма этих штаммов ХОС превращаются в глицерин.

2. Установлено, что деградация 3-ХПД штаммами Pseudomonas sp. 28−12, Pseudomonas sp. 31−3 и Rhodococcus sp. 18−19 осуществляется с помощью стереоселективной 3-ХПД-дегалогеназы. Показана возможность получения высокочистых энантиомеров (S) — или (Я)-З-ХПД (более 97% ее) путем кинетического разделения рацемической смеси этого соединения с помощью клеток микроорганизмов.

3. Выявлено, что штаммы Pseudomonas sp. 28−12, Pseudomonas sp. 31−3 и Rhodococcus sp. 18−19 осуществляют стереоселективный гидролиз ЭПХГ с образованием оптически активных соединений — остаточного энантиомера ® — или (8)-эпоксида и ® — или (8)-3-ХПД соответственно. Показано, что дикие штаммы катализируют синтез диола с низким выходом, вследствие дальнейшей конверсии этого соединения. Получены мутанты бактерий Pseudomonas sp. 31−3 и Pseudomonas sp. 28−12, потерявшие способность дехлорировать 3-ХПД, синтезирующие (Я)-З-ХПД из ЭПХГ с выходом, близким к теоретически возможному.

4. Обнаружено, что штамм Arthrobacter sp. 15−4, трансформирует прохиральный 1,3-ДХП в 3-ХПД, содержащий около 91% (Я)-изомера. Показано, что в клетках этого штамма присутствуют два фермента с 1,3-ДХП-дегалогеназной активностью, что может служить причиной снижения чистоты получающегося продукта.

5. Установлено, что штаммы Pseudomonas sp. 28−1, Pseudomonas sp. 28−21, Nocardioides simplex 50−5, Arthrobacter sp. 22−11, Microbacterium laevaniformans 27−33 проявляют высокую эпоксидгидролазную и дегало-геназную активность и устойчивость к ХОС и способны полностью их деградировать. Осуществлена селекция штаммов Nocardioides simplex R50−5, Microbacterium laevaniformans R27−33, обладающих сверхустойчивостью к ХОС. Показана способность микроорганизмов иммобилизоваться на по-ликапроамидных волокнах, достигая концентрации 8−10 мг (асв) на грамм носителя.

6. На базе штаммов Pseudomonas sp. 28−1, Pseudomonas sp. 28−21, Nocardioides simplex R50−5, Arthrobacter sp. 22−11, Microbacterium laevaniformans R27−33, создан консорциум для детоксикации ЭПХГ и хлоргид-ринов глицерина в промышленных выбросах. Определены условия очистки модельного стока, содержащего ЭПХГ, на лабораторной установке с помощью иммобилизованного консорциума. Показано, что эффективная.

111 детоксикация стока достигается при концентрации ксенобиотика не более 2 г/л и скорости разбавления 0,05 — 0,06 ч" 1.

7. Установлено, что микроорганизмы консорциума способны расти и деградировать ЭПХГ даже в условиях высоких концентраций хлористого натрия (60 г/л) в присутствии глицерина (5,0 г/л), толуола (0,1 г/л) и дифе-нилолпропана (0,05 г/л).

8. Показана возможность использования иммобилизованного консорциума для локальной очистки сточных вод производства эпоксидных смол, содержащих до 4 г/л ЭПХГ.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Промышленные хлорорганические продукты. Справочник / под ред. Ошина JI.A. М: Химия — 1978. — 654 с.
  2. Goldman, P., G.W.A. Milne, and D.B. Keister. Carbon-halogen bond cleav age. III. Studies on bacterial halidohydrolases. // J. Biol. Chem. -1968.-v.243 -p.428−434.
  3. Ehrenberg L., and S. Hussain. Genetic toxicity of some important epoxides //. Mutat. Res. 1981. — v. 86, № 1 — p. 113.
  4. Wade, D.R., S.C. Airy, and J.E. Sinsheimer. Mutagenicity of aliphatic epoxides. // Mutat. Res. 1978. — v. 58. — p. 217−223.
  5. Neilson, A. H. The biodegradation of halogenated organic compounds // J. Appl. Bacteriol.- 1990. v.69 — p. 445−470.
  6. Chaudhry C.R. and Shapalamadugu. Biodegradation of halogenated organic compounds. // Microbiol. Rev. 1991. v.55 — p.59- 79.
  7. Hardman, D.J. Biotransformation of halogenated compounds. // Crit. Rev. Biotechnol. 1991. — v. 11 — p. 1 — 40.
  8. Leisinger T., and R. Bader. Microbial dehalogenation of synthetic organohalogen compounds: hydrolytic dehalogenases. // Chimia.- 1993. -v. 47 p.116−121.
  9. Van den Wijngaard, A. J. Prins, A. C. Smal, and D.B. Janssen. Degradation of 2-chloroethylvinylether by Ancylobacter aquaticus AD25 and AD27. // Appl. Environ. Microbiol. 1993. — v.59 — p.2777−2783.
  10. Janssen. D.B., J. Gerritse, J. Brackman, C. Kalk, D. Jager, and B. Witholt. Purification and characterization of a bacterial dehalogenase with activity toward halogenated alkanes, alcohols and ethers. // Eur. J. Biochem. -1988. v.171 -p.67−72.
  11. Fetzner S., F. Lingens. Bacterial dehalogenases? Biochemistry, Genetics and Biotechnological Application. // Microbiol. Rev. 1994. — v.58,4 p.641- 685.
  12. Hardman, D. J., and J. H. Slater. Dehalogenases in soil bacteria. // J. Gen. Microbiol. 1981. — v. 123 — p. 117−128.
  13. Nakamura T., F. Y.W. Mizunashi, and L. Watanabe. Microbial transformation of prochiral 1.3-dichloro-2-propanol into optically active 3-chloro-1.2-propanediol. // Agric. Biol. Chem.- 1991. v.55 — p.1931−1933.
  14. Assis H. M. S, Sallis P. J., Bull A. T., Hardman D. J. Biochemical characterization of a Haloalcohol dehalogenase from Arthrobacter erithii HlOa. // Enz. And Microbiol. Tech. 1998. — v.22. — p.568 — 574
  15. Suzuki, T., N. Kasai. R. Vamamoto. and N. Minamiura. Isolation of a bacterium assimilating ®-3-chloro-l, 2-propanediol and production of (S)-3-chloro-l, 2-propanediol using microbial resolution. // J. Ferment. Bioeng. -1992. v.73 — p. 443−448.
  16. Kasai, N., K. Tsujimura, K. Unoura, and T. Suzuki. Degradation of 2,3-dichloro-l-propanol by a Pseudomonas sp. // Agric. Biol. Chem-1990, — V.54 p.3185−3190.
  17. Faber K. Biotransformations in organic chemistry. / Textbook.-Springer-Verlag.- 1995.- 356 p,
  18. Bartnicki E.W. and Castro C.E. Biodegalogenation. The pathway for transhalogenation and the stereochemistry of epoxide formation from halogydrins // Biochemistry.- 1969, — v.8.- p.4677 4680.
  19. Assis H.M.S., Bull A.T., Hardman D.J. Synthesis of chiral epihalohydrins using haloalcohol dehalogenase A from Arthrobacter erithii H 10a // Enzyme and Microbial Technology.- 1998.- V. 22.- p. 545 551.
  20. Bull, A. T., Hardman, D. J, Sallis P.J. and Stubbs B.M. Dehalogenation of organohalogen containing compounds // U.S. patent P10504 SOL.-1992, April.
  21. Семина И.Г., C.B. Беляева Микробиологическая трансформация 1-хлоргидрина глицерина в соокислительных условиях
  22. Микробиол. 1997- т.66, № 5, — с.43- 48.
  23. Nakamura Т., Nagasava Т., Fujio Yu, Watanabe I., Yamada H. Purification and characterization of two epoxide hydrolases from Corynebacterium sp. strain TV-1074 // Appl. Environ. Microbiol. 1994. -p. 4630−4633.
  24. Jacobs, M. H. J., A. J. Van den Wijngaard, M. Pentenga, and D. B. Janssen. Characterization of the epoxide hydrolase from an epichlorohydrin-degrading Pseudomonas sp. // Eur. J. Biochem. -1991.-v. 202.-p.1217−1222
  25. Kasai, N. K. Process for preparation by ® -(-)-3-halogeno-l, 2-propanedioL by treatment with microorganisms //U.S. patent5246843.-1993, September.
  26. Japanese patent application 88/265,838. 20 October 1988./ European patent application EP 365.029 25 April 1990, — / Nakajima, H., M. Onda, R. Tsurutani, and K. Motosugi. Optically active B-halolactic acid or glicidic acid.
  27. Small F. J., Tilley J.K., Ensign S. A. Characterization of a new pathway for epichlorohydrin degradation by whole cells of Xanthobacter strain Py2 //Appl. and Environ. Microbiol.- 1995, — 61,№ 4,-P. 1507 -1513
  28. Meyer, D. J., B. Coles, S. E. Pemble, K. S. Gilmore, G. M. Eraser, and B. Ketterer. Theta, a new class of glutathione transferases purified from rat and man.//Biochem. J- 1991.-v.274- p.409−414.
  29. Kasai N., Suzuki Т., Furukawa Y. Chiral C3 epoxides and halohydrins: Theie preparation and synthetic application // J. Mol. Cat. B: Enzymatic.- 1998, — V- 4, № 5−6.- P. 237 252
  30. Hartmans. S., J. P. Smits, M. J, van der Werf, F. Volkering, and J. A. M. de Bont. Metabolism of styrene oxide and 2-phenylethanol in the styrene-degrading Xanthobacter strain 124X // Appl. Environ. Microbiol-1989 v.55. — p. 2850−2855
  31. Haan Ardre de, Smith Mark, Voorhorst Wilfried GB, de Bont Jan A M Cofactor regeneration in the production of 1,2-epoxypropane by Mycobacterium strain E3: The role of storage material // J. Gen.-Microbiol -1993, — v.139, № 12 p.3017−30 224
  32. B.JI., Серебрянный B.A. Методы получения оптически активных промежуточных продуктов для синтеза простагландинов // Хим.-фарм. журн, — 1994.- № 6.- С. 36 59
  33. Cimetiere B., Jacob L. and Julia M. Resolution of oxiranes. Application to the synthesis of the platellet aggregation factor // Tetrahedron Lett.-1986, — V. 27, — P. 6329.
  34. Golding B.T. Synthesis and reactions of chiral C3-units // Chemistry and industry.- 1988.- № 3.- P. 615- 621
  35. Koden M., Kuratate F., Funada K., Awane K., Sakaguchi K., Shiomi Y. and Kitamura K. Ferroelectric liquid crystals incorporating the optically active S-lactone ring // Jpn. J. Applied Physics.- 1989.- V. 29, — P. 981 983
  36. Koden M., Kuratate F., Funada K., Awane K., Sakaguchi K., Shiomi Y. and Kitamura K. Ferroelectric liquid crystals incorporating the optically active 5-lactone ring // Jpn. J. Applied Physics.- 1989, — V. 29, — P. 981 983
  37. Takano S., Yanase M., Takahashi M. and Ogasawara K. Enantiodivergent synthesis of both enantiomers of sulcatol and matsutake alcohol from ®-epichlorohydrin // Chem. Lett.-1987.p. 2017−2020.
  38. Kitamura, M., Ohkuma, T., Takaya, H., and Noyori, N. A practical asymmetric synthesis of carnitine. // Tetrahedr. Lett. -1988 .- v.29 -p.1555−1556
  39. Shimizu S./Yfttori S., Hata H., Yamada H. A novel fungal ensyme, NADPH-dependent carbonyl reductase, showing high specificity to conjugated polyketones .'purification and characterization // Eur.
  40. J. Biochem. -1988.- V. 174.-P.37−44
  41. Kawamura K., Ohta T. and Otani G. An efficient synthesis of the optical isomers of nipradiol // Chem. Pharm. Bull.- 1990.- V. 38.- P. 2092 2096.
  42. Mc Clure D.E., Engelholdt E.L., Mensler K., King S., Saari W.S., Huff J.R. and Baldwin J.J. Chiral Heteroaryloxymethyloxiranes // J. Org. Chem.- 1979, — V. 44, — P. 1826 1831
  43. Takano S., Yanase M., Sekiguchi Y. and Ogasawara K. Practical synthesis of a-amino-(3-hydroxybutanoic acid (GABOB) from ®-epichlorohydrin // Tetrahedron. Lett.- 1987, — V. 28, — P. 1783 1784
  44. Weijers C.A.G.M., de Bont J.A.M. Epoxide hydrolases from yeasts and other sources: versatile tools in biocatalysis // J. Mol. Cat. B: Enzymatic.- 1999, — V.6, № 3. p. 199 214
  45. Kagegama, Y., Nihira, T., and Yamada, Y. Lipase-catalyzed synthesis of macrocyclic lactones in organic solvents.// Ann. N. Y. Acad. Sci.1990 v.613 p.681−685
  46. Baldwin J.J. et al. Synthesis of ®-and-(S)-epichlorohydrin // J. Org. Chem.- 1978, — V.43, № 25, — P. 4876 4878.
  47. Nakamura. Т., F. Yu, W. Mizunashi, and I. Watanabe. Production of ®-3-chloro-l, 2-propanediol from prochiral l, 3-dichloro-2-propanol by Corynebacterium sp. strain N-1074. // Appl. Environ. Microbiol.-1993,-v. 59-p.227−230.
  48. Kasai, N., K. Tsujimura, K. Unoura, and T. Suzuki. Preparation of (, S)-2,3-dichloro-l-propanol by Pseudomonas sp. and its use in the synthesis of (S)-epiclorohydrin. //J. Ind. Microbiol-1992.- v. 9 p.97−101
  49. Nakamura. T., T. Nagasawa, F. Yu, I. Watanabe, and H. Yamada. A new catalytic function of halohydrin hydrogen-halide-lyase, synthesis of p-hydroxynitriles from epoxides and cyanide. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1991-V.180 — p. 124 -130
  50. Archelas A., Furstoss R. Epoxide hydrolases: new tools for the synthesis of fine organic chemicals // Trends in Biotechnology.-1998.- V. 16, № 3.. p. 108 116.
  51. Whitesides, G. M. and Wong, C.-H. Enzymes as catalysts in synthetic organic chemistry. // Angew. Chem. Int. Ed. Engl.- 1985- 24. -617−638
  52. Yamada, H. and Shimizu, S. Microbial and enzymatic processes for the production of biologically and chemically useful compounds.// Angew. Chem. Int. Ed. Engl. -1988 v.27 -p. 622 — 642.
  53. Best D.J., Floyd N.C., Magalhaes A., Burfield A. and Rhodes P.M. Initial enzymatic steps in the degradetion of a-pinene by Pseudomonas fluorescens NCIMB 11 671. //Biocatalysis. 1987.- v. 1, — 147−159.
  54. Warhurst A.M., Fewcon C.A. Microbial metabolism and biotransformation of styrene. // J. Appi. Bacteriol.- 1994.-v. 77.-p.597−606.
  55. Hartmans S., Microbial degradetion of styrene. In: Biotransformations: Microbial degradetion of health risk compaunds (Singh., V.P. ed.)./ Amsterdam, Elsevier science B.V.- 1995. p.227−238.
  56. Griffiths E.T., Harries P.C., Jeffcoat R., Trudgill P.W. Purifications and proptties of a-pinene oxide lyase from Nocardia sp. strain PI8.3.// J. Bacteriol. -1987 v. 169, — p. 4980−4983.
  57. Weijers C. de Haan A., de Bont J. Chiral resolution of 2,3-epoxyalcanes by Xanthobacter Py 2 II Appl. Microbiol. Biotechnol.-1988.-V.27.-p. 337−340.
  58. Shirai K., Hitsasuka K. Production of 8-phenetyl alcohol from styrene by Pseudomonas 305-STR-1−4 // Agric. Biol. Chem.- 1979.- v. 43, p.1399−1406.
  59. Mischits M., Faber К., Willetts A. Isolation of highly enantioselective epoxide hydrolase from Rhodococcus sp. NCIMB 11 216// Biotechnol. Lett.- 1995. 17, № 9. — p. 893 — 898.
  60. De Bont, J. A. M., J. P. Van Dijken, and C. G. Van Ginkel. The metabolism of 1,2-propanediol by the propylene oxide utilizing bacterium Nocardia A60 // Biochim. Biophys. Acta .- 1982. v.714 .p. 465−470.
  61. Nakamura T., Yu F., Watanabe I. and Yamada H. Purification and characterization of two epoxide hydrolases from Corynebacterium sp. strain N-1074 II Appl. and Environ. Microbiol.- 1994.- V. 60.- P. 4630−4633.
  62. Barbirato F., Verdoes J.C., J.A. de Bont, M.J. Van der Werf The Rhodococcus erythropolis DCL 14 limonene-l, 2-epoxide hydrolase //
  63. Furuhashi Keizo, Takagi Motoyoshi. Process for the preparation of epoxides by means of microorganisms: Пат. 5 376 539 США, МКИ5 C12P 17, C12P 13/00 Заявл.02.10.92, Опубл. 27.12.94.
  64. Little, M., and P. A. Williams. A bacterial halidohydrolase: its purification, some properties and its modification by specific aminoacid reagents. // Eur. J. Biochem 1971. — v.21 — p.99−109
  65. , J. В., Jacques, P., Bare, G., Dewulf, O., and Thonart, P. Bioconversion of 1 carnitine precursors by yeast.// Medet. Fac. Landbowwet. Rijuksuniv. Gent-. 1989,-v. 54,-p. 1287−1300.
  66. Weijers Botes AL, Van Dyk and A.M. de Bont Enatioselective hydrolysis of unbranched aliphatic 1,2-epoxides by Rhodotorula glutinis // Tetrahedron: Assym. 1998. — v.9. — P. 467−473.
  67. Л.И. очистка сточных вод от перхлорэтилена // Хим. пром. 1976. — № 10. — с.745−746.
  68. М. И., Евстратов В. Н., Семенов В. Д. Очистка сточных вод предприятий хлорной промышленности. M: Химия. — 1978. — 192с.
  69. Но Б. И., Ущенко В. П., Рухаков Г. Г. и др. Очистка сточных вод и газовых выбросов от дихлорэтана // Хим. пром. 1977. — № 4. -с.314−317.
  70. А. И., Душкин С. С., Магнитная обработка промстоков хлорорганического производства / Известия ВУЗов. Химия и хим. технол. 1972, — т. 15, № 2. — с.273 — 275.
  71. Ю. Н. Основы селекции микроорганизмов, утилизирующих синтетические органические соединения— М.: Наука, 1982— 142 с
  72. Н.Ф. Микробная деструкция галогенсодержащих органических соединений // Хим. и технол. воды. 1982. — т.4, № 3.-с.264 -273.
  73. Wilson В.H. Biorestoration of aquifers contaminated with organic compounds. // Crit. Rev. Environ. Control .-1988. -v. 18- p.29−89.
  74. Vogel, T. M., C. S. Criddle, and P. L. McCarty. Transformations of halogenated aliphatic compounds. // Environ. Sci. Technol.- 1987.- v. 21-p.722 736.
  75. В.О., Безбородов A.M. Опыт создания промышленной технологии микробиологической очистки газо-воздушных выбросов. // Прикл. биох. и микробиол. 1999.- т.35, № 5, — с.570−577.
  76. Goldstein, R. M., L. M. Mallory, and M. Alexander. Reasons forpossible failure of inoculation to enhance biodegradation. // Appl. Environ. Microbiol. -1985.-v.50-p.977−983
  77. H.C. Популяционная микробиология, — Новосибирск. -1978 г.- с. 36−37.
  78. Neidleman, S. L., and J. Geigert. Biohalogenation: principles, basicroles and applications- Ellis Horwood Ltd., Chichester, United Kingdom.- 1986.-p. 156−171.
  79. , D. В., R. Oldenhuis, and A. J. van den Wijngaard. Hydrolytic and oxidative degradation of chlorinated aliphatic compounds by aerobic microorganisms. // Adv. Appl. Biotechnol. Ser. Biotechnol. Biodegrad. -1990 -v.4- p. 105−125.
  80. Ramachandra M., D.L.Grawford, G. Hertel Caracterization of an extracellular lignin peroxidase of the lignocellulolitic actinomycete Streptomyces viridosporus // Appl. Envirn. Microbiol.-1988.- v.54 .-p.3057−3063.
  81. Hardman. D. J., and J. H. Slater. The dehalogenase complement of a soil pseudomonad grown in closed and open cultures on haloalkanoic acids.//J. Gen. Microbiol. 1981. — v. 127- p.399 — 405.
  82. Galli R. Biodegradation of dichloromethane in waste water using a fluidized bed bioreaktor.// Appl. Microbiol. Biotechnol.- 1987.v. 27, N2.-p.206−213.
  83. Zaidi, B. R., Y. Murakami, and M. Alexander. Factors limiting success of inoculation to enhance biodegradation of low concentrations of organic chemicals. // Environ. Sci. Technol. -1988. -v.22- p.1419−1425.
  84. И. А. Кривец, Т. Ю. Григорьева, А. Г. Севрук, С. С. Ставская. Получение активной биомассы Pseudomonas rathonii Т -деструктора анионных поверхностно-активных веществ // Химия и технол. воды. -1990- т. 12.- с. 78 80.
  85. Portier R. Bioreaktor to treat volatieles in ground water //
  86. Bioprocess. Technol.-1990.- 12 N 4, — p 491−503.
  87. H.B., В.А. Ежов, Ю. А. Троценко Аэробная биодеградация формальдегида, метанола и метиламина иммобилизированными клетками Methilobacterium extroguens II Прикл. биохим. и микробиол, — 1997.-т.ЗЗ N2.-с.162−165.
  88. G.A.Hill, M.E.Tomusiak, B. Qual, К.М. van Cleave Bioreaktor design effects on biodegradation capabilities of VOCs in waste water // Environ.Progr.-l991 .-v. 10 N2.-p. 147−153.
  89. , M. J. К., P. H. Pritchard, and A. W. Bourquin. Preliminary development of a bench-scale treatment system for aerobic degradation of trichloroethylene./ In G. S. Omenn. Environmental biotechnology.-Plenum Press, New York.- 1988, — p. 203−209.
  90. Экологическая роль микробных метаболитов /под ред. Д. Г. Звягинцева М: изд-BoMfY, 1986.-е. 166−178.
  91. Г. А., Кузнецова Е. В., Ленская В. А. Углеродминеральные носители для адсорбционной иммобилизации нерастущих бактериальных клеток // Хим. и технол. воды, — 1996,-т. 18, N 2,-с. 193 195.
  92. Г. Н. Адгезионная иммобилизация микроорганизмов в очистке воды //Химия и технология воды. 1989.- т. 11, № 2, с.158−169
  93. М.В., Л.И. Глоба Влияние природы на эффективность очистки // Химия и техн. воды, — 1995.- т. 17, N 4, — с.438 443
  94. Л.П., И.В. Науменко, В. Г. Перевозный Применение плоскостной насадки для кнтесификации биологической очистки сточных вод // Химия и технол. воды 1990. т. 12, № 3. — с.272−275.
  95. П. И., Т. П. Чеховская, В. У. Никоненко, В. И. Рыбникова, M. Н. Закиева, К. С. Адамова. Биологическая очистка от фенола попутных вод газоконденсатных скважин Дмитровского месторождения // Химия и технол. воды 1990.-Т. 12.-С.43−48.
  96. П. И., Чеховская Т. П., Никоненко В. У. Микробное разрушение анилина // Химия и технол. воды.— 1985— т.7,2,—С. 84—87
  97. П. И., Дмитренко Г. Н., Куликов Н. И Очистка промышленных сточных вод прикрепленными микроорганизмами // Химия и технол. воды.— 1985—т. 7, № 1.—С. 64—68.
  98. C.B., И.Н. Сингирцев, А. Ю. Федоров В.Н. Перспективы применения синтетического «Нитрон» как носителя при микробной очистке сточных вод // Химия и технол. воды.- 1996, — т. 18, № 2.1. С.216−220.
  99. Friday D.D., R.J. Portier. Development of an immobilized microb bioreaktor for VOC applications // Environm. Progn.-1991.- V.10, № 1.- p. 30−39.
  100. П.И., Н.Ф. Мочалевич, H.H. Куликов и др. Очистка фенилсодержащих сточных вод закрепленными микроорганизмами // Химия и технол. воды 1989.- т. 11, № 1, — с. 73 — 75.
  101. С.С., Шамолина H.H., Никовская Г. Н. и др. Иммобилизация бактерий деструкторов на искусственных волокнах для очистки сточных вод от анионных ПАВ // Химия и технол. воды — 1991, — т. 13, № 6.- с. 548−554.
  102. Г. И., М.М. Земляк, JI.B. Григорьева и др. Очистка и доочистка бытовых сточных вод иммобилизированными микроорганизмами // Хим. и техн. воды.-1996, — т. 18, № 2.- с. 187−192.
  103. Контроль качества воды.- М.: Стройиздат.-1986.- 159 с.
  104. И.И. Биохимический метод очистки производственных сточных вод // М.: Стройиздат.-1967.- 138 с.
  105. А.П., А.З. Асадуллин, И. Г. Пеньковцева и др.// Химия и технол. воды 1987.- т. 9, № 3.- с. 263−265.
  106. Г. П., Тряхова Т.И, Г. Н. Светлакова, Л. И. Розанова Биотестирование промышленных сточных вод производства резины // Химия и техн. воды, 1987 т.9, № 3 — с. 182−184
  107. Вредные вещества в промышленности т. 1, 2. Органические вещества. -ЛенинградгХимия.- 1976.- 1 т.- 591 с, 2 т. 623 с.
  108. А.Е., Шабаров Ю. С. Лабораторные работы в органическом практикуме. Изд. 2-е. -М.: Химия 1974, — с.138−140.
  109. Методы элементоорганической химии. Хлоралифатические соединения.- М.: Наука.- 1973.- т.2 462 с.
  110. Методы получения химических реактивов и препаратов. М.: НИИТЭХИМ. -1970, №. 21.-C.36−37 .
  111. Определитель бактерий Берджи / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уилльямса. М.: Мир — 1997. -Т1 -430 с., Т2 — 800
  112. Методы общей бактериологии / под ред. Ф. Герхардта М.: Мир. — 1984, — Т.1 — с. 54−57, Т. З — с. 263.
  113. Практикум по микробиологии. / под ред. Н. С. Егорова. М.:
  114. Изд-во МГУ. 1976. — 306 с.
  115. С.И., Дубинина Г. А. Методы изучения водных микроорганизмов. М.: Наука. — 1989. — с. 287.
  116. О.А., Ногина Т.М, Квасников Е. Н. Хемотаксонометрические признаки некоторых коринеподобных бактерий и групп «Rhodochrous» // Микробиол. 1978. — т. 47, № 6 — с.1055−1062.
  117. О.А., Квасников Е. Н., Ногина Т. М. Нокардиоподобные и коринеподобные бактерии. Киев: Наука думка. 1980.-217 с.
  118. И.Б. Ившина, М. В. Бердичевская, JI.B. Зверева, JI.B. Рыбалка, Е. А. Еловикова Фенотипическая характеристика алканотрофных родококков из различных экосистем. // Микробиология. 1995. -т.64, № 4. — с. 507−513.
  119. E.JI. Физиология и биохимия представителей рода Pseudomonas. М.: Наука — 1984. — 200 с.
  120. В.В., Киприанова Е. А. Бактерии рода Pseudomonas. -Киев: Наукова думка. 1990. — 263 с.
  121. Lechevalier М.Р. Identification of aerobic actinomycetes of clinical importace // J. Lab. Clin. Med. 1968. — v/74. — p.934−944.
  122. Becker B.M.P., Lechevalier R. N/, Gordon H.A., Lechevalier M.P. Rapid differentation betven Nocardia and Streptomyces by paper chromatography of whole-cell hydrolisates // Appl. Microbiol. -1964. -v.12,5. -p.421−423.
  123. Практикум по биохимии / под ред. C.E. Северина, Г. А. Соловьева. М.: изд-во МГУ. — 1989. — с.93−96.
  124. Р. Методы очистки белков. М: Мир. — 1985. — с.358.
  125. Г. А. Практическое руководство по энзимологии-М:Высш. школа. 1980. — с. 271.
  126. Bradford М.М. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Anal. Biochem 1976. — v.12. — p.248−254
  127. Bergman J. G., Sanik J. Determination of frace amount of chlorine in naptha // Anal.Chem.-1957. v.29. — p.241−243
  128. Методы общей бактериологии / под ред. Ф. Герхардта М.: Мир, — 1984, — Т.2-с. 24−25.
  129. Mori К. Synthesis of optically active pheromones // Tetrahedron. -1989.- V. 45, № 11, — P. 3233 3298.
  130. Ю.Ю. Аналитическая химия промышленных сточных вод.-М: Химия -1984. 447 с.
  131. Методика определения глицерина в сточной воде производства эпоксидиановых смол / Сб. метод, определения орган, соединений, — М: ГосНИИхлорпроект, — 1974, — 26−28 с.123
  132. Регламент производства эпоксидиановых смол.-М: ГОСНИИхлорпроект. 1972. — 157 с.
  133. А.И. Обзор копмлексных оценок токсичности сточных вод методом биотестирования // Комплексная оценка качества поверхностных вод.- М: Гидрометеоиздат.-1984. с.61−65
  134. Л.И. ГТропионовокислые бактерии.- М.:Изд-во МГУ, — 1995.-286 с.
  135. Straus U.T., Felfer U., Faber K. Biocatalytic transformation of racematic into chiral building blocks in 100% chemical yield and 100% enantiomeric excess // Tetrahedron Assym. 1999.- v. 10. — 107−117.
  136. Уфимский НИИ медицины труда и экологии человека Лаборатория микробиологии1. ПРОТОКОЛ № 2исследования патогенности культуры микроорганизма
  137. Наименование культуры микроорганизма Nocardioides simplex 50−5
  138. В результате выполненных исследований установлено, что исследуемая культура Nocardioides simplex 50−5 авирулентна для млекопитающих, не проявляет инфекционность, инвазивность, токсигенность. л
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?