Стандартизация и контроль качества лекарственных средств группы фторхинолонов методами хроматографии и ИК-спектроскопии

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

.

В настоящее время лекарственные средства группы фторхиноло-нов находят все более широкое применение в медицинской практике. Обладая широким антибактериальным спектром и высокой биодоступностью при пероральном введении, они рассматриваются как серьезная альтернатива высокоактивным парентеральным антибиотикам широкого спектра действия [51, 52].

В то же время недостаточно изучен анализ данных лекарственных средств химическими и физико-химическими методами, в том числе методами ИК-спектроскопии, высокоэффективной жидкостной и тонкослойной хроматографии. В современном фармакопейном анализе данные методы находят широкое применение для установления подлинности и количественного определения субстанций и лекарственных препаратов [117, 145, 220, 222, 226]. Однако не все фторхинолоны описаны в отечественных фармакопейных статьях и зарубежных фармакопеях, а методики анализа фармакопейных фторхинолонов не являются унифицированными. Особенно это относится к фторхинолонам III и IV поколений, зарегистрированным в РФ (левофлоксацин, спарфлоксацин и моксиф-локсацина гидрохлорид).

Другой важной проблемой является фальсификация лекарственных средств. Широкая распространенность фальсифицированных про-тивомикробных лекарственных средств (по данным ВОЗ — до 30% от общего числа фальсифицированных препаратов) делает актуальной разработку методик анализа, позволяющих выявлять фальсифицированные лекарственные препараты фторхинолонов [129−133].

В связи с этим является актуальной разработка унифицированных подходов к стандартизации и контролю качества данных лекарственных средств и их лекарственных препаратов с использованием методов ИКспектроскопии, ТСХ и ВЭЖХ (левофлоксацин, спарфлоксацин, моксиф-локсацина гидрохлорид).

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

.

Целью данной работы являлась разработка унифицированных подходов к стандартизации и контролю качества лекарственных средств группы фторхинолонов с использованием методов ИК-спектроскопии, ТСХ и ВЭЖХ (левофлоксацин, спарфлоксацин, моксифлоксацина гидрохлорид).

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

— изучение фторхинолонов методом ИКспектроскопии;

— составление атласа ИК-спектров субстанций и препаратов (таблеток) фторхинолонов;

— изучение хроматографических характеристик и разработка унифицированных методик установления подлинности фторхинолонов методом ТСХ;

— изучение хроматографических характеристик и разработка методик установления подлинности и количественного определения лево-флоксацина, спарфлоксацина и моксифлоксацина гидрохлорида методом ВЭЖХ;

— разработка комплексного аналитического подхода к выявлению фальсифицированных лекарственных средств группы фторхинолонов, не содержащих действующие вещества, указанные на этикетке.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ.

Составлен атлас ИК-спектров субстанций и лекарственных препаратов фторхинолонов различных производителей, осуществлена интерпретация ИК-спектров. Впервые разработаны методики установления подлинности фторхинолонов в лекарственной форме «таблетки» методом ИК-спектроскопии.

Разработаны методики пробоподготовки субстанций и лекарственных препаратов фторхинолонов для анализа методами ТСХ и ВЭЖХ (левофлоксацин, спарфлоксацин, моксифлоксацина гидрохлорид). Изучено влияние подвижных фаз различного состава на хроматографиче-ские характеристики фторхинолонов при их анализе данными методами.

Впервые разработаны унифицированные методики установления подлинности фторхинолонов методом ТСХ, а также методики установления подлинности и количественного определения левофлоксацина, спарфлоксацина и моксифлоксацина гидрохлорида методом ВЭЖХ.

Впервые разработан комплексный подход к выявлению фальсифицированных лекарственных средств группы фторхинолонов, не содержащих действующие вещества, указанные на этикетке, с использованием методов ИК-спектроскопии, ТСХ и качественных реакций.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Полученные ИК-спектры могут быть использованы при стандартизации и контроле качества по разделу «подлинность» соответствующей НД на субстанции и лекарственные препараты фторхинолонов.

Методики установления подлинности и количественного определения левофлоксацина, спарфлоксацина и моксифлоксацина гидрохлорида методом ВЭЖХ, методики установления подлинности фторхинолонов методом ТСХ предлагаются для стандартизации и контроля качества субстанций и лекарственных препаратов данной группы лекарственных средств с последующим их включением в соответствующие разделы НД.

Методики установления подлинности субстанций и препаратов фторхинолонов методами ИК-спектроскопии и ТСХ включены в издание «Экспресс-анализ с целью выявления фальсифицированных лекарственных средств. Практическое руководство. Фторхинолоны и цефалоспорины» [92]. Данное руководство входит в состав тестового набора «Сорбполимер-Минилаб» (ЗАО «Сорбполимер», г. Краснодар). АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

Результаты проведенных исследований доложены на следующих конференциях и совещаниях.

IX Российский национальный конгресс «Человек и лекарство», 8−12 апреля 2002 г., Москвашкола по стандартизации и контролю качества лекарственных средств.

62-й Конгресс Международной фармацевтической федерации, Франция, Ницца, 31 августа — 5 сентября 2002 г. (стендовый доклад).

X Российский национальный конгресс «Человек и лекарство», 7−11 апреля 2003 г., Москвароссийско-американский симпозиум «Стандартизация и контроль качества лекарственных средств».

Межрегиональная научно-методическая конференция Фармобра-зование — 2003, Воронеж, 21−23 апреля 2003 г.

Семинар по контролю качества лекарственных средств (Министерство здравоохранения РУз, Главное управление Комитета по контролю качества лекарственных средств и медицинской техники, Корпорация Никомед), Республика Узбекистан, Ташкент, 26−28 апреля 2004 г.

Апробация работы проведена на межлабораторной конференции кафедры фармацевтической химии фармацевтического факультета ММА им. И. М. Сеченова 09 декабря 2005 г.

1. Проведено отнесение основных характеристических полос в ИК спектрах фторхинолонов. Полученные ИК-спектры субстанций фтор хинолонов предлагаются для использования в качестве стандартных при анализе по разделу нормативной документации «подлинность».2. Разработана унифицированная методика анализа таблеток фторхи нолонов методом ИК-спектроскопии и составлен атлас соответст вующих ИК-спектров, которые предлагаются для выявления фальси фикатов, не содержащих указанное на упаковке действующее веще ство.3. Разработан унифицированный состав подвижной фазы (метанол — 25% раствор аммиака — этилацетат — ацетонитрил 1:1:2:1) и методики ана лиза субстанций и препаратов фторхинолонов методом ТСХ, которые предлагаются для выявления фальсификатов, не содержащих указан ные на упаковке лекарственные вещества, и для включения в раздел НД «подлинность» для субстанций и лекарственных препаратов фтор хинолонов.4. Установлено, что при анализе левофлоксацина, спарфлоксацина и моксифлоксацина гидрохлорида методом обращенно-фазовой ВЭЖХ использование буферных растворов в составе подвижной фазы и до бавление ион-парных реагентов существенно повышают эффектив ность колонки и симметричность пиков анализируемых соединений. Оптимальные значения параметров хроматографических пиков дан ных веществ наблюдаются в подвижной фазе, содержащей в качестве водного компонента фосфатный буфер с рН 2,5 с добавлением тетра бутиламмония в концентрации 1 ммоль/л (для левофлоксацина) и 3 ммоль/л (для спарфлоксацина и моксифлоксацина гидрохлорида).Оптимальное соотношение ацетонитрил — водный компонент состав ляет 10:90 (для левофлоксацина) и 15:85 (для спарфлоксацина и мок сифлоксацина гидрохлорида).5. Разработанные методики ВЭЖХ предлагаются для стандартизации и контроля качества субстанций левофлоксацина, спарфлоксацина, моксифлоксацина гидрохлорида и их препаратов по разделам «под линность» и «количественное определение». Относительная погреш ность количественного определения моксифлоксацина гидрохлорида составила 1,42%, спарфлоксацина- 1,52%.6. Разработан комплексный подход к выявлению фальсифицированных лекарственных средств группы фторхинолонов, не содержащих дей ствующие вещества, указанные на этикетке. Для обнаружения таких подделок следует использовать простые качественные реакции, ТСХ и ИК-спектроскопию в средней области.