Митохондриальной АТФ-чувствительный калиевый канал и его роль в адаптации организма к гипоксии
Диссертация
Полученный результат вызвал необходимость дополнительного исследования принадлежности исследуемого белка-канала к семейству митохондриальных белков. Для этого на 55 кДа белок, выделенный из митохондрий печени крысы и формирующий при встраивании в искусственные мембраны АТФ-чувствительный калиевый канал, были получены специфические поликлональные антитела. Вестерн-блот анализ с полученными… Читать ещё >
Содержание
- Введение 6 Обзор литературы
- 1. Системы транспорта калия в MX
- 1. 1. Транспорт калия в MX
- 1. 2. Молекулярные структуры, ответственные за транспорт калия в MX
- 1. 3. Физиологическое значение транспорта калия в MX
- 2. АТФ-ингибируемые калий-транснортирующие каналы
- 2. 1. АТФ-зависимый калиевый канал цитоплазматической мембраны
- 2. 1. 1. Структурная организации цитонлазматического
- 2. 1. АТФ-зависимый калиевый канал цитоплазматической мембраны
- 2. 1. 2. Биофизические свойства цитоплазматичсского калиевого канала
- 2. 1. 3. Модуляторы цитоплазматического калиевого канала
- 2. 1. 3. 1. Внутриклеточные нуклеотиды — регуляторы цитоКдтф канала
- 2. 1. 3. 2. Фармакологические регуляторы цитоКдтф канала
- 2. 1. 4. Функциональная роль цитоКдтф канала в клетке
- 2. 2. АТФ-чувствительный калиевый канал внутренней мембраны MX
- 2. 2. 1. Структурная организация митоКдтф канала
- 2. 2. 2. Биофизические свойства митоКдтф канала
- 2. 2. 3. Модуляторы митоКдтф канала
- 2. 2. 3. 1. Метаболические модуляторы митоКдтф канала
- 2. 2. 3. 2. Фармакологические модуляторы митоКдтф канала
- 2. 4. 1. Активация митоКдтф в развитии устойчивости организма к гипоксии
- 2. 4. 2. Механизмы защиты сердца при гипоксии, опосредованные активацией митоКдтф
- 2. 4. 3. Феномен прерывистой гипобарической тренировки
- 1. 1. Выделение MX печени крысы
- 1. 2. Выделение MX сердца крысы
- 6. 1. Получение и очистка антител к белку с молекулярной массой 55 кДа. 56 6.1.1. Подготовка белка с м.м. 55 кДа: выделение и очистка
- 6. 2. Иммунизация и анализ препарата антител. 56 6.2.1. Детекция специфических антител и определение титра
- 6. 2. 1. 1. Непрямой Дот-анализ
- 6. 2. 1. 2. Вестерн-Блот анализ
- 6. 3. Очистка антител к АТФ-зависимому белку с м.м. 55 кДа
- 6. 4. Ингибиторный анализ с использованием антител к белку с м.м. 55 кДа
- 8. 1. Хирургические процедуры и модели животных
- 8. 2. Схема эксперимента
- 8. 3. Анализ электрокардиограмм
- 8. 3. 1. Анализ ишемических нарушений
- 8. 3. 2. Анализ нарушений ритма
- 8. 4. Критерии отбора
- 8. 5. Статистический анализ
- 9. 1. Метод отбора высоко- и низкоустойчивых животных
- 9. 2. Адаптирование низкоустойчивых животных к недостатку кислорода методом прерывистой нормобаричсской гипоксии
- 1. 1. Изучение влияния активации митоКдтф канала уридиновыми нуклеотидами на повреждения миокарда при ишемии на модели экспериментального острого инфаркта миокарда
- 1. 1. 1. Влияние уридина и уридин-5'-монофосфата на ишемические изменения сердечной активности, при введении препаратов до и после создания экспериментального инфаркта
- 1. 1. 2. Антиишемическое действие уридина и уридин-5'-монофосфата
- 1. 1. 3. Антиаритмичсский эффект уридина и уридин-5'-монофосфата
- 1. 2. Параметры функционирования митоКдтф канала у крыс с различной резистентностью, а также у животных, адаптированных к гипоксии
- 1. 2. 1. Изучение параметров дыхания и окислительного фосфорилированин в MX печени и сердца крыс с различной резистентностью к гипоксии
- 1. 2. 2. Изучение параметров АТФ-зависимого транспорта К+ в MX печени сердца крыс с различной резистентностью к гипоксии
- 2. 1. Определение гомологии белка с м.м. 55 кДа методом
- 2. 2. Ингибиторный анализ активности митоКдтф канала с использованием антител, полученных на белок с м.м. 55 кДа
- 2. 2. 1. Определение степени чистоты белка, используемого для иммунизации
- 2. 2. 2. Иммунизация и определение титра полученных антител
- 2. 2. 3. Определение специфичности полученных антител
- 2. 2. 4. Выделение иммуноглобулинов G (IgG) из антисыворотки и проведение ингибиторного анализа
Список литературы
- Александров А.А., Берестовский Г. Н., Волкова С. П. Регуляция одиночного Ca/Na канала клетки в липидном бислое. // ДАН СССР. 1976, т. 227, с. 723−6.
- Александров А.А., Берестовский Г. Н., Волкова С. П. Регуляция одиночного потенциалзависимого Ca/Na канала клетки в липидном бислое. // Биофизика сложных систем и радиационных нарушений. М.: Наука. 1977, с.33−39.
- Антитела. Методы. Под ред. Китти. Изд-во «Мир», 1991, т. 1, с. 106−107.
- Берестовский Г. Н. и Александров А.А. О транспотной структуре и воротном механизме реконструированного кальциевого канала клеток харовых водорослей. // Биофизика. 1983, т. 28, с. 816−20.
- Бакеева Л.Е., Брустовецкий Н. Н. Межмитохондриальные септированные контакты в клетках печени суслика Citelius undulates при зимней спячке.// Биол.Мембр. 1993, 13(1): 36−43.
- Березовский В.А. Гипоксия. Киев. Наука думка, 1978,250 с.
- Гелетюк В.И., Казаченко В. Н. Дискретный характер проводимости канала в нейронах прудовика. // Биофизика. 1983, т.28, с.994−8.
- Гелетюк В.И., Казаченко В. Н. Кластерная организация ионных каналов. М.: Наука. 1990,223 с.
- Григорьев С. Диссертация кандидата биологических наук. 1999.
- Евтодиенко Ю.В., Кудзина Л. Ю., МедведевБ.И., Юрков И. С. Непосредственное участие фосфолипидов в трансмембранном переносе ионов калия. // Биол.Мембр. 1996,13(5): 529−536.
- Кудзина Л.Ю., Медведев Б. И., Поваляева Г. В., Фойгель А. Г., Евтодиенко Ю. В. Реконструкция К±транспортирующей системы митохондрий на искусственных фосфолипидных мембранах. // Биофизика. 1974, 19(5): 765 769.
- Лойда 3., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов, — М.: Мир, 1982.-270С.
- Лукьянова Л. Функционально-метаболические особенности животных с различной индивидуально резистентностью к гипоксии. // Проблемы гипоксии: молеулярные, физиологические и медицинские аспекты. 2004, с. 156−170.
- Лукьянова Л.Д., Дудченко A.M., Чернобаева Г. Н. и др. Прерывистая нормобарическая гипоксия. М., 1999, с. 139−153.
- Лукьянова Л.Д., Дудченко A.M., Чернобаева Г. Н. и др., Прерывистая нормобарическая гипоксия. М., 1999, с. 139−153.
- Лукьянова Л.Д., Коробков А. В. Физиологические и клинические проблемы адаптации к гипоксии, гиподинамии, гипотермии. Под ред. А. В. Коробкова -М. Медицина, 1981, т.2, с. 73−76.
- Лукьянова Л.Д., Коробков А. В. Физиологические и клинические проблемы адаптации к гипоксии, гиподинамии, гипотермии. Под ред. А. В. Коробкова -М. Медицина, 1981, т.2, с. 73−76.
- Маршанский А.А., Новгородов С. А., Ягужинский Л. С. Влияние специфических ингибиторов дыхательной цепи и АТФ-синтетазы на транспорт в митохондриях. // Биофизика. 1983,28(5): 830−834.
- Маршанский А.А., Ягужинский Л. С. Влияние субстратов АТФ-синтетазы на индукцию процесса перекисного окисления липидов в митохондриях. // Биол.Мембр. 1985,2(11): 1081−1086.
- Миронова Г. Д. Катион-транспортирующие белки митохондриальной и цитоплазматической мембран. Диссертация доктора биологических наук. 1985,270с.21.