Для обнаружения алкалоидов в растительном сырье чаще всего используют общие (осадочные) реакции и хроматографию. Кроме того, учитывают еще некоторые свойства алкалоидов: их растворимость в кислотах и выпадение в осадок после подщелачивания, щелочную реакцию спиртовых растворов оснований алкалоидов С целью идентификации алкалоидов проводят специфические (цветные) реакции, микрокристаллоскопические реакции и хроматографический, спектроскопический, люминесцентный анализы .
Методика проведения анализа. В сухом растительном материале присутствие алкалоидов обнаруживается следующей реакцией. Соскоб исследуемого сырья (или порошок) помещают на предметное стекло, прибавляют2—3 капли5% уксусной кислоты, накрывают покровным стеклом и слегка подогревают (не доводить до кипения). Через2—3 мин рядом кладут второе покровное стекло так, чтобы под него засосалась жидкость. После этого снимают первое покровное стекло вместе с порошком и наносят каплю реактива на алкалоиды реактивы Вагнера (рис.3), Драгендорфа (Рис4), который проникает под покровное стекло и вызывает осаждение алкалоидов. На границе соприкосновения жидкостей образуется помутнение.
Рис 3. С реактивом Вагнера
Рис 4. С реактивом Драгендорфа
Так как осадки нестабильны и способны дифундировать по поверхности предметного стекла, необходима экспрессность в проведении реакции. Для наибольшей наглядности проводят химические реакции из кислого извлечения При добавлении соответствующих реактивов в присутствии алкалоидов тотчас или через некоторое время образуется осадок. Обилие осадка зависит как от количественного содержания алкалоидов, так и от чувствительности их к реактиву. Реакции проводят с неочищенным извлечением. Обязательным условием является кислая среда (в щелочной — осадки не образуются или же образуются за счет разрушения реактивов). Реакции проводят с минимальным количеством реактива, капельно. Избыток реактива приводит к растворению осадка. Для проведения реакций, алкалоиды из ЛРС извлекают 1%CH3COOH (см.рис3), фильтруют. Проводят осадочные реакции в фильтрате (см. таб.1).
Таблица1.
|
Реактив. | Осадки. | Эффект реакции. | |
Драгендорфа (см. рис.4). | C большинством алкалоидов образуются оранжево-красные или кирпично-красные осадки. | | |
Вагнера (см. рис.3). | образуют бурые осадки. | | |
Р-р фосфорно-вольфрамовой кислоты (см. рис.5). | образует белые осадки. | | |
Р-р танина (см. рис.6). | беловатые или желтоватые аморфные осадки. | | |
Р-р пикриновой кислоты (см. рис.7). | желтые кристаллические осадки — пикраты. | | |
| |
|
Рис. 5 Р-р фосфорновольфрамовой кислоты
Рис. 6 Р-р танина
Рис. 7 Р-р пикриновой кислоты