Методика исследования. 
Влияние коменатов на функциональное состояние ЦНС в условиях гипоксии с гиперкапнией у крыс

В работе использована калиевая соль коменовой кислоты, синтезированная в отделе биологически активных веществ им. профессора А. Я. Шурыгина ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный университет». Коменат калия представляет собой кристаллический порошок желтого цвета, растворим в воде и спирте, молекулярная масса — 194,18.

Исследования проводились на крысах, самцах (n=53) массой 200−250 г. в возрасте 3 мес. линии «Вистар». Крысы являются удобной моделью для изучения влияния стресса, вызванного гипоксией, поскольку именно для них разработано большое количество поведенческих и обучающих методик. В период проведения опытов животные содержались в стационарных условиях специализированного вивария при естественном световом режиме и свободном доступе к воде и пище (Приказ Минздравсоцразвития РФ от 23.08.2010 N 708н «Об утверждении правил лабораторной практики»). Эксперименты проводились с 9.00 до 13.00 в осенне-зимний период. Коменат калия вводили животным натощак, внутрижелудочно через зонд ежедневно в течение 3 дней, в дозе 4 мг/кг до начала экспериментальных манипуляций. Доза комената калия — 4 мг/кг установлена как наиболее фармакологически активная в ранее проведенных исследованиях его антиокислительной эффективности в головном мозге стрессированных животных. Контрольные животные получали воду очищенную в эквивалентном объёме. Влияние соединения оценивали в условиях нормоксии (без воздействия гипоксии) через сутки и 14 суток после гипоксического воздействия. Острую гипоксию с гиперкапнией моделировали у крыс, помещая их в герметичные сосуды, емкостью 1 л. Животные находились в таких условиях до появления первого агонального вздоха. После этого крыс извлекали и помещали в стандартные клетки.

Индивидуальное поведение животных изучали в двух тестах:

• — «открытое поле» (установка площадью 1 м², расчерченная на 100 квадратов, позволяла оценивать исследовательское поведение животных в условиях стресса, вызванного ярким освещением (лампа 200 ватт) и открытым пространством). (Исследования общей двигательной активности, эмоциональности)
• — «приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ), представляет собой установку, имеющую два рукава, в месте пересечения которых находилась открытая площадка. Один из рукавов лабиринта имеет закрытые отсеки. Лабиринт устанавливали на высоте одного метра от пола. (Определяет уровень тревожности.) (Хабриев Р.У. 2005; Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д. П. 1991 г.)

Все животные были разделены на 4 группы в соответствии с поставленной задачей: в 1 группу (контроль-интактный) вошли крысы, получавшие в процессе эксперимента воду очищенную и не подвергавшиеся «баночной гипоксии»; во 2 группу (контроль-коменат) — животные, получавшие водный раствор комената калия; 3 группа (контроль-гипоксия) — животные, получавшие воду и подвергшиеся воздействию «баночной» гипоксии с гиперкапнией; 4 группа (гипоксия-коменат) — животные, получавшие водный раствор комената калия и подвергшиеся «баночной» гипоксии с гиперкапнией.

Оценку изменений поведенческих реакций осуществляли через сутки и 14 суток после гипоксии.

Наблюдение за животными в «открытом поле» проводили в течение четырёх минут, учитывая число вертикальных стоек (вертикальная двигательная активность) и число пересечённых квадратов (горизонтальная двигательная активность) Наблюдение за животными в «приподнятом крестообразном лабиринте» проводили в течении 5 мин, учитывая число ориентировочных реакций (вертикальная двигательная активность), число подходов к дистальному краю открытых рукавов, время в центре и свешивания.

Статистическую обработку данных проводили параметрическим методом. Для оценки достоверности различий выборок применяли t-критерий Стьюдента.