Методы исследования химической организации клетки
Движение заряженных частиц (макромолекул и др.), взвешенных в электролите, при наложении внешнего электрического поля; осуществляется в среде пористого наполнителя (хроматографическая бумага, гели); в зависимости от величины и знака заряда частиц они перемещаются к катоду или аноду и занимают совершенно определенное место (зону) (рис. 3.2). Хроматография. Разделение смеси веществ за счет различий… Читать ещё >
Методы исследования химической организации клетки (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Люминесцентная микроскопия.
Индукция с помощью ультрафиолетового света флуоресценции химических компонентов клетки (естественных или введенных извне).
Применяется для прижизненного выявления в клетке биохимических компонентов, способных к флуоресценции — витаминов, пигментов, гормонов, антибиотиков. Кроме того, с помощью синтетических флуорохромов, специфически взаимодействующих с определенными химическими компонентами клетки (ДНК, РНК, липидами и др.), исследуют их внутриклеточную локализацию.
Дифференциальное центрифугирование.
Центрифугирование смеси, полученной в результате разрушения клеток (ткани, органа), в специальных центрифугах при различных скоростях вращения ротора, что позволяет раздельно осаждать частицы с различной массой (ядра, оргаиеллы, макромолекулы). p>Применяется для получения чистых фракций различных субклеточных структур для последующего биохимического и биофизического исследований.
Электрофорез.
Движение заряженных частиц (макромолекул и др.), взвешенных в электролите, при наложении внешнего электрического поля; осуществляется в среде пористого наполнителя (хроматографическая бумага, гели); в зависимости от величины и знака заряда частиц они перемещаются к катоду или аноду и занимают совершенно определенное место (зону) (рис. 3.2).
Используется для разделения сложных смесей биополимеров — белков, нуклеиновых кислот и др.
Рентгеноструктурный анализ.
Основан на изучении дифракции, возникающей при взаимодействии рентгеновского излучения с кристаллическим образцом.
Рис. 3.2. Электрофореграмма смеси белков (каждому пятну соответствует определенная белковая фракция)
Применяется для исследования атомно-молекулярного строения биологических полимеров — пептидов, полисахаридов, нуклеиновых кислот.
5. Хроматография. Разделение смеси веществ за счет различий в их распределении в системе, состоящей из двух компонентов — подвижного (газовая или жидкая фаза) и неподвижного (твердая фаза или жидкость, связанная на инертном носителе).
Основные разновидности: жидкостная, газовая, тонкослойная хроматография.
Используется для разделения и анализа смесей веществ, а также изучения их физико-химических свойств (массы и размеров молекул и др.).