Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Судебно-химическое исследование нитробензола и его основных метаболитов

Диссертация: Судебно-химическое исследование нитробензола и его основных метаболитов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В работе рассмотрена возможность применения однои двухкомпонент-ных подвижных фаз при изучении хроматографической активности объектов исследования. В качестве подобных фаз использовались растворители с различной полярностью. Низшие предельные алифатические углеводороды (гек-сан, гептан), обладающие наименьшей диэлектрической проницаемостью, обусловливали наименьшую хроматографическую подвижность… Читать ещё >

Содержание

  • Глава 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Физические свойства нитробензола и его основных метаболитов
    • 1. 2. Получение объектов исследования и их применение
    • 1. 3. Токсикологическая характеристика
    • 1. 4. Идентификация объектов исследования
    • 1. 5. Количественное определение
    • 1. 6. Изолирование и очистка рассматриваемых соединений
    • 1. 7. Метаболизм, распределение в теплокровных организмах и сохраняемость в трупном материале
  • МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
  • Глава 2. ИДЕНТИФИКАЦИЯ НИТРОБЕНЗОЛА И ЕГО ОСНОВНЫХ МЕТАБОЛИТОВ
    • 2. 1. Идентификация хроматографическими методами
      • 2. 1. 1. Идентификация в тонких слоях нормальнофазного сорбента
      • 2. 1. 2. Идентификация методом ВЭЖХ с применением нормальнофазного сорбента
    • 2. 2. Идентификация спектральными методами
      • 2. 2. 1. Электронная спектроскопия
      • 2. 2. 2. Колебательная спектроскопия
    • 2. 3. Идентификация с помощью хромогенных реакций
      • 2. 3. 1. Идентификация нитробензола по реакции с гидроксидом натрия в среде ДМФА-вода (98:2)
      • 2. 3. 2. Идентификация о- и ж-нитрофенола по реакции с гидроксидом натрия в среде ДМФА-вода (99:1)
      • 2. 3. 3. Идентификация и-нитрофенола по реакции с гидроксидом натрия в водной среде
  • ВЫВОДЫ КО ВТОРОЙ ГЛАВЕ
  • Глава 3. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРОБЕНЗОЛА И
  • РЯДА ЕГО МЕТАБОЛИТОВ
    • 3. 1. Определение спектрофотометрическим методом
      • 3. 1. 1. Определение на основе собственного поглощения
      • 3. 1. 2. Определение на основе реакции с гидроксидом натрия
        • 3. 1. 2. 1. Определение нитробензола в среде ДМФА-вода (98:2)
        • 3. 1. 2. 2. Определение о- и л/-питрофенола в среде ДМФА-вода (99:1)
        • 3. 1. 2. 3. Определение «-нитрофенола в водной среде
    • 3. 2. Определение методом ВЭЖХ с применением. нормальнофазного сорбента
  • ВЫВОДЫ К ТРЕТЬЕЙ ГЛАВЕ
  • Глава 4. ОСОБЕННОСТИ ОЧИСТКИ ИССЛЕДУЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ
    • 4. 1. Экстракционное выделение из водных растворов
    • 4. 2. Очистка хроматографическими методами и особенности хроматографической активности рассматриваемых соединений
      • 4. 2. 1. Очистка в тонком слое сорбента
      • 4. 2. 2. Очистка методом колоночной хроматографии
    • 4. 3. Оценка степени очистки извлечений из биологического материала в контрольных опытах
      • 4. 3. 1. Оценка эффективности очистки ацетоновых и толуольных извлечений методом тонкослойной хроматографии
      • 4. 3. 2. Оценка эффективности очистки ацетоновых извлечений методом тонкослойной хроматографии после предварительной экстракции
      • 4. 3. 3. Оценка эффективности очистки ацетоновых и толуольных извлечений методом колоночной хроматографии
      • 4. 3. 4. Оценка эффективности очистки ацетоновых извлечений методом колоночной хроматографии после предварительной экстракции
    • 4. 4. Применение ИК-спектрофотометрии для оценки степени чистоты нитробензола и его основных метаболитов, изолированных из биоматериала и очищенных методами экстракции и колоночной хроматографии
  • ВЫВОДЫ К ЧЕТВЕРТОЙ ГЛАВЕ
  • Глава 5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРОБЕНЗОЛА И ЕГО ОСНОВНЫХ МЕТАБОЛИТОВ В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ
    • 5. 1. Сравнительное изолирование исследуемых соединений из биологической ткани различными изолирующими агентами
    • 5. 2. Исследование особенностей извлечения нитробензола и его основных метаболитов оптимальными изолирующими агентами
      • 5. 2. 1. Изолирование нитробензола толуолом в зависимости от ряда факторов
        • 5. 2. 1. 1. Исследование зависимости степени извлечения нитробензола от объема изолирующего агента и кратности изолирования
        • 5. 2. 1. 2. Изучение зависимости степени извлечения нитробензола от продолжительности контакта изолирующей жидкости и биологического материала
        • 5. 2. 1. 3. Изучение зависимости степени извлечения нитробензола от соотношения количества биоматериала и отравляющего вещества
      • 5. 2. 2. Методика определения нитробензола в ткани трупных органов (печени) при изолировании толуолом
      • 5. 2. 3. Методика определения нитробензола в биологических жидкостях при изолировании толуолом
      • 5. 2. 4. Методика определения нитробензола в гнилостно-измененном материале
      • 5. 2. 5. Изолирование основных метаболитов нитробензола ацетоном в зависимости от ряда факторов
        • 5. 2. 5. 1. Исследование зависимости степени извлечения основных метаболитов нитробензола от объема изолирующего агента и кратности изолирования
        • 5. 2. 5. 2. Изучение зависимости степени извлечения основных метаболитов нитробензола от продолжительности контакта изолирующей жидкости и биоматериала
        • 5. 2. 5. 3. Изучение зависимости степени извлечения основных метаболитов нитробензола от соотношения количества биоматериала и отравляющего вещества
      • 5. 2. 6. Методика определения основных метаболитов нитробензола в ткани трупных органов при изолировании ацетоном
      • 5. 2. 7. Методика определения основных метаболитов нитробензола в биологических жидкостях при изолировании ацетоном
      • 5. 2. 8. Методика определения основных метаболитов нитробензола в гнилостно-измененном материале
  • ВЫВОДЫ К ПЯТОЙ ГЛАВЕ
  • Глава 6. ИЗУЧЕНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ НИТРОБЕНЗОЛА В ОРГАНИЗМЕ ТЕПЛОКРОВНЫХ И СОХРАНЯЕМОСТЬ РЯДА ИССЛЕДУЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ В ТРУПНОМ МАТЕРИАЛЕ
    • 6. 1. Особенности распределения нитробензола в организме кролика
    • 6. 2. Сохраняемость объектов исследования в трупном материале
  • ВЫВОДЫ К ШЕСТОЙ ГЛАВЕ
  • ОБЩАЯ СХЕМА ИССЛЕДОВАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ПРИ ОТРАВЛЕНИИ НИТРОБЕНЗОЛОМ

Судебно-химическое исследование нитробензола и его основных метаболитов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность темы

Нитрои аминопроизводные бензола широко используются в синтезе органических красителей и некоторых сельскохозяйственных ядохимикатов.

В клинике интоксикаций данными соединениями характерными являются поражения нервной системы, красной крови с образованием метгемоглоби-на, развитие гемолитической анемии, гепатотоксическое и пефротоксическое действие.

Одним из представителей данной группы соединений является нитробензол. Известно применение нитробензола в качестве полупродукта органических синтезов, ароматизатора, реагента в аналитической практике, растворителя. Он обладает высокой токсичностью по отношению к теплокровным животным и человеку. Описаны случаи отравления нитробензолом, в том числе с летальным исходом. Отравления могут происходить при непосредственном контакте с веществом в процессе производства, хранения, применения, вследствие аварии, в условиях загрязнения объектов окружающей среды отходами химических производств, выбросами в атмосферу и сточными водами предприятий.

Летальная доза нитробензола для человека составляет 10 мг/кг, но смертельный исход может наступить уже от приема 1−2 мл или нескольких капель вещества.

Широкое применение нитробензола, его токсичность и токсичность ряда его основных метаболитов, наличие случаев смертельного отравления обусловливает необходимость изучения данного вещества в судебно-химическом отношении.

До настоящего времени условия изолирования нитробензола и его метаболитов из биологического материала, их очистки, идентификации и количественного определения недостаточно изучены. Отсутствует методика определения нитробензола при наличии его метаболитов в биологическом материале. В доступной литературе практически отсутствуют данные по сохраняемости нитробензола и его метаболитов в трупном материале в зависимости от ряда внешних факторов.

Исходя из вышеизложенного, разработка методики судебно-химического исследования нитробензола и его основных метаболитов является актуальной.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей диссертационной работы являлась разработка методики судебно-химического исследования нитробензола и его основных метаболитов: анилина, о-, м-, я-нитрофенолов, м-нитроанилина, о-, м-, я-аминофенолов, «-нитрокатехола. Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить особенности хроматографического поведения нитробензола и его основных метаболитов в тонких слоях и колонках сорбентов, выявить оптимальные условия идентификации и количественного определения объектов исследования методами ТСХ и ВЭЖХ;

2. Изучить особенности взаимодействия исследуемых соединений с рядом цветореагентов, показать возможность применения отдельных реакций в условиях анализа биологического материала;

3. Провести изучение возможности применения различных видов экстракционных процессов для концентрирования и очистки объектов исследования;

4. Исследовать закономерности изолирования объектов исследования отдельными классами изолирующих жидкостей из биологического материала, разработать схему очистки извлечений;

5. Изучить особенности распределения нитробензола в организме теплокровных животных;

6. Определить сроки сохраняемости объектов исследования в трупном материале и исследовать зависимость скорости разложения анализируемых веществ в трупном материале от продолжительности и температурного режима сохранения.

Научная новизна исследований. Изучены особенности хроматографиче-ского поведения нитробензола и его основных метаболитов в сорбентах с гид-роксилированной поверхностью при использовании различных подвижных фаз. Расчитаны значения ряда величин, характеризующих хроматографическую подвижность веществ. Определены оптимальные условия хроматографическо-го рвзделения объектов исследования в тонких слоях и колонках сорбентов.

Разработаны унифицированные, хорошо воспроизводимые, высокочувствительные методики обнаружения и количественного определения нитробензола и его основных метаболитов.

Изучены особенности светопоглощения рассматриваемыми соединениями в ультрафиолетовой, видимой и инфракрасной областях спектра, рассчитан ряд основных оптических характеристик электронных спектров.

Определены оптимальные условия экстрагирования нитробензола и его основных метаболитов из водных растворов с учетом рН среды, насыщения экстрагентов водой и природы органических растворителей.

Впервые, применяя сочетание методов экстракции и хроматографической очистки, разработаны оригинальные методики определения объектов исследования в ткани трупных органов и биожидкостях, которые могут быть использованы как для исследования свежего, так и гнилостно-измененного трупного материала.

С помощью разработанных методов изучены особенности распределения нитробензола в органах и биологических жидкостях теплокровных животных (кролики), отравленных нитробензолом.

Получены данные по сохраняемости объектов исследования в ткани трупных органов. Исследована зависимость скорости разложения веществ от продолжительности и температурного режима сохранения.

Предложена схема судебно-химического исследования нитробензола и ряда его основных метаболитов.

Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований разработана методика изолирования из биологического материала, очистки, идентификации и количественного определения нитробензола (информационное письмо «Определение нитробензола при судебно-химическом исследовании биологического материала» (№ 129 от 15. 03. 04- утверждено Российским центром судебно-медицинской экспертизы МЗ РФ. — М., 2004. — 26 с.).

Внедрение результатов работы:

— методика определения ряда метаболитов нитробензола методом ВЭЖХ (внедрена в научный процесс кафедры неорганической химии Курского государственного медицинского университета с 17.11.2003 г.- акт внедрения № 22 от 12.04.2005 г.);

— методика количественного определения нитробензола и его основных метаболитов методом спектрофотометрии (внедрена в научный процесс кафедры органической химии Курского государственного медицинского университета с 15.12.2003 г.- акт внедрения № 25 от 15.04.2005 г.);

— методика экстракционно-фотометрического определения метаболитов нитробензола в биологическом материале при совместном присутствии (внедрена в научный процесс кафедры фармацевтической химии Курского государственного медицинского университета с 22.01.2004 г.- акт внедрения № 20 от 06.04.2005 г.);

— методика идентификации нитробензола и его основных метаболитов в тонком слое силикагеля (пластины «Силуфол» иУ-254) (внедрена в научный процесс кафедры органической химии Курского государственного медицинского университета с 11.02.2004 г.- акт внедрения № 24 от 15.04.2005 г.);

— методики определения нитробензола и ряда его метаболитов на основе реакции с гидроксидом натрия (внедрена в научный процесс кафедры неорганической химии Курского государственного медицинского университета с 19.02.2004 г.- акт внедрения № 23 от 12.04.2005 г.) — и методика определения нитробензола и его метаболитов в биологическом материале методом ВЭЖХ (внедрена в научный процесс кафедры фармацевтической химии Курского государственного медицинского университета с 26.02.2004 г.- акт внедрения № 21 от 06.04.2005 г.).

Апробация работы. Основные положения работы представлены и доложены на X и XI Российских национальных конгрессах «Человек и лекарство» (Москва 2003, 2004 гг.), 67-й и 69-й межвузовских научных конференциях студентов и молодых ученых (Курск 2002, 2003 гг.), 67-й, 68-й и 69-й итоговых научных сессиях КГМУ и отделения медико-биологических наук ЦентральноЧерноземного научного центра РАМН (Курск 2002, 2003, 2004 гг.), 32-й вузовской научно-технической конференции студентов и аспирантов в области научных исследований.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 работ.

Связь исследований с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена по плану научно-исследовательских работ кафедры фармацевтической химии Курского государственного медицинского университета и соответствует проблеме «Фармация» межведомственного научного совета № 36 РАМН. Номер государственной регистрации 01. 200. 117 602.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы (1 глава), экспериментальной части (5 глав), общих выводов, списка цитируемой литературы и приложения. Материалы диссертации изложены на 236 страницах машинописного текста, содержат 61 рисунок, 40 таблиц и 6 формул. Список цитируемой литературы включает 168 источников, из которых 54 на иностранных языках.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ.

1. Изучена хроматографическая активность нитробензола и его основных метаболитов в тонких слоях и колонках нормальнофазных сорбентов при использовании элюентов различной полярности. Рассчитан ряд параметров хроматографирования. Установлено, что наиболее оптимальными подвижными фазами для селективного разделения объектов исследования методами ТСХ и ВЭЖХ являются соответственно системы растворителей гексан-диоксан-пропанол-2-ацетон (40:15:2:0,5) и гексан-диоксан-пропанол-2 (50:20:3).

2. Исследован характер поглощения веществами электромагнитного излучения в УФ-, видимой и ИК-областях спектра. Показана возможность идентификации рассматриваемых соединений методами электронной и колебательной спектрофотометрии.

3. Разработаны методики количественного определения нитробензола и его основных метаболитов методами СФМ и ВЭЖХ. Относительная ошибка среднего результата не превышает соответственно ±1,3 и ±2,1%.

4. На основе изученных хромогенных реакций нитробензола и мононитрофе-нолов с гидроксидом натрия в среде ДМФА-вода разработаны методики идентификации и количественного определения рассматриваемых соединений. Относительная ошибка среднего результата при количественном определении не превышает ±1,5%.

5. Изучена экстрагируемость метаболитов нитробензола из водных растворов гидрофобными органическими растворителями в зависимости от природы экстрагента, рН среды, насыщения экстрагентов водой. Показано, что моно-нитрофенолы наиболее полно извлекаются хлороформом из водных растворов с рН 2,0, а анилин и моноаминофенолы — диэтиловым эфиром, насыще-ным водой и этилацетатом из водных растворов с рН 6,0−7,0. Предложены эффективные способы экстракционной и хроматографической очистки объектов исследования от соэкстрактивных веществ биологического материала.

6. Проведено сравнительное изолирование нитробензола и его основных метаболитов из биологического материала различными изолирующими агентами. Определены оптимальные условия изолирования анализируемых веществ толуолом (для нитробензола) и ацетоном (для метаболитов нитробензола).

7. Разработаны методики определения объектов исследования в тканях трупных органов и биожидкостях на основе изолирования оптимальными изолирующими агентами и последующей очистки извлечений методом хроматографии или сочетанием методов экстракции и хроматографии. Разработанные методики характеризуются достаточными для подобного рода исследований правильностью и воспроизводимостью.

8. Исследованы особенности распределения нитробензола в организме теплокровных животных (кролики) при введении отравляющего вещества через желудок. Установлено присутствие в органах и биожидкостях отравленных животных как нитробензола, так и ряда его метаболитов: ми п-нитрофенола, я-аминофенола.

9. Изучена сохраняемость нитробензола и его основных метаболитов в трупном материале на протяжении 55 суток. Определена продолжительность сохранения каждого из рассматриваемых соединений при 10−12 и 18−20°С. По результатам проведенных исследований предложена общая схема исследования биологического материала при отравлении нитробензолом.

Заключение

.

Обзор источников литературы по теме диссертации включает известные сведения о свойствах, применении, токсическом действии на организм нитробензола и ряда его метаболитов, а также о методах их обнаружения, количественного определения и способах изолирования из биоматериала и биожидкостей.

Идентификация объектов исследования основана, главным образом, на их способности образовывать окрашенные продукты с рядом цветореагентов. Имеющиеся методики определения характеризуются недостаточной селективностью, некоторые из них зачастую длительны по выполнению.

Для количественного определения рассматриваемых соединений в источниках литературы предложен ряд химических и физико-химических методов. Однако, в связи с тем, что информация носит отрывочный характер, отсутствуют способы определения объектов исследования при их возможном совместном присутствии в извлечениях, полученных из объектов биологического происхождения, адаптация данных методик к условиям судебно-химического анализа крайне затруднительна.

Недостаточно изучены вопросы изолирования и очистки рассматриваемых веществ. Многие известные методики изолирования нитробензола основаны на применении перегонки с водяным паром. Они, как правило, трудоемки и требуют использования громоздкой аппаратуры.

Имеющаяся информация не дает полного представления об особенностях распределения и сохраняемости рассматриваемых соединений в ткани трупных органов и биожидкостях в зависимости от ряда факторов окружающей среды.

На основании существующих данных источников литературы можно сделать заключение о необходимости изучения нитробензола и его основных метаболитов в судебно-химическом отношении и разработки унифицированной методики их определения в биологическом материале.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Объекты исследования:

1. Нитробензол ч. д. а. ТУ 6−09−99−120−78;

2. Анилин ч. д. а. или х. ч. ГОСТ 5819–78 (содержание основного вещества более 99,5%);

3. о-Нитрофенол ч. ТУ 6−09−11−1561−81;

4.-Нитрофенол ч. д. а. ТУ 6−09−9915−74;

5. и-Нитрофенол ч. д. а. ТУ 6−09−3973−75;

6. о-Аминофенол ч. д. а. (фирма «АМисИ», Германиярегистрационный номер 935IXсодержание действующего вещества 99,9%);

7. лг-Аминофенол ч. д. а. (фирма «АШпсЬ», Германиярегистрационный помер 1024Хсодержание действующего вещества 99,9%);

8. и-Аминофенол ч. д. а. МРТУ 6−09−6035−69;

9. лг-Нитроанилин ч. д. а. ТУ 6−09−4181−76;

10. «-Нитрокатехол ч. д. а. (фирма «АМпсЬ», Германиярегистрационный номер 25 455−071- содержание действующего вещества 97,0%).

Приборы:

1. Спектрофотометр СФ-46 (производственное объединение «ЛОМО», г. Ленинград);

2. Спектрофотометр СФ-56 (производственное объединение «ЛОМО», г. СПб);

3. Спектрофотометр СФ-2000 (г. Москва);

4. ИК-Фурье спектрофотометр «№ко1е1 Magna-750» (США);

5. Жидкостный хроматограф «Милихром» (производственное объединение «Научприбор», г. Орел);

6. Ультрафиолетовый облучатель Л-80;

7. Потенциометр ЭВ-74;

8. Термостат ТС-80 М-2;

9. Вакуумный испаритель;

10. Водяная баня;

11. Электроплитка.

Реактивы:

1. Ацетон о. с. ч. ТУ 6−09−3513−86;

2. Ацетонитрил ч. ТУ 6−09−8534−87;

3. Борная кислота х. ч. ГОСТ 9656–75;

4. Гексан ч. д. а. ТУ 261 -003−5 807 999−98;

5. Гидроксид натрия х. ч. ГОСТ 4328–77;

6. 1, 4-Диоксан ч. д. а. ГОСТ 10 455–80;

7. И, Ыдиметилформамид (ДМФА) ч. ГОСТ 20 289;

8. Диэтиловый эфир ОСТ 82−2006;88;

9. Нитрат калия ч. д. а. ГОСТ 4217–77;

10. Пропанол-2 х. ч. ТУ 6−09−402−87;

11. Серная кислота х. ч. ГОСТ 4204–77;

12. Сульфат натрия безводный х. ч. ГОСТ 4166–76;

13. Тетрахлорметан ч. д. а. ГОСТ 20 288–74;

14. Толуол ч. д. а. ГОСТ 5789–78;

15. Уксусная кислота х. ч. ГОСТ 61–75;

16. Фосфорная кислота ч. д. а. ГОСТ 6552–80;

17. Хлорид 2,3,5-трифенилтетразолия ч. д. а. ТУ 6−09−07−1646−87;

18. Хлороводородная кислота х. ч. ГОСТ 3118–77;

19. Хлороформ ч. д. а. ТУ 2631−020−11 291 058−96;

20. Этанол 95%;

21. Этилацетат х. ч. ГОСТ 22 300–76.

Материалы:

1. Бумага индикаторная универсальная ПНД 50−975−84 («Lachema», Чехия);

2. Колонки хроматографические КАХ-1 и КАХ-3 размерами 64×2 мм для жидкостного хроматографа, заполненные сорбентом «Силасорб-600»;

3. Силикагель L 40/100/z («Lachema», Чехия);

4. Хроматографические пластины типа «Силуфол» UV-254;

5. Фильтры бумажные.

Посуда:

1. Бюретки стеклянные градуированные на 25 мл;

2. Воронки делительные вместимостью 25, 50 и 100 мл;

3. Колбы мерные на 10, 25 и 50 мл;

4. Колбы конические на 100 и 200 мл;

5. Камеры хроматографические цилиндрические стеклянные (внутренний объем около 600 см);

6. Пробирки стеклянные вместимостью 20 мл;

7. Пипетки градуированные на 0,2, 1, 2, 5 и 10 мл;

8. Стеклянные фильтры № 4 (диаметром 2 см);

9. Цилиндры мерные градуированные на 10, 50, 100 и 250 мл;

10. Чашки выпарительные фарфоровые вместимостью 50, 100 и 250 мл.

Методы исследования Были использованы методы хроматографии в тонком слое сорбента, жидкостной колоночной хроматографии низкого давления, спектрофотометрии в УФ-, ИКи видимой областях спектра, высоко-эффективной жидкостной хроматографии.

Статистическая обработка данных Методики количественного определения были разработаны на модельных смесях с известным содержанием определяемого вещества. Обработка результатов проводилась в соответствии с установленными требованиями и с использованием пакета прикладных программ «Microsoft Excel» .

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

ГЛАВА 2. ИДЕНТИФИКАЦИЯ НИТРОБЕНЗОЛА И ЕГО ОСНОВНЫХ.

МЕТАБОЛИТОВ.

2.1. Идентификация хроматографическими методами 2ЛЛ. Идентификация в тонких слоях нормальнофазного сорбента.

Изучена хроматографическая подвижность нитробензола и его основных метаболитов в тонком слое силикагеля с гидроксилированной поверхностью (пластины «Силуфол» иУ-254).

В процессе исследования на линию старта хроматографической пластины размером 6×10 см наносили по 5 мкг каждого из анализируемых веществ в виде 0,02% этанольного раствора. Для хроматографического разделения объектов исследования использовали стеклянные камеры с внутренним объемом около 600 см. Перемещение подвижной фазы в слое сорбента происходило восходящим методом под действием капиллярных сил. Детекцию хроматограмм осуществляли в УФ-свете. Наблюдали появление темных пятен анализируемых веществ на более светлом общем фоне пластины. В УФ-свете пятна нитробензола и нитрофенолов имели фиолетовую окраску, а анилина, аминофенолов и и-нитрокатехола — светло-желтую, усиливающуюся при обработке пластины парами аммиака.

Хроматографическая активность рассматриваемых соединений обусловлена различными типами взаимодействий, основные из которых приводят к образованию водородных связей. Данные связи образуются при взаимодействии силанольных групп адсорбента, имеющего гидроксилированную поверхность, и отдельными группами атомов в молекулах адсорбата. Кроме возникающих связей между адсорбатом и адсорбентом на хроматографическую подвижность соединений влияют взаимодействия, которые возникают между поверхностью адсорбента и подвижной фазой, а также подвижной фазой и адсорбатом.

В работе рассмотрена возможность применения однои двухкомпонент-ных подвижных фаз при изучении хроматографической активности объектов исследования. В качестве подобных фаз использовались растворители с различной полярностью. Низшие предельные алифатические углеводороды (гек-сан, гептан), обладающие наименьшей диэлектрической проницаемостью, обусловливали наименьшую хроматографическую подвижность рассматриваемых веществ. При этом фенольный гидроксил, нитрои аминогруппы взаимодействовали с гидроксилированной поверхностью силикагеля с образованием различного рода связей, в том числе водородных. В этом случае пятна веществ на хроматограмме обнаруживались вблизи линии старта. Рост хроматографической подвижности анализируемых веществ наблюдался при увеличении диэлектрической проницаемости элементов систем. Наибольшие значения подвижности объектов исследования достигались в силыгополярных элюентах. Объяснить это можно тем, что полярные растворители обладают достаточным сродством к анализируемым веществам и способны конкурировать с ними при образовании связей с силанольиыми группами сорбента. В данных условиях взаимодействие активных групп объектов исследования с поверхностью сорбента ослабляется и происходит увеличение скорости продвижения веществ вместе с подвижной фазой.

По данным результатов хроматографирования нитробензола и его основных метаболитов при использовании однои двухкомпонентпых подвижных фаз составлялись элюенты из трех или четырех компонентов. В каждую из таких систем включали неполярный или малополярный растворитель и один или два растворителя со средней или сильной полярностью в различных объемных соотношениях. Многокомпонентные подвижные фазы позволили подобрать оптимальные условия хроматографического разделения анализируемых объектов. Результаты хроматографирования нитробензола и его основных метаболитов с использованием трехи четырехкомпонентных элюентов представлены в таблице 1.

Для оценки поведения исследуемых структур при хроматографировании нами был рассчитан ряд величин: (относительно стандартного вещества.

-, и-нитрофенола), В, величина, которая представляет собой отношение средних скоростей перемещения вещества и фронта подвижной фазы за время получения хрома-тограммы.

— величина, которая определяется как отношение ЯГ анализируемого и стандартного вещества.

В — условное удерживание в тонком слое сорбента, рассчитаное по формуле:

В=1/ЯГ (1).

Рк • - относительный коэффициент емкости тонкого слоя, определяемый по формуле:

Р —. где 1Уа — значение КГ анализируемого вещества, ИД — значение КГ «базовой структуры» (."-нитрофенола).

Д (ДО) — относительное изменение свободной энергии при адсорбции (по отношению к льнитрофенолу), найденное по формуле:

Л (ЛО)=-К-Т-1пРк. (3).

Значения рассчитанных величин представлены в таблице 1. Как свидетельствуют полученные данные, величина хроматографической активности (относительно изменения свободной энергии при адсорбции) рассматриваемых соединений, при использовании малополярных элюентов, содержащих преимущественно гексан, возрастает в ряду л/-аминофенол —> п-нитрокатехол —" о-аминофенол —" я-аминофенол —> и-нитрофенол —> м-нитроанилин —> лг-нитрофенол —> анилин —> о-нитрофенол —> нитробензол.

Наиболее подвижным на пластинах «Силуфол» ЦУ-254 является нитробензол, который в своей структуре имеет питрогруппу, практически не способную к образованию водородных связей с поверхностью силикагеля. Нитрофе-нолы в своей структуре кроме нитрогруппы содержат в орто-, метаили пара-положении гидроксильную группу, обладающую большей способностью, чем нитрогруппа, взаимодействовать с поверхностью сорбента. Образование внутримолекулярной водородной связи между нитрогруппой и фенольным гидро-ксилом происходит у о-нитрофенола в большей степени, чем у .и-нитрофенола и и-нитрофенола, поэтому значение относительного изменения свободной энергии при адсорбции для и-нитрофенола оказывается меньшим, чем для о-нитрофенола, что проявляется меньшей хроматографической подвижностью п-нитрофенола по сравнению с о-нитрофенолом.

Аминогруппа в структуре анилина имеет возможность более активно взаимодействовать с гидроксилированной поверхностью силикагеля, по сравнению с нитрогруппой, уменьшая тем самым хроматографическую подвижность вещества.

Хроматографическую активность моноаминофенолов характеризует наличие фенольного гидроксила и аминогруппы в структуре веществ. При этом элюент, основу которого составляет неполярный растворитель, оказывает влияние на подвижность исследуемых объектов. и-Аминофенол в большей степени, чем ои д/-аминофенол, способен взаимодействовать с полярным компонентом подвижной фазы — диоксаном, что уменьшает возможность взаимодействия вещества с гидроксилированной поверхностью сорбента и увеличивает его хроматографическую подвижность.

Наличие нитрои аминогруппы в структуре, и-нитроанштина способствует увеличению возможности конкурентного взаимодействия данных групп с поверхностью сорбента. Следовательно, хроматографическая подвижность м-нитроанилина будет меньше подвижности анилина и, соответственно, нитробензола.

Наименее подвижным на пластинах «Силуфол» иУ-254 является м-аминофенол, который в своей структуре имеет гидроксильную группу и аминогруппу в положении «3». Из-за незначительного внутримолекулярного взаимодействия фепольного гидроксила и первичной аминогруппы увеличивается возможность более активного взаимодействия данных групп с гидроксилиро-ванной поверхностью силикагеля. При этом хроматографическая подвижность вещества уменьшается и значение относительного изменения свободной энергии при адсорбции будет минимальным.

Введение

в состав подвижной фазы сильнополярного компонента — ацетона не меняет порядок продвижения веществ по пластине, но изменяет хрома-тографическую подвижность каждого из анализируемых веществ.

Показать весь текст

Список литературы

  1. A.c. 309 283 СССР, МКИ2 G01 N21/20. Способ количественного определения нитросоединений / Я. В. Релин, Т. К. Соколова. № 1 412 526 / 23−04- Заявл. 20.04.70- Опубл. 09.07.71, Бюл. № 2.-3 с.
  2. A.c. 362 238 СССР, МКИ2 G01 N31/16. Способ количественного определения в сточных водах ароматических нитросоединений / М. Д. Белостоцкий, Е. А. Чистякова. -№ 1 631 031 /23−04- Заявл. 17.03.71- Опубл. 13.12.72, Бюл. № 2.-2 с.
  3. A.c. 947 766 СССР, МКИЗ G01 N33/48. Способ определения анилина в биологических объектах / JT.B. Песахович, З.М. Деева- Тюменск. гос. мед. ип-т и Алтайск. гос. мед. ин-т. № 2 849 192 /28−13- Заявл. 02.10.79- Опубл. 30.07.82, Бюл. № 28. — 4 с.
  4. Актуальные проблемы теоретической и прикладной токсикологии: Сб. науч. тр. / Моск. НИИ гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана- Под ред. М. И. Михеева. — М.: МНИИГ, 1988.-179 с.
  5. , А. Избирательная токсичность / А. Альберт- Под ред. В.А. Фило-ва. М.: Медицина, 1989. — 432 с.
  6. Анализ зарубежных и отечественных статистических данных по острым химическим отравлениям / Н. И. Литвинов, Ю. И. Остапенко, В.И. Казачен-ков и др. // Токсикологический вестник. 1997. — № 5. — С. 5−12.
  7. , H.A. Ферментативный метод определения фенолов с использованием пероксидазы арахиса / H.A. Багирова, Т. Н. Шеховцева, Н. В. Табачникова // Журн. аналит. химии. 2000. — Т. 55, № 1. — С. 93−101.
  8. , А.Г. Определение понятий и систематизация веществ повышенной опасности / А. Г. Баразьян, C.B. Суворов // Гигиена и санитария. — 1997.- № 3. С. 59−61.
  9. , И.Я. Спектрофотометрический анализ в органической химии / И .Я. Берштейн, Л. А. Шевнюк, Ю. Л. Каминский. Л.: Химия, 1986. — 187 с.
  10. , Г. П. Предельно допустимые концентрации химических веществ в окружающей среде / Г. П. Беспамятнов, Ю. А. Кротов. JL: Химия, 1985.-528 с.
  11. , Е.К. Гигиеническая оценка доочищенных сточных вод ани-линокрасочной промышленности / Е. К. Булочникова, Н. В. Пиртахия // Гигиена и санитария. 1985.- № 1.-С. 13−16.
  12. , E.H. Вопросы токсикологии нитрофенольиых соединений. Вопросы гигиены и токсикологии пестицидов. — Труды АМН СССР. М., 1966. — С. 121−124.
  13. , М.И. Влияние витамина К3 на активность ферментов редокс- цепей эндоплазматической сети печени крыс и гидроксилирование амидопирина, этилморфина и анилина / М. И. Бушма, П. И. Лукиенко // Фармакология и токсикология. 1983. — Т. 46, № 3. — С. 65−67.
  14. , Н.М. Сравнительная оценка изменений в крови при острой и подострой интоксикации ароматическими нитро- и аминосоединениями / Н. М. Василенко, В. И. Звездай // Фармакология и токсикология. — 1972. — Т. 35,№ 1.-С. 108−110.
  15. , С.П. Хроматографическое определение алкилнитрофенолов / С. П. Веревкин, А. И. Рожнов, A.B. Зимичев // Журн. аналит. химии. -1989. -Т. 44, № 9.-С. 1680−1685.
  16. Влияние анилина и бензола на крыс, предварительно адаптированных к низким положительным температурам воздуха / В. В. Кустов, Л.М. Меле-сова, В. К. Фадеева и др. // Гигиена и санитария. 1987. — № 2. — С. 26−29.
  17. Влияние низких положительных температур воздуха на чувствительность животных к токсическому действию анилина / В. В. Кустов, В. К. Фадеева,
  18. Л.М. Мелесова, М. В. Сидорова // Гигиена и санитария. 1987. — № 5. — С. 32−34.
  19. ВЭЖХ определение нитробензола в воде / Определение концентраций химических веществ в воде централизованных систем питьевого водоснабжения: Сборник методических указаний. Вып. 2. — М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 1999. — 175 с.
  20. , И.Д. Превращения и определение промышленных органических ядов в организме / И. Д. Гадаскина, В. А. Филов. М.: Медицина, 1971.-304 с.
  21. Газохроматографическое определение ароматических аминов в воде водных объектов / М. Т. Дмитриев, Н. В. Зайцева, В. Ю. Малков, Т. С. Уланова // Гигиена и санитария. 1989. — № 7. — С. 29−31.
  22. Газохроматографическое определение нитро- и аминосоединений ароматического ряда / Н. В. Зайцева, Т. С. Уланова, В. Ю. Малков, Т.В. Нурисла-мова// Гигиена и санитария. 1991. — № 12. — С. 82.
  23. Гигиенические нормативы содержания вредных веществ в питьевой воде (Постановление № 26 от 24.10.96. СанПиН 2.1.4.559−96) / Токсикологический вестник. 1997. — № 2. — С. 37−44.
  24. , С.Н. Общие механизмы токсического действия / С. Н. Голиков, И. В. Саноцкий, Л. А. Тиунов. Л.: Химия, 1986. — 216 с.
  25. , П.Ф. Органическая химия красителей / П. Ф. Гордон, П.П. Грегори- Под ред. Г. Н. Ворожцова. М.: Мир, 1987. — 344 с.
  26. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. — 11-е изд. М.: Медицина, 1987.-336 с.
  27. , Я.М. Вредные органические соединения в промышленных выбросах в атмосферу / Я. М. Грушко. Л.: Химия, 1986. — 207 с.
  28. , Я.М. Вредные органические соединения в промышленных сточных водах / Я. М. Грушко. Л.: Химия, 1982. — 216 с.
  29. , Е.А. Обнаружение и определение анилина при судебно-химических исследованиях / Е. А. Грязнова, В. Г. Беликов // Суд. мед. эксп-за. 1959. — Т. 2, № 4. — С. 39−43.
  30. Действие нитробензола и его хлорпроизводных на некоторые показатели антиокислительного гомеостаза в тканях крыс / Л. И. Паранич, A.B. Пара-нич, Н. М. Василенко, Е. В. Бугай // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1993.-Т. 116, № 10.-С. 402−405.
  31. , И. Титрование в неводных средах / И. Денеш- Под ред. И. П. Белецкой. М.: Мир, 1971.-413 с.
  32. , Т.С. Обоснование норматива 4-нитроанилина в воде водоемов / Т. С. Дергачева, Н. Я. Михайловский // Гигиена и санитария. 1985. — № 4. -С. 82−83.
  33. , М.Т. Газохроматографическое определение ароматических аминов в воздухе / М. Т. Дмитриев, Т. С. Уланова, A.B. Михайлов // Гигиена и санитария. 1985. — № 1. — С. 57−59.
  34. , М.Т. Газохроматографическое определение фенола в моче / М. Т. Дмитриев, Ю. Б. Суворова // Гигиена и санитария. 1991. — № 2. — С. 85−86.
  35. , С.Ю. Фотоматрический анализ парацетамола на содержание примеси п-аминофенола / С. Ю. Доронин, H.H. Гусакова, Р. К. Чернова // Фармация. 2001. -№ 3.- С. 35−37.
  36. , М.И. Автоматическое определение анилина и его замещенных в воздушной среде / М. И. Евгеньев, С. Ю. Гармопов, В. В. Медведев // Заводская лаборатория. Диагностика материалов. 1996. — Т. 62, № 3. — С. 8−9.
  37. , М.И. Проточно-инжекционное определение ариламинов с фотометрическим детектированием / М. И. Евгеньев, И. И. Евгеньева, Ф.С. Ле-винсон // Заводская лаборатория. Диагностика материалов. -1996. — Т. 62, № 1.-С. 11−14.
  38. , П.Н. Фотометрическое определение азотсодержащих лекарственных препаратов, основанное на превращениях с образованием нитрита / П. Н. Ивахненко, C.B. Малыгина, JI.C. Чигаренко // Фармация. 1978. — Т. 27, № 3,-С. 83−84.
  39. Идентификация органических соединений / Р. Шрайдер, Д. Кертин и др.- Под ред. Б. А. Руденко. М.: Мир, 1988. — 704 с.
  40. Инверсионный вольтамперометрический анализ воды на содержание анилина и фенола / JI.C. Анисимова, Ю. А. Акенеев, В. Ф. Слипченко и др. // Заводская лаборатория. Диагностика материалов. 1999. — Т. 65, № 2. — С. 6−8.
  41. , Д.А. Биохимические критерии оценки ранних признаков неблагоприятного воздействия нитрохлорсоединений бензола / Д. А. Кашкалда, Ф. А. Колодуб // Врачебное дело. 1992. — № 5. — С. 62−65.
  42. , Н.Д. Динамика численности и структуры бактериального комплекса почвы при внесении азобензола / Н. Д. Конева, Ю. В. Круглов // Микробиология. 2001. — Т. 70, № 4. — С. 552−557.
  43. , И.М. Извлечение малых количеств нитрофенолов из воды макропористыми ионами / И. М. Коренман, А. Т. Алымова, С. Н. Талопкина // Журн. аналит. химии. 1979. — Т. 34, № 12. — С. 2425−2427.
  44. , И.М. Новые титриметрические методы / И. М. Коренман. — М.: Химия, 1983.- 173 с.
  45. , И.М. Фотометрический анализ / И. М. Коренман. М.: Химия, 1970.- 150 с.
  46. , Я.И. Фотометрическое определение фенола в воде в присутствии анилина и нитроанилипов после извлечения гидрофильными растворителями / Я. И. Коренман, Т. А. Кучменко // Журн. аналит. химии. 1995. -Т. 50, № 7.-С. 787−791.
  47. , Я.И. Экстракционно-фотометрическое раздельное определение анилина и нитроанилинов / Я. И. Коренман, Г. М. Смольский, H.H. Сель-манщук // Журн. аналит. химии. 1992. — Т. 47, № 7. — С. 1251−1254.
  48. , И.А. Полярографическое определение нитробензола / И. А. Коршунов, A.B. Рабов, JI.H. Сазанова // Заводская лаборатория. 1948. — Т. 14, № 3.-С. 519−522.
  49. , В.И. Распределение ароматических нитросоединений между органическими фазами трехфазных экстракционных систем / В. И. Кофанов, В. А. Франковский, И. Н. Ребик // Жури, аналит. химии. 1991. — Т. 46, № 3. -С. 506−512.
  50. , В.Ф. Анализ ядохимикатов / В. Ф. Крамаренко, Б.М. Турке-вич. М.: Химия, 1978. — 264 с.
  51. , А.П. Аналитическая химия неводных растворов / А. П. Крешков. М.: Химия, 1982. — 256 с.
  52. , А.И. Анализ металлов / А. И. Лазарев, И. П. Харламов. — М.: Металлургия, 1987. 320 с.
  53. , О.И. Скрининг метод оценки влияния ксенобиотиков на репродуктивную функцию / О. И. Линева, В. И. Карнаух // Гигиена и санитария. — 1991.-№ 3.-С. 79−81.
  54. , H.A. Классификация токсических веществ, вызывающих различные типы гипоксий на начальных стадиях интоксикации / H.A. Лошадкин, С. С. Абнизов // Токсикологический вестник. — 1995. № 3. — С. 25−27.
  55. , Р. Острые отравления / Р. Лудевиг, К. Лос- Пер. с нем. A.B. Низового- Под ред. Е. В. Гембицкого. М.: Медицина, 1983. — 560 с.
  56. , Е.А. Клиническая токсикология / Е. А. Лужников. М.: Медицина, 1994.-256 с.
  57. , Е.А. Острые отравления: Руководство для врачей / Е. А. Лужников, Л. Г. Костомарова. М.: Медицина, 1989. — 431 с.
  58. , А.И. Параметры воздействия нитрофеиолов различного химического строения с альбумином и их токсичность / А. И. Луйк, В. Д. Лукянчук // Вопр. мед. химии. 1982. — Т. 28, № 5. — С. 48−51.
  59. , Л. Методы органического анализа / Л. Мазор- Под ред. А. Н. Кашина. М.: Мир, 1986. — 584 с.
  60. , Т.А. Анализ продуктов реакции антрахинона, гидрохлорида анилина и анилина методом ТСХ / Т. А. Масленникова // Заводская лаборатория. Диагностика материалов. 1993. — Т. 59, № 1. — С. 18−20.
  61. , А.П. Фотоэлектроколориметрический метод определения малых концентраций пара-нитрофенола в воде / А. П. Махиня // Гигиена и санитария. 1967. — № 3. — С. 58−60.
  62. , К.Ф. Предупреждение загрязнения водоемов сточными водами предприятий синтетической химии / К. Ф. Мелещенко. Киев: Здоров’я, 1971.- 144 с.
  63. , Ю.Т. Анилин / Б. Т. Николаев, A.M. Якубсон. М.: Химия, 1984. — 148 с.
  64. , Л.П. Метод определения анилина при санитарно-химических исследованиях резин / Л. П. Новицкая, И. С. Духовная // Гигиена и санитария. 1985. -№ 3. -С. 60−61.
  65. Об острых отравлениях амидо- и нитропроизводными бензола / И.Т. Фе-сенко, О. В. Чаплий, Н. И. Омельченко, JT.M. Калиниченко // Врачебное дело. 1982. -№ 7. — С. 112−113.
  66. , М.М. Количественный спектрофотометрический анализ в ультрафиолетовой, видимой и ближней инфракрасных областях / М. М. Овчинников, Г. Н. Подгорный, И. С. Балаховский // Клинич. лаб. диагностика. 2002. — № 2. — С. 6−11.
  67. Определение анилина и изомеров толуидина в воде водных объектов методом жидкостной хроматографии / Н. В. Зайцева, Т. С. Уланова, В. Ю. Малков, Т. В. Нурисламова // Гигиена и санитария. 1992. — № 7−8. — С. 76.
  68. Основы аналитической токсикологии: Международная программа по химической безопасности / Р. Дж. Фланаган, P.A. Брейтуэйт и др. — Женева: ВОЗ, 1997.-368 с.
  69. Очистка сточных вод нефтеперерабатывающих заводов / Я. А. Карелин, И. А. Попова, JT.A. Евсеева, О .Я. Евсеева. М.: Стройиздат, 1982. — 184 с.
  70. , Н.Я. Отравление нитробензолом / Н. Я. Павлова, Б. О. Рехтман // Врачебное дело. 1974.-№ 5.-С. 125−126.
  71. , С.Е. Влияние выбросов предприятий химии и нефтехимии на здоровье населения / С. Е. Першин, Л. К. Квартовкина // Гигиена и санитария. 2003. — № 6. — С. 84−85.
  72. Применение методов газовой и жидкостной хроматографии при изучении метаболизма органических соединений / H.A. Тараненко, В. Б. Дорогова, Н. М. Мещаков, Л. И. Панфилова // Гигиена и санитария. 2001. — № 2. — С. 75−76.
  73. , В.Ф. Определение нитрофенолов в воде методом капилярной ВЭЖХ с амперометрическим детектированием / В. Ф. Рубан // Журн. ана-лит. химии. 1992. — Т. 47, № 12. — С. 2042−2045.
  74. , О.Б. Методы определения фенола и его производных в биологических средах / О. Б. Рунова, P.A. Волкова // Клинич. лаб. диагностика.1996. -№ 5. С. 15−19.
  75. С1 2 121 681 RU G 01 N33/50. Способ определения 4-нитрофенолов в биологическом материале / Шорманов В. К. (Курский гос. мед. ун-т. — № 94 021 200/14- Заявл. 07.06.94 // Изобретения (Заявки и патенты). 1998. — № 31. -С. 1−2.
  76. Свойства органических соединений. Справочник. / Под ред. A.A. Потехи-на. Л.: Химия, 1984. — 520 с.
  77. , Г. А. Анион-радикалы ароматических соединений 24*. Электрохимическое восстановление полигалогенированных производных нитробензола / Г. А. Селиванова, В. Ф. Стариченко, В. Д. Штейнгарц // Журн. биоорган, химии. 1995.-Т. 31, № 2. -С. 226−232.
  78. , С. Количественный органический анализ по функциональным группам / С. Сиггиа, Дж. Г. Ханна. М.: Химия, 1983. — 672 с.
  79. Спектрофотометрическое и хроматографическое определение п-аминофенола в парацетамоле / М. И. Евгеньев, С. Ю. Гармонов, Л.Ш. Ша-кирова, A.C. Брысаев // Химико-фармац. журн. 2000. — Т. 34, № 5. — С. 52−54.
  80. Справочник химика / Под ред. Б. П. Никольского. — М.: Химия, 1964. Т. 2. — 1168 с.
  81. Справочное руководство по компонентному составу водотоков и сточных вод различных производств. Казань: Изд-во Казанск. ун-та, 1992. — 82 с.
  82. , А.Г. Экстракционно-хроматографический метод определения анилина в природных водах / А. Г. Страдомская, К. П. Тарасова, Н.И. Гавриленко//Гидрохим. матер. 1991. -№ ПО.-С. 117−122.
  83. , Г. А. Окислительные методы синтеза производных п-нитрофенола / Г. А. Субоч, Е. Ю. Беляев // Хим. фармац. журн. 2000. — Т. 34, № 4. — С. 51−52.
  84. , В.А. Тактика и неотложная помощь при острых химических отравлениях / В. А. Троцкевич, О. В. Курашов // Врачебное дело. 1991. — № 6.-С. 91−94.
  85. , Ф. Капельный анализ органических веществ / Ф. Файгль- Под ред.
  86. B.И. Кузнецова. М.: Госхимиздат, 1986. — 584 с.
  87. , Е.Г. Оценка мутагенной опасности бензола и ряда его производных / Е. Г. Фельдт // Гигиена и санитария. — 1985. № 7. — С. 21−23.
  88. , И.Т. Об острых отравлениях амидо- и нитропроизводными бензола / И. Т. Фесенко, О. В. Чаплий, Н. И. Омельченко // Врачебное дело. — 1982.-№ 7.-С. 112−113.
  89. , Л.А. Идентификация лекарственных препаратов, содержащих ароматическую нитрогруппу / Л. А. Черкашкина, Л. И. Парфенова, Н. И. Двич // Фармация. 1983. — Т. 32, № 3. — С. 39−40.
  90. , В.Д. Определение фенольных соединений в воде хроматографиче-скими методами / В. Д. Чмиль // Журн. аналит. химии. 1981. — Т. 2, № 4.1. C. 1095−1098.
  91. , М.Г. О роли токсических модифицирующих веществ в химическом канцерогенезе / М. Г. Шандала, Н. Я. Янышева, Н. В. Балепко // Гигиена и санитария. 1991. — № 3. — С. 55−58.
  92. , Л.П. Особенности биоэлектрической активности миокарда крыс на фоне развивающейся гемической гипоксии, вызванной острым отравлением нитробензолом / Л. П. Широбокова // Токсикол. вестн. — 2002. — № 1.-С. 24−28.
  93. Токсикол. вестн. — 2003. № 2. — С. 6−9.
  94. , Л.П. Фармакопротекторное действие церебрала и митохонд-рина при гемической гипоксии, вызванной острым отравлением нитробензолом / Л. П. Широбокова, А. Н. Макаренко, A.M. Шаяхметова // Токсикологический вестник. 2002. — № 4. — С. 14−16.
  95. В.К. Изолирование алкилдинитрофенольных соединений из трупного материала / В. К. Шорманов, Н. Д. Захарова, A.B. Нестерова // Суд. мед. эксп-за. 1993. — Т. 36, № 3. — С. 34−36.
  96. В.К. Химико-токсикологическое исследование отдельных классов ароматических соединений кислотного характера и их эфиров: Дис.. д-ра фармац. наук: 15.00.02 / В. К. Шорманов. Защищена 01.03.99- 1 960 012 564. — М., 1999. — 643 с.
  97. , В.К. Определение 4-нитрофенолов в объектах биологического происхождения / В. К. Шорманов, И. А. Фурсова // Судебно-мед. Экспертиза. 1998. — Т. 41, № 6. — С. 28−33.
  98. , В.К. Определение токсичных соединений динитрофенольной структуры при судебно-химических исследованиях биологического материала / В. К. Шорманов, И. А. Фурсова // Суд. мед. эксп-за. 1996. — Т. 39, № 3.-С. 31−34.
  99. , В.К. Особенности изолирования нитробензола из биологического материала / В. К. Шорманов, Л. В. Бредихина // Суд. мед. эксп-за. -2000. Т. 43, № 3. — С. 28−30.
  100. , В.К. Особенности экстракции 2,4-динитрофенола и 2,4,6-тринитрофенола из водных растворов / В. К. Шорманов, И. А. Фурсова, М. Н. Якубовская // Суд. мед. эксп-за. 1994. — Т. 37, № 2. — С. 22−23.
  101. , В.К. Экстрагирование 4-нитрофенола и 2-хлор-4-нитрофенола из водных растворов / В. К. Шорманов, И. А. Фурсова, М. И. Якубовская // Фармация. 1996. — Т. 45, № 4. — С. 40−41.
  102. , В.К. Экстрагируемость 2-нитрофенола и 3-нитрофенола из водных растворов / В. К. Шорманов, М. К. Шепиев // Суд. мед. эксп-за. -1997.-Т. 40, № 3.-С. 30−32.
  103. Е.В. Отдаленное действие на организм ароматических аминов и продуктов их трансформации в воде / Е. В. Штанников, И. Н. Луцевич // Гигиена и санитария. 1983. -№ 9. — С. 19−22.
  104. Е.В. Трансформация ароматических аминов в процессе кондиционирования воды / Е. В. Штанников, И. Н. Луцевич // Гигиена и санитария. 1982. — № 4. — С. 20−23.
  105. , В. Яды в нашей пище / В. Эйхлер- Под ред. Б. Р. Стригановой 2-е изд., доп. М.: Мир, 1993. — 187 с.
  106. , Г. А. Основы жидкостной экстракции / Г. А. Ягодин, С. З. Каган. — М.: Химия, 1981.- 400 с.
  107. Acute nitrobenzene poisoning with severe associated methemoglobinemia, identification in whole blood by GC-FID and GC-MS / A.M. Marbinez, S. Ballesteros, E. Almarra et. // J. Anal. Toxicol. 2003. — Vol. 27, № 4. — P. 221−225.
  108. Alber, M. Determination of nitrophenols in rain and snow / M. Alber, H. Bohm, I. Brodesser // Fresenius J. Anal. Chem. 1989. — Vol. 334, № 6. — P. 540−545.
  109. Archer, J. Extraction of phenols from an acidic water matrix using solid phase extraction / J. Archer, Chen Ying-Lin // Anal. Chem. and Appl. Spectrosc.: Pitsburgh Conf. Atlanta (Ga), 1993.-901 p.
  110. Bagnato, L. Two-dimensional thin-lager chromatography for the separation and identification of nitro derivatives in explosives / L. Bagnato, G. Grasso // J. Chromatogr. 1986. — Vol. 57, № 3. — P. 440−444.
  111. Benowitz, L. Novel treatment in stroke. Endogenous low molecular weight factors support extensive CNS axon growth / L. Benowitz // Eur. J. Neuropsycho-pharm. 2000. — Vol. 10, № 4. — P. 23.
  112. Biodegradation of sorbed chemicals in soil / K. Scow, F. Shifang, C. Johnson, M. Guang // J. Environmental Health Perspectives 1995. — Vol. 21, № 102. -P. 93−95.
  113. Bohm, H.B. Identification of nitrophenols in rain-water by high-performance liquid chromatography with photodiode array detection / H.B. Bohm, I. Teltes, D. Vol mer // J. Chromatogr. 1989. — Vol. 478, № 2. — P. 390−407.
  114. Brauchamp, R.O. A critical review of the literature on nitrobenzene toxicity / R.O. Brauchamp, R.D. Irons, D.E. Rickert // CRC Crit. Rev. Toxicol. 1982. -№ 11.-P. 33−84.
  115. Breda, A. Determination of phenol, m-, o- and n- cresd, n-aminophenol in urine by high-performance liquid chromatography / A. Breda // J. Chromatogr. — 1990.-Vol. 535, № 1−2.-P. 311−316.
  116. Cserhati, T. Determination of the lipophilicity of some aniline derivatives by reversed-phase thin-lager chromatography. The effect of salts / T. Cserhati, B. -Bordas, M. Srogyi // J. Chromatogr. 1986. — Vol. 21, № 6. — P. 312−316.
  117. Feifes, J. Gas chromatographic and mass spectrometric determination of ni-troaromatics in water / J. Feifes, K. Lensen, D. Volmer // J. Chromatogr. 1990. -Vol. 518, № 1.-P. 21−40.
  118. Haring, R.C. Azobenzene as an acaricide and insecticide / R.C. Haring // J. Econom. Entomol. 1946. — Vol. 39, № 1. — P. 78−81.
  119. Hassan, Y.M. Spectrofotometric determination of some pharmaceutically important nitro compounds in thier dosage from / Y.M. Hassan, F. Belal, M.Y. El-Din // J. Analyst. 1988. — Vol. 113, № 7. — P. 1087−1089.
  120. Hernandez, L. Voltammetric determination of methyl parathion, ortho, meta and para nitrophenol with a carbon paste electrode modified with C|8 / L. Hernandez, P. Hernandes, J. Vicente // Fresenius J. Anal. Chem. — 1993. Vol. 345, № 1 l.-P. 712−715.
  121. Hernandez, P. Determination of 4-nitrophenyl by adsorptive stripping aguare-wave polarography / P. Hernandez, F. Galan-Estella, L. Hernandez // J. Anal. Chem. acta. 1993. — Vol. 271, № 2. — P. 217−221.
  122. Herterich, R. Gas chromatographic determination of nitrophenols in atmospheric liquid water and airborne particulates / R. Herterich // J. Chromatogr. -1991.-Vol. 549, № 1−3. P. 313−324.
  123. Investigation into the mechanism of action of nitrobenzene as a mild dehydro-genating agent under acid-catalysed conditions / M.L. Cristiano, D.J. Gago, A.M. Gonsalves et. // J. Org. Biomol. Chem. 2003. — Vol. 1, № 3. — P. 565 574.
  124. Johnson, G.R. Evolution of catabolic pathways for synthetic compounds: bacterial pathways for degradation of 2,4-dinitrotoluene and nitrobenzene / G.R. Johnson, J.C. Spain // J. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2003. — Vol. 62, № 2−3. — P. 110 123.
  125. Kadiyala, V. Construction of Escherichia coli strains for conversion of ni-troacetophenones to ortho-aminophenols / V. Kadiyala, L.J. Nadeau, J.C. Spain // J. Appl. Environ. Microbiol. 2003. — Vol. 69, № 11. — P. 6520−6526.
  126. Kastelan, M. TLC separation of m- and n-aminophenols by metal-ion addition to the chromatographic layer / M. Kastelan, M. Petrovic // Fresenius J. Anal. Chem. 1991.-Vol. 34, № 12.-P. 784−785.
  127. Kosson, D.S. Interactions of aniline with soil and groundwater at an industrial spill site / D.S. Kosson, V.B. Stephen // J. Environmental Health Perspectives -1995.-Vol. 21, № 103.-P. 71−73.
  128. Kunugi, A. HPLC of nitrophenols determination of products of oncolumn nitration of phenol / A. Kunugi, C. Truji, K. Tabei // Resolut. Chromatogr. and Chromatogr. Commun. 1987. — Vol. 10, № 11. — P. 624−625.
  129. Kuruc, J. GC-FTIR-MS analysis of volatile radiolysis products of nitrophenol solution in carbon tetrachloride / J. Kuruc, M.K. Yahoo, P. Kuran // J. Radioanal. and Nucl. Chem. Lett. 1993. — Vol. 175, № 5. — P. 359−370.
  130. Leon-Gonsalez, M.E. Simultaneous flow-injection determination of o- and p-nitrophenol using a photodiode-array detector/ M.E. Leon-Gonsalez, L.V. Perer-Arribas, M.J. Santos-Delgado// J. Anal. Chem. acta. 1992. — Vol. 258, № 2.-P. 269−273.
  131. Mattews, E. W. Recovery of dichlorobenzene, nitrobenzene and naphthalene during evaporative concentration / E.W. Mattews // J. Anal. Chem 1985. — Vol. 57, № 7.-P. 1494−1496.
  132. Michalke, P. Determination of p-nitrophenol is serum and urine by ensymatic conjugate hydrolysis and HPLC application after paration intoxication / P. Michalke // J. Rechtsmed. 1984. — Vol. 92, № 2. — P. 95−100.
  133. Morris, M.E. High-performance liquid chromatographic analysis of p-nitrophenol and its conjugates in biological samples / M.E. Moms, Y.B. Hansel // J. Chromatogr. Biomed. Appl. 1990. — Vol. 532, № 2. — P. 285−293.
  134. Nick, K. Gas chromatographic determination of nitrophenols after derivativa-tion with diazomethane / K. Nick, H.F. Ycholler // Fresenius J. Anal. Chem. -1992. Vol. 343, № 3. — P. 304−307.
  135. Nishikova, Y. Determination of nitrobenzenes in river, water, sediment and fish samples by gas chromatography-mass spectrometry / Y. Nishikova, T. Okumura //J. Anal. Chem. Acta. 1995. — Vol. 312, № 1. — p. 45−55.
  136. Patil, S.F. Thermal desorption-gas chromatography for the determination of benzene, aniline, nitrobenzene and chlorobenzene in workplace air / S.F. Patil // J. Chromatogr. 1992. — Vol. 600, № 2. — P. 344−351.
  137. Patil, S.S. Gas chromatographic studies on the biodegradation of nitrobenzene and 2,4-dinitrophenolin the nitrobenzene plant wastewater / S.S. Patil, V.M. Shinde // J. Environ. Pol lut. 1989. — Vol. 57, № 3. — P. 235−250.
  138. Patil, Y.Y. Shimulfaneous gas chromatographic determination of nitrobenzene and 2,4-dinitrophenol in nitrobenzene manufacturing plant wastewater / Y.Y. Patil, V.M. Shinde // J. Anal. Lett. 1988. — Vol. 21, № 8. — P. 1397−1408.
  139. Rafii, F. Reduction of Azo Dyes and nitroaromatic compounds by bacterial enzymes from the human intestinal tract / F. Rafii, C.E. Cerniglia // J. Environmental Health Perspectives 1995. — Vol. 21, № 103. — P. 17−19.
  140. Rahim, S.A. Spectrophotometric determination of aniline in aqueous solutions by aro-dye formation with diazotired p-nitroaniline / S.A. Rahim, N.D. Ismail, S.A. Bashir//J. Mikrochim. acta. 1987. — Vol. 3, № 5−6. — P. 417−423.
  141. Reeves, J.B. Nitrobenzene oxidation vs pyrolysis-gas chromatography mass-spectrometry as a means to determine lignin composition / J.B. Reeves, G.C. Galetti // J. Anal, and Appl. Pyrol. 1993. — Vol. 27, № 1. — P. 195−207.
  142. Riggin, R.M. Determination of aniline and substituted derivatives in wastewater by gas and liquid chromatography / R.M. Riggin, T.F. Cole, B.C. Stephen // J. Anal. Chem.- 1983. -Vol. 55, № 12.-P. 1862−1869.
  143. Sancher, J.A. The investigation of coating materials for the detection of nitrobenzene with coated quartz piezoelectriccrystals / J.A. Sancher, P.K. Drew, J.F. Alder//J. Anal. Chem. acta. 1986. — Vol. 182,№ 3.-P. 285−291.
  144. Santos-Delgado, M.J. Shimulfaneous determination of o- and n-nitrophenol by doide array spectrophotometry and dirivative techniques / M.J. Santos-Delgado, L.V. Perez-Arribas, M.E. Leon-Gonzalez // Fresenius J. Anal. Chem. 1989. — Vol. 343, № 7.-P. 705.
  145. Scanton, J.J. High-perfomance liquid chromatography of nitrophenols with a swept-potential electrochemical detector / J.J. Scanton, P.A. Flaguer, G.W. Robinson//J. Anal. Chem. acta. 1984. — Vol. 158, № 2.-P. 169−177.
  146. Spectrophotometric determination of aniline by flow injection analysis in a nonagueous medium / C.R. Berman, G.D. Clark, D.A. Whitman, B.D. Christian // J. Microchem. 1989. — Vol. 39, № 1. — P. 20−24.
  147. Study of the aromatic by-products formed from ozonation of anilines in aqueous solution / J. Sarasa, S. Cortes, P. Ormad P et al. // J. Water Res. 2002. — Vol. 36.-№ 12.-P. 3035−3044.
  148. The influence of medication «Cerebral» on T-lymphocytes of asthma patients / L.V. Kuznetsova, O.G. Kuznetsov // 4th Int. Congr. Sona 99 (Dakar, Senegal, 12−16 April, 1999). Dacar, 1999.-P. 30.
  149. Thorburn, B.D. Identification and determination of aromatic intro compounds by electron spin resonance spectrometry / B.D. Thorburn, A.Z. Eltayeb, B.D. Flockhart // J. Anal. Chem. Acta. 1987. — Vol. 200, № 1. — P. 481−490.
  150. Tritz, Y.I. Titration of phenols in nonaqueous solvents / Y.I. Tritz, R.T. Kenn // J. Anal. Chem.- 1993.-Vol. 65, № 5. P. 179−181.
  151. Verma, K.K. Detection of nitrobenzene and related aromatics by reduction and indophenol formation / K.K. Verma, D.D. Gupta // J. Anal. Chem. acta. 1987. -Vol. 199, № 3.-P. 233−236.
  152. Xiong, H. Brainderived peptides are inhibited transynaptic transmission by GABA- В receptors in CAI region of rat hippocampal slices / H. Hiong, A. Baskys, J.M. Woitowicz // J. Brain Res. 1996. — Vol. 737, № 7. — P. 188−194.
  153. Zhuang, H. Determination of volatile phenols by a flow injection chemilumi-nescent quench method / H. Zhuang, F. Zhang, Q. Wang // J. Analyst. 1995. -Vol. 120, № l.-P. 121−124.
  154. Zissi, U. Biodegradation of p-aminoazzobenzene by Bacillus Subtilis under aerobic conditions / U. Zissi, G. Liberatos, S. Pavlou // J. Industr. Microbiol. Biotech.- 1996.-Vol. 19, № l.-P. 49−55.
  155. Zuman, P. Reaction of electrogenerated arylhydroxylamines and nitrosoben-zene in the course freduction of nitrobenzene under conditions of cyclic volt-ammetry / P. Zuman, Z. Figalek // J. Electronal. Chem. 1990. — Vol. 296, № 2. -P. 589−593.
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?