Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Разработка методологии многопрофильного выявления антител к возбудителям инфекционных заболеваний перинатального периода на основе белковых матриц

Диссертация: Разработка методологии многопрофильного выявления антител к возбудителям инфекционных заболеваний перинатального периода на основе белковых матриц
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Настоящая работа направлена на реализацию нового подхода к диагностике, основанного на применении белковых матриц, позволяющих одновременно выявлять в крови пациента специфические антитела к нескольким патогенным микроорганизмам. Основное достоинство такого подхода в том, что пациент в одном анализе может быть обследован на наличие нескольких инфекций, вызывающих сходные симптомы заболевания… Читать ещё >

Содержание

  • Список использованных сокращений

Глава 1. ИНФЕКЦИИ ПЕРИНАТАЛЬНОГО ПЕРИОДА И ПОДХОДЫ К ИХ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ (Литературный обзор).

1.1. Особенности инфекционных заболеваний перинатального периода и j ^ их диагностики.

1.1.1. Токсоплазмоз.

1.1.2. Краснуха.

1.1.3. Инфекция, вызванная вирусами простого герпеса.

1.1.4. Цитомегаловирусная инфекция.

1.1.5. Хламидиоз.

1.1.6. Микоплазмоз.

1.1.7. Сифилис.

1.2. Многопрофильный иммуноанализ, как альтернативный подход к диагностике инфекционных заболеваний.

1.3. Виды, форматы и дизайн белковых микроматриц.

1.4. Материалы, используемые в качестве твёрдой фазы.

1.5. Методы иммобилизации биомолекул на поверхности твёрдой фазы.

1.6. Методы регистрации иммунологического связывания.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Материалы.

2.2. Методы.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУВДЕНИЕ.

3.1. Выбор формата белковой матрицы.

3.2. Выбор и исследование целевых свойств материалов для подложки матрицы.

3.3. Сравнительная оценка способов подготовки поверхности носителя.

3.4. Выбор номенклатуры матрицы (подбор антигенов).

3.5. Выбор способа и условий иммобилизации антигенов на подложке.

3.6. Выбор стратегии генерирования сигнала.

3.7. Оптимизация состава и условий применения физического проявителя.

3.8. Отработка схемы и условий многопрофильного анализа.

3.9.Лабораторные испытания прототипа тест-системы для многопрофильного анализа.

3.10. Концепция набора для многопрофильного анализа.

Разработка методологии многопрофильного выявления антител к возбудителям инфекционных заболеваний перинатального периода на основе белковых матриц (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность темы

.

Одним из основных способов диагностики и дифференциации инфекционных заболеваний является серологическое обследование пациентов с целью выявления маркеров (антител классов IgG и IgM) к отдельным возбудителям. При смешанных инфекциях, когда организм поражается сразу несколькими возбудителями, а также для дифференциации заболеваний, имеющих сходную клиническую картину, часто необходимо выполнение нескольких иммунологических тестов. В настоящее время такое обследование проводится при помощи моноспецифических тест-систем.

Многопрофильная иммунодиагностика — новое направление, предполагающее использование устройств, так называемых «белковых матриц» (protein arrays), позволяющих одновременно определять в исследуемом образце множество различных антител. Часто такие матрицы называют «белковыми чипами» или «иммуночипами». Одним из факторов, тормозящим развитие многопрофильной иммунодиагностики, является разнообразие существующих антигенов, для работы с которыми часто требуется подбор индивидуальных условий. Успехи последних лет в развитии иммунохимии, в частности получение рекомбинантных антигенов, а также разработка эффективных способов наработки, выделения и очистки натуральных белков, позволяют в значительной степени унифицировать их свойства и сделать возможным их совместное использование в многопрофильном анализе.

Белковая матрица для многопрофильного анализа антител представляет собой плотную подложку, на поверхности которой дискретно нанесены в определенном порядке антигены различных возбудителей инфекционных заболеваний. Результаты после выполнения дот-иммуноанализа на матрицах расшифровываются по наличию сигнала в точно пространственно определенных зонах нанесения антигенов. Белковые матрицы имеют большой потенциал, как универсальные инструменты в биомедицинских исследованиях и клинической медицине (Cahill D.J., 2001). Большинство предлагаемых устройств подобного рода предполагают размещение больших библиотек различных антигенов на миниатюрных подложках, роботизацию процесса изготовления и применения матриц (Ekins R.P., 1998; Kodadek Т., 2001; Nielsen U. et all., 2004; Templin M. et all., 2002). Такой подход требует новых дорогостоящих технологий, материалов, оборудования и поэтому в широкой клинической практике пока не используется. По мнению D.J.Cahill (2001), применение этих новых технологий в академических исследованиях должно возрасти в ближайшие 3−5 лет, однако, их внедрение в клиническую диагностику и лечение произойдёт в более отдаленном будущем.

Одной из наиболее перспективных областей применения белковых матриц в практической медицине является комплексное обследование беременных женщин и новорождённых детей на наличие у них спектра сывороточных антител к инфекционным заболеваниям, негативно влияющим на здоровье матери и ребенка. Большинство заболеваний перинатального периода характеризуются широким распространением среди населения разных регионов мира, множественностью путей заражения, частым сочетанием двух и более возбудителей, взаимно усиливающих патогенность, а также скудностью и неспецифичностью клинической симптоматики (Boyer S.G., 2004; Vivarelli R., 2001). Поэтому для достоверной диагностики таких заболеваний требуется дополнительное лабораторное обследование. Одним из наиболее оправданных подходов является проведение комплексного серологического обследования.

Для проведения такого обследования необходима постановка ряда анализов на моноспецифических тест-системах, поэтому оно представляет собой длительную, трудоёмкую и дорогостоящую процедуру. Следует отметить, что для выполнения иммунофермеитных анализов требуется специальная дорогая аппаратура и высокая квалификация персонала. В настоящее время такое обследование проводится только в крупных, как правило, городских учреждениях здравоохранения. Оперативная доставка образцов из отдаленных населенных пунктов, особенно в условиях сибирского бездорожья, представляет большую трудность. Поэтому, значительная часть населения фактически лишена возможности серологического обследования с целью выявления инфекционной угрозы и своевременной ее ликвидации.

Таким образом, создание недорогого и простого в исполнении многопрофильного серологического теста, позволяющего оперативно проводить комплексное серологическое обследование беременных женщин, в том числе и в условиях слабо оснащенных сельских медицинских пунктов, позволит сделать такое обследование более доступным, массовым, своевременным и эффективным. 7.

Усовершенствование диагностики инфекций перинатального периода является важной социальной задачей, поскольку напрямую связано со здоровьем рождающихся детей и в перспективе определяет здоровье населения страны.

Цель и задачи исследования

.

Целью исследования является разработка подходов и методических приёмов для изготовления и применения многопрофильного теста, позволяющего осуществлять комплексное обследование беременных женщин и новорожденных детей на наличие у них спектра сывороточных антител класса IgG к возбудителям инфекционных заболеваний перинатального периода.

Поставленная цель подразумевает решение следующих задач:

— выбор формата и общей стратегии многопрофильного теста;

— оценку целевых свойств материалов для изготовления подложки (твердой фазы);

— подбор антигенов по номенклатуре теста и создание прототипа белковой матрицы;

— отработку способа и условий иммобилизации антигенов на твердой фазе;

— оценку способов получения и усиления визуального сигнала;

— отработку схемы и условий проведения многопрофильного анализа;

— создание и лабораторные испытания прототипа многопрофильного теста.

Научная новизна и практическая ценность работы.

— Обоснован выбор формата белковой матрицы и общей стратегии бесприборного многопрофильного анализа антител.

— Проведена экспериментальная оценка целевых свойств материалов для изготовления подложки белковой матрицы.

— Из числа коммерчески доступных антигенов отобраны антигены пригодные для использования в многопрофильном тесте. Создан прототип белковой матрицы.

— Экспериментально подобраны условия подготовки поверхности твердой фазы и иммобилизации на ней антигенов.

— Проведена сравнительная экспериментальная оценка наиболее перспективных вариантов хромогенной визуализации и усиления сигнала.

— Отработана общая схема и оптимизированы условия выполнения многопрофильного теста с использованием конъюгатов на основе коллоидного золота и усилением сигнала серебряным проявлением.

— Сконструирован и испытан прототип белковой матрицы для одновременного выявления антител класса IgG к 8 возбудителям инфекций перинатального периода.

— Проведены лабораторные испытания прототипа многопрофильного теста.

— Разработана концепция набора для многопрофильного анализа, получен Патент РФ на «Набор для многопрофильного анализа сыворотки крови с целью одновременного выявления специфических антител к возбудителям TORCH-инфекций методом дот-иммуноанализа» .

Работа выполнена в течение 2002;2006 гг. В 2005 г работа проводилась при финансовой поддержке Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере (Проект № 5028 «Разработка технологии автоматизированного производства биочипов и создание прототипа тест-системы «).

Все экспериментальные работы осуществлялись в рамках научно-исследовательского проекта «Изучение динамики гуморального иммунитета при сифилитической инфекции и отработка новых методов иммуноанализа», утвержденного Этическим комитетом ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» 19.09.2002 г.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Теоретическое и экспериментальное обоснование выбора формата белковой матрицы и общей стратегии бесприборного многопрофильного анализа антител.

2. Экспериментальное обоснование выбора материала для изготовления подложки белковой матрицы.

3. Методология изготовления белковой матрицы.

4. Методология проведения многопрофильного дот-иммуноанализа с применением конъюгатов на основе коллоидного золота и усилением сигнала серебряным проявлением.

5. Концепция набора для многопрофильного анализа сыворотки крови с целью одновременного выявления специфических антител класса IgG к 9 возбудителям инфекций перинатального периода методом дот-иммуноанализа.

Конкретное участие автора в получении результатов.

Вклад автора в представленные результаты заключается в личном участии во всех теоретических и экспериментальных исследованиях, обработке результатов и формулировании выводов. Все работы выполнены под руководством и в соавторстве с А. Г. Полтавченко. Часть исследований выполнена в соавторстве с О. И. Серпинским, Б. Н. Зайцевым, II.H. Карпышевым, З. А. Акименко, Н. А. Кривенчуком, П. В. Филатовым и А. Н. Рыбаковым. Всем, принимавшим участие в данной работе, автор выражает искреннюю признательность. За помощь в оформлении работы автор благодарит Е. М. Малкову, П. А Белавина, М. А. Суслопарова, 3. А. Акименко.

Апробация работы и публикации.

Материалы диссертации представлены на следующих конференциях:

1. Полтавченко А. Г., Яковченко A.M., Кривенчук Н. А., Серпинский О. И. «Иммуночипы для диагностики TORCH — инфекций» // Междисциплинарный семинар: «Микробициды для здоровья и репродукции человека, медико-социальные проблемы сексуально передаваемых инфекций», и международная научная конференция «Актуальные вирусные инфекции — теоретические и практические аспекты» (Санкт-Петербург, 2−5 ноября 2004 года).

2. Полтавченко А. Г., Кривенчук Н. А., Рыбаков А. Н., Филатов П. В., Яковченко A.M. «Панель сывороток с нормированным содержанием антител класса IgG к антигенам р17 и р41 Treponema pallidum» // Междисциплинарный семинар: «Микробициды для здоровья и репродукции человека, медико-социальные проблемы сексуально передаваемых инфекций», и международная научная конференция «Актуальные вирусные инфекции — теоретические и практические аспекты» (Санкт-Петербург, 2−5 ноября 2004 года).

3. Яковченко A.M., Полтавченко А. Г., Кривенчук Н. А, Серпинский О. И. «Использование серебра в многопрофильной иммунодиагностике инфекционных заболеваний» // Научно-практическая конференция с международным участием.

Серебро и висмут в медицине" (Новосибирск, 25−26 февраля 2005 года).

4. Полтавченко А. Г., Яковченко A.M. «Многопрофильная иммунодиагностика инфекционных заболеваний» // Международная конференция «Профилактика, диагностика и лечение инфекционных болезней, общих для людей и животных» (Ульяновск, 21 -23 июня 2006 года).

5. Яковченко A.M., Полтавченко А. Г. «Многопрофильная серодиагностика инфекционных заболеваний» // III Российская научная конференция с международным участием «Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера» (Новосибирск 27−29 сентября 2006 года).

По материалам исследований опубликованы статьи:

1. Полтавченко А. Г., Яковченко A.M., Кривенчук Н. А. Многопрофильная иммунохимическая индикация возбудителей инфекционных заболеваний // Клиническая лабораторная диагностика. — 2006. — № 5. — С. 39−42.

2. Полтавченко А. Г., Яковченко A.M., Кривенчук Н. А., Зайцев Б. Н. Многопрофильная серодиагностика инфекционных заболеваний. 1. Выбор формата белковых чипов и материала для изготовления подложки // Биотехнология. — 2006. — № 5. — С. 77−87.

3. Полтавченко А. Г., Яковченко A.M., Кривенчук Н. А. Многопрофильная серодиагностика инфекционных заболеваний. 2. Иммобилизация антигенов на подложке белкового чипа. — Биотехнология // 2007. — № 1. — С. 86−94.

4. Полтавченко А. Г., Яковченко A.M., Кривенчук Н. А., Карпышев Н. Н. Многопрофильная серодиагностика инфекционных заболеваний. 3. Визуализация результатов анализа. — Биотехнология // 2007. — № 2. — С. 63−71.

5. Полтавченко А. Г., Яковченко A.M. Многопрофильная серодиагностика инфекционных заболеваний. 4. Лабораторные испытания многопрофильного теста // Биотехнология. — 2007. — № 3. — С. 88−94.

6. Полтавченко А. Г., Яковченко A.M., Кривенчук Н. А., Рыбаков А. Н. Разработка панели с нормированным содержанием IgG к Treponema pallidum // Вестн. дерматологии и венерологии. — № 3. — С. 5−13.

Получены Патенты РФ:

1. Патент РФ № 2 298 795 / Набор для многопрофильного анализа сыворотки крови с целью одновременного выявления специфических антител к возбудителям TORCH-инфекций методом дот-иммуноанализа // Полтавченко А. Г., Яковченко A.M., Кривенчук Н. А., Серпинский О. И., Лунев М. А. — приоритет от 29.03.2004, опубл. 10.05.2007, Бюл. № 13.

2.. Патент РФ № 2 275 635 / Панель сывороток с нормированным содержанием антител класса IgG к антигенам р17 и р41 Treponema pallidum и способ ее получения // Полтавченко А. Г., Кривенчук Н. А., Рыбаков А. Н., Филатов П. В., Яковченко A.M. — приоритет от 03.06.2004, опубл. 27.04.2006, Бюл. № 12.

Структура и объем диссертации

.

Диссертация изложена на 119 страницах, содержит 11 таблиц и 20 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, выводов и списка литературы.

Список литературы

включает в себя 167 источников, из них 108 иностранных.

выводы.

1. Для реализации многопрофильного иммуноанализа разработан формат теста на плоских белковых матрицах с низкой плотностью нанесения антигенов и хромогенной системой детекции, позволяющий легко контролировать нанесение антигенов на подложку и учитывать результаты визуально.

2. По результатам испытания различных материалов для изготовления подложки белковой матрицы отобрана синтетическая бумага «Polylith» марки «GC», имеющая однородную поверхность и эффективно связывающая антигены после минимальной предварительной обработки.

3. Разработаны способ и условия иммобилизации антигенов на твердой фазефизическая адсорбция в режиме сушки капель (2,5 мкл) сорбционной смеси на поверхности подложки (рН 7,3−8,0, концентрация антигенов 10−20 мкг/мл).

4. Создан прототип белковой матрицы, представляющий собой подложку с дискретно нанесёнными в виде пятен (2−3 мм) антигенами возбудителей перинатальных инфекций (6 рекомбинантных и 2 в виде лизатов натуральных микроорганизмов) и положительным контролем (иммуноглобулины человека). Матрицы сохраняют исходные характеристики при температуре 3−8°С в течение 12 месяцев.

5. Для визуализации иммунологического связывания подобрана хромогенная система с использованием конъюгата на основе коллоидного золота и серебряного проявителя с метолом, обеспечивающая наибольшую чувствительность и контрастность проявления.

6. Отработана общая схема и условия проведения многопрофильного теста. Тест выполняется в 10 шагов при комнатной температуре в течение 60 минут.

7. Разработан прототип теста для многопрофильного анализа, включающий белковые матрицы и все готовые растворы. Лабораторные испытания показали, что многопрофильный анализ на основе белковых матриц может обеспечить чувствительность, специфичность и воспроизводимость, не уступающую серийно выпускаемым моноспецифическим иммуноферментным тестам, при условии подбора качественных антигенов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Хронические инфекционные заболевания широко распространены. Для большинства из них характерны скудная, неспецифичная клиническая манифестация и частое сочетание нескольких возбудителей («микст-инфекции»), делающие невозможной постановку диагноза без дополнительных лабораторных исследований и диктующие необходимость проведения исследований на несколько различных инфекционных агентов. Основным подходом современной медицинской диагностики хронических инфекционных заболеваний человека является серологическое обследование при помощи иммуноферментного анализа (ИФА).

Настоящая работа направлена на реализацию нового подхода к диагностике, основанного на применении белковых матриц, позволяющих одновременно выявлять в крови пациента специфические антитела к нескольким патогенным микроорганизмам. Основное достоинство такого подхода в том, что пациент в одном анализе может быть обследован на наличие нескольких инфекций, вызывающих сходные симптомы заболевания. Принципиально возможно создание матриц, которые могут позволять одновременно проводить анализ на десятки или сотни различных патогенов, однако обычно такой необходимости нет. Более актуально создание матриц по конкретным областям медицинской диагностики. Например, для анализа крови доноров на станциях переливания, определения этиологических факторов аллергических и паразитарных заболеваний, дифференцирования сходных хронических инфекций, эпидемиологического скрининга по определенным группам заболеваний. Перечень нозологических форм обычно укладывается в 8−10 наименований.

В настоящее время диагностических тест-систем на основе белковых матриц нет ни в России, ни за рубежом. Но не возникает сомнений в том, что в ближайшем будущем ситуация изменится. Так в 2006 г. фирма Bio-Rad (США) предприняла попытку внедрения на рынок медицинских услуг тест-системы на основе суспензионной белковой матрицы для дифференциации 6 аутоиммунных заболеваний. Этой и другими иностранными фирмами интенсивно разрабатываются многопрофильные тест-системы для контроля инфекционных заболеваний.

Целью настоящей работы являлось создание методологии изготовления и применения белковых матриц для многопрофильного серологического обследования беременных женщин на наличие инфекционных заболеваний, негативно влияющих на здоровье матери и плода. Основаниями для выбора такой номенклатуры белковой матрицы послужили:

— высокая социальная значимость качественной и широкой диагностики перинатальных инфекций, во многом определяющей здоровье детей нашей страны;

— потребность медицинских учреждений в такой тест-системе;

— доступность антигенов приемлемого качества для изготовления матриц;

— доступность моноспецифических ИФ тест-систем для сравнительного анализа показателей многопрофильного теста;

— доступность стандартных или рабочих панелей сывороток для первичной аттестации тест-системы.

При выборе формата и общей стратегии многопрофильного теста наиболее простым и перспективным для быстрого внедрения в клиническую практику нами признан анализ антител на плоских белковых матрицах с низкой плотностью нанесеиия антигенов и хромогенной детекцией иммунологического сигнала.

Изучены целевые свойства большого перечня листовых материалов, потенциально пригодных для изготовления белковой матрицы. Установлено, что приемлемым вариантом материала подложки может служить листовой белый полистирол, однако для улучшения его сорбционных свойств необходимо удаление поверхностного слоя материала, что значительно усложняет технологию изготовления матриц. В качестве лучшего материала для адсорбционной иммобилизации антигенов отобрана синтетическая бумага «Polylith» марки «GC». Этот носитель имеет однородную поверхность, эффективно связывающую антигены после минимальной предварительной обработки — отмывка раствором детергента (SDS) с последующим ополаскиванием дистиллированной водой. Прочная иммобилизация белков на таком материале достигается методом физической адсорбции при сушке нанесенных капель сорбционной смеси, что значительно упрощает технологию изготовления матриц. Наиболее эффективное связывание около 20 нг белка на пятно диаметром 2−3 мм) на синтетической бумаге достигается при сорбции антигенов из 0,01 М боратного буфера, рН 7,3−8,0. Автоматизированное нанесение антигенов на подложку матрицы с удовлетворительным качеством и скоростью может быть достигнуто при использовании перьевого планшетного плоттера, управляемого компьютером.

Проведено сравнительное исследование доступных хромогенных систем генерирования иммунологического сигнала. Наиболее пригодной для визуализации результатов многопрофильного анализа признана система с использованием в качестве метки конъюгата — коллоидного золота и в качестве субстрата — физического проявителя на основе метола. Эта относительно недорогая система позволяет эффективно выявлять в образце весь спектр антител и генерирует контрастные сигналы, легко оцениваемые визуально. Отработана схема комплектации тест-систем проявителем, предусматривающая наличие двух компонентов: жидкого — 10%-ного раствора нитрата серебра и сухого — смеси цитратного буфера и метола. Дозировка сухого компонента с погрешностью не более 8% может быть осуществлена путем получения тритурационных таблеток с массой 12 мг, достаточных для приготовления 1 мл физического проявителя.

Проведена сравнительная оценка целевых свойств коммерчески доступных вариантов антигенов возбудителей перинатальных инфекций. Для изготовления прототипа матрицы отобраны 6 рекомбинантных (Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Rubella virus, Treponema pallidum, Cytomegalovirus, Herpes simplex virus-1) и 2 натуральных {Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealytica) антигенов. С использованием для автоматической распечатки антигенов перьевого планшетного плоттера изготовлены прототипы белковых матриц, несущие на себе 8 вышеуказанных антигенов, а также положительный контроль (IgG-Hum).

Отработана общая схема и условия проведения многопрофильного теста. Создан прототип тест-системы, включающий белковые матрицы и необходимые рабочие и отмывочные растворы.

Лабораторные испытания прототипа с использованием доступных панелей сывороток и иммунопероксидазных моноспецифических тест-систем отечественных и зарубежных производителей показали, что многопрофильный анализ антител на основе белковых матриц может обеспечивать высокие показатели чувствительности, специфичности и воспроизводимости, не уступающие показателям моноспецифических иммуноферментных тест-систем. Основным условием обеспечения хорошего качества многопрофильного теста является использование при изготовлении белковых матриц высокоспецифичных и высокоочищеиных антигенов.

Описанная методология изготовления белковых матриц проста, позволяет получать воспроизводимые результаты и обеспечивает стабильность характеристик матриц при длительном хранении, в том числе и при повышенных температурах.

Разработана концепция набора для многопрофильного выявления перинатальных инфекций, предусматривающая выполнение серийных и индивидуальных анализов. Такой набор должен включать гребенку с десятью зубцами, каждый из которых является белковой матрицей, а также многоячеечную ванну, заполненную готовыми рабочими и отмывочными растворами и запаянную фольгой. Выполнение анализа в таком наборе заключается во внесении исследуемых образцов в ячейки первого ряда и, затем, последовательную инкубацию зубцов гребенки (или ее части по числу образцов) в ячейках. После выемки из последнего ряда результаты учитываются визуально по наличию на матрицах темных пятен в местах нанесения соответствующих антигенов.

Внедрение такого теста в практику позволит сделать обследование пациентов существенно более дешевым, простым, быстрым, а, следовательно, более доступным и массовым. Один анализ в многопрофильной тест-системе эквивалентен нескольким анализам в современных моноспецифических диагностических наборах. В то же время, по предварительным оценкам, себестоимость этих анализов близка. Таким образом, внедрение теста па белковых матрицах в широкую практику может дать значительный экономический эффект, складывающийся за счет низкой себестоимости систем, сокращения трудозатрат на выполнение анализа и снижения затрат на приборное обеспечение. Простота выполнения анализа, полная комплектация набора и возможность визуального учета результатов позволят использовать такие тест-системы в скудно оснащенных лабораториях низшего звена здравоохранения (районные и сельские лечебные учреждения) и во внелабораторных условиях.

На основе описанных в настоящей работе методических решений могут быть созданы белковые матрицы с различным набором специфичности (для выявления паразитарных заболеваний, для дифференциации аллергических состояний, для контроля переливаемой крови и т. п.).

Таким образом, настоящая работа направлена на отработку методологии нового поколения диагностических систем, позволяющих одновременно, просто и дешево выявлять и дифференцировать большое число инфекционных заболеваний, имеющих сходную или скудную симптоматику. Такие системы могут найти применение не только в медицине, но и в ветеринарии, в экологических исследованиях и научных экспериментах.

Показать весь текст

Список литературы

  1. В.П. Заболевания, передаваемые половым путем. Витебск 1996.- 145 с.
  2. В.А. Проблемы и новые направления в диагностике инфекционных заболеваний у детей / В. А. Анохин, Г. Р. Хасапова // Росс, педиатр, журнал. 2000. -№ 4.-С. 32−38.
  3. Г. Б. Особенности течения беременности и родов у женщин с генитальным герпесом: Дис. канд. мед. наук. М, 1992.
  4. В.В. Токсоплазмоз: современные научно-практические подходы // Вестник инфектологии и паразитологии. 2001 // http://www.infectologv.spb.ru.
  5. В.В. Приобретенный токсоплазмоз у лиц молодого возраста: патогенез, диагностика, лечение и военно-врачебная экспертиза: Автореф. дис.. д-ра мед. наук. СПб., 2002.
  6. Н.Н., Антонов А. Г., Базарова М. В. Протоколы диагностики, лечения и профилактики внутриутробных инфекций у новорождённых детей. -М., 2001.
  7. Гайдамовичене J1.M., Йоцявичене А. П. Поражение нервной системы при токсоплазмозе. Вильнюс: Мокслас, 1989. — 123 с.
  8. А.А., Сиволобова Г. Ф., Кочнева Г. В., Урманов И. Х. Клонирование и экспрессия в E.coli основных антигенов Treponema pallidum и исследование их иммунохимических свойств // Иммунология.- 1998. № 4.- С. 7−11.
  9. .Л., Анкирская Л. С., Ванько Л. В. Бубнова Н.И. Внутриутробные бактериальные и вирусные инфекции плода и новорожденного // Акушерство и гинекология. 1994. — № 4. — С. 20−26.
  10. Т.Х. Теория фотографического процесса: Пер. с англ. / Под ред. А. Л. Картужанского. Л.: Химия, 1980. — С. 384−392.
  11. Диагностика и лечение внутриутробных инфекций // Метод, рекоменд. для врачей-неонатологов / Под. ред. Володина Н. Н., Дегтярева Д. Н. М., 1998.
  12. Т.Н., Черешнев В. А., Долгих Д. В., Гашина Е. А. Клинико-лабораторные аспекты цитомегаловирусной инфекции у детей раннего возраста // Педиатрия. -2001.-№ 5.-С. 43−46.
  13. Т.Н. Клинико-лабораторные аспекты инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 2-го типа, у детей первого года жизни // Педиатрия. 2003. — № 3.1. С. 14−18.
  14. А.А., Симакова Н. Г., Смирнова B.C. Этиология и патогенез внутриутробной инфекции // Акушерство и гинекология. 1995. — № 6. — С. 9−12.
  15. И.И., Кошелева Н. Г., Башлякова М. М. Хламидийная инфекция в акушерстве и перинатологии. С-Петербург., 1995.
  16. A.M. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высшая Школа, 1991.
  17. А.П. Токсоплазмоз. JL: Медицина, 1985. — 168 с.
  18. Н.В. Цитомегаловирусная инфекция— типичный представитель оппортунистических инфекций // Рос. мед. Вести. 1997. — № 2. — С. 34−38.
  19. Козлова J1.B., Иванян А. Н., Грибко Т. В. и др. Диагностика, профилактика и лечение внутриутробных инфекционных заболеваний. Смоленск, 1997.
  20. Королева J1.M. Роль факторов гуморального иммунитета в развитии перинатальной патологии при беременности, осложненной генитальным хламидиозом // Росс, вестн. перинатол. педиатр. 2000. — № 5. — С. 15−19.
  21. В.Г. Инфекция в акушерстве // Сборник научных трудов.- М., 1995.
  22. Н.И., Зубков В. В., Помелова В. Г., Ванько J1.B. Клинико-диагностическая характеристика пневмонии у новорожденных при герпетических инфекциях//Педиатрия.-2001. -№ 3.-С. 8−13.
  23. В.Н. Влияние цитомегаловирусной инфекции на течение беременности и здоровье новорожденных // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. -2003. № 2. — С. 30−32.
  24. Ю.В. Токсоплазмоз человека: достижения, проблемы и перспективы // Инфекционные болезни. 2003. — № 1. — С. 52−57.
  25. И.Б. Оптимизация тактики лечения беременных с рецидивирующей герпетической инфекцией и клинико-иммунологическая характеристика новорожденных // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2003. — № 1.-С. 36−39.
  26. Марченко Jl.A. Materia Medica // Бюллетень для врачей и фармацевтов. 1996. — № 10.-С. 53−73.
  27. А.Д. Биочипы в биологии и медицине 20го века. Выступление на научной сессии общего собрания РАН // Вестник российской академии наук. 2003. -№ 5.-С. 412.
  28. В. JI. Основы сканирующей зондовой микроскопии. Нижний Новгород, 2004.
  29. Михайличенко ВВ, Есипов АС. Дискуссия: диагностика и лечение хламидиоза // Terra Medica nova. 2000. — № 2. — С. 1−10.
  30. Неонатология / под ред. Е. П. Сушко, В. И. Новикова, Л. М. Тупкова и др. Минск: Выш.шк., 1998.-416 с.
  31. А.П., Асцатурова О. Р. Генитальный герпес и беременность // Акушерство и гинекология. 1997. -№ 1.- С. 11−13.
  32. Л.Л., Талалаев А. Г., Каск Л. Н. Значение различных вирусных инфекций в невынашивании, мертворождении, перинатальной и младенческой смерти // Педиатрия. 1999. -№ 1. — С. 1−10.
  33. Л.Л. Врожденные вирусные инфекции и маловесные дети // Вопросы современной педиатрии. 2002. — № 4. — С. 9−13.
  34. Новые методы иммуноанализа / Под ред. W.P. Collins. М.: Мир, 1991. — 280 с.
  35. А.П., Чепурченко Н.В, Фриго Н. В., Никулин Н. К., Комарова В. Д Сифилис: лабораторная диагностика и материалы. Нижний Новгород, 2003.
  36. Д.Ю. Бронхолегочная дисплазия у детей // Педиатрия. 2004. — № 1. -С. 91−94.
  37. Г., Рочестер К. Адсорбция из растворов на поверхностях твердых тел: Пер. с англ. / Под ред. В. И. Лыгина.- М.: Мир. 1986. — 488 с.
  38. Патент РФ N 2 133 469 МПК 6 G 01N 33/553 Маркер для поверхностного блот-иммунологического и гибридизационного анализов на пористых носителях / Полтавченко А. Г., Серпинский О. И. // Бюл. изобретений. 1999. — № 20.
  39. Патент РФ № 202 129 206 Изделие и способ для многопараметрическогоиммуноанализа сывороток / Полтавченко А. Г., Серпинский О. И., Карпышев H.II. // Бюл. изобретений. 2004. — № 35.
  40. Н.А., Нефедова Н. К., Федоров Г. Н., Тихонов В. Г. Клинические особенности течения хламидийной инфекции у детей 1-го года жизни // Росс, педиатр, журнал. 2001. — № 3. — С. 49−50.
  41. В.И., Позднев O.K. Медицинская микробиология. М., 1998. — с. 659 667.
  42. А.Г., Караваев B.C., Тузиков Ф. В. Использование золей серебра как маркеров иммуноанализа на микротитровальных планшетах // ЖМЭИ. 1998.- № 2. -С. 108−111.
  43. А.Г., Полтавченко Д. А., Загоскина Т. Ю. Проявление золей серебра в микротитровальных планшетах // Сибирь-Восток. 2002. — т. 9. — № 57. — С. 7−9.
  44. А.Г., Рыбаков А. Н., Надточий О. И. Изучение гуморального иммунного ответа на белки р17, р41 и р47 Treponema pallidum на ранних стадиях сифилиса //ЖМЭИ. 2004. — № 3. — С. 52−57.
  45. Протоколы диагностики, лечения и профилактики внутриутробных инфекций у новорожденных детей. МЗ РФ, 2001. — 94 с.
  46. Г. А., Буслаева Г. Н., Монхе П. С., Непокульчицкая Н. В. Гематологические и иммунологические показатели при внутриутробных инфекциях // Педиатрия. 1997. — № 4.- С. 59−62.
  47. В.В., Лаврентьева И. Н., Таточенко В. К. Краснуха. Пермь — СПб -М., 2002.-175 с.
  48. С.В., Белавин П. А., Бабкина И. Н., Максютов А. З., Вяткина Т. Г., Баранова С. Г. Получение рекомбинантных антигенов Treponema pallidum и их применение в иммуноферментной диагностике сифилиса // Вестник дерматол. и венерол. 2000. -№ 2. — С. 5−8.
  49. И.С. Внутриутробные инфекции: хламидиоз, микоплазмоз, герпес, цитомегалия / И. С. Сидорова, И. Н. Черниенко // Росс, вестн. перинатол. педиатр. -1998.-№ 3.-С. 7−13.
  50. Р.К. Методы очистки белков: Пер. с англ. М.: Мир. — 1985. — 358 с.
  51. Н.В. Поражение нервной системы при врожденных инфекциях.
  52. Методические рекомендации. СПб, 2003. — С. 5−7.
  53. И. М., Плясунов И. В., Сафронов П. Ф., Бахтина М. М. Разработка и получение рекомбинантного антигена gD вируса простого герпеса 1-ГО типа (HSV-1) // Мол. генетика, микробиология и вирусология. 2001.- № 2. — С. 34−37.
  54. Технология лекарственных форм / Под ред. JI.A. Ивановой. М.: Медицина, 1991.т. 2.-201 с.
  55. А.В. Значение инфекционных заболеваний плода и новорожденного в перинатальной патологии // Вопр. охр. мат. 1988. — № 4. — С. 34−38.
  56. А. В. Современные инфекции. М., 1987.
  57. А.В. Хламидиозы: диагностика, роль в патологии человека // Арх. патол.- 1989.- № 1.-С. 3−9.
  58. А. В., Мельникова В. Ф. Перинатальные инфекции // Вопросы патогенеза, морфологической диагностики и клинико-морфологических сопоставлений: Руководство для врачей. СПб.: Элби — СПб, 2002. — 352 с.
  59. Н.П. Проблемы классификации внутриутробных инфекций // Педиатрия.- 2000. № 1.-С. 87−91.
  60. Afanassiev, V., Hanemann, V., Wolfl, S. Preparation of DNA and protein micro arrays on glass slides coated with an agarose film // Nucleic Acids Res. 2000. — Vol. 28.- № 12. -P. 1−5.
  61. Alexandre I., Hamels S., Dufour S., Collet J., Zammatteo N., De Longueville F., Gala
  62. J. L., Remacle J. Colorimetric Silver Detection of DNA Microarrays // Anal. Biochem.2001.-Vol. 295. -№i. P. 1−8.
  63. Alford C.A. et al. Congenital and perinatal cytomegalovirus infection // Rev. Infect. Dis.- 1990. Vol. 12. — № 7. — P. 745 — 753.
  64. Angenendt P, Glokler J, Murphy D, Lehrach H, Cahill D.J. Toward optimized antibody microarrays: a comparison of current microarray support materials // Anal. Biochem.2002. Vol. 309. — № 2. — P. 253−260.
  65. Angenendt P. Progress in protein and antibody microarray technology // Drug Discov. Today. 2005. — Vol. 10. — № 7. — P. 503−511.
  66. Arenkov P., Kukhtin A., Gemmell A., Voloshchuk S., Chupeeva V., Mirzabekov A. Protein microchips: use for immunoassay and enzymatic reactions // Anal. Biochem. -2000.-Vol. 278.-№ 2.- P. 123−131.
  67. Atreya C.D. Rubella virus and birth defects: molecular insights into the viral teratogenesis at the cellular level // Birth Defects Research (Part A): Clinical and Molecular Teratology. 2004. — Vol. 70. — P. 431−437.
  68. Bacarese-Hamilton Т., Gray J., Ardizzoni, A., Frisanti A. Allergen microarrays // Methods Mol. Med. 2005. — Vol. 114.- P. 195−207.
  69. Baker D.A. Herpes simplex virus infections // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 1992. -Vol. 4.-P. 676−681.
  70. Beksac S. M. et al. Prenatal diagnosis of intrauterine cytomegalovirus infection in a fetus with non-immune hydrops fetalis // Am. J. Obstet. Gynecol. 2001. — Vol. 80. -P. 762−765.
  71. Bhattacharya R., Bhattacharya D., Dhar Т.К. A novel signal amplification technology based on catalyzed reporter deposition and its application in a Dot-ELISA with ultra high sensitivity // Immunol. Meth. 1999. — Vol. 227. — P. 31−39.
  72. Biagini R. et al. Method for simultaneous measurement of antibodies to 23 pnumococcal capsular polysaccharides // Clin. Diagn. Lab.Immunol. 2003. — Vol. 10.- P. 744−750.
  73. Binnig G., Quate C.F., Gerber C. Atomic force microscope // Phys. Rev. Lett. 1986. -Vol. 56. — № 9. p. 930−933.
  74. Blackburn J.M., Hart D.J. Fabrication of protein function microarrays for systems-oriented proteomic analysis // Methods Mol. Biol. 2005. — Vol. 310. — P. 197−21.
  75. Blanco D.R., Miller J.N., Lovett M.A. Surface antigens of the Syphilis Spirocheate and their potential as virulence determinants // Emery Infect Dis. -1997.- Vol. 3. № 1. — P. 1120.
  76. Bobrow M.N., Shaughnessy K.J., Litt G.J. Catalyzed reporter deposition, a novel method of signal amplification: Application to membrane immunoassays // J. Immunol. Meth. -1991.-Vol. 137.-P. 103.
  77. Bora U., Chugh L., Nahar P. Covalent immobilization of proteins onto photoactivatedpolystyrene mierotiter plates for enzyme-linked immunosorbent assay procedures // J. Immunol. Meth. 2002. — Vol. 268. — P. 171- 177.
  78. Boyer S. G., Boyer К. M. Update on TORCH infections in the newborn infant // Newborn and Infant Nursing Reviews. 2004. — Vol. 4. — № 1. -P. 70−80.
  79. Braeckmans K., De Smedt S.C., Leblans M., Pauwels R., Demeester J. Encoding microcarriers: present and future technologies // Nat. Rev. Drug Discov. 2002. — Vol. 1. -№ 6.-P. 447−456.
  80. Cahill D. J. Protein and antibody arrays and their medical applications // J. Immunol. Meth.-2001.-Vol. 250.-P. 81−91.
  81. S.G., Papaioannou S., Ntumazan L.L. // J. Obstet. Gynaec. 1996. — Vol. 103. -№ 1. — P. 54−59.
  82. Castillo-Solorzano C. et al. New horizons in the control of rubella and prevention of congenital rubella syndrome in the Americas // J. Infect. Dis. 2003. — Vol. 187. — № 1. — P. 146−152.
  83. Cha Т., Guo, A., Zhu X.Y. Enzymatic activity on a chip: the critical role of protein orientation // Proteomics. 2005. — Vol. 5. — № 2. — P. 416−419.
  84. Chen G.Y., Uttamchandani M., Zhu Q. et al. Developing a strategy for activity-based detection of enzymes in a protein microarray // Chembiochemistry.- 2003 Vol. 4. — P. 336.
  85. Chiari M., Cretich M., Corti A. et al. Peptide microarrays for the characterization of antigenic regions of human chromogranin A. // Proteomics. 2005. — Vol. 5. -№ 14. — P. 3600−3603.
  86. Chu X., Xiang Z., Fu X. et al. Silver-enhanced colloidal gold metalloimmunoassay for Schistosoma japonicum antibody detection // J. Immunol. Meth. 2005. — Vol. 301. — P. 7788.
  87. Clyne B. Jerrard D. A. Syphilis testing // Journal of Emergency Medicine. 2000. -Vol. 18.- № 3. — P. 361−367.
  88. Cold J.C. Diagnosis disseminated toxoplasmosis // CM&R. — 2005. -Vol.3. — P. 186 187.
  89. Combaret V., Bergeron С., Brejon S. et al. Protein chip array profiling analysis of sera from neuroblastoma patients // Cancer Lett.- 2005. Vol. 228. — № 1. — P. 91−96.
  90. Cretich M., Damin F., Pirri G., Chiari M. Protein and peptide arrays: Recent trends and new directions // Biomolecular Engineering. 2006. — Vol. 23. — P. 77−88.
  91. Delehanty J.B., Ligler F.S. A microarray immunoassay for simultaneous detection of proteins and bacteria //Anal. Chem. 2002. — Vol. 74. — P. 5681.
  92. Dietrich H.R., Knoll J., van den Doel L.R. et al. Nanoarrays: a method for performing enzymatic assays // Anal. Chem. 2004. — Vol. 76. — № 14. — P. 4112−4117.
  93. Dimmock J.E. Intrahepatic bile duct paucity and cytomegalovirus infection // Pediatr. Pathol. 1993. — Vol. 13. — P. 847−852.
  94. Emond R.T.D. Color atlas of infectious disease. London: Mosby-Wolfe, 1995.-439 p.
  95. Ekins R.P., Chu R., Biggart E. The development of microspot, multi-analitical radiometric immunoassay using dual fluorescentlabelled antibodies // Anal Chim Acta. -1990.-Vol. 227.-P. 73−96.
  96. Ekins R.P., Chu F.W. Multianalitical microspot immunoassay-microanalytical «compact disk» of the future // Clin Chem. 1991. -Vol. 37. — P. 1955−67.
  97. Ekins R. P. Ligand assays: from electrophoresis to miniaturized microarrays // Clinical Chemistry. 1998. — Vol. 44. — P. 2015−2030.
  98. Espina V., Woodhouse E.C., Wulfkuhle J. et al. Protein microarray detection strategies: focus on direct detection technologies // J. Immunol. Meth. 2004. — Vol. 290. — P. 121 133.
  99. Esser P. Principles in Adsorption to Polystyrene // Nunc Laboratories. Bulletin № 6 // www.nuncbrand.com.
  100. Fall B.I., Eberlein-Konig В., Behrendt II. et al. Microarrays for the screening of allergenspecific IgE in human serum // Anal. Chem. 2003. — Vol. 75. — P. 556.
  101. Figeys D. Adapting arrays and lab-on-a-chip technology for proteomics // Proteomics. -2002. Vol. 2. — P. 373.
  102. Fowler K.B. Maternal immunity and prevention of congenital cytomegalovirus infection // JAMA. 2003. — Vol. 289. — P. 1008−1011.
  103. Geho D., Lahar N., Gurnani P. et al. Pegylated, steptavidin-conjugated quantum dots are effective detection elements for reverse-phase protein microarrays // Bioconjug. Chem.2005. Vol. 16. — № 3. — p. 559−566.
  104. Haab B.B., Dunham M.J., Brown P.O. Protein microarrays for highly parallel detection and quantitation of specific proteins and antibodies in complex solutions // Genome Biol. -2001.-Vol .2.-№ 2-P. 4.
  105. Hamelinck D., Zhou H" Li L., Verweij C., Dillon D., Feng Z., Costa J., Haab B.B. Optimized normalization for antibody microarrays and application to serum-protein profiling // Mol. Cell. Proteom. 2005. — Vol. 4. — № 6. — P. 773−784.
  106. Holgate C.S., Jackson P.I., Cowen P.N., Bird C.C. Immunogold silver staining: new method of immunostaining with enhanced sensitivity // J. Histochem. Cytochem. — 1983. -Vol. 31.-P. 938−944.
  107. Hsu S.M., Soban E. Color modification of diaminobenzidine (DAB) precipitation by metallic ions and its application for double immunohistochemistry // J. Histochem. Cytochem. 1982. — Vol. 30. — P. 1079.
  108. Huang R.P. Detection of multiple proteins in an antibody-based protein microarray system //J. Immunol. Meth. 2001- Vol. 255. — P. 1−13.
  109. Hueber W., Kidd B.A., Tomooka B.H. et al. Antigen microarray profiling of autoantibodies in rheumatoid arthritis // Arthritis Rheum. 2005. — Vol. 52. — № 9. — P. 2645−2655.
  110. Janzi M., Odling J., Pan-Hammarstrom Q. et al. Serum microarrays for large scale screening of protein levels // Mol. Cell. Proteomics. 2005. — Vol. 4. — № 12. — P. 1942— 1947.
  111. Jauho E. S., Boas U., Wiuff C. et al. New technology for regiospecific covalent coupling of polysaccharide antigens in ELISA for serological detection // J. Immunol. Meth. 2000. — Vol. 242. — P. 133−143.
  112. Johnsson В., Lofas S., Lindquis, G. Immobilization of proteins to a carboxymethyldextran-modified gold surface for biospecific interaction analysis in surface plasmon resonance sensors//Anal. Biochem. -1991.-Vol. 198.-P. 268.
  113. Jones V.W., Kenseth J.R., Porter M.D. et al. Microminiaturized immunoassays using atomic force microscopy and compositionally patterned antigen arrays // Anal. Chem. -1998.-Vol. 70.-P. 1233.
  114. Kodadek T. Protein microarrays: prospects and problems // Chem. Biol. 2001. — № 8. -P. 105.
  115. Kopf E., Shnitzer D., Zharhary D. Panorama Ab microarray cell signaling kit: a unique tool for protein expression analysis // Proteomics. 2005. — Vol. 5. — № 9. — P. 2412−2416.
  116. Kukar Т., Eckenrode S., Gu Y. et al. Protein Microarrays to Detect Protein-Protein Interactions Using Red and Green Fluorescent Proteins // Analytical Biochemistry. 2002. -Vol.306. -№ 1.- P. 50−54.
  117. Kusnezow W., Hoheisel J.D. Solid supports for microarray immunoassays // J. Mol. Recognit. 2003. — Vol. 16. — № 4. — P. 165−176.
  118. Lee Y., Kang D.K., Chang S.I. et al. High-throughput screening of novel peptide inhibitors of an integrin receptor from the hexapeptide library by using a protein microarray chip // J. Biomol. Screen. 2004. — Vol. 9. — № 8. — P. 687−694.
  119. Lee J.H., Hwang K.S., Park J. et al. Immunoassay of prostate-specific antigen (PSA) using resonant frequency shift of piezoelectric nanomechanical microcantilever // Biosens. Bioelectron. 2005. — Vol. 20. — № 10. — P. 2157−2162.
  120. Lechtzier V., Hutoran M., Levy T. et al. Sodium dodecyl sulphate-treated proteins as ligands in ELISA. //J. Immunol. Meth. 2002. — Vol. 270. — P. 19−26.
  121. Lesaicherre M., Uttamchandani M., Chen G., Yao S. Developing site-Specific immobilization strategies of peptides in a microarray // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2002. — Vol. 12. — № 16. — P. 2079−2083.
  122. Lesaicherre M., Uttamchandani M., Chen G., Yao S. Antibody-Based fluorescence detection of kinase activity on a peptide array // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2002. — Vol. 12. — № 16. — P. 2085−2088.
  123. Libro T.I., Domenech E., Gastro R. et all. // An. Esp. Pediat. (исп.) 1997. — P. 58−62.
  124. Lynch L. Prenatal diagnosis of fetal cytomegalovirus infection // Am. J. Obstet. Gynecol. 1998. — Vol. 165. — P. 714−718.
  125. Liotta L.A., Espina V., Mehta A.I. et al. Protein microarrays: meeting analytical challenges for clinical applications // Cancer Cell. 2003. — Vol. 3. — № 4. — P. 317−325.
  126. Lyashchenko К. P., Singh M., Colangeli R., Gennaro M. L. A multi-antigen print immunoassay for the development of serological diagnosis of infectious diseases // J. Immunol. Meth. 2000. — V. 242. — P. 91−100.
  127. Manavi K. A review on infection with Chlamydia trachomatis // Best Practice & Research Clinical Obstetrics & Gynaecology. 2006. — Vol. 20. — № 6. — P. 941−951
  128. Marquette C.A., Thomas D., Degiuli A., Blum L.J., Design of luminescent biochips based on enzyme, antibody, or DNA composite layers // Anal. Bioanal. Chem. 2003. -Vol. 377. — № 5. — P. 922−928.
  129. Miller J.C. Antibody microarray profiling of human prostate cancer sera: antibody screening and identification of potential biomarkers // Proteomics. 2003. — Vol. 3. — P. 5663.
  130. Moeremans M., Daneels G., Dijck D.V. et al. Sensitive visualization of antigen-antibody reactions in dot and blot immune overlay assays with immunogold and immunogold/silver staining // J. Immunol. Meth. 1984. — Vol. 74. — P. 353−360.
  131. Nedeljkovic J., Jovanovic Т., Oker-Blom C. Maturation of IgG avidity to individual rubella virus structural proteins // Journal of Clinical Virology. 2001. — Vol. 22. — P. 4754.
  132. Nielsen U., Geierstanger B. Multiplexed sandwich assays in microarray format // J. Immunol. Meth. 2004. — Vol. 290. — P. 107- 120.
  133. Oladepo D.K., Klapper P.E., Marsden H.S. Peptide based enzyme-linked immunoassays for detection of anti-HSV-2 IgG in human sera // Journal of Virological Methods. 2000. — № 87. — P.63−70.
  134. Opalka D. Simultaneous quantitation of antibodies to neutralizing epitopes on viruslike particles for human papillomavirus types 6, 11, 16, and 18 by multiplexed Luminex assay // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2003. — Vol. 10. — P. 108−115.
  135. Pawley J.B. Handbook of Biological Confocal Microscopy. Plenum, New York, 1995.
  136. Paweletz C.P., Charboneau L., Bichsel V.E., Simone N.L., Chen T. et al. Reversephase protein microarrays which capture disease progression show activation of pro-survival pathways at the cancer invasion front // Oncogene. 2001. — Vol. 20. — P. 1981.
  137. Peluso P., Wilson D.S., Do D., Tran H., Venkatasubbaiah M. et al. Optimizing antibody immobilization strategies for the construction of protein microarrays // Anal. Biochem.-2003.-Vol. 312.-P. 113.
  138. Ramachandran N., Larson D.N., Stark P.R., Hainsworth E., LaBaer J. Emerging tools for real-time label-free detection of interactions on functional protein microarrays // FEBS J.- 2005. Vol. 272. — № 21. — P. 5412−5425.
  139. Robertson S.E., Featherstone D.A., Gacic-Dobo M., Hersh B.S. Rubella and congenital rubella syndrome: global update // Rev Panam Salud Publica. 2003. — Vol. 14. — № 5. — P. 306−315.
  140. Ru-Qiang L., Cui-Yan Т., Kang-Cheng R. Colorimetric detection of protein microarrays based on nanogold probe coupled with silwer enhancement // J. Immunol. Meth. 2004. — Vol. 285. — P. 157−163.
  141. Schweitzer В., Roberts S., Grimwade В., Shao W., Wang M. et al. Multiplexed protein profiling on microarrays by rolling-circle amplification // Nat. Biotechnol. 2002. — Vol. 20.- P. 359.
  142. Schweitzer В., Predki P., Snyder M. Microarrays to characterize protein interactions on a whole-proteome scale // Proteomics. 2003. — Vol. 3. — № 11. — P. 2190−2199.
  143. Shreffler W.G., Lencer D.A., Bardina L., Sampson H.A. IgE and IgG4 epitope mapping by microarray immunoassay reveals the diversity of immune response to the peanut allergen, Ara h 2 // J. Allergy Clin. Immunol. 2005. — Vol. 116. — № 4. — P. 893 899.
  144. Signore C. Infectious diseases update: rubella // Prim Care Update Ob/Gyns. 2001. -Vol. 8. — P. 133−137.
  145. Speer R., Wulfkuhle J.D., Lotta L.A., Petricoin 3rd, E.F. Reverse-phase proteinmicroarrays for tissue-based analysis // Curr. Opin. Mol. Ther. 2005. — Vol. 7. — № 3. — P. 240−245.
  146. Tabatabai L.B. Developments in diagnostic technologies for bioterrorism agents // IVD Technology. July/August 2005.
  147. Tannapfel A. Identification of novel proteins associated with hepatocellular carcinomas using protein microarrays // J. Pathol. 2003. — Vol. 201. — P. 238−249.
  148. Taton T.A., Mirkin C.A., Letsinger R.L. Scanometric DNA array detection with nanoparticle probes // Science. 2000. — Vol. 289. — P. 1757- 1760.
  149. Templin M.F., Stoll D., Schrenk M. et al. Protein microarray technology // Trends Biotechnol. 2002. — Vol. 20 — P. 160.
  150. Templin M. Stoll D., Schrenk M. et al. Protein microarray technology. // Drug Discov. Today.-2002.-№ 7.-P. 815.
  151. The International Congress on Toxoplasmosis // Preface International Journal for Parasitology. 2004. — № 34. — P. 249−252.
  152. Tomizaki K.Y., Usui K., Mihara H. Protein-detecting microarrays: current accomplishments and requirements // Chembiochem. 2005. — Vol. 6. — № 5. — P. 782−799.
  153. Venkatasubbarao, S. Microarrays status and prospects // Trends Biotechnol. — 2004. -Vol. 22.-№ 12.- p. 630−637.
  154. Vivarelli R., Grosso S., Cioni M. et al. Pseudo-TORCH syndrome or Baraitser -Reardon syndrome: diagnostic criteria // Brain and Development. 2001. — Vol. 23. — № 1. -P. 18−23.
  155. Weber В., Berger A., Rabenau H. Human cytomegalovirus infection: diagnostic potential of recombinant antigens for cytomegalovirus antibody detection // Journal of Virological Methods. 2001. — Vol. 96. — P.157−170.
  156. Wicher K., Horowitz H. W., Wicher V. Laboratory methods of diagnosis of syphilis for the beginning of the third millennium // Microbes and Infection. 1999. — Vol. 1. — № 1. -P. 1035−1049
  157. Wiese R., Belosludtsev Y., Powdrill Т., Hogan M. Simultaneous multianalytes ELISA performed on a microarray platform // Clin. Chem. 2001. — Vol. 47. — P. 1451.
  158. Wilson D.S., Nock S. Recent developments in protein microarray technology // Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 2003. — Vol. 42. — P. 494.
  159. Wong, S.J. et al. Immunoassay targeting nonstructural protein 5 to differentiate West Nile virus from dengue and St Louis encephalitis virus infections and from Flavivirus vaccination // J. Clin.Microbiol. 2003. — Vol. 41. — P. 4217−4223.
  160. Witte K.L., Nock S. Recent applications of protein arrays in target identification and disease monitoring // Drug Discovery Today: Technology. 2004. — Vol. 1. — № 1. — P. 3540.
  161. Zhi Z.L., Murakami Y., Morita Y. et al. Multianalyte immunoassay with self-assembled addressable microparticle array on a chip // Anal. Biochem. 2003. — Vol. 318. -№ 2.-P. 236−243.
  162. Zhou X., Zhou J. Protein microarrays on hybrid polymeric thin films prepared by self-assembly of polyelectrolytes for multiple-protein immunoassays // Proteomics. 2006. -Vol. 6.-№ 5.- P. 1415−1426.
  163. Zhu H., Klemic J.F., Chang S. et al. Analysis of yeast protein kinases using protein chips // Nat. Genet. 2000. — Vol. 26. — P. 283.
  164. Zhu H., Snyder M. Protein chip technology // Curr. Opin. Chem. Biol. 2003. — Vol. 7. — № 1. — P. 55−63.
  165. Zhu Q., Uttamchandani M., Li D., Lesaicherre M.L., Yao S.Q. Enzymatic profiling system in a small-molecule microarray // Org. Lett. 2003. — Vol. 5. — № 8. — P. 12 571 260.
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?