Помощь в учёбе, очень быстро...
Работаем вместе до победы

Характеристика примордиальных зародышевых клеток как векторов для генетической трансформации эмбрионов кур

Диссертация: Характеристика примордиальных зародышевых клеток как векторов для генетической трансформации эмбрионов кур
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В ходе выполнения диссертационной работы изучены факторы, влияющие на эффективность выделения и поддержания в культуре ПЗК кур. Впервые дана сравнительная оценка различных методов генетической трансформации данного типа клеток in vitro и in vivo и выполнено введение трансформированных ПЗК в эмбрионы кур in vivo. Впервые изучена эффективность колонизации донорскими ПЗК гонад эмбрионов-реципиентов… Читать ещё >

Содержание

  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Особенности эмбриогенеза кур
    • 1. 2. Генетическая трансформация эмбрионов кур
      • 1. 2. 1. Методы направленного переноса генов в эмбрионы кур in vivo
        • 1. 2. 1. 1. Использование вирусных векторов
        • 1. 2. 1. 2. Перенос рекомбинантной ДНК в эмбрионы посредством плюрипотентных клеток
      • 1. 2. 2. Культивирование эмбрионов кур после генно-инженерных манипуляций
    • 1. 3. Характеристика примордиальных зародышевых клеток (ПЗК) как вектора для доставки рекомбинантной ДНК
      • 1. 3. 1. Развитие и миграция ПЗК в ранний период эмбриогенеза
      • 1. 3. 2. Особенности культивирования ПЗК
      • 1. 3. 3. Методы генетической модификации ПЗК
    • 1. 4. Перспективы использования трансгенных технологий в птицеводстве

Характеристика примордиальных зародышевых клеток как векторов для генетической трансформации эмбрионов кур (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Актуальность темы

.

Создание биоинженерных форм в животноводстве, в том числе в птицеводстве является одним из перспективных направлений развития современной науки. Генетическая модификация сельскохозяйственной птицы рассматривается в качестве приема улучшения генотипа уже существующих пород для придания им устойчивости к различным возбудителям инфекционных заболеваний, улучшения продуктивных показателей, а также получения биореакторов, синтезирующих рекомбинантные белки в клетках яйцевода [Rapp et al., 2003; Kamihira et al., 2005; Kawabe et al., 2006; Kwon M.S. etal., 2008; Эрнст, 2008; Сураева, 2008].

Однако несмотря на заметные успехи в области трансгенеза птиц, само создание трансгенных кур представляет сегодня определенную проблему. Особенности воспроизводства и развития кур [Petitte, Mozdziak, 2002] значительно снижают эффективность традиционного метода введения экзогенной ДНК в клетки животных — микроинъекции, что требует поиска и разработки альтернативных методов направленного переноса генов. Одним из таких направлений, интенсивно развивающихся в последние годы, является разработка методических подходов, связанных с использованием в качестве клеток-мишеней для введения рекомбинантной ДНК разных типов плюрипотентных стволовых клеток [Petitte et al., 2004; Zhii et al., 2005], в том числе примордиальных зародышевых клеток (ПЗК) — предшественников высоко дифференцированных половых клеток. Генетическая трансформация ПЗК с последующей их трансплантацией в эмбрионы кур in vivo рассматривается как перспективный метод целенаправленной генетической модификации гонад и получения трансгенной птицы. В связи с этим проведение исследований в данном направлении представляется актуальным в рамках разработки высокоэффективных трансгенных технологий с целью их дальнейшего использования в птицеводстве.

Цель и задачи исследований.

Исходя из выше изложенного, целью диссертационной работы явилось изучение результативности использования примордиальных зародышевых клеток (ПЗК) как векторов для генетической трансформации эмбрионов кур in vivo.

Для достижения указанной цели были поставлены и решены следующие задачи:

1. Изучить факторы, влияющие на эффективность выделения и поддержания в культуре ПЗК кур.

2. Выполнить генетическую трансформацию ПЗК in vitro и in vivo.

3. Оптимизировать метод генетической трансформации ПЗК in vitro.

4. Ввести трансформированные ПЗК в эмбрионы кур in vivo и изучить эффективность колонизации данными клетками гонад эмбрионов-реципиентов.

5. Разработать методические приемы, позволяющие повысить эффективность трансгенеза.

Научная новизна.

В ходе выполнения диссертационной работы изучены факторы, влияющие на эффективность выделения и поддержания в культуре ПЗК кур. Впервые дана сравнительная оценка различных методов генетической трансформации данного типа клеток in vitro и in vivo и выполнено введение трансформированных ПЗК в эмбрионы кур in vivo. Впервые изучена эффективность колонизации донорскими ПЗК гонад эмбрионов-реципиентов, а также исследовано влияние предъинкубационной обработки эмбрионов и концентрации донорских ПЗК на эффективность трансгенеза.

Практическая значимость.

Усовершенствован метод выделения ПЗК из эмбрионов кур и оптимизированы условия поддержания в культуре данного типа клеток. Предложен эффективный способ генетической трансформации ПЗК и их введения в эмбрионы кур in vivo. Оптимизированы отдельные этапы технологической цепочки генетической модификации гонад эмбрионов кур in vivo с эффективностью колонизации введенных трансформированных ПЗК до 39,1%. Предложен метод предъинкубационной обработки эмбрионов, блокирующий развитие эндогенных ПЗК в гонадах эмбрионов-реципиентов.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Способ дезагрегации ткани, стадия развития эмбрионов, разделение клеток по адгезии как факторы, влияющие на результативность получения культуры ПЗК кур.

• Электропорация как результативный способ генетической трансформации ПЗК in vitro.

• Эффективность колонизации донорскими ПЗК гонад эмбрионов-реципиентов.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на международных конференциях: «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования, образование», Санкт-Петербург, 2007; «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2008, 2009.

Публикация результатов исследований.

По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе в центральных научных журналах, рекомендованных ВАК — 4.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 103 страницах, содержит 13 таблиц, 22 рисунка, 1 схему. Библиографический список содержит 117 источников, в том числе 96 на иностранных языках.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

5. ВЫВОДЫ.

1. Эффективность выделения ПЗК из эмбрионов кур зависит от способа дезагрегации ткани, метода очистки от других типов клеток и стадии развития используемого для выделения эмбриона. Максимальное количество ПЗК в гонадах эмбрионов установлено на шестой день инкубации — 4080±70. Показано, что при дезагрегации 6-дневных эмбрионов в растворе 0,05% трипсина с последующим разделением эмбриональных клеток по адгезии после 90 минут культивирования доля ПЗК в полученной суспензии клеток достигает 80,7±3,4% (р<0,001).

2. На продолжительность культивирования ПЗК кур влияет наличие и тип фидерного слоя. Максимальный период поддержания ПЗК в культуре установлен при их инкубации на фидере, представленном свежеизолированными эмбриональными фибробластами кур -7 дней. При использовании в качестве фидерного слоя культивируемых эмбриональных фибробластов кур и линии клеток STO данный показатель не превышал 5 дней, а при отсутствии фидерного слоя — 2 дней.

3. Высокая результативность переноса рекомбинантной ДНК в ПЗК кур выявлена при использовании метода электропорации — 61,1±6,3%. При применении ретровирусной трансфекции доля трансформированных клеток была достоверно ниже и не превышала в условиях in vitro 0,08±0,002%, in vivo -3,2±0,2% (р<0,005).

4. Максимальная эффективность трансфекции ПЗК in vitro установлена при действии на клетки-мишени электрического разряда напряжением 180 В в течение 80 мкс.

5.

Введение

трансформированных ПЗК в дорсальную аорту 2,5-дневных эмбрионов способствует колонизации донорскими клетками гонад эмбрионов-реципиентов с результативностью 4,3±0,1% и эффективностью трансгенеза 42,0%.

6. Обработка эмбрионов кур до инкубации УФ в течение 90 минут достоверно снижает количество эндогенных ПЗК в гонадах в 24,6 раз (до 166±28 при 4080±70 в контроле, р<0,001).

Введение

трансформированных ПЗК в количестве 300−400 клеток на эмбрион после предъинкубационной обработки эмбрионов-реципиентов УФ достоверно повышает результативность генетической модификации клеток гонад до 39,1±3,4% (р<0,001) при эффективности трансгенеза 62,0−64,0%.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Лабораториям, занимающимся генной и клеточной инженерией животных, рекомендуем для эффективной трансформации ПЗК кур in vitro использовать метод электропорации.

Для эффективной генетической трансформации гонад эмбрионов кур рекомендуем осуществлять введение трансформированных ПЗК в дорсальную аорту 2,5-дневных эмбрионов в концентрации 300−400 клеток на эмбрион после предъинкубационной обработки эмбрионов-реципиентов УФ в течение 90 минут.

Показать весь текст

Список литературы

  1. . Ф. Инкубация яиц с основами эмбриологии сельскохозяйственной птицы / М.: КолосС. 2006. С. 248.
  2. Н. А. Фенотипический эффект экспрессии рекомбинантных генов в организме трансгенных животных: автореф. дисс. доктора биол. наук.- Дубровицы. 2008. С. 36.
  3. Н. А., Зиновьева Н. А., Эрнст JI. К. Оптимизация отдельных элементов технологии создания трансгенной птицы // Боровск. 2006. С. 229. ,
  4. В. Ф., Сидорова М. В., Панов В. П. Морфология сельскохозяйственных животных. Анатомия и гистология с основами цитологии и эмбриологии / М.: Гринлайт. 2008. С. 510−516.
  5. Гистология / Под ред. Ю. И. Афанасьева, H.A. Юрина М.: Медицина, 2002. — 695с.
  6. И.А. Эмбриональные стволовые клетки и проблема направленной дифференцировки // Успехи биологической химии, т. 48, 2008. С. 181−220.
  7. Н. А., Эрнст JI.K. Проблемы биотехнологии и селекции сельскохозяйственных животных // Дубровицы: ВИЖ. 2004. С. 316.
  8. Н. А., Эрнст JI.K. Эффективность использования ретровирусных векторов для получения трансгенных кур // Дубровицы: ВИЖ. 2008. С. 224.
  9. Н. А., Попов А. Н., Эрнст JI. К., Марзанов Н. С. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве // Дубровицы: ВИЖ. 1998. С. 47.
  10. Животная клетка в культуре (Методы и применение в биотехнологии) / Под ред. Проф. Л. П. Дьяконова, проф. В. И. Ситькова. М.: Компания Спутник+, 2000. — 400 с.
  11. Микроскопическая техника: Руководство / под ред. Д. С. Саркизова, Ю. П. Перова. М.: Медицина, 1996. — 544 с.
  12. , Б. Микроскопическая техника / Б. Ромейс. Пер. с нем.
  13. B.Я. Александрова, З. И. Кроковой -М.: Изд.-во иностр. лит.-ры, 1953. 718с.
  14. Т.А., Савченкова И. П., Сергеев Н. И., Эрнст Л. К. Выделение примордиальных половых клеток из зародышей мышей и их очистка // С-х биол. 2000. № 2. С. 119—122.
  15. И.П. Эмбриональные стволовые клетки в биологии: настоящее и будущее // Дубровицы 1999. С. 93.
  16. Н. М., Бырышников А. Ю., Фисинин В. П., Прокофьев М. И. Изучение эффективности различных способов трансфекции репортерного гена в эмбриональные клетки кур // Известия РАН. 2008. № 1.1. C. 18−23.
  17. Н. М., Самойлов А. В. Получение фармацевтических белков с помощью трансгенной птицы // Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. 2009. Т. 20, № 4. С. 19−23.
  18. В. А., Зиновьева Н. А., Волкова Н. А. Использование ретровирусных векторов для переноса генов в органы-мишени у сельскохозяйственных животных // Международная конференция. 2001. С. 90.
  19. А.О. Генетическая трансформация эмбриональных клеток кур с использованием ретровирусных векторов: автореф. дисс. канд. биол. наук.- Дубровицы. 2010. С. 18.
  20. С.Н. Генетическая инженерия / Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2004. 496 с.
  21. Л. К., Прокофьев М. И. Биотехнология сельскохозяйственных животных/М.: Колос, 1995. 192с.
  22. JI. К., Зиновьева Н. А., Брем Г. Современное состояние и перспективы использования трансгенных технологий в животноводстве / М.: РАСХН, 2002. 341с.
  23. Bednarczyk М., Lakota P., Siwek М. Improvement of hatchability of chicken eggs injected by blastoderm cells // Poult. Sci. 2000. 79, 1823−1828.
  24. Borwornpinyo S. Optimal hatchability of cultured chicken embryos from freshly laid eggs in surrogate eggshells // MS thesis, North Carolina State University. 2000. 85, 189−205.
  25. Borwornpinyo S., Brake J., Mozdziak P., Petitte J. Culture of chicken embryos in surrogate eggshells // Poult. Sci. 2005. 84, 1477−1482.
  26. Bosselman R., Hsu R., Boggs Т., Hu S., Bruszewski J. 1989. Germline transmission of exogenous genes in the chicken // Science. 1989. 243, 533−535.
  27. Bradley A., Evans M., Kaufman M., Robertson E. Formation of germ-line chimaeras from embryo-derived teratocarcinoma cell lines // Nature. 1984. 309, 255−256.
  28. Brazolot C., Petitte J., Etches R. Efficient transfection of chicken cells by lipofection, and introduction of transfected blastodermal cells into the embryo // Mol. Reprod. 1991. 30, 304−312.
  29. Capecchi M. Altering the genome by homologous recombination // Science. 1989. 244, 1288−1292.
  30. Capecchi M. Generating mice with targeted mutations // Nat. Med. 2001. 7, 1086−1090.
  31. Carsience R., Clark M., Verrinder Gibbins, A., Etches, R. Germline chimeric chickens from dispersed donor blastodermal cells and compromised recipient embryos // Development. 1993. 117, 669−675.
  32. Chambers I., Colby D., Robertson M., Nichols J., Lee S. Functional expression cloning of Nanog, a pluripotency sustaining factor in embryonic stem cells // Cell. 2003. 113, 643−655.
  33. Chang I., Tajima A., Chikamune T., Ohno T. Proliferation of chick primordial germ cells cultured on stroma cells from the germinal ridge // Cell Biol. Int. 1995a. 19, 143−149.
  34. I., Yoshiki A., Kusakabe M., Tajima A., Chikamune T. 1995b. Germ line chimera produced by transfer of cultured chick primordial germ cells // Cell Biol. Int. 1995b. 19, 569−576.
  35. Chang I., Jeong D., Hong Y., Park T., Moon Y., Ohno T. Production of germline chimeric chickens by transfer of cultured primordial germ cells // Cell Biol. Int. 1997. 21,495−499.
  36. Chapman, Hu W., Ivarie R. Rapid and improved method for windowing eggs accessing the stage x chicken embiyo // Mol. Reprod. 2005. 69, 31−34.
  37. Conover J., Ip N., Poueymirou W., Bates B., Goldfarb M., DeChiara T. Ciliary neurotrophic factor maintains the pluripotentiality of embryonic stem cells//Development. 1993. 119, 559−565.
  38. Du L., Jing A. The investigation of cell culture conditions to maintain chicken embryonic stem cells as totipotent cells // Asian-Aus. J. Anim. Sci. 2003. 16, 1102−1107.
  39. Etches R., Clark M., Toner A., Liu G., Gibbins A. Contributions to somatic and germline lineages of chicken blastodermal cells maintained in culture //Mol. Reprod. 1996. 45, 291−298.
  40. Evans M., Kaufman M. Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos //Nature. 1981. 292, 154−156.
  41. Eyal-Giladi H., Kochav S. From cleavage to primitive streak formation: a complementary normal table and a new look at the first stages of the development of the chick // Developmental Biology. 1976. 49, 321−337.
  42. Eyal-Giladi H., Ginsburg M., Farbarov A. Avian primordial germ cells are of epiblastic origin // J. Embryol. Exp. Morphol. 1981. 65, 139−147.
  43. Fraser R., Carsience R., Clark M., Etches R., Gibbins A. Efficient incorporation of transfected blastodermal cells into chimeric chicken embryos // Int. J. Dev. Biol. 1993. 37, 381−385.
  44. Joyner A. IRL PRESS at Oxford University Press. 2003. P. 109.
  45. Gajovic S., Gruss P. Differentiation of the mouse embryoid bodies grafted on the chorioallantoic membrane of the chick embryo // Int. J. Dev. Biol. 1993. 42, 225−228.
  46. Ha J., Park T., Hong Y., Jeong D., Kim J., Kim K. Production of germline chimeras by transfer of chicken gonadal primordial germ cells maintained in vitro for an extended period // Theriogenology. 2002. 58, 1531−1539.
  47. Harvey A., Speksnijder G., Bough L., Morris J. Consistent production of transgenic chickens using replication-deficient retroviral vectors and high throughput screening procedures // Poult Sci. 2002a. 81, 202−212.
  48. Harvey A., Speksnijder G., Bough L., Moms J. Expression of exogenous protein in the egg white of transgenic chickens // Nat Biotechnol. 2002b. 20, 396−399.
  49. Horiuch H., Tategaki A., Yamashita Y., Hisamatsu H., Ogawa M. Chicken leukemia inhibitory factor maintains chicken embryonic stem cells in the undifferentiated state // J. Biol. Chem. in press. 2004. 75, 148−157.
  50. Illmensee K., Mintz B. Totipotency and normal differentiation of single teratocarcinoma cells cloned by injection into blastocysts // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1976. 73,549−553.
  51. Kamihira, Pain S., Leibo M., Cochran M. Production of chicken chimeras from injection of frozen-thawed blastodermal cells // Poult. Sci. 2005. 76, 753−760.
  52. Karagenc L., Petitte J. Soluble factors and the emergence of chick primordial germ cells in vitro // Poul. Sci. 2000. 79, 80−85.
  53. Karagenc L., Cinnamon Y., Ginsburg M., Petitte J. Origin of primordial germ cells in the prestreak chick embryo // Dev. Genet. 1996. 19, 290 301.
  54. Kawaguchi T., Nomura K., Hirayama Y., Kitagawa T. Establishment and characterization of a chicken hepatocellular carcinoma cell line, LMH // Cancer Res. 1987. 47, 4460−4464.
  55. Kawabe Y. Production of scFv-Fc Fusion Protein Using Genetically manipulated Quails // Biosciens and Bioengineering. 2006. Vol. 102. P. 297−303.
  56. Kwon M., Koo B., Choi B., Lee H., Kim Y., Shim H., Kim J.-H. Development of transgenic chickens expressing enhanced green fluorescent protein // Biochemical and Biophysical Research Communications. 2004. 320, 442-^148.
  57. Koo B., Koo B., Choi B., Lee H. Development of transgenic chickens expressing enhanced green fluorescent protein // Biochemical and Biophysical Research Communications. 2006. 320, 442148.
  58. Le Douarin N., McLaren A. Chimeras in Development Biology // Academic Press, London- Orlando. 1984. P. 456.
  59. Liu G. 1995. Targeted modification of the genome in chicken blastodermal cells//PhD thesis, University ofGuelph. 1995. 145, 125−128.
  60. Martin G. Teratocarcinomas and mammalian embryogenesis // Science. 1980. 209, 768−776.
  61. Martin G. Isolation of a pluripotent cell line from early mouse embryos cultured in medium conditioned by teratocarcinoma stem cells // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1981. 78, 7634−7638.
  62. Martin G., Evans M. Differentiation of clonal lines of teratocarcinoma cells: formation of embryoid bodies in vitro // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1975. 72, 1441−1445.
  63. Marzullo G. Production of chick chimaeras 11 Nature. 1970. 225, 7273.
  64. Matsui Y., Zsebo K., Hogan B. Derivation of pluripotential embryonic stem cells from murine primordial germ cells in culture // Cell. 1992. 70, 841−847.
  65. McLachlan J. A simple method of preparing chick eggs for chorioallantoic grafts //Experientia. 1982. 38, 141−142.
  66. Mintz B., Illmensee K. Normal genetically mosaic mice produced from malignant teratocarcinoma cells // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1975. 72, 3585−3589.
  67. Mitsui K., Tokuzawa Y., Itoh H., Segawa K., Murakami M. The homeoprotein Nanog is required for maintenance of pluripotency in mouse epiblast and ES cells // Cell. 2003. 113, 631−642.
  68. Mozdziak P., Angerman-Stewart J., Rushton B., Pardue S. Isolation of chicken primordial germ cells using fluorescence-activated cell sorting // Poult. Sci. 2005. 84, 594−600.
  69. Mozdziak P., Borwornpinyo S., McCoy D., Petitte J. Development of transgenic chickens expressing bacterial beta-galactosidase // Dev. Dyn. 2003a. 226, 439−445.
  70. Mozdziak P., Pophal S., Borwornpinyo S., Petitte J. Transgenic chickens expressing beta-galactosidase hydrolyze lactose in the intestine // J. Nutr. 2003b. 133, 3076−3079.
  71. Muramatsu T., Mizutani Y., Ohmori Y., Okumura J. Comparison of three nonviral transfection methods for foreign gene expression in early chicken embryos in ovo // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1997. 230, 376−380.
  72. New D. A new technique for the cultivation of the chick embryo in vitro // J. Embryol. Exp. Morphol. 1995. 193, 320−331.
  73. Nichols J., Evans E., Smith A. Establishment of germ-linecompetent embryonic stem (ES) cells using differentiation inhibiting activity // Development. 1990. 110, 1341−1348.
  74. Nichols J., Chambers I., Smith A. Derivation of germline competent embryonic stem cells with a combination of interleukin-6 and soluble interleukin-6 receptor // Exp. Cell Res. 1994. 215, 237−239.
  75. Nieuwkoop P., Sutasurya L. Primordial germ cells in the chordates: embryogenesis and phylogenesis // Cambridge University Press, Cambridge Eng.- New York. 1989. P.187.
  76. Nolan C., Killian J., Petitte J., Jirtle R. Imprint status of M6P/IGF2R and IGF2 in chickens // Dev. Genes Evol.2001. 211, 179−183.
  77. Pain B., Clark M., Shen M., Nakazawa H., Sakurai M., Samarut J. Long-term in vitro culture and characterisation of avian embryonic stem cells with multiple morphogenetic potentialities // Development. 1996. 122, 2339−2348.
  78. Pain B., Chenevier P., Samarut J. Chicken embryonic stem cells and transgenic strategies // Cells Tissues Organs. 1999. 165, 212−219.
  79. Park T., Han J. Derivation and characterization of pluripotent embryonic germ cells in chicken // Mol. Reprod. 2000. 56, 475482.
  80. Park T., Hong Y., Kwon S., Lim J., Han J. Birth of germline chimeras by transfer of chicken embryonic germ (EG) cells into recipient embryos // Mol. Reprod. 2003. 65, 389−395.
  81. Perry M. A complete culture system for the chick embryo // Nature. 1998. 331, 70−72.
  82. Pittoggi C., Beraldi R. Complete culture system for the chick embryo //Nature. 2006. Vol. 331. P. 70−72.
  83. Petitte J., Yang Z. Method of producing an avian embryonic stem cell culture and the avian embryonic stem cell culture produced by the process // In US patent. 1994. 53, 42−45.
  84. Petitte J., Kegelmeyer A. Rapid sex determination of chick embryos using the polymerase chain reaction //Anim. Biotechnol. 1995. 6, 119−130.
  85. Petitte J., Liu G., Yang Z. Avian pluripotent stem cells // Mechanisms of Development. 2004. 121, 1159−1168.
  86. Petitte J.5 Mozdziak P. Production of transgenic poultry // In: Pinkert, C.A., (Ed.), Chapter 11 in Transgenic Animal Technology, A Laboratory Handbook, Academic Press, New York. 2002. P. 525.
  87. Petitte J., Clark M., Liu G., Verrinder Gibbins A., Etches R. Production of somatic and germline chimeras in the chicken by transfer of early blastodermal cells//Development. 1990. 108, 185−189.
  88. Prelle K., Zink N., Wolf E. Pluripotent stem cells—model of embryonic development, tool for gene targeting, and basis of cell therapy //Anat. Histol. Embryol. 2002. 31, 169−186.
  89. Raveh D., Friedlander M., Eyal-Giladi H. Nucleolar ontogenesis in the uterine chick germ correlated with morphogenetic events // Exp. Cell Res. 1996. 100, 195−203.
  90. Resnick J., Bixler L., Cheng L., Donovan P. Long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture // Nature. 1992. 359, 550−551.
  91. Ricks C., Mendu N., Phelps P. The embryonated egg: a practical target for genetic based advances to improve poultry production // Poult. Sci. 2003. 82, 931−938.
  92. Rose T., Weiford D., Gunderson N., Bruce A. Oncostatin M.(OSM) inhibits the differentiation of pluripotent embryonic stem cells in vitro // Cytokine. 1994. 6, 48−54.
  93. Rosenblum C., Chen H. In ovo transfection of chicken embryos using cationic liposomes //Transgenic Res. 1995. 4, 192−198.
  94. K., Simlciss K., 1987. Explanted embryo culture: in vitro and in ovo techniques for the domestic fowl // Br. Poult. Sci. 1997. P. 28.
  95. Salter D., Smith E., Hughes S., Wright S., Crittenden L. Transgenic chickens: insertion of retroviral genes into the chicken germ line // Virology. 1992. 157, 236−240.
  96. Sang H. Prospects for transgenesis in the chick // Mech. Dev. 2004. 121, 1179−1186.
  97. Selleck M. Culture and microsurgical manipulation of the early avian embryo // Methods Cell Biol. 1996. 51,1−21.
  98. Shamblott M., Axelman J., Wang S., Bugg E., Littlefield J. Derivation of pluripotent stem cells from cultured human primordial germ cells // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1998. 95, 13 726−13 731.
  99. Smith A., Hooper M. Buffalo rat liver cells produce a diffusible activity which inhibits the differentiation of murine embryonal carcinoma and embryonic stem cells // Dev. Biol. 1987. 121, 1−9.
  100. Soodeen-Karamath S., Gibbins A. Apparent absence of oct % from the chicken genome // Mol. Reprod. Dev. 2001. 58, 137−148.
  101. Speksnijder G. Flourescence activated cell sorting of transfected chicken blastodermal cells prior to injection into recipient embryos // MS thesis, University of Guelph, Guelph, Ont. 1996. P. 165.
  102. Speksnijder G., Ivarie R. A modified method of shell windowing for producing somatic or germline chimeras in fertilized chicken eggs // Poult. Sci. 2000. 79, 1430−1433.
  103. Song Y., D’Costa S., Pardue S., Petitte J. Production of germline chimeric chickens following the administration of a busulfan emulsion // Mol. Reprod. Dev. 2005. Vol. 70. P. 438−444.
  104. Swift C. Origin and early history of primordial germ cells in the chick //Am. J. Physiol. 1914. 15,483−516.
  105. Tada T., Tada M., Hilton K., Barton S., Sado T., Takagi N. Epigenotype switching of imprintable loci in embryonic germ cells // Dev. Genes Evol. 1998. 207, 551−561.
  106. Thomson J., Marshall V. Primate embryonic stem cells // Curr. Top. Dev. Biol. 1998.38, 133−165.
  107. Thomson J., Itskovitz-Eldor J., Shapiro S., Waknitz M., Swiergiel J. Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts // Science. 1998. 282, 1145−1147.
  108. Thoraval P., Afanassieff M., Cosset F., Lasserre F., Verdier G. Germline transmission of exogenous genes in chickens using helper-free ecotropic avian leukosis virus-based vectors // Transgenic Res. 1995. 4, 369−377.
  109. Tsunekawa N., Naito M., Sakai Y., Nishida T., Noce T. Isolation of chicken vasa homolog gene and tracing the origin of primordial germ cells // Development. 2000. 127, 2741−2750.
  110. Watt J., Petitte J., Etches R. Early development of the chick embryo // Journal of Morphology. 1993. 215, 165−182.
  111. Weaver J. Electroporation of cells and tissues // IEEE Trans. Plasma Sci. 2000. 28, 24−33
  112. Wei Q., Croy B., Etches R. Selection of genetically modified chicken blastodermal cells by magnetic-activated cell sorting // Poult. Sci. 2001. 80, 16 711 678.
  113. Wolf E., Kramer R., Polejaeva I., Thoenen H., Brem G. Efficient generation of chimaeric mice using embryonic stem cells after longterm culture in the presence of ciliary neurotrophic factor // Transgenic Res. 1994. 3, 152−158.
  114. Yang Z., Petitte J. Use of avian cytokines in mammalian embryonic stem cell culture // Poult. Sci. 1994. 73, 965−974.
  115. Yasuda Y., Tajima A., Fujimoto T., Kuwana T. A method to obtain avian germ-line chimaeras using isolated primordial germ cells // J. Reprod. Fertil. 2001. Vol. 96. P. 521−528.
  116. Zhao D., Kuwana T. Purification of avian circulating primordial germ cells by nycodenz density gradient centrifugation // Br. Poult. Sci. 2003. Vol. 44. P. 30−35.
  117. Zhu L., van de Lavoir M., Albanese J., Beenhouwer P. Production of human monoclonal antibody in eggs of chimeric chickens // Nat. Biotechnol. 2005. Vol. 23. P.115−119.
Заполнить форму текущей работой

Пора сдавать?