Косвенные методы определения численности микроорганизмов

Так, состав отдельных групп^[1] микроорганизмов (бактерии, акти ном и цеты, грибы и т. д.) может быть уточнен посевом почвен;

Рис. 9. Почвенные микроорганизмы в сканирующем электронном микроскопе: А — нсспорообразующис бактерии, Б — сиорообразуюшая бактерия, В — споры бациллы; Г — Streptomyces sp. Д, Е — спороносиы стрептомииегов;

Ж — конидиеносеи Penicillium, 3 — конидии Penicillium; И — конидиеносеи Aspergillus (по: В С. Гузев и лр) ной суспензии на различные твердые питательные среды, где затем развиваются колонии микроорганизмов тех или иных групп. В практике обычно используют агаризованные или желатинизированные, а иногда силикагелевые питательные среды.

После инкубации засеянных чашек в термостате подсчитывают выросшие на твердой питательной среде колонии. Допуская, что каждая колония произошла из одного зародыша того или иного микроорганизма, устанавливают число клеток в исходном образце почвы.

Подобный пересчет имеет ряд условностей. Например, бактериальные колонии могут вырасти на питательной среде не из одной клетки, а из группы клеток, оставшихся не разделенными в почвенной взвеси. Колонии грибов и актиномицетов вырастают как из обрывков мицелия разной величины, так и из спор. Дифференцировать колонии, образованные из спор или мицелия указанных микроорганизмов, невозможно. Поэтому правильнее богатство почв мицелиальными микроорганизмами учитывать, измеряя длину их мицелия при прямом микроскопировании.

Представляют значительный интерес примерные соотношения числа микроорганизмов, подсчитываемых в одной и той же почве различными методами. В таблице I приведены соответствующие данные Д. И. Никитина для дерново-подзолистых почв Подмосковья.

Таблица 1

Соотношение показателей численности микроорганизмов, определенных разными методами в дерново-подзолистых почвах

Как видно, прямая микроскопия дает показатели, во много раз превосходящие те, что получены методом посева. Указанное явление объясняется прежде всего тем, что при прямом анализе подсчитывают живые и мертвые клетки. Число последних может быть велико, так как индивидуальная жизнь микроорганизмов очень коротка. Однако численность мертвых клеток в почве обычно не превышает 25% общего числа.

Общие показатели численности микроорганизмов, как бы условны они ни были, представляют интерес. На их основании можно примерно вычислить массу совокупности микроорганизмов в почве. Как показывают подсчеты, эта масса составляет десятые доли процента массы почвы. При последовательном сравнении почв, начиная от более северных и кончая южными, можно отметить постепенное увеличение в них доли микробной массы.

• [1] Здесь и далее понятие «группы микроорганизмов» имеет, как правило, не таксономический, а скорее, морфо-физиологический и функциональный — экологический смысл. Анализ подобных групп традиционноиспользовался в почвенной микробиологии, и именно в таком виде результаты исследований были представлены в большинстве цитированных работ. Поэтому несколько условное понятие «групп» в учебнике сохранено, содержание же термина ясно из текста. Студентам же, наверное, полезно задуматься, сколько раз за последние десятилетия менялись объем и содержание ключевых терминов в микробиологии. Например, «бактерии» — палочковидные микроорганизмы, палочковидные неспорообразуюшие микроорганизмы (в отличие от бацилл);преимущественно одноклеточные формы (в отличие от мицеальных — акти-номицетов); прокариоты (за исключением прокариотических синезеленыхводорослей, впоследствии цианобактерий); все прокариоты (включая цианобактерии); наконец, снова лишь группа прокариот (поскольку к другойгруппе, или домену, теперь относят археи, или архебактерии). {Прим, ред.)