Аспорогенный рекомбинантный штамм Bacillus anthracis – продуцент протективного антигена сибиреязвенного микроба
Диссертация
За синтез и регуляцию компонентов экзотоксина отвечают гены, входящие в состав плазмиды pXOl (182 т.п.н.). Образование капсулы кодируют детерминанты, расположенные на внехромосомном репликоне рХ02 (93,5 т.п.н.) (Mikesell P. et al., 1983; Uchida I. et al., 1985; Okinaka R. et al., 1999). Вакцинные штаммы, лицензированные для использования в медицине (В. anthracis СТИ-1) или ветеринарии (В… Читать ещё >
Содержание
- ВВЕДЕНИЕ 6 ОСНОВНАЯ ЧАСТ
- ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
- 1. 1. В. anthracis — возбудитель сибирской язвы
- 1. 2. Сибиреязвенный токсин — структура, механизм действия, функции и генетическая детерминация
- 1. 3. Выделение протективного антигена из культуральных фильтратов аттенуированных и рекомбинантных штаммов и его практическое использование
- СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
- ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 3 В
- 2. 1. Штаммы микроорганизмов, бактериофаги и плазмиды, использованные в работе
- 2. 2. Питательные среды, реактивы и лабораторные животные
- 2. 3. Методы исследования
- 2. 3. 1. Определение видовых признаков В. anthracis
- 2. 3. 2. Определение протеолитической активности штаммов В. anthracis
- 2. 3. 3. Определение способности сибиреязвенных культур к споруляции
- 2. 3. 4. Определение стабильности свойства аспорогенности
- 2. 3. 5. Приготовление споровой взвеси
- 2. 3. 6. Определение ЛД50 штаммов В. anthracis для лабораторных животных
- 2. 3. 7. Определение протективных свойств рекомбинантного протективного антигена
- 2. 3. 8. Трансформация штаммов В. anthracis
- 2. 3. 9. Выделение плазмидных ДНК штаммов В. anthracis
- 2. 3. 10. Определение стабильности гибридных плазмид in vitro
- 2. 3. 11. Метод полимеразной цепной реакции
- 2. 3. 12. Исследование белкового состава культуральных фильтратов
- 2. 3. 13. Выделение и очистка протективного антигена из культу-рального фильтрата рекомбинантного штамма В. anthracis
- 2. 3. 14. Определение концентрации белка в препаратах
- 2. 3. 15. Получение иммунных сывороток и специфических антител к протективному антигену
- 2. 3. 16. Реакция радиальной диффузной преципитации на среде с анти-ПА антителами
- 2. 3. 17. Постановка иммуноблот анализа с поликлональными антителами к протективному антигену
- 2. 3. 18. Постановка дот-иммуноанализа с поликлональными антителами к протективному антигену
- 2. 3. 19. Твердофазный иммуноферментный анализ
- 2. 3. 20. Количественная оценка продукции протективного антигена рекомбинантными и вакцинными штаммами В. anthracis
- 2. 3. 21. Статистические методы
- 3. 1. Генетическое конструирование аспорогенного штамма-продуцента протективного антигена
- 3. 2. Стабильность репликации гибридной плазмиды pUBl 10РА-1 в аспорогенных трансформантах
- 3. 3. Определение уровней продукции протективного антигена аспорогенными и спорообразующими клонами с pUBllOPA
- 3. 4. Изучение стабильности биологических свойств аспороген-ного штамма-продуцента протективного антигена при пассировании на питательных средах и хранении
- 4. 1. Оптимизация условий культивирования аспорогенного продуцента протективного антигена
- 4. 2. Разработка экспериментальной схемы выделения и очистки протективного антигена из культурального фильтрата рекомбинантного штамма
- 5. 1. Характеристика препарата протективного антигена, выделенного из культурального фильтрата аспорогенного рекомбинантного продуцента
- 5. 2. Получение специфичных антител к рекомбинантному про-тективному антигену
- 5. 3. Использование рекомбинантного протективного антигена и антител к нему в иммунохимических реакциях
Список литературы
- Абалакин В.А., Сергеева Л. В., Черкасова Т. Д., Черкасский Б. Л. Очистка и характеристика факторов сибиреязвенного токсина // Микробиол. аспекты иммунобиотехнол.: Соврем, состояние и перспективы. / НИИВС АМН СССР. -М. 1992. — С. 82−93.
- Абалакин В. А. Иммуносупрессивное действие летального токсина Bacillus anthracis на мышей. Журн. микробиол., эпидемиол. и имму-нобиол. — 1989. — № 6. — С. 94−99.
- Александров Н.И., Гефен Н. Е., Будак А. П., Рунова В. Ф., Езепчук Ю. В., Бажинов А. Г. Изучение реактогенности химической депонированной сибиреязвенной вакцины на небольших группах людей // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1963(a). — № 3.- С. 32−34.
- Ашмарин И.П., Воробьев А. А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз, 1962. 180 с.
- Барков A.M., Евтеева Е. В., Липницкий А. В. Выделение и антигенная характеристика компонентов культурального фильтрата Bacillus anthracis // Биотехнология. -2000. № 6. — С. 27−33.
- Бароян О.В. Очерки по мировому распределению важнейших заразных болезней человека. М.: Медицина, 1967. — 348 с.
- Безносов М.В. Выделение и изучение специфических антигенов Bacillus anthracis с целью конструирования диагностических и профилактических препаратов // Автореф. дис.. канд. биол. наук. Саратов, 1997.-22 с.
- Богомолов Ф.И. Морфологические и культуральные свойства штаммов сибирской язвы, выделенных из импортного кожевенного сырья. -Мпсробюлопчный журнал. 1967. — Т. 29. — С. 210−212.
- Борисов И.В., Проскурина В. А., Неляпин Н. М. Патоморфоло-гические изменения у белых мышей при сибиреязвенной интоксикации // Тез. докл. итоговой науч. конф., Ставрополь. 1989. — Т.1. — С. 23−26.
- Бургасов П.Н., Рожков Г. И. Сибиреязвенная инфекция. М., 1984. -212с.
- Васильев К.Г., Сегал А. Е. История эпидемии в России. М.: Мед-гиз, 1960. — 398 с.
- Гинсбург Н.Н. Культуральные и биохимические свойства возбудителя сибирской язвы. В кн.: Рук-во по микробиологии, клинике и эпидемиологии инфекционных болезней. М.: Медицина, 1966. — С. 297- 299.
- Гинсбург Н.Н., Левина Е. Н., Федотова Ю. М. Современная характеристика возбудителя сибирской язвы. В кн.: Сибирская язва. 1975. -С. 6−39.
- Глик Б., Пастернак Д. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение: Пер. с англ. М.: «Мир», 2002. — 589 с.
- Гловер Д. Клонирование ДНК. Методы: Пер. с англ. М.: Мир, 1988. — 538 с.
- Дербин М.И., Садовой Н. В., Тарумов B.C., Гарин Н. С. Сравнительное изучение гуморального противосибиреязвенного иммунитета у привитых живой и химической вакцинами. Иммунология. — 1982. — № 3. — С. 49−52.
- Еремин С. А. Никифоров А.К., Костюкова Т. А., Микшис Н. И. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1999. — № 4. — С. 91 — 92.
- Инструкции и методические указания по лабораторной, клинической диагностике, профилактике и лечению сибирской язвы у людей. М., 1980. — 65 с.
- Ипатенко Н.Г. Сибирская язва. М.: Колос, 1996. 335 с.
- Кудрявцева О.М. Генетическое конструирование штаммов продуцентов протективного антигена Bacillus anthracis: Дис. канд. биол. наук. -Саратов, 2007. — 134 с.
- Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование. Пер. с англ. М.: Мир, 1984.- 479 с.
- Маринин Л.И., Онищенко Г. Г., Степанов А. В. и др. Микробиологическая диагностика сибирской язвы. М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999. — 222 с.
- Микшис Н. И., Болотникова М. Ф., Новикова Л. В., Попов Ю. А., Еремин С. А., Дроздов И. Г., Кутырев В. В. Получение аспорогенных штаммов Bacillus anthracis П Биотехнология. 2003. — № 1.-С.3−11.
- Онищенко Г. Г., Васильев Н. Т., Литусов Н. В., Харечко А. Т., Васильев П. Г., Садовой Н. В., Кожухов В. В. Сибирская язва: актуальные аспекты микробиологии, эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики -М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999. 447 с.
- Практическая химия белка. Пер. с англ. /Под ред. А. Дарбре. М.: Мир, 1989.-629 с.
- Сибирская язва. Под ред. С. Г. Колесова. М.: Колос, 1976.287с.
- Скоупс Р. Методы очистки белков. М.: Мир, 1985. -358 с.
- Степанов А.С. Разработка основ генетического анализа возбудителя сибирской язвы: Дис. докт. мед. наук. Саратов, 1992. — 333 с.
- Тедиков В.М., Добрица А. П. Клонирование и экспрессия детерминанты протективного антигена Bacillus anthracis в клетках Escherichia coli, Ваcillus subtilis и Bacillus anthracis II Молекул, генетика, микробиол. и вирусол. -1993.-№ 2.-С. 13−16.
- Тучков И. В., Куличенко А. Н., Норкина О. В., Дроздов И. Г. Детекция штаммов сибиреязвенного микроба с использованием полимеразной цепной реакции // Генет., микробиол., и совершенствование методов лаб. диагн. особо опасных инф. Саратов, 1991. — С. 89−91.
- Фримель Г. Иммунологические методы: Пер. с англ. М.: Медицина, 1987.-472 с.
- Черкасова Т.Д., Абалакин В. А. Чувствительность иммуноком-петентных клеток мышей к токсину Bacillus anthracis И Журн. микробиол., эпи-демиол. и иммунобиол. 1989. — № 4.- С.104−105.
- Черкасский Б.Л., Жанузаков Н. Ж. Сибирская язва. Алма-Ата: Кайнар, 1980. -269 с.
- Черкасский Б.Л. Эпидемиология и профилактика сибирской язвы. М.: «Интерсэн», 2002. 384 с.
- Щелкунов С. Н. Генетическая инженерия: Учеб. пособие: В 2 ч. -Новосибирск: изд-во Новосиб. Ун-та, 1994. 304 с.
- Azhar A., Singh S., Anand К., Bhatnagar R. Expression of protective antigen in transgenic plants: a step towards edible vaccine against anthrax // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. — V. 299. — № 3 — P.345−351.
- Baillie L. Vaccine production of the Bacillus anthracis protective antigen // United States Patent № US6267966 (C12N15/31- A61K39/07- C12R1/125) 2001.
- Baillie L., Moir A., Manchee R. The expression of the protective antigen of Bacillus anthracis in Bacillus subtilis II J. Appl. Microbiol. 1998. — V. 84. — № 5. -P. 741−746.
- Barnard J., Friedlander A. Vaccination against anthrax with attenuated recombinant strains of Bacillus anthracis that produce protective antigen // Infect. Im-mun. 1999. — V. 67. — № 2. — P. 562−567.
- Bartkus J., Leppla S. Transcriptional regulation of the protective antigen of Bacillus anthracis II Infect. Immun. 1989. — V. 57. — P. 2295−2300.
- Beal F., Taylor M., Thome C. Rapid lethal effect in rats of a third component found upon fractionating the toxin of Bacillus anthracis II J. Bacteriol. 1962. -V. 83. — P. 1274−1280.
- Bhatnagar R., Singh J., Leppla S., Friedlander A. Calcium is required for the expression of anthrax lethal toxin activity in the macrophagelike cell line J774A. 1 //Infec. Immun.- 1989. V.57. — № 7. — P. 2107−2114.
- Bourgogne A., Drisdale M., Hilsenbeck S., Peterson S., Koehler T. Global effect of virulence gene regulators in a Bacillus anthracis strain with both virulence plasmid //Infect. Immun. 2003. — V. 71. — №. 5. — P. 2736 — 2743.
- Brachman P. Anthrax. In: Infectious Disease, Edited by Hoeprich P.D., New York, Harper and Row. 1977. — P. 807−812.
- Brachman P. Bioterrorism: an update with a focus on anthrax // Am J. Epidemiol. 2002. — V. 155. — P. 981 -987.
- Bragg Т., Robertson D. Nucleotide sequence and analysis of the lethal factor gene (lef) from Bacillus anthracis II Gene. 1989. — V. 81. — P. 45−54.
- Bush L. Abrams В., Beall A. et al. Index case of fatal inhalational anthrax due to bioterrorism in the United States // N. Engl. J. Med. 2001. — V. 345. — P. 16 071 610.
- Cataldi A., Labruiere E. Mock M. Construction and characterization of a protective antigen deficient Bacillus anthracis strain // Mol. Microbiol. — 1990. — V. 4. — № 7. — P. 1111−1117.
- Chauhan V., Singh A., Waheed S., Singh S., Bhatnagar R. Constitutive expression of protective antigen gene of Bacillus anthracis in Escherichia coli II Bio-chem. Biophys. Res. Commun. 2001. — V. 283. — № 2. — P. 308−315.
- Chichester J., Musiychuk K., de la Rosa P., Horsey A., Stevenson N.,
- UgulavaN., Rabindran S., Palmer G., Mett V., Yusibov V. Immunogenicity of a sub-unit vaccine against Bacillus anthracis // Vaccine. 2007. — V. 25. — № 16. — P. 31 113 114.
- Coulson N., Fulop M., Titball R. Effect of different plasmids on colonization of mouse tissues by the aromatic amino acid dependent Salmonella typhimurium SL 3261 // Microb. Pathog. 1994. — V. 16. — № 4. — P. 305−311.
- Escuyer V., Duflot E., Sezer O., Danchin A., Mock M. 1988. Structural homology between virulence-associated bacterial adenylate cyclases. // Gene. 1988. — V. 71.-P. 293−298.
- Farchaus J., Ribot W., Jendrek S., Little S. Fermentation, purification, and characterization of protective antigen from a recombinant, avirulent strain of Bacillus anthracis II Appl. Environ. Microbiol. 1998. — V. 64. — № 3. — P. 982−991.
- Fish D., Mahlandt В., Dobbs J., Linkoln R. Purification and properties of in vitro produced anthrax toxin components // J. Bacteriol. 1968. — V. 95. — P. 907 918.
- Fowler K., McBride В., Turnbull P., Baillie L. Immune correlates of protection against anthrax // J. Appl. Microbiol. 1999. — V. 87. — № 2. — P. 305.
- Friedlander A. Macrophages are sensitive to anthrax lethal toxin thorough an acid-dependent process // J. Biol. Chem. 1986. — V. 261. — P. 7123−7126.
- Friedlander A. The anthrax toxins. In: Trafficking of Bacterial Toxins. Ed. Saelinder C.B.CRC Press, Boca Raton. 1990. — P. 121−128.
- Gladstone G. Immunity of anthrax: protective antigen present in cell-free culture filtrates // Brit. J. Exp. Pathol. 1946. — V. 27. — P. 393−410.
- Gordon V., Leppla S., Hewleff E. Inhibitors of receptor mediated endocy-tosis block the entry of Bacillus anthracis adenylate cyclase toxin but not that of Bordetellapertussis II Infect. Immun. 1988. — V. 56. — № 5. — P. 1066−1069.
- Guidi-Rontani C., Weber-Levy M., Mock M., Cabiaux V. Translocation of Bacillus anthracis lethal and edema factors across endosome membranes // Cell. Microbiol. 2000. — V. 2. — P. 259−264.
- Gupta P., Waheed S., Bhatnagar R. Expression and purification of the recombinant protective antigen of Bacillus anthracis II Protein Expr. Purif. 1999. — V. 16. — № 3. — P. 369−376.
- Hahn J., Dubnau D. Analysis of plasmid deletional instability in Bacillus subtilis И J. Bacterid. 1985. — V. 162. — P. 1014−1023.
- Heines В., Klein F., Lincoln R. Quantitative assay for crude anthrax toxin // J. Bacteriol. 1965. — Vol.89. — P. 74−83.
- Hoffinaster A., Koehler T. The anthrax toxin activator gene atxA is associated with CC>2-enhanced non-toxin gene expression in Bacillus anthracis II Infect. Immun. 1997. — V. 65. — P. 3091−3099.
- Hoffinaster A., Koehler T. Autogenous regulation of the Bacillus anthracis pag operon. // J. Bacteriol. 1999(a). — V. 181. — P. 4485−4492.
- Hoffinaster A., Koehler T. Control of virulence gene expression in Bacillus anthracis II J. Appl. Microbiol. 1999(6). — V. 87. — P. 279−281.
- Hull A., Criscuolo C., Mett V., Groen H., Steeman W., Westra H., Chapman G., Legutki В., Baillie L., Yusibov V. Human-derived, plant-produced monoclonal antibody for the treatment of anthrax // Vaccine. 2005. — V. 23. — P. 20 822 086.
- Iacono-Connors L., Welkos S., Ivins В., Dalrymple J. Protection against anthrax with recombinant virus-expressed protective antigen in experimental animals //Infect. Immun.- 1991.-V. 59.-№ 6.-P. 1961−1965.
- Ivins В., Welkos S. Cloning and expression of Bacillus anthracis protective antigen in Bacillus subtilis II Infect. Immun. 1986. — V. 54. — P. 537−542.
- Ivins В., Worsham P., Friedlander A., Farchaus J., Welkos S. Method of making a vaccine // United States Patent № US2002034512 (C12N15/75- C12N15/74).-21.03.2002.
- Kado C., Liu S. Rapid procedure for detection and isolation of large and small plasmids //J. Bacteriol. 1981. — V.145. — № 3. — P. 1365−1373.
- Klimpel K., Arora N., Leppla S. Anthrax toxin lethal factor contains a zinc metalloprotease consensus sequence which is required for lethal toxin activity // Mol. Microbiol. 1994. — V. 13. — P. 1093−1100.
- Koehler Т., Dai Z., Kaufman-Yarbray M. Regulation of the Bacillus anthracis protective antigen gene: C02 and a trans-acting element activate transcription from one of two promoters. // J. Bacteriol. 1994. — V. 176. — P. 586 — 595.
- Koprowski H. Old and new prescriptions for infectious diseases and the newest recipes for biomedical products in plants // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). 2002. — V. 50. — №. 6. — P. 365−369.
- Koya V., Moayeri M., Leppla S., Daniell H. Plant-based vaccine: mice immunized with chloroplast-derived anthrax protective antigen survive anthrax lethal toxin challenge // Infect. Immun. 2005. — V. 73. — № 12. — P. 8266−8274.
- Larson D., Calton G., Burnett J., Little S., Leppla S. Purification of Bacillus anthracis protective antigen by immunosorbent chromatography. Enzyme Mi-crob. Technol. — 1988. — V. 10. — № 1. — P. 14−18.
- Larson D., Calton G., Little S., Leppla S., Burnett J. Separation of three exotoxic factors of Bacillus anthracis by segnential immunosorbent chromatography. -Toxicon. 1988. — V.26. — № 10. — P.913−921.
- Leppla S. Anthrax toxin edema factor: a bacterial adenylate cyclase that increases cyclic AMP concentrations in eukaryotic cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1982.-V. 79.-P. 3162−3166.
- Leppla S. Anthrax toxins. In Bacterial Toxins and Virulence Factors in Disease, ed. J. Moss, B. Iglewski, M. Vaughan, A. Tu. New York/Hong Kong: Basel, 1995.-V. 8.-P. 543−572.
- Leppla S. Production and purification of anthrax toxin // Methods Enzy-mol. 1988. — V. 165. — P. 103−116.
- Leppla S. The anthrax toxin complex. In: Alouf J. and Freer J., Sourcebook of bacterial protein toxins, London: Academic Press., 1991. P. 277−302.
- Linkoln R., Fish D. Anthrax toxin. In: T. Montie, S. Kadis, S. Ajl, Microbial Toxins III, New York, 1970. P. 361−414.
- Little S., Leppla S., Cora E. Production and characterization of monoclonal antibodies to the protective antigen component of Bacillus anthracis toxin // Infect. Immun. 1988. — V.56. — № 7.- P. 1807−1813.
- Masure H., Shattuck R., Storm D. Mechanisms of bacterial pathogenicity that involve production of calmodulinsensitive adenylate cyclases // Microbiol. Rev. -1987.-V.51.- № 1.- P. 60−65.
- Mignot Т., Mock M., Fouet A. A plasmid-encoded regulator couples the synthesis of toxins and surface structures in Bacillus anthracis II Mol. Microbiol. -2003. V. 47. — № 4. — P. 917−927.
- Mikesell P., Ivins В., Ristroph J., Dreier T. Evidence for plasmid-mediated toxin production in Bacillus anthracis II Infect. Immun. 1983. — V. 39. — P.371.376.
- Miller J., McBride В., Manchee R., Moore P., Baillie L. Production and purification of recombinant protective antigen and protective efficacy against Bacillus anthracis // Lett.Appl. Microbiol. 1998. — V. 26. — № 1. — P. 56−60.
- Milne J., Blanke S., Hanna P., Collier R. Protective antigen-binding domain of anthrax lethal factor mediates translocation of a heterologous protein fused to its amino- or carboxy-terminus // Mol. Microbiol. 1995. — V. 15. — P. 661−666.
- Mock M., Labruy’ere E., Glaser P., Danchin A., Ullmann A. Cloning and expression of the calmodulin-sensitive Bacillus anthracis adenylate cyclase in Escherichia coli II Gene. 1988. — V. 64. — P. 277−284.
- National Communicable Disease Center Investigational new drug application for anthrax protective antigen, aluminum hydroxide absorbed. FDA № DBS-IND 180,1970.
- O’Brien J., Friedlander A., Dreier Т., Ezzel J., Leppla S. Effects of anthrax toxin components on human neutrophies // Jnfect. Immun. 1985. — V. 47. — № l.-P. 306−310.
- Petosa C., Collier R., Klimpel K., Leppla S., Liddington R. Crystal structure of the anthrax toxin protective antigen //Nature, 1997. — V. 385. — P. 833−838.
- Puziss M., Howard M.B. Studies on immunity in anthrax. Control of cellular permeability by bicarbonate ion in relation to protective antigen elaboration // J. Bacteriol. 1963. — V.85. — № 1. — P.237−243.
- Quinn С., Shone С., Turnbull P., Melling J. Purification of anthrax-toxin components by high-performance anion-exchange, gel-filtration and hydrophobic-interaction chromatography // J. Biochem. 1988. — V. 252. — P. 753−758.
- Quinn C., Singh Y., Klimpel K., Leppla S. Functional mapping of anthrax toxin lethal factor by in-frame insertion mutagenesis. // J. Biol. Chem. 1991. — V. 266. — P. 20 124−20 130.
- Robertson D., Leppla S. Molecular cloning and expression in Escherichia coli of the lethal factor gene of Bacillus anthracis II Gene. 1986. — V. 44. — P. 71−78.
- Robillard N., Koehler Т., Murray R., Thorne C. Plasmid pBAl-mediated toxin production in Bacillus anthracis cells // Abstr. Annu. Meet. Amer. Soc. Microbiol. 1983. — V. 54.-P. 115.
- Sastiy K., Tuteja U., Santhosh P., Lalitha M., Batra H. Identification of Bacillus anthracis by a simple protective antigen-specific mAb dot-ELISA//J. Med. Microbiol. 2003. — V. 52. — P. 47−49.
- Singh Y., Leppla S., Bhatnagar R., Friedlander A. Bases of cellular sensitivity and resistance to anthrax lethal toxin. In: P.C.B.Turnbull, Proc. Int. Workshop on Anthrax. Salisbury Med. Bull., Winchester, England, 1989. P. 51.
- Singh Y., Ivins В., Leppla S. Study of immunization against anthrax with the purified recombinant protective antigen of Bacillus anthracis II Infect. Immun. -1998. V. 66. — № 7. — P. 3447−3448.
- Singh Y., Klimpel K., Arora N., Sharma M., Leppla S. The chymotryp-sinsensitive site, FFD315, in anthrax toxin protective antigen is required for translocation of lethal factor // J. Biol. Chem. 1994. — V. 269. — P. 29 039−29 046.
- Spencer R., Lightfoot N. Preparedness and response to bioterrorism // J. Infect. 2001. — V.43.-P.104−110.
- Spencer R., Wilcox M. Agents of biological warfare // Rev. Med. Microbiol. 1993. — V. 4. — P. 138−143.
- Stanley J., Smith H. Purification of factor I and recognition of third factor of the anthrax toxin//J. Gen.Microbiol. 1961. — V. 26. — P. 49−66.
- Swanson-Biearman В., Krenzelok E. Delayed life-threatening reaction to anthrax vaccine // J. Clin. Toxicol. 2001. — V. 39. — № 1. — P. 81−84.
- Thorne C.5 Belton F. An agar diffusion method for titrating Bacillus anthracis immunizing antigen and its application to a study of antigen production // J. Gen. Microbiol. 1957. — V. 17. — P. 505−516.
- Tippets M.5 Robertson D. Molecular cloning and expression of Bacillus anthracis edema factor toxin gene: a calmodulin-dependent adenylate cyclase I I J. Bacteriol. 1988. — V. 170. — № 5. — P. 2263 — 2266.
- Towbin H., Staehelin Т., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. — Vol. 76. — P. 4350−4354.
- Turnbull P., Broster M., Carman J. Development of antibodies to protective antigen and lethal factor components of anthrax toxin in humans and guinea pigs and their relevance to protective immunity // Infect. Immun. 1986. — V. 52. — P. 356 363.
- Uchida I., Sekizake Т., Hashimoto K., Terakado N. Association of the incapsulation of Bacillus anthracis with 60 megadalton plasmid // J. Gen. Microbiol. 1985. — V. 131. — P. 363−367.
- Uchida I., Hornung J., Thorne C., Klimpel K., Leppla S. Cloning and characterization of a gene whose product is a trans-activator of anthrax toxin synthesis // J. Bacteriol. 1993. — V. 175. — P. 5329 -5338.
- Vodkin M., Leppla S. Cloning of the protective antigen gene of Bacillus anthracis I I Cell. 1983. — V. 34. — P. 693−697.
- Welkos S., Lowe J., Eden-McCutchan F., Vodkin M., Leppla S., Schmidt J. Sequence and analysis of the DNA encoding protective antigen of Bacillus anthracis I I Gene. 1988. — V. 69. — P. 287−300.
- Worsham P., Sowers M. Isolation of an asporogenic (spoOA) protective antigen-producing strain of Bacillus anthracis // Canad. J. Microbiol. 1999. — V. 45. -P. 1−8.
- Wright G. Influence of spermine and related substances on susceptibility of Bacillus anthracis to lyzozyme // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1961. — V. 108. — P. 740−742.
- Wright G., Green Т., Kanode R. Studies on immunity in anthrax. Immunizing activity of alumprecipitated protective antigen. J. Immunol. — 1954. -V. 73. — № 6. — P. 387−391.